顺铂耳毒性机制及抗氧化药物局部应用的预防作用

顺铂是临床普遍应用的广谱高效抗肿瘤药物,与多种抗肿瘤药有协同效应、无交叉耐药等特点,为当前联合化疗中最常用的药物之一。然而,顺铂的毒副作用严重困扰着癌症患者,其耳毒性尤为突出。顺铂耳毒性多为双侧、进展性、不可逆性、剂量依赖性听力损伤,往往导致成人、尤其是儿童患者出现语言交流障碍。大量研究证实,顺铂通过诱发活性氧(ROS)升高导致听觉毛细胞发生caspase-3激活的细胞凋亡。哺乳动物听觉毛细胞无自发再生能力,一旦损伤即为永久性。因此,顺铂耳毒性预防的药物研发或治疗策略开发至关重要。目前,越来越多的药物被证实在细胞和动物水平上具有顺铂耳毒性保护作用。然而,绝大部分药物经系统性用药后拮抗顺铂抗肿瘤疗效,无法实现临床上的有效应用。至今仍无有效顺铂耳毒性保护药物被批准上市。耳蜗局部鼓室内用药可部分缓解耳毒性保护候选药物对顺铂抗肿瘤疗效的干扰,但因顺铂需周期性用药,多次鼓室内给予耳毒性保护药物易引起局部创伤和感染。本文总结了具有代表性抗氧化药物预防顺铂耳毒性的基础和临床研究进展,为顺铂耳毒性新药研发提供理论依据。     

丹参对顺铂耳蜗毒性的防护作用

目前有研究发现一氧化氮(nitric oxide,NO)与顺铂导致的内耳毒性关系密切,增加的NO可能参与了顺铂的耳毒性作用。近来又有文献报道,丹参salvia miltiorrhiza)可以通过降低一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性以降低庆大霉素耳毒性。但是,丹参能否降低顺铂耳毒性,是否通过影响NOS表达来实现,目前尚未见报道。本研究拟采用顺铂内耳中毒的动物模型,通过免疫组织化学、图像分析、听性脑干反应测定、电镜观察等方法,来探讨顺铂耳蜗毒性的机制,以期寻求防治顺铂耳蜗毒性损伤的有效药物。     

铜转运蛋白与顺铂耳毒性研究

顺铂是临床上常用的化疗药物,具有抗肿瘤谱广、临床效果显著、价格低廉等优点,然而其耳毒性一直是困扰临床工作者的难题。近年研究发现铜转运蛋白在顺铂进出细胞过程中发挥重要作用。本文就铜转运蛋白与顺铂耳毒性研究的国内外最新进展做一综述。     

黑素和抑制剂对顺铂耳毒性的影响

作回顾了顺铂药效学、耳毒性及黑素和一些抑制剂对其耳毒性的影响；并就黑素、磷霉素和自由基清除剂ＬＡＺＡＲＯＩＤＳ与顺铂耳毒性的相互关系进行了实验研究，认为黑素是影响顺铂耳中毒易感性的一个肯定因素，磷霉素和Ｕ７８５１７Ｆ有希望成为预防顺铂耳中毒的保护剂。     

顺氯氨铂的耳毒性

由于抗癌药物顺铂的广泛应用,对其副作用,如耳毒性引起临床普遍关注。本文就顺铂耳毒性特点、中毒因素、病理改变、中毒机制及预防方法等方面作简要综述。认为严密观察、给予适当治疗,可望改善其耳毒性作用。     

磷霉素减轻顺铂耳毒性的实验研究

本文以听性脑干反应测听、扫描电镜为指标，观察磷霉素对顺铂耳毒性的拮抗作用．用药后顺铂组豚鼠4、8KHzABR阈均明显提高；顺铂 磷霉素组豚鼠仅8KHzABR阈提高。扫描电镜示顺铂组耳蜗第一、二国外毛细胞严重性嵌损；顺铂 磷霉素组耳蜗第一、二回病变轻微。结果表明磷霉素能有效地减轻顺铂引起的耳毒性。     

葡萄糖酸锌对顺铂耳毒性保护作用的实验研究

本文用豚鼠做实验。用葡萄糖酸锌140mg／kg／日口服5天，然后同时用顺铂2mg／kg／口腹腔注射5天，与单纯顺铂腹腔注射组及生理盐水腹腔注射组对照，观察葡萄糖酸锌对顺铂的耳毒性有无保护作用。结果发现葡萄糖酸锌＋顺铂组豚鼠的耳廓反射的减退和耳蜗外毛细胞损害程度均较单用顺铂组轻，提示葡萄糖酸锌对顺铂的耳毒性有保护作用。     

顺铂耳毒性机制及耳保护策略研究进展

顺铂作为抗癌一线用药,多用于卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、甲状腺癌等癌症的治疗,具有较强的广谱抗癌作用,也常伴有一些副作用,如肾毒性、耳毒性、骨髓抑制等.顺铂的耳毒性可导致双侧永久性听力损失,这会使患者的生活质量受到极大影响,特别是在言语交流和社会发展方面.因此,在应用顺铂治疗癌症的同时,也应注意加强对其耳毒性的防护...     

小鼠耳蜗血管纹Na-K-2Cl联合转运子1在顺铂耳毒性发生时的改变

目的研究顺铂(cis-dichlorodiammine platinum,Cisplatin)耳毒性发生后耳蜗血管纹Na-K-2Cl联合转运子1(NKCC1)的表达情况,并初步探讨其机制。方法选取健康CBA/CaJ小鼠20只,随机分为对照组和实验组各10只,实验组动物连续腹腔注射顺铂3.5mg.kg-1.d-1,建立顺铂耳毒性小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。以听性脑干反应(ABR)阈值作为评价听功能的指标,检测给药前后小鼠听功能的改变,并采用免疫组织化学(SP法)结合免疫荧光实验技术,观察对照组和实验组小鼠腹腔注射顺铂前后耳蜗血管纹NKCC1表达的变化。结果NKCC1在小鼠耳蜗血管纹主要表达于边缘细胞,而顺铂作用后血管纹边缘细胞的NKCC1表达明显减弱,图像分析显示两组平均灰度值差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论小鼠顺铂耳毒性作用后血管纹边缘细胞NKCC1的表达量明显减弱,这可能是顺铂耳毒性发生机制中的一个重要环节。     

XIAP与顺铂诱导的感音神经性聋

顺铂是常用的化疗药物，但具有耳毒性，在很多应用高剂量顺铂治疗的患者中出现听力损失的症状。在动物实验和人的颞骨研究中也发现，顺铂可导致耳蜗多部位损伤。听力损伤的机制可能是活性氧（reactive oxygen species，ROS）产生过多等的原因激发了细胞凋亡。调控细胞凋亡级联反应下游的凋亡蛋白因子可望阻止细胞凋亡和听力损失。本文对顺铂耳毒性及XIAP预防顺铂耳毒性损伤的可能机制进行综述。     

L-NAME 对顺铂耳毒性影响的实验研究

目的本研究旨在通过建立顺铂内耳中毒的动物模型,探索一氧化氮合酶(NOS)在顺铂的耳毒性机制中的影响,为临床预防和治疗顺铂的耳毒性提供理论依据.方法将豚鼠随机分成三组.对照组给予生理盐水;试验组给予顺铂;拮抗组预先给予N-硝基-L-甲基-精氨酸(L-NAME)后再给顺铂.对耳蜗的iNOS的活性进行免疫组化的研究,对L-NAME对顺铂的耳蜗损害所起的作用进行扫描电镜观察.结果光镜下,对照组螺旋器的结构正常,呈iNOS阴性染色;试验组的内、外毛细胞明显变性,呈iNOS阳性染色.扫描电镜下,对照组内、外毛细胞的纤毛排列整齐;试验组的绝大部分内、外毛细胞的纤毛散乱,倒伏,甚至消失;拮抗组的大多数内、外毛细胞的纤毛排列整齐,少数可见纤毛融合或消失.结论一氧化氮(NO)在顺铂的内耳毒性作用机制中发挥着重要的作用,应用NOS的拮抗剂可以减轻其内耳毒性.     

顺铂耳毒性的研究

顺铂是临床上常用的抗癌药物之一，但有较强的肾毒性和耳毒性，其肾毒性可以通过水化疗法、利尿剂和肾保护剂的使用等方法得到明显缓解，其耳毒性除中断治疗外，尚无明确的防护措施，顺铂耳毒性的产生机制及防护方法就成为当前人们关注的热点。本文就顺铂对耳蜗形态学和功能的影响及其发生的可能机制和防治方法进行综述。     

L—NAME对顺铂耳毒性影响的实验研究

目的：本研究旨在通过建立顺铂内耳中毒的动物模型，探索一氧化氮合酶（NOS）在顺铂的耳毒性机制中的影响，为临床预防和治疗顺铂的耳毒性提供理论依据。方法：将豚鼠随机分成三组。对照组给予生理盐水；试验组给予顺铂；拮抗组预先给予N－硝基－L－甲基－精氨酸（L－NAME）后再给顺铂。对耳蜗的iNOS的活性进行免疫组化的研究，对LNAME对顺铂的耳蜗损害所起的作用进行扫描电镜观察。结果：光镜下，对照组螺旋器的结构正常，呈iNOS阴性染色，试验组的内、外毛细胞明显变性，呈iNOS阳性染色。扫描电镜下，对照组内、外毛细胞的纤毛排列整齐；试验组的绝大部分内、外毛细胞的纤毛散乱，倒伏，甚至消失；拮抗组的大多数内、外毛细胞的纤毛排列整齐，少数可见纤毛融合或消失。结论：一氧化氮（NO）在顺铂的内耳毒性作用机制中发挥着重要的作用，应用NOS的拮抗剂可以减轻其内耳毒性。     

银杏叶提取物对顺铂耳蜗毒性的拮抗作用

目的 研究银杏叶提取物对顺铂耳毒性的拮抗作用。方法 杂色健康豚鼠27只，随机分为生理盐水组、顺铂（CDDP）组、银杏叶提取物（Egb CDDP）组，动态观察动物听阈变化及耳蜗外毛细胞形态学改变，并在损伤6天后，观察外毛细胞损伤率、耳蜗毛细胞凋亡情况。结果 CDDP组听阈及外毛细胞损伤率显著性升高，凋亡现象明显；Egb CDDP组外毛细胞的损伤率及听阈损伤均明显减轻，仅出现早期凋亡表现；生理盐水组各项指标均无明显变化。结论 Egb对顺铂所致的耳毒性具有明显拮抗作用。     

顺铂对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞延迟整流钾电流的影响

目的探讨耳毒性药物顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞延迟整流钾电流的影响,了解顺铂耳毒性的离子机制。方法选择状态良好培养2—14d的耳蜗螺旋神经节细胞在电压钳制条件下记录的钾电流作为对照组,浴液中分别加入100,500,1000,5000μM不同浓度的顺铂溶液后记录的电流为实验组,观察其对钾通道电流电生理学特性的影响,并观察冲洗后电流的恢复情况。结果实验显示耳蜗螺旋神经节细胞钾通道电流的电生理学特性受不同浓度顺铂溶液的影响,并具有浓度依赖性,表现在其活化动力学和电流幅度的改变。本实验中顺铂的50％的电流被抑制时的浓度（IC50）为294μM,冲洗后钾通道电流逐渐恢复。结论顺铂可以改变耳蜗螺旋神经节细胞钾通道电流的电生理学特性,这种变化在短期内可逆,揭示其耳毒性的形成具有一定的离子机制。     

顺铂对曾暴露噪声豚鼠的耳毒性

本文报告了顺铂对豚鼠的正常听力耳和噪声性聋耳产生的毒性作用。已知顺铂有耳毒性,经内耳组织病理学观察可见螺旋器外毛细胞结构破坏(底转破坏最重),血管纹变性,螺旋神经节细胞和蜗神经退变。听力损伤首先表现于高频,随药物剂量增加逐渐累及低频。损伤为永久性或部分可逆性,但也有完全恢复的报导。作者选耳动反射明显的有色及白色豚鼠各10只,按以下程序:测A B R阈值-单耳噪声暴露-测阈值-给顺铂处理-测阈值-3周后再测阈值-灌流固定内耳完成实验。A B R刺激分别为0.8、1.6、3.15、6.3、12.5、16和20KHz,听觉诱发反应从麻醉后     

硫普罗宁对顺铂所致耳毒性的保护作用

目的探讨硫普罗宁对顺铂耳毒性的保护作用。方法将48只豚鼠随机等分为四组,每组12只:生理盐水对照组:生理盐水腹腔注射2ml/d共7天;硫普罗宁组:腹腔注射硫普罗宁0.3g·kg-1·d-1共7天;顺铂组:腹腔注射顺铂4mg·kg-1·d-1共4天;顺铂加硫普罗宁组:先腹腔注射硫普罗宁0.3g·kg-1·d-13天,从第4天起先腹腔注射硫普罗宁0.3g·kg-1·d-1,再腹腔注射顺铂4mg·kg-1·d-1共4天。动物用药前后行听性脑干反应检查。每组半数动物做耳蜗基底膜铺片硝酸银染色,在光镜下观察毛细胞形态,半数动物取耳蜗组织匀浆测局部丙二醛(malonaldehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量。结果顺铂应用后可使(auditory brainstem response,ABR)反应阈上升,波I潜伏期延长,耳蜗组织匀浆内MDA含量增多,SOD活性下降,与生理盐水对照组相比差异具有显著统计学意义(P<0.01)。硫普罗宁可改善顺铂的耳毒性,使ABR反应阈下降,波I潜伏期缩短,局部MDA含量减少,SOD活性提高,与顺铂组相比差异具有显著统计学意义(P<0.05)。光镜下见应用顺铂后外毛细胞明显损伤,而硫普罗宁可减轻上述损伤。结论硫普罗宁可能通过抗自由基原理来改善顺铂的耳毒性。     

应用畸变产物耳声发射和扩展高频测听对顺铂耳毒性的临床研究

目的：应用0．5—16kHz畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emissions,DPOAE)和扩展高频测听对顺铂耳毒性进行临床研究。方法:对24例应用顺铂进行初次化疗的妇科肿瘤病人于化疗前后分别进行0．5—16kHz DPOAE、常频纯音测听及扩展高频测听检查，比较DPOAE和常频纯音测听、扩展高频测听的结果。结果：顺铂化疗后扩展高频区纯音听阈升高，DPOAE在3kHz、4kHz处及扩展高频区下降明显。结论：常频DPOAE较常频纯音测听更敏感，和扩展高频测听检查一样均可用于顺铂耳毒性的监测。扩展高频DPOAE可能比常频DPOAE更敏感。DPOAE与纯音听闻可能并非一一对应关系。病人对顺铂的易感性可能随着年龄的增加逐渐减低。     

黄芪对顺铂耳毒性保护作用的实验研究

目的探讨黄芪是否对顺铂的耳毒性具有保护作用。方法健康SD大鼠40只随机分成4组,每组10只。对照组：生理盐水2ml／d腹腔注射6天;黄芪组：黄芪注射液5g&#183;kg^-1&#183;d。腹腔注射6天;顺铂组：顺铂4mg&#183;kg^-1&#183;d^-1腹腔注射6天;顺铂加黄芪组：腹腔注射黄芪5g&#183;kg^-1&#183;d^-1加顺铂4mg&#183;kg^-1&#183;d^-16天。用药前及用药后第7天行畸变产物耳声发射（DPOAE）检测,然后处死大鼠。每组半数动物冰冻连续切片,DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测毛细胞凋亡;半数动物扫描电镜观察毛细胞形态。结果顺铂组用药后DPOAE幅值下降,毛细胞受损,并可观察到凋亡细胞,与对照组及黄芪组比较差异具有显著统计学意义（P〈0．01）。顺铂加黄芪组用药后DPOAE幅值上升,毛细胞受损减轻,凋亡细胞数量减少,与顺铂组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论黄芪能有效保护耳蜗免受顺铂的耳毒性损伤。     

顺铂致豚鼠螺旋神经节细胞凋亡及Caspase-3活化的研究

目的：探讨顺铂的耳毒性作用与螺旋神经节细胞（sprial glanglion cell,SGC)凋亡的关系，及SGC的凋亡是否与凋亡蛋白酶Caspase-3信号转导有关。方法：取40只听力正常的豚鼠，随机分为顺铂1、2、4天组和对照组，每天检测听性脑干反应（ABR）和40Hz相关电位以观察豚鼠高，低频的听阈变化，并用TNEL法检测凋亡细胞数量变化，免疫组化检测SGC中Caspase-3p20活性片段的表达。结果：随着注射顺铂时间的延长，豚鼠听力逐渐下降，同时SGC的TUNEL染色明显增强，Caspase-3p20活性片段的表达增高，与对照组比较均有显著性差异（P＜0．01），结论：顺铂的耳毒性损害机制与SGC的凋亡有关；顺铂所致的SGC凋亡过程中有Caspase-3p20的激活。