白藜芦醇对胃癌细胞上皮间质转化作用及其机制的研究

目的 探讨白藜芦醇（RSVL）对胃癌细胞上皮间质转化（EMT）的影响并分析其作用机制。方法 胃癌细胞SGC-7901分为空白对照组、转化生长因子β1(TGF-β1)组和TGF-β1+RSVL组三组。MTT实验检测增殖情况;Transwell实验检测迁移、侵袭情况;q RT-PCR检测EMT相关转化因子的mRNA表达水平;Western blot检测E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Snali 1、YAP蛋白表达水平;免疫荧光观察YAP蛋白表达及细胞核内YAP蛋白表达。结果 与空白对照组相比,TGF-β1组24、48、72、96 h细胞增殖率增加（P<0.05）;与TGF-β1组相比,TGF-β1+RSVL组24、48、72、96 h细胞增殖率降低（P<0.05）,均呈时间依赖性。与空白对照组相比,TGF-β1组0、48 h的细胞迁移数、侵袭数增加（P<0.05）;与TGF-β1组相比,TGF-β1+RSVL组0、48 h的细胞迁移数、侵袭数降低（P<0.05）。与空白对照组相比,TGF-β1组E-cadherin mRNA、蛋白表达水...     

转化生长因子-β通路对胃癌细胞增殖、侵袭及slug蛋白、上皮钙黏素表达的影响

目的 研究转化生长因子-β(TGF-β)通路的激活与阻断对人胃癌HGC-27细胞增殖、侵袭及slug蛋白和上皮钙黏素（E-cadherin,E-cad）表达的影响。方法 于2021年1月至2022年1月使用外源性通路激活剂TGF-β1和阻断剂SB431542培养胃癌细胞，后根据对细胞给药不同分为五组。空白对照组：仅使用等量常规培养基；激动剂组：TGF-β1(25μg/L)；阻断剂组：SB431542(2 mg/L)；激动剂+低浓度阻断剂组：TGF-β1(25μg/L)+SB431542(2 mg/L)；激动剂+高浓度阻断剂组：TGF-β1(25μg/L)+SB431542(4 mg/L)。并使用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测各组胃癌细胞增殖活性，使用Transwell侵袭实验检测各组胃癌细胞侵袭能力，使用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测胃癌细胞中slug与E-cad两种蛋白的表达情况。结果 五组胃癌细胞增殖活性、侵袭能力及slug蛋白、E-cad蛋白表达水平比较均差异有统计学意义（P<0.05）。激动剂组胃癌细胞增殖活性（24 h:0.70±0.13）和侵袭能力[细胞穿过小...     

秦艽多糖通过调控STMN1表达影响肺癌细胞增殖、迁移及侵袭

摘要：目的:探讨秦艽多糖是否可通过调控微管不稳定性蛋白1（STMN1）表达而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法:体外培养肺癌细胞A549,随机分为对照组、秦艽多糖低、中、高浓度组(25,50,100μg·ml-1);采用甲基噻唑基四唑（MTT）与平板克隆形成实验检测细胞增殖能力; Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭; pcDNA 3.1-STMN1转染至A549细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测STMN1、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67（Ki67）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）的表达量。结果:与对照组比较,秦艽多糖中、高浓度组细胞活力、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及STMN1、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著降低（P<0.05）,E-cadherin蛋白水平显著升高（P<0.05）,且秦艽多糖各浓度组间的指标差异均有统计学意义（P<0.05）;与高浓度秦艽多糖+pcDNA 3.1组比较,高浓度秦艽多糖+pcDNA 3.1-STMN1组细胞活力、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及STMN1、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著升高（P<0.05）,E-cadherin蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:秦艽多糖可能通过下调STMN1的表达从而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。     

槲皮素抑制TGF-β1诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生EMT的效果研究CSCD

目的旨在研究槲皮素抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生上皮-间质转化(EMT)的效果。方法将肝癌细胞分为对照组(10 ng/ml TGF-β1)、低剂量组(50 nmol/l槲皮素+10 ng/ml TGF-β1)、高剂量组(10 ng/ml TGF-β1+100 nmol/l槲皮素),分别处理6 h,光学显微镜观察肝癌细胞形态学变化。6、12和24 h后,观察肝癌细胞迁移及侵袭能力。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝癌细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA表达。Western blot法测定肝癌细胞E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白。结果经TGF-β1诱导后,肝癌细胞发生明显EMT。划痕实验结果显示,12和24 h时,高剂量组和低剂量组肝癌细胞迁移划痕空隙长度明显低于对照组(P<0.05)。侵袭实验中,与对照组比较,低和高剂量组每视野穿膜肝癌细胞数明显降低,且高剂量组穿膜高于低剂量组(P<0.05)。RT-PCR实验结果显示,对照组E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组和低剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组和低剂量组(P<0.01)。低剂量E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组(P<0.01)。Western blot实验结果显示,对照组E-cadherin蛋白表达明显低于高剂量组和低剂量组(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白明显高于高剂量组和低剂量组(P<0.01)。高剂量组E-cadherin蛋白表达明显高于低剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.01)。结论槲皮素通过增加E-cadherin蛋白表达表达,降低N-cadherin、Vimentin蛋白表达,使得TGF-β1诱导的肝癌细胞EMT得到明显抑制。     

红花黄色素通过活性氧影响TGF-β1诱导的卵巢癌SKOV-3细胞生物学特性的机制学研究

摘要：目的:探讨红花黄色素对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的卵巢癌SKOV-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法:采用噻唑蓝法检测不同浓度(0.15,0.25,0.50,1.00 mg·L-1)红花黄色素对SKOV-3细胞增殖活力的影响,并根据红花黄色素抑制作用结果将SKOV-3细胞分为对照组、红花黄色素组(0.25 mg·L-1)、TGF-β1组(10 ng·ml-1)和红花黄色素+TGF-β1组(0.25 mg·L-1+10 ng·ml-1),采用噻唑蓝法、Transwell小室实验和划痕实验分别检测各组细胞增殖、侵袭和迁移能力,免疫印迹法检测各组细胞中E-钙黏素、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达,活性氧检测试剂盒检测各组细胞内活性氧水平。结果:红花黄色素可呈浓度依赖性抑制SKVO3细胞增殖。与对照组相比,10 ng·ml-1TGF-β1处理后SKVO3细胞增殖、侵袭、迁移能力和细胞中N-钙黏蛋白、波形蛋白表达水平以及细胞内活性氧水平明显增强（P<0.05）,且细胞中E-钙黏素蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;而0.25 mg·L-1红花黄色素处理后SKVO3细胞则与TGF-β1处理后的结果相反（P<0.05）;与TGF-β1组相比,红花黄色素联合TGF-β1可明显降低TGF-β1对SKVO3细胞的影响（P<0.05）。结论:红花黄色素可抑制TGF-β1诱导的卵巢癌SKOV-3细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制细胞内活性氧水平,减弱其介导的上皮间质转化有关。     

蔓荆子黄素调控miR-378/PRRX1轴对胃癌生物学行为的影响

目的 探究蔓荆子黄素（Cas）对胃癌（GC）SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移及微小RNA-378(miR-378)/配对相关同源框1(PRRX1)轴的影响。方法 不同浓度Cas(0、5、10、20、40、80μmol/L)处理SGC-7901细胞48 h。将对数生长期的SGC-7901细胞分为：对照组、Cas低浓度组（10μmol/L）、Cas中浓度组（20μmol/L）、Cas高浓度组（40μmol/L）、Cas高浓度+miR-378小干扰RNA(siRNA)组（40μmol/L Cas+miR-378 siRNA）、Cas高浓度+PRRX1组（40μmol/L Cas+PRRX1过表达质粒）、Cas高浓度+miR-378 siRNA+PRRX1组（40μmol/L Cas+miR-378 siRNA+PRRX1过表达质粒）。MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Transwell小室、划痕实验分别测定各组SGC-7901细胞活力、集落形成数量、凋亡率、侵袭及迁移能力;q PCR、蛋白印迹实验分别检测SGC-7901细胞miR-378、PRRX1蛋白表达水平;双萤光素酶实验验证mi...     

裂果薯皂苷单体Ⅰ通过TGF-β1调控上皮间质转化对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响

目的探究裂果薯皂苷单体Ⅰ通过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭和转移的影响。方法MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖活性;用TGF-β1刺激细胞24 h,以TGF-β1/Smad信号通路抑制剂SIS3作阴性对照。细胞划痕实验和Tran-swell小室侵袭实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测Smad7、Smad2/3、p-Smad2/3、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果SSPHⅠ能抑制SMMC-7721细胞的增殖,其24 h的IC50为1.72μmol·L^-1;与TGF-β1组相比,TGF-β1+SSPHⅠ组细胞迁移率和侵袭细胞数显著降低;Western blot实验结果显示,TGF-β1+SSPHⅠ组的Smad2/3,p-Smad2/3,N-cadherin和Vimentin蛋白的表达降低,Smad7和E-cadherin表达升高,结果与TGF-β1+SIS3组相同(P均<0.05)。结论SSPHⅠ能抑制SMMC-7721细胞侵袭和转移,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路,阻断EMT发生有关。     

丹酚酸B对转化生长因子β1诱导人肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的：观察丹酚酸B（Sal B）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肺成纤维细胞增殖及分化的影响。方法：将人胚肺成纤维细胞（MRC-5）随机分为6组：对照组（未加入TGF-β1或Sal B）;1μmol/L Sal B组;10μmol/L Sal B组;10ng/mL TGF-β1组;TGF-β1（10ng/mL）＋1μmol/L Sal B组;TGF-β1（10ng/mL）＋10μmol/L Sal B组。采用MTT法观察各组细胞增殖情况;RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞α-SMA mRNA和蛋白的表达情况;免疫荧光方法检测细胞内纤维形肌动蛋白（Factin,Fibrous Actin）重组及观察细胞形态变化。结果：与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平均明显增加,细胞形态发生明显改变,胞内可见大量F-actin聚合形成的应力纤维（stress fiber）（P〈0.01）;与对照组比较,单纯加入Sal B对细胞增殖、α-SMA表达、细胞形态和F-actin重组均未产生影响（P〉0.05）;与单纯TGF-β1组比较,TGF-β1＋Sal B两组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均下降,发生形态改变的细胞减少,胞内F-actin聚合形成的stress fibers减少（P〈0.05）,且10μmol/L Sal B对TGF-β1抑制效应优于1μmol/L Sal B,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：Sal B体外能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞增殖和向肌纤维母细胞分化。     

转化生长因子 -β通路对胃癌细胞在裸鼠体内增殖、侵袭及 slug蛋白和上皮钙黏素基因表达的影响

目的研究转化生长因子 -β(TGF-β)通路的激活与阻断对人胃癌 HGC-27细胞增殖、侵袭及 slug蛋白和上皮钙黏素(E-cad)基因表达的影响。方法于 2021年 4月至 2022年 3月使用人胃癌 HGC-27细胞构建 30只胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型后,使用外源性通路激活剂 TGF-β1和阻断剂 SB431542对 TGF-β通路进行激活和阻断。使用随机数字表法将所有裸鼠分为五组( n=6)。空白对照组:注射等量生理盐水,激动剂组:皮下注射 TGF-β1(1微克 /只),阻断剂组:腹腔注射 SB431542(0.7 mg/kg),激动剂 +低浓度阻断剂组: TGF-β1(1微克 /只) +SB431542(0.7 mg/kg),激动剂 +高浓度阻断剂组: TGF-β1(1微克 /只) +SB431542(1.0 mg/kg)。饲养至 24 d,统一处死并记录不同组裸鼠的肿瘤质量与体积,采用逆转录 -聚合酶链反应( RTPCR)与蛋白质印迹法检测肿瘤组织中 slug与 E-cad基因的表达。结果使用通路激活剂激活通路后,胃癌移植瘤体积     

伊维菌素对人胃癌细胞BGC-823、MGC-803迁移和侵袭的影响及机制研究

目的:研究伊维菌素对人胃癌细胞BGC-823、MGC-803迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:0、2.5、5、10、20、40μmol/L伊维菌素分别作用于BGC-823、MGC-803细胞24 h后用MTT法检测细胞抑制率,再采用Transwell小室侵袭实验观察5μmol/L伊维菌素和含0.67‰二甲基亚砜的磷酸盐缓冲液(对照组)作用24 h对BGC-823、MGC-803细胞迁移和侵袭的影响,Western blot法分别检测5、10μmol/L伊维菌素和含0.67‰二甲基亚砜的磷酸盐缓冲液(对照组)作用于BGC-823、MGC-803细胞24 h后上皮-间质转化(EMT)标记物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail和EMT转导通路转化生长因子β(TGF-β)/Smad中TGF-β1、TGF-βR、Smad2、Smad3蛋白的表达水平。结果:伊维菌素对BGC-823、MGC-803细胞生长均有抑制作用,其细胞抑制率与其浓度呈正相关。与对照组比较,5μmol/L伊维菌素作用后BGC-823、MGC-803细胞的迁移数和侵袭数均明显减少(P<0.01或P<0.001);5、10μmol/L伊维菌素作用后BGC-823、MGC-803细胞中E-cadherin蛋白表达明显增强(P<0.05或P<0.01或P<0.001),N-cadherin、Vimentin、Snail、TGF-βR、Smad2、Smad3蛋白表达均明显减弱(P<0.05或P<0.01或P<0.001),TGF-β1蛋白仅在10μmol/L伊维菌素作用后明显减弱(P<0.05)。结论:伊维菌素能显著抑制BGC-823、MGC-803细胞的迁移和侵袭,其可能与抑制TGF-β/Smad活性从而影响EMT过程有关。     

探究山柰酚对肺癌细胞阿霉素耐药敏感性的作用机制

目的 基于转化生长因子β₁/Ras相关C3肉毒素底物1(transforming growth factor β₁/rasrelated C3 botulinum toxin substrate,TGF-β₁/Rac1)信号通路,探究山柰酚对肺癌细胞阿霉素耐药敏感性的作用机制。方法 将H1299/R细胞分为空白组(control group,NC)、山柰酚低、中、高剂量组、TGF-β₁抑制剂组、Rac1抑制剂组、山柰酚高剂量+TGF-β₁抑制剂组、山柰酚高剂量+Rac1抑制剂组以及山柰酚高剂量+TGF-β₁抑制剂+Rac1抑制剂组。MTT检测细胞生长抑制率和细胞耐药敏感性;采用流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室检测细胞侵袭;免疫印迹检测细胞中TGF-β₁和Rac1蛋白表达。结果 和NC组相比,山柰酚低、中、高剂量组、TGF-β₁抑制剂组及Rac1抑制剂组的H1299/R细胞半数抑制浓度(half in...     

miR-144通过TGF-β/Smad通路抑制前列腺癌细胞的增殖侵袭

摘要：目的:观察微小RNA（miR）-144对前列腺癌细胞增殖侵袭的影响及其对转化生长因子-β（TGF-β）/Smad信号通路的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测LNCaP、PC-3、SW1990人前列腺癌细胞和RWPE-1人正常前列腺上皮细胞中miR-144的表达水平;以miR-144表达量最低的PC-3细胞和表达量最高的LNCaP细胞作为研究对象,转染miR-144 mimics-NC序列为NC组,转染miR-144 mimics序列为miR-144过表达（mimics）组,荧光显微镜观察转染情况; qRTPCR检测转染后miR-144的表达水平,细胞活力检测试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭能力,生物信息学预测及荧光素酶报告基因检验miR-144的潜在靶基因,蛋白免疫吸附法（Western Blot）检测TGF-β/Smad通路蛋白表达水平。结果:与正常前列腺上皮细胞RWPE-1比较,LNCaP、PC-3、SW1990前列腺癌细胞中miR-144的表达水平均显著降低（P<0.05）,miR-144 mimics转染后细胞转染效率均达到90%以上。与NC组比较,mimics组细胞中miR-144的相对表达水平显著升高,细胞的增殖活性和侵袭能力显著降低（P<0.05或P<0.01）。与TGF-β-Wt+miR-144 mimics-NC共转染组比较,TGF-β-Wt+miR-144 mimics转染组荧光素酶活性显著降低（P<0.05）。TGF-β转录本3’UTR区域具有miR-144的潜在靶点,miR-144潜在靶基因为TGF-β,在24～120 h,与miR-144 mimics-NC组相比,miR-144 mimics、miR-144 mimics+TGF-β组细胞活性显著降低（P<0.05）;与miR-144 mimics组相比,miR-144 mimics+TGF-β组细胞活性显著升高（P<0.05）。与NC组比较,mimics组细胞中p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3水平及TGF-β、TGF-βR蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。结论:miR-144可能通过TGF-β/Smad信号通路抑制前列腺癌细胞的增殖及侵袭。     

NGF/TrkA轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨神经生长因子（NGF）/原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 体外培养正常宫颈上皮细胞HUCEC和宫颈癌细胞SiHa,将SiHa细胞分为对照组（正常培养）、L-NGF组（50μg/L重组人NGF蛋白）、H-NGF组（100μg/L重组人NGF蛋白）、H-NGF+L-K252a组（100μg/L重组人NGF蛋白+50μg/L K252a）、H-NGF+H-K252a组（100μg/L重组人NGF蛋白+100μg/L K252a）。Western blot检测NGF、TrkA、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达;CCK-8法检测SiHa细胞增殖情况;流式细胞术检测SiHa细胞凋亡;划痕愈合实验测定细胞迁移;Transwell试验测定细胞侵袭。结果 SiHa细胞较HUCEC细胞NGF、TrkA水平升高（P<0.01）。与对照组相比,L-NGF组、H-NGF组NGF、TrkA水平,增殖活力,迁移率,侵袭细胞数量以及N-cadherin、Vimentin蛋白水平...     

分泌型丛生蛋白通过抑制线粒体自噬缓解H2O2诱导的心肌细胞损伤 #br#

目的 探讨分泌型丛生蛋白（sCLU）对心肌细胞氧化损伤的影响及其机制。方法 采用大鼠心肌细胞 H9C2。实验1分为Control组（仅更换培养基）和H2O2组（100 µmol/L H2O2处理）。实验2分为Control组、pcDNA3.1组 （转染 pcDNA3.1 对照空质粒）、pcDNA3.1-sCLU 组（转染 pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒）、H2O2组（100 µmol/L H2O2处 理）、H2O2+pcDNA3.1 组（pcDNA3.1 对照空质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组 （pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）。实验 3 分为 DMSO 组（加入 1% 体积分数 的 DMSO）、Mdivi-1 组（10 µmol/L 的 Mdivi-1 处理）、H2O2+DMSO 组（加入 1% 体积分数的 DMSO 处理 30 min 后加入 100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+Mdivi-1组（10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min后加入100 µmol/L的H2O2处理）、H2O2+ pcDNA3.1-sCLU 组（pcDNA3.1-sCLU 过表达质粒转染 48 h 后加入 100 µmol/L H2O2处理）、H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1组（pcDNA3.1-sCLU过表达质粒转染48 h后加入10 µmol/L的Mdivi-1处理30 min,再加入100 µmol/L H2O2 处理）。采用MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二 醛（MDA）水平。DFCH-DA荧光探针测定细胞活性氧（ROS）水平。实时定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附试验 检测细胞中sCLU表达,Western blot法检测CLU、PINK1、Parkin和LC3蛋白表达水平。结果 （1）实验1。与Control 组比较,H2O2组细胞中sCLU mRNA、细胞培养上清中sCLU蛋白及细胞中CLU蛋白相对表达水平均降低（P＜0.01）。 （2）实验2。与Control组比较,H2O2组细胞活力、SOD水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低,细胞凋亡率、ROS水平、MDA 水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均升高（P＜0.05）;与H2O2组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU组细胞活力、SOD水平、 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均升高,细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、PINK1和Parkin蛋白表达水平均降低（P＜0.05）。（3） 实验3。与DMSO组比较,Mdivi-1组细胞活力与细胞凋亡率差异无统计学意义;H2O2+DMSO组细胞活力下降,细胞 凋亡率升高（P＜0.05）。与H2O2+DMSO组比较,H2O2+Mdivi-1组、H2O2+pcDNA3.1-sCLU组和H2O2+pcDNA3.1-sCLU+ Mdivi-1 组细胞活力均升高,细胞凋亡率均下降（P＜0.05）。与 H2O2+Mdivi-1 组比较,H2O2+pcDNA3.1-sCLU 组和 H 2O2+pcDNA3.1-sCLU+Mdivi-1组细胞活力差异无统计学意义,细胞凋亡率降低（P＜0.05）。结论 sCLU对氧化应 激条下的心肌细胞具有保护作用,其机制可能与线粒体自噬的抑制有关。     

白花丹素调控LINC01615对喉鳞癌细胞生物学行为的影响

摘要：目的:探讨白花丹素是否通过调控长基因间非编码RNA 01615（LINC01615）进而影响喉鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法:采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、集落形成实验、Transwell实验检测不同剂量(2,4,8μmol·L-1)白花丹素对喉鳞癌细胞FD-LSC-1存活、克隆形成以及迁移侵袭的影响;实时定量PCR（RT-qPCR）检测LINC01615表达。将FD-LSC-1细胞分为si-NC组、si-LINC01615组、高剂量(8μmol·L-1)药物+pcDNA组、高剂量(8μmol·L-1)药物+pcDNA-LINC01615组,采用上述方法检测细胞存活率、克隆形成以及迁移侵袭能力变化。结果:白花丹素中、高剂量白花丹素处理后FD-LSC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、LINC01615及N-cadherin蛋白表达均显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.05）。与si-NC组比较,si-LINC01615组FD-LSC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、LINC01615及N-cadherin蛋白表达显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.05）。与高剂量药物+pcDNA组比较,高剂量药物+pcDNA-LINC01615组FD-LSC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、LINC01615及N-cadherin蛋白表达显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论:一定剂量的白花丹素通过下调LINC01615能够抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

大黄素对 TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞上皮间质转分化及 Mfn2表达的影响

目的 探讨大黄素（EM）对转化生长因子 β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）上皮间质转分化及线粒体融合蛋白 2（Mfn2）的影响。方法 采用 CCK-8法检测不同浓度 EM对 HK-2细胞增殖的影响;实验分空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+EM（10、20、40 μmol/L）组,EM干预组予以不同浓度的大黄素处理 HK-2细胞 30 min后,TGF-β1组和 EM干预组同时给予浓度为 10 μg/L的 TGF-β1刺激 48 h收集细胞,Western blot法检测 α-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、结缔组织生长因子（CTGF）及 Mfn2蛋白的表达。结果 CCK-8结果提示 0、10、20、40、80、160 μmol/L 浓度的 EM 处理组的 HK-2 细胞存活率（%）分别为 100.00±0.00、90.89±2.17、88.52±1.67、87.72±2.00、63.46±1.73、52.19±2.60 ,呈逐渐降低趋势（P＜0.01）;Western blot结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1刺激后,HK-2细胞中 α-SMA、CTGF及 Mfn2蛋白水平升高,E-cadherin蛋白表达降低（P＜0.05）,与 TGF-β1组比较,给予不同浓度大黄素干预后,α-SMA、CTGF及 Mfn2蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高（P＜0.05）,且呈一定剂量依赖性。结论 大黄素缓解了 TGF-β1诱导的 HK-2细胞上皮间质转分化,可能通过减少 TGF-β1诱导的 Mfn2的表达来减缓肾脏纤维化。     

茶黄素调节Snail/Slug信号通路对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 研究茶黄素调节Snail/Slug信号通路对口腔鳞癌（OSCC）细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法 采用MTT法检测25、50、100、150、175 mg/L茶黄素处理的人OSCC细胞SCC-25存活率，筛选出茶黄素的合适作用浓度。体外培养SCC-25细胞并构建OSCC移植瘤模型，分为对照组、茶黄素低剂量组、茶黄素高剂量组、茶黄素高剂量+空载组、茶黄素高剂量+Snail过表达组。采用实时荧光定量PCR与免疫印迹检测各组细胞Snail、Slug表达；采用MTT法与流式细胞术分别检测各组细胞增殖、凋亡；采用细胞划痕与Transwell侵袭实验分别检测各组SCC-25细胞迁移、侵袭；采用免疫印迹检测各组SCC-25细胞凋亡及上皮间质转化相关蛋白表达；检测各组裸鼠肿瘤体积、肿瘤质量。结果 与对照组相比，茶黄素低剂量组、茶黄素高剂量组细胞存活率、迁移率、侵袭数、Snail mRNA及蛋白表达、Slug m RNA及蛋白表达、Bcl-2、N-cadherin蛋白表达、裸鼠肿瘤质量及体积均降低（P<0.05），细胞凋亡率、Bax、ZO-1及E-cadherin蛋白表达均升高（P&...     

全反式维甲酸对HFL-Ⅰ细胞α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、热休克蛋白47表达的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ),热休克蛋白47(HSP47)mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HFL-Ⅰ细胞,MTT法检测不同浓度TGF-β1和ATRA分别作用3 d对HFL-Ⅰ细胞增殖能力的影响。随后分为6组:对照组、5μg·L-1 TGF-β1组、10μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1TGF-β1+0.1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+1μmol·L-1 ATRA组、5μg·L-1 TGF-β1+10μmol·L-1 AT-RA组,RT-PCR和Western blot方法分别检测各实验组细胞中α-SMA,Collagen-Ⅰ,HSP47 mRNA和蛋白的表达。结果①MTT法检测结果显示不同浓度的TGF-β1可刺激HFL-Ⅰ细胞增殖,呈浓度依赖性(P<0.05);不同浓度的ATRA对HFL-Ⅰ细胞增殖能力均有明显抑制作用,并随药物浓度的增加而增强(P<0.05)。②5μg.L-1 TGF-β1诱导后,HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05)。③ATRA以浓度依赖性方式下调经TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞中α-SMA,Collagen-I,HSP47 mR-NA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 ATRA能够抑制TGF-β1诱导的HFL-Ⅰ细胞的分化,其作用机制可能与降低Col-lagen-I、HSP47表达有关。     

桦木酸对人胃癌MKN-45细胞上皮-间充质转化的影响北大核心CSCD

目的观察桦木酸(betulinic acid,BA)对转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)诱导的人胃癌MKN-45细胞迁移与侵袭能力的影响,并从上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)方面探讨相关作用机制。方法体外培养MKN-45细胞,采用CCK-8法分别检测24、48和72 h不同浓度BA对MKN-45细胞增殖的影响;通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验观察BA(5、10、20μmol·L^(-1))和TGF-β1抑制剂LY2109761(10μmol·L^(-1))对TGF-β1(10μg·L^(-1))诱导后MKN-45细胞侵袭与转移水平的影响;采用Western blot法检测各组MKN-45细胞中TGF-β1、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达情况。结果BA能以时间及浓度依赖性地抑制MKN-45细胞的增殖,干预24、48、72 h后的IC 50值分别为212.8、22.72、13.17μmol·L^(-1)。与空白组相比,TGF-β1诱导后MKN-45细胞的划痕迁移(P<0.05)与Transwell侵袭(P<0.01)水平明显增加;MKN-45细胞中TGF-β1(P<0.01)、N-Cadherin(P<0.05)、MMP-2(P<0.01)明显上调,E-Cadherin(P<0.01)明显下调。与TGF-β1组相比,LY2109761能明显逆转TGF-β1诱导的MKN-45细胞迁移与侵袭能力(P<0.01),下调TGF-β1、N-Cadherin、MMP-2(P<0.01),并上调E-Cadherin(P<0.01);BA能呈浓度依赖性地抑制TGF-β1诱导下MKN-45细胞的迁移与侵袭能力(P<0.01),下调TGF-β1(P<0.01)、N-Cadherin(P<0.01)、MMP-2(P<0.05或P<0.01),并上调E-Cadherin(P<0.01)。结论BA能抑制胃癌MKN-45细胞的迁移与侵袭能力,其机制可能与阻滞TGF-β1诱导的EMT进程有关。     

二烯丙基二硫下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌细胞β-catenin表达

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。方法实验组分为6组,对照组(Control),DADS处理组,TGF-β1处理组,TGF-β1+SB431542组,TGF-β1+DADS组,TGF-β1+NSC23766组。RT-PCR、Western blot分别检测TGF-β1、Rac1、β-catenin、E-cadherin和vimentin mRNA和蛋白水平。结果DADS下调TGF-β1、Rac1、β-catenin和vimentin,上调E-cadherin表达。TGF-β1受体阻断剂SB431542和Rac1抑制剂NSC23766下调β-catenin和vi-mentin,上调E-cadherin表达。结论DADS通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。