调补肺肾法对COPD大鼠肺组织胶原和基质金属蛋白酶的影响及远后效应

目的观察调补肺肾方法(补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾)对慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructive pulmonary disease,COPD)大鼠肺组织胶原和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)表达的影响及远后效应。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、补肺健脾组[4.84 g/(kg.d)]、补肺益肾组[4.44 g/(kg.d)]、益气滋肾组[4.84 g/(kg.d)]和氨茶碱组[2.3 mg/(kg.d)],采用香烟熏吸联合细菌感染法制造COPD稳定期模型。于第9周起分别给予补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方和氨茶碱,给药12周,于第20、32周分批取材,观察肺组织病理、MMP-9、MMP-2、金属蛋白酶组织抵制剂(TIMP)-1和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原等表达。结果模型组肺组织病理损害明显。第20周时,补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾中药可明显减轻肺组织病理损伤,改善支气管壁增厚、支气管狭窄、肺泡破裂和融合、肺小动脉壁增厚(P<0.05或P<0.01),降低肺组织MMP-9、MMP-2、TIMP-1和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原等表达(P<0.05或P<0.01),在32周仍显著改变(P<0.05或P<0.01),且较氨茶碱组显著(P<0.05或P<0.01)。结论补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾法可明显改善COPD肺组织损害,降低肺组织胶原和基质金属蛋白酶表达,且远后效应良好。     

补肺健脾方对COPD大鼠骨骼肌IGF-1、mTOR和HIF1-α的影响

目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期模型大鼠股四头肌、肱二头肌、肋间肌、比目鱼肌胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)~(-1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)~(-1)α表达的影响。方法:48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氨茶碱组、补肺健脾组,每组12只。采用香烟烟雾暴露联合细菌感染法制备COPD稳定期大鼠模型。自第9周起,对照组、模型组给予2 mL生理盐水灌胃;补肺健脾组、氨茶碱组给予补肺健脾方[5 g·(kg·d)~(-1)]、氨茶碱[2.3 m g·(kg·d)~(-1)]治疗,第20周结束后取材。采用荧光定量PCR和Western Blot技术观察4种骨骼肌IGF-1、mTOR和HIF1-αmRNA和蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组IGF-1、mTOR mRNA及蛋白表达显著降低(P0.05),HIF1-αmRNA及蛋白表达显著升高(P0.01)。与模型组比较,补肺健脾组和氨茶碱组IGF-1、mTOR mRNA表达显著升高(P0.01),IGF-1、mTOR蛋白表达升高(P0.05),HIF1-αmRNA和蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:补肺健脾方可通过显著上调IGF-1、mTOR,下调HIF1-α,改善COPD大鼠骨骼肌功能。     

补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠黏膜屏障的保护作用研究

背景 人体呼吸道和胃肠消化道具有相似的黏膜结构,黏膜屏障构成机体抵御外邪的第一道防线,当呼吸道感染后刺激黏膜产生局部免疫应答,通过迁移和归巢影响到肠道,导致黏膜局部抗感染能力减弱,诱发黏膜屏障损伤,加重慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺部病变。目的 基于“肺与大肠相表里”中医药经典脏腑理论,观察补肺健脾方对COPD稳定期模型大鼠肺组织炎性因子表达水平,肺、结肠组织肺肠相关活性肽表达水平的影响。方法 2019年9月至2020年12月选取SPF级SD大鼠50只,采用乱数表法将50只大鼠随机分为对照组、模型组、补肺健脾组、氨茶碱组和益生菌组,每组10只。1～8周采用香烟烟雾暴露联合鼻腔滴注脂多糖(LPS)制作COPD模型(对照组除外)。各组自第9周起灌胃给药,12周结束后取材。在光镜下观察肺、结肠组织病理变化,采用免疫组化法检测肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)分泌型免疫球蛋白A(SIgA)及肺、结肠组织P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)表达水平。结果 对照组大鼠肺、结肠组织结构基本完整;模型...     

调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠模型全身和肺脏炎症反应的影响及远期效应

目的：评价调补肺肾（补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾）三法对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease,COPD）稳定期大鼠全身和肺脏局部炎症反应的影响及远期效应。方法：将大鼠随机分为6组：对照组、模型组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组和氨茶碱组。除对照组外,采用香烟熏吸联合细菌感染法制备COPD稳定期大鼠模型。于第9周分别以补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方和氨茶碱灌胃至第20周,于20、32周分批取材,观察外周血白细胞计数和中性粒细胞比率及血清、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid,BALF）和肺组织白细胞介素1p（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor—α,TNF—α）、可溶性TNF受体Ⅱ（soluble tumor necrosis factor receptor Ⅱ,sTNFR2）的水平。结果：各组外周血白细胞计数和中性粒细胞比率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。20周时模型组BALF 中白细胞计数较对照组明显升高（P〈0．01）,3个中药组及氨茶碱组均较模型组显著降低（P〈0．01）,其中补肺健脾组白细胞计数明显低于氨茶碱组（P〈0．05）;第32周,3个中药组的BALF中白细胞计数较氨茶碱组明显降低（P〈0．05,P〈0．01）,而3个中药组间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。第20和32周,模型组血清和肺组织IL-18、IL-6、IL-8、IL-10、TNF—α、sTNFR2含量,BALF中IL-8、IL-10、TNF—α水平均较对照组显著升高（P〈0．05,P〈0．01）;3个中药组上述因子均较模型组明显降低（P〈0．05,P〈0．01）,其中3个中药组血清、BALF和肺组织中细胞因子水平较氨茶碱组降低,而以血清和BALF改变明显（P〈0．05,P〈0．01）。第32周外周血清和BALF、肺组织炎症因子表达与20周时比较,差异无统计学意义。结论：补肺健脾、补肺益肾和益气滋肾中药可显著降低COPD稳定期大鼠全身和肺脏局部的炎症反应,且具有良好的远期效应。     

健脾补肺化痰方对哮喘大鼠肺组织中TGF-β_1、c-fos表达影响

目的:探讨健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠肺组织中TGF-β_1、c-fos表达的影响。方法:将120只雄性SD幼龄大鼠,随机分为正常组4周(Z4)、8周(Z8)、12周(Z12),模型组4周(M4)、8周(M8)、12周(M12),健脾补肺化痰方组4周(J4)、8周(J8)、12周(J12),地塞米松组4周(D4)、8周(D8)、12周(D12),每组30只,采用卵白蛋白(OVA)雾化激发建立哮喘大鼠模型,用Masson染色法及Img-Pro6.0图像分析系统,分别测定上述时间段各组大鼠肺组织中WAt/Pbm、WAi/Pbm及WAm/Pbm等气道形态学参数,同时采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测各组大鼠肺组织中TGF-β_1、c-fosm RNA的表达。结果:与正常组相比,模型组肺组织中TGF-β_1、c-fos的表达及WAt/Pbm、WAi/Pbm、Wam/Pbm等气道形态学参数均有不同程度升高(P0.05);与模型组相比,各治疗组以上指标均有不同程度下调(P0.05);健脾补肺化痰方组与地塞米松组比较,差异无显著性(P0.05)。结论:健脾补肺化痰方可通过下调TGF-β_1、c-fos的表达实现对气道重塑的抑制。     

槲皮素对慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌损伤的保护作用及其作用机制

目的 探讨槲皮素对气管内注射脂多糖并结合香烟烟雾暴露所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型中骨骼肌线粒体及过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)/沉默交配型信息调节因子2同源蛋白3(SIRT3)信号通路的影响.方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=16)、COPD组(n=16)和槲皮素组(n=16).COPD组和槲皮素组大鼠气管内注射脂多糖并结合香烟烟雾暴露建立COPD模型.从第31天开始,对照组和COPD组大鼠灌服生理盐水,槲皮素组COPD大鼠灌服槲皮素(100 mg/kg).实验结束时测量各组大鼠的肺功能,并对骨骼肌线粒体酶活性、氧化参数和细胞因子进行分析.通过实时PCR和Western blot分析大鼠左比目鱼肌组织中PGC-1α和SIRT3的表达.结果 在肺功能参数测定中,COPD组和槲皮素组大鼠峰值呼气流量(PEF)和用力呼气量(FEV)0.3/用力肺活量(FVC)比值均较对照组明显降低(P<0.05).COPD组大鼠骨骼肌线粒体中细胞色素C氧化酶(COX)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na+/K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性均显著低于对照组(P<0.05);COPD组骨骼肌线粒体丙二醛(MDA)含量明显高于对照组(P<0.05),而锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶活性均显著低于对照组(P<0.05);COPD组大鼠骨骼肌白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平均显著高于对照组(P<0.05);所有这些异常经槲皮素治疗均显著减弱(P<0.05).Western blot和实时PCR检测显示,COPD组PGC-1α和SIRT3的蛋白和mRNA水平显著低于对照组(P<0.05).此外,槲皮素组PGC-1α和SIRT3的蛋白和mRNA表达较COPD组显著升高(P<0.05).结论 槲皮素可通过减轻COPD大鼠骨骼肌线粒体功能损伤改善骨骼肌功能障碍,部分原因可能与PGC-1α/SIRT3信号通路上调有关.     

补肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病稳定期模型大鼠肺血管病变的影响

目的观察补肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠肺功能、右心及肺动脉超声以及肺组织病理的改善情况,评价补肺颗粒对COPD稳定期模型大鼠肺血管病变的疗效。方法将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、罗氟司特组(西药组)、补肺颗粒组(中药组),每组10只。除空白组外,其余各组采用熏香烟结合气道内滴注内毒素法制造COPD稳定期大鼠模型,造模80 d后,各组大鼠静养20 d进入稳定期,至此造模完毕。之后空白组和模型组给予生理盐水灌服,罗氟司特组与补肺颗粒组分别给予罗氟司特和补肺颗粒治疗,持续30 d。测定各组大鼠肺功能[用力肺活量(FVC)、最大呼气量(FEV_(0. 3))、FEV_(0. 3)/FVC],并分别于实验第30、60、80、130 d以小动物超声测定各组大鼠PR Peak(肺动脉瓣反流)、肺动脉血流速度(PV Peak)、平均肺动脉压(m PAP)及制作肺组织病理切片。结果造模期间,空白组大鼠发育良好,模型组毛发干枯少光泽,神情倦怠,体重明显减轻;干预期间,空白组及模型组较干预前无明显改变,西药组和中药组改善明显,活动增加,反应变快,饮食增多,体质量回升。造模后,与空白组比较,其余3组在肺功能各项指标方面均有降低(P 0. 05),超声各项指标均有不同程度的升高(P 0. 05);与空白组比较,各造模大鼠COPD模型大鼠支气管结构出现一定程度损伤,黏膜下出现大量炎细胞浸润,肺泡结构紊乱扩张融合形成肺大泡,肺血管增生,管壁增厚,官腔变形,微血管数量增多;经过30 d给药干预后,与模型组比较,西药组及中药组肺功能各项指标均明显升高(P 0. 01),超声各项指标均明显下降(P 0. 01);与模型组比较,西药组及中药组大鼠肺组织中各损伤均有明显改善。结论补肺颗粒可以明显改善COPD稳定期大鼠肺功能,提高其右心及肺动脉功能,并一定程度修复肺组织损伤及抑制肺血管增生重塑,保护肺血管,对预防COPD肺血管病变具有可靠的疗效。     

补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺泡表面活性蛋白A、D及肺泡结构的影响

目的:观察补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠肺泡表面活性蛋白(Surfactant-associated Proteins,SP)-A、SP-D及肺泡结构的影响。方法:将36只COPD大鼠随机分为空白组,模型组,补肺益肾高剂量组、中剂量组、低剂量组,氨茶碱组,采用香烟暴露联合反复细菌感染制备COPD稳定期大鼠模型,空白组、模型组给予生理盐水灌胃,补肺益肾高剂量组、中剂量组、低剂量组分别给予补肺益肾方7.4 g·(kg·d)~(-1)、3.7g·(kg·d)~(-1)、1.85 g·(kg·d)~(-1)灌胃,氨茶碱组给予氨茶碱54 mg·(kg·d)~(-1)灌胃。治疗12周后取材,检测肺组织病理、肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构,荧光定量PCR检测肺组织SP-A、SP-D基因表达,激光共聚焦检测肺组织SP-A、SP-D阳性表达。结果:肺组织病理示,空白组大鼠肺组织结构基本正常;模型组大鼠肺泡壁部分断裂融合,细支气管壁增厚,管壁周围结缔组织增生、炎症细胞浸润,气道内黏液分泌;补肺益肾高剂量组、中剂量组、低剂量组和氨茶碱组均有不同程度减轻,补肺益肾中剂量组减轻尤为明显。肺组织超微结构示,空白组大鼠肺组织肺泡Ⅱ型细胞中可见线粒体丰富,线粒体嵴排列整齐,板层小体完整;模型组Ⅱ型细胞线粒体较小,线粒体嵴较为清晰,但板层小体脱颗粒、空泡化;补肺益肾高剂量组Ⅱ型细胞中线粒体丰富,线粒体嵴清晰,板层小体较少但结构完整;补肺益肾中剂量组Ⅱ型细胞中线粒体丰富且排列整齐,线粒体嵴较为清晰,板层小体丰富且结构完整,细胞边缘绒毛完整;补肺益肾低剂量组和氨茶碱组Ⅱ型细胞中线粒体较少,结构不清晰,板层小体少且部分空泡化。荧光定量PCR示,与空白组比较,模型组肺组织SP-A、SP-D mRNA显著降低(P≤0.01);与模型组比较,补肺益肾高剂量组、中剂量组,氨茶碱组SP-A、SP-D mRNA均显著升高(P≤0.01),补肺益肾低剂量组SP-A mRNA升高(P≤0.01);与补肺益肾高剂量组、中剂量组比较,低剂量组和氨茶碱组SPA、SP-D mRNA均显著降低(P≤0.01)。激光共聚焦显示,与空白组比较,模型组肺组织SP-A、SP-D阳性表达细胞数明显降低(P≤0.01);与模型组比较,补肺益肾高剂量组、中剂量组和氨茶碱组SP-A、SP-D均升高(P≤0.01);与补肺益肾高剂量组比较,中剂量组SP-A、SP-D均升高(P≤0.05或P≤0.01);与补肺益肾中剂量组比较,补肺益肾低剂量组和氨茶碱组SP-A、SP-D均降低(P≤0.01)。结论:补肺益肾方能够改善COPD模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中板层小体的结构,调节肺泡表面活性蛋白的合成和分泌,从而维持肺泡结构稳定,以补肺益肾中剂量尤为显著。     

补肺健脾益肾方治疗对老年COPD稳定期患者T淋巴细胞亚群、BODE指数及生活质量的影响

目的:评价补肺健脾益肾方治疗老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的疗效及对患者外周血T淋巴细胞亚群、BODE指数及生活质量的影响.方法:将80例中医辨证为肺脾肾气虚型COPD稳定期患者随机分组,对照组(40例)仅采取常规西医治疗,而观察组(40例)在常规西医治疗的基础上联合补肺健脾益肾汤,治疗8周后比较临床疗效及患者外周血T淋巴细胞亚群、BODE指数及生活质量的变化.结果:经治疗后观察组BODE指数及BMI积分、FEV1积分、MMRC积分、6MWT积分均较对照组明显减少,差异具有统计学意义(P＜0.05);经治疗后观察组CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较对照组明显升高,CD8 +水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);两组经治疗后肺功能指标FEV1和FEV1/FVC均较治疗前有明显改善,差异具有统计学意义(P＜0.05);两组治疗后SGRQ评分均较治疗前明显降低,但观察组治疗后SGRQ评分明显低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:补肺健脾益肾方用于老年COPD稳定期治疗可改善患者肺功能及BODE指数,提高生活质量,增强细胞免疫功能.     

补肺益肾定喘方对慢性阻塞性肺疾病缓解期(肺肾亏虚型)患者miR-145、TGF-β1、IL-33及肺功能的影响

[目的]观察补肺益肾定喘方在慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期(肺肾亏虚型)治疗中的应用价值.[方法]将118例COPD稳定期(肺肾亏虚型)患者随机分为观察组和对照组,每组各59例.对照组给予西医常规的噻托溴铵粉吸入剂吸入治疗,观察组在对照组基础上联合补肺益肾定喘方口服治疗,疗程为3个月.观察2组患者治疗前后中医证候评...     

补肺阳方对慢性阻塞性肺疾病肺阳虚证模型大鼠的影响

目的研究补肺阳方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)肺阳虚证大鼠肺功能的影响,为补肺阳方治疗COPD提供实验研究依据。方法采用烟熏加气管滴注脂多糖及二次造模的方法建立大鼠COPD肺阳虚证模型。将补肺阳方高中低剂量(12.6 g/kg、6.3 g/kg、3.15 g/kg)给予不同组别COPD肺阳虚证大鼠,同时设立正常组及胸腺肽(阳性药物)对照组。利用肺功能仪器检测大鼠肺功能,HE染色法观察气管及肺组织病理学变化,扫描电子显微镜观察气管超微结构变化。结果HE染色显示模型对照组大鼠气管黏膜上皮脱落严重,黏膜下腺体增生,气管壁各层均有大量炎细胞浸润,肺泡隔变薄、断裂,肺泡相互融合形成肺大泡;胸腺肽对照组支气管形态完整,炎性细胞渗出较少;补肺阳方高中低剂量组与模型对照组相比,上皮细胞脱落减轻,炎性渗出物减少。扫描电子显微镜显示模型对照组黏膜不完整,中间有凹陷,形成沟壑状,纤毛非常稀疏,可见明显脱落;补肺阳方不同剂量及胸腺肽对照组病变均较轻。肺功能结果显示,与正常组比较,模型对照组最大通气量(maximum ventilatory volume,MVV)明显降低(P<0.01),第二秒用力呼出容积占用力肺活量百分比(percentage of 0.2 second forced expiratory volume in forced vital capacity,FEV0.2/FVC)下降(P<0.01);与模型对照组比较,补肺阳方各剂量组MVV出现明显上升(P<0.05,P<0.01),但FEV0.2/FVC的变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肺阳方可显著改善COPD肺阳虚证大鼠的症状和肺功能。     

大黄素介导IRS-2/PI3K/Akt通路干预大鼠非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的探讨大黄素通过介导IRS-2/PI3 K/Akt通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响。方法随机选取25只雄性大鼠给予高脂饲料喂养12周制备NASH模型,12周后取5只大鼠进行检测,确定NASH模型制备成功,剩余20只大鼠数字表法随机分为模型组(10只)和大黄素组(10只),另取同龄10只雄性未造模大鼠作为正常对照组。大黄素组大鼠给予20 mg/kg的大黄素灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,连续给予8周。对大鼠肝脏进行称重,计算肝指数;检测空腹血糖和空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测血生化指标。对肝组织进行HE染色,检测肝组织中IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量。结果模型组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较正常对照组增高,HDL-C水平较正常对照组降低(P<0.01);大黄素组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较模型组降低,HDL-C水平较模型组增高(P<0.05)病理检测发现,模型组出现大量脂肪变性,存在炎性细胞浸润和细胞气球样变性,大黄素组病灶明显较模型组减轻。模型组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较正常对照组降低(P<0.05),大黄素组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较模型组增高(P<0.05)。结论大黄素可以提高IRS-2/PI3K/Akt通路的活性,改善高脂诱导的NASH大鼠肝脏脂肪沉积及胰岛素抵抗。     

健脾清化方对糖尿病大鼠血糖波动和胰岛分泌功能的影响

目的观察中药复方健脾清化方干预糖尿病模型大鼠血糖波动及改善胰岛细胞分泌功能的作用。方法小剂量链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导Wistar大鼠糖尿病模型。随机分为健脾清化方组(JPQ组)、正常组(NOR组)和模型组(CON组)。分别给予生药含量1. 3 g/ml健脾清化方10 ml/kg和等剂量蒸馏水灌胃,干预4周。葡萄糖氧化酶法观察健脾清化方对模型大鼠糖代谢(IPGTT)、血糖波动水平[平均血糖波动幅度(Mean amplitude of glycemic excursions,MAGE)、葡萄糖曲线下面积(Area under curve of glucose,AUCg)]、Elisa法检测胰岛细胞功能[I/G、胰岛素原(Proinsulin,PI)、真胰岛素(True insulin,TI)、PI/TI]的影响,并行HE染色光镜下观察胰岛细胞形态变化。结果健脾清化方组大鼠的腹腔糖耐量血糖水平显著降低(P 0. 05),MAGE和AUCg降低(P 0. 05),健脾清化方组PI显著下降(P 0. 05),TI显著上升(P 0. 05),PI/TI显著下降(P 0. 05),I/G显著上升(P 0. 05)。HE染色光镜下可见健脾清化方组胰岛细胞数量增多,形态改善。结论健脾清化方能有效改善糖尿病模型大鼠的糖代谢和血糖波动,并对糖尿病模型大鼠的胰岛素分泌功能和胰岛细胞形态有一定的改善作用。     

柏正平教授运用补肺益肾膏治疗COPD稳定期临床经验

湖南省名中医柏正平教授认为慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期肺、脾、肾亏虚为发病之本,痰浊、瘀血为病理产物,治以补肺健脾、温肾固本、祛痰化瘀,临床采用自拟膏方补肺益肾膏对COPD稳定期患者进行调理,增强患者体质,减少急性发作次数,提高患者生活质量,为COPD稳定期的临床治疗提供有效方法。     

参芪补肺方对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠Nrf2和MUC5AC表达的影响

目的探讨参芪补肺方对大鼠肺组织Nrf2、MUC5AC的m RNA及蛋白表达水平的影响。方法将Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、中药组、可比特组。参照相关建模实验方法建立COPD肺肾气虚型大鼠模型,采用烟熏合脂多糖(LPS)气管滴入建立COPD大鼠模型,空白对照组大鼠不做任何干预,其余三组分别给予生理盐水灌胃、参芪补肺方中药汤剂灌胃、可比特雾化吸入,连续30天。实验后处死大鼠提取肺组织,用PCR法检测Nrf2和MUC5AC的m RNA表达量,用western-blot检测Nrf2和MUC5AC蛋白的表达情况。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠肺组织Nrf2和MUC5AC的m RNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),中药组和可比特组Nrf2和MUC5AC的表达水平较模型对照组显著降低(P0.05),中药组和可比特组比较无差异(P0.05)。结论参芪补肺方能够影响大鼠肺组织中的Nrf2、MUC5AC的m RNA及蛋白表达水平,从而发挥对COPD大鼠模型的抗氧化和抗粘液高分泌机制的调节作用。     

慢性阻塞性肺疾病稳定期虚证中医药治疗进展

目的:综述近10年中医药治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)虚证研究进展。方法:通过检索近10年文献对COPD稳定期虚证的病因病机、辨证分型和治疗进行归纳总结。结果:COPD稳定期虚证以气虚、阴虚、阳虚等为主,多表现为肺、脾、肾气虚,主要证候有肺脾气虚证、肺肾气虚证、肺肾气阴两虚证等,其治疗多由补肺健脾益肾着手。结论:中医药治疗COPD稳定期虚证疗效显著。     

参芪补肺方对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中KLF2表达的影响

目的通过KLF2在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达,探讨参芪补肺方的治疗效果。方法复制大鼠COPD模型,应用免疫组化和RT-PCR方法检测KLF2蛋白及m RNA的表达,并行相关分析。结果免疫组化结果显示模型组、空白组和中药治疗组蛋白表达有差异性(P0.05);RT-PCR结果显示模型组、空白组和中药治疗组m RNA表达有差异性(P0.05)。结论参芪补肺方在COPD氧化/抗氧化失衡过程当中起到了一定的作用,减少了ROS的释放,减缓了氧化应激的速度。     

健脾补肺化痰方对哮喘大鼠气道胶原蛋白影响

目的:观察健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠气道壁胶原蛋白合成的影响。方法:48只SD大鼠随机分成正常对照组,哮喘模型组,辅舒酮组,健脾补肺化痰方高剂量、中剂量和低剂量组。以卵蛋白(OVA)致敏制备幼龄大鼠哮喘模型,HE染色测气道壁内、外径及网状基底膜层厚度,肺组织石蜡切片行免疫组化染色计算机图像分析测定气道Ⅰ、Ⅲ型胶原含量。结果:健脾补肺化痰方高、中、低剂量干预组、辅舒酮组气道壁内、外径比值均高于哮喘模型组,网状基底膜厚度较哮喘模型组显著变薄(P<0.05或P<0.01),健脾补肺化痰方高、中、低各组间比较亦有差异(P<0.05),健脾补肺化痰方高剂量组与辅舒酮组比较无明显差异(P>0.05)。各组气道壁Ⅲ型胶原显著低于哮喘模型组(P<0.05或P<0.01),高、中、低剂量组各组间Ⅲ型胶原含量比较(P<0.05)依次增高。高剂量组与辅舒酮组Ⅲ型胶原含量相当(P>0.05)。结论:健脾补肺化痰方可以通过减少气道壁Ⅲ型胶原沉积和气道壁增厚而抑制气道重塑。     

健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠EGF、MMP-9的含量影响

目的:研究表皮生长因子(EGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在幼龄哮喘大鼠气道重塑中的表达及其之间的相关性分析,通过实验初步探讨健脾补肺化痰方对哮喘患儿平喘作用的机理,为中医药防治小儿哮喘提供新的研究思路。方法:48只SD幼龄大鼠随机分成正常对照组,哮喘模型组,辅舒酮组,健脾补肺化痰方高剂量、中剂量和低剂量组,以卵蛋白(OVA)致敏制备幼龄大鼠哮喘模型。采用HE染色观察肺病理组织学变化,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中EGF、肺组织MMP-9的含量变化。结果:正常对照组哮喘大鼠镜下无炎症反应,无气道重塑。模型组炎症反应很重;气道壁明显增厚,气道壁受损,气道管腔狭窄,气道平滑肌层和网状基底膜层增厚;气道上壁纤维化改变明显,具备气道重塑的特征。健脾补肺化痰方低中高剂组大鼠病理变化炎症程度依次减轻,高剂组与辅舒酮组炎症反应相当,炎症反应很轻。各组大鼠血清中EGF、肺组织MMP-9含量与模型组之间有差异性(P0.05或P0.01)。     

脾虚证大鼠骨骼肌变化及中医补脾类方的作用比较

目的观察脾虚证模型大鼠骨骼肌肌力变化及中医补脾类方的作用。方法雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组和脾虚模型组,模型组采用过度疲劳+饮食失节的方法造模4周。造模2周后模型组大鼠随机分为脾虚模型组、中药干预组(健脾升阳的补中益气汤组、健脾的四君子汤组、健脾渗湿的参苓白术散组);于造模第15天,中药各组大鼠分别按4.05 g/(kg·d)给予各干预方(补中益气汤、四君子汤、参苓白术散)灌胃;模型组和对照组给予等量蒸馏水,连续14 d。测定各组大鼠的抓握力,血液和骨骼肌相关生化指标,观察骨骼肌病理变化。结果与正常组相比,脾虚模型组大鼠抓握力、骨骼肌琥珀酸脱氢酶(SDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MM)、肌肉素(Musclin)、胆碱酯酶受体(M-AChRM2)及Ca2+-ATPase均显著性降低,血胆碱酯酶(Ach E)显著性升高(P0.01或P0.05);骨骼肌出现炎细胞浸润,肌纤维排列紊乱,粗细不匀,肌丝松散及肌纤维空泡样变。与模型组相比,3个干预方组大鼠的上述指标均见不同程度地改善(P0.01或P0.05),骨骼肌病变减轻;其中补中益气汤组的抓握力和骨骼肌SDH、CK-MM、M-AChRM2较四君子汤组和参苓白术散组显著性升高(P0.01或P0.05)。结论脾虚证模型大鼠存在骨骼肌的损伤,健脾、健脾渗湿、健脾升阳3方对该模型大鼠骨骼肌均有不同程度的改善作用,但以健脾升阳的补中益气汤作用最佳。