黄芪、丹参对糖尿病大鼠体内粘附分子CD54、CD106、CD62P的影响

目的 :研究丹参和黄芪对 STZ诱导的糖尿病大鼠模型体内三种粘附分子的变化和对肾脏、主动脉病理变化的影响。方法 :将大鼠分正常对照、糖尿病、胰岛素、丹参、黄芪五组 ,测定各组血糖、糖化血红蛋白、单个核细胞表面 CD54、血小板表面 CD6 2 P表达水平 ,观察肾脏和大血管 CD54和 /或 CD1 0 6 表达强度及病理变化。结果 :丹参和黄芪降低肾脏 CD54、CD1 0 6 和主动脉 CD1 0 6 的表达 ,也降低单个核细胞的表达 (黄芪 =2 0 .88± 0 .75 ,丹参 =2 9.63± 2 5 .2 5 vs DM=65 .0 9± 1 4.92 ,P<0 .0 5 ) ,但对血小板 CD6 2 P的表达无明显影响 (P>0 .0 5 )。肾脏及主动脉的病理变化明显减轻 ,黄芪还有轻度降血糖作用。结论 :黄芪和丹参能降低糖尿病大鼠体内 CD54、CD1 0 6 水平 ,并能改善糖尿病引起的肾脏和主动脉的病理变化     

西洛他唑对糖尿病模型大鼠勃起功能的影响

目的:探讨西洛他唑对精尿病模型大鼠勃起功能的影响.方法:50只SD雄性大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病动物模型,成模8周后随机分为糖尿病对照组(DM组)和西洛他唑治疗组(CI组),同时喂养10只大鼠为正常对照组(C组).各组动物灌服西洛他唑[20mg/kg·d)]或者NS.灌胃处理8周后用阿朴吗啡(Apomorphine,APO)诱导法观察勃起功能,用电生理方法测定坐骨神经的运动神经传导速度(Motor merve conduction velocity,MNCV);并取阴茎海绵体组织用比色法检测一氧化氮合酶(Nitric oxide synthaes,NOS)水平,用TUNEL法观察阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡情况.结果:与DM组相比,CI组的勃起功能、MNCV、NOS水平明显改善,凋亡指数显著降低(P<0.05).结论:西洛他唑对DM大鼠勃起功能的下降具有明显治疗作用.     

急慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞鉴定与临床意义分析

目的观察不同类型HBV感染患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞(Treg)的频率和临床指标的相关性。方法采集72例慢性乙型肝炎患者(CHB)、16例急性乙型肝炎患者(AHB)、32例健康人的外周血,流式细胞仪分析Treg频率及Treg细胞表面和细胞内分子表达。所有病例及对照均经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBVDNA载量,同时进行肝功能检测。结果CD4+CD25highTreg表面高表达CD45RO,低表达CD45RA,细胞内高表达CTLA-4。比较Treg占CD4+T细胞频率,慢性乙型肝炎组(3·9%±1·4%)与正常对照(3·5%±0·7%)比较差异无统计学意义(P>0·05),但是明显高于急性乙型肝炎组(3·1%±0·9%)(P<0·05),急性乙型肝炎组与正常对照比较差异无统计学意义(P>0·05)。慢性乙型肝炎组Treg频率在高病毒载量组(HBVDNA>107拷贝/ml,4·5%±1·9%)明显高于低病毒载量组(HBVDNA<107拷贝/ml,3·4%±0·6%)和正常对照组,并与病毒载量成正相关(r=0·32,P<0·01)。8例随访急性乙型肝炎患者Treg频率在恢复期(6·0%±1·7%)明显高于急性期(3·0%±0·6%),配对t检验P<0·001。结论CD4+CD25highTreg在慢性乙型肝炎患者高病毒载量组明显升高,这提示Treg可能通过抑制细胞免疫反应影响病毒清除;Treg在急性肝炎早期较低,随后增高,可能与Treg在急性肝炎的不同发病阶段中所起的作用有关。     

剪切力作用对血小板膜糖蛋白分子表达的影响

目的　探讨剪切力活化血小板的作用机制。方法　用改制的锥板黏度计对健康人的全血标本分别施加 10 0、15 0、10 0 0、30 0 0s-1的剪切力作用后 ,以血小板膜糖蛋白 (GP)的荧光标记抗体、单色或三色荧光法染色血小板 ,用流式细胞术检测血小板膜PAC 1(活化的GPIIb/IIIa)、CD6 2P(P 选择素 )、GPIb/IX和GPIIb/IIIa的水平。结果　PAC 1、CD6 2P在静止的血小板表面表达很低 ,阳性率分别为 1 7%± 1 1% (n =5 )和 0 9%± 0 5 % (n =5 ) ;受到高剪切力作用后表达水平增加 ,以PAC 1增加更为迅速、明显 ,于 30 0 0s-1剪切力作用 0 5min时达峰值 (73 6 %± 7 4 % ) ,之后很快开始下降 ,CD6 2P的表达相对较缓慢 ,但在观察时间内呈持续上升趋势 ,30 0 0s-1剪切力作用 7min时 ,阳性率为2 6 4 %± 3 5 %。GPIb/IX、GPIIb/IIIa存在于 96 5 %～ 99 4 %的静止血小板表面。血小板膜GPIb/IX水平在低剪切力作用下无明显变化 ,高剪切力作用 1min内有不同程度增加 ,但随后开始下降 ,30 0 0s-1作用 7min时 ,平均荧光强度由静止时的 72 4± 6 7降低到 4 4 9± 4 9(n =5 )。GPIIb/IIIa水平在高剪切力作用下迅速增加 ,30 0 0s-1作用 7min时 ,平均荧光强度由静止时的 98 5± 12 1增高到 15 9 5±2 3 6 (n =5 )。结论　高     

高血压性脑出血并发肺部感染患者T淋巴细胞亚群和TNFα的变化

目的 :探讨高血压性脑出血患者并发肺部感染时T淋巴细胞亚群和TNFα的变化。方法 :将 6 4例高血压脑出血患者分为并发肺部感染组和肺部正常组 38例 ,采用桥联酶联免疫法、ELISA法测定外周血T淋巴细胞亚群、采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子α(TNFα) ,并与健康对照组 5 2例比较。结果 :高血压脑出血并发肺部感染组CD3 (6 4 .6 9%± 5 .4 0 % )、CD4(4 1 .1 5 %± 9.0 7% )、CD4/CD8(1 .4 0± 0 .2 2 )比值分别与正常对照组相比 (70 .6 5 %± 4 .39% ,4 8.0 2 %± 8.2 7% ,1 .96± 0 .2 4 )降低 ,CD8(30 .0 8%± 7.87% )、TNFα(1 97.2 4± 2 3.5 1ng·L-1 )与正常对照组相比 (2 4 .4 2 %± 7.1 0 % ,5 7.6 2± 2 1 .6 4ng·L-1 )增高 ,P <0 .0 1。结论 :高血压性脑出血并发肺部感染存在细胞免疫功能低下 ,细胞因子TNFα可能是影响肺部感染发生和发展的重要因素     

免疫球蛋白Fc区介导抑制脂蛋白E基因敲除鼠动脉粥样硬化形成

目的　探讨免疫球蛋白治疗对实验性动脉粥样硬化形成的抑制作用 ,及其作用机制。方法　 6周龄的脂蛋白基因敲除鼠 (apoEKnockout,apoE-/ -)高脂餐喂养 8周或 16周 ,分别诱导早期脂质条纹和进展的复合粥样斑块形成。同时腹腔注射 1g·kg-1·d-1的人类免疫球蛋白 (IG)或免疫球蛋白Fab片段 (F(ab′) 2 ) 8周或 16周 ,观察其对早期脂质条纹形成和进展粥样斑块的抑制作用。离体实验检测IG对单核 /巨噬细胞株U937细胞表面Fc受体表达的影响。结果　与对照组相比 ,IG治疗显著降低脂质条纹面积 ( 4 2 %± 2 0 %vs 13 6 %± 4 8%,P <0 0 1)和进展复合斑块面积 ( 8 1%± 2 7%vs2 1 5 %± 3 9%,P <0 0 1) ;而F(ab′) 2 片段治疗组血管病灶面积无明显降低 (脂质条纹面积12 1%± 3 7%;粥样斑块面积 2 0 6 %± 4 8%) ,与对照组相比均P >0 0 5。免疫组化显示 ,IG治疗减少斑块内巨噬细胞浸润 ,而CD+4 、CD+8T淋巴细胞和I Ab +浸润细胞百分数无明显变化。血清脂质谱也无明显差异。离体实验表明 ,IG抑制细菌脂多糖 (LPS)诱导的单核 /巨噬细胞表面FcγⅡ受体表达。结论　IG治疗显著抑制动脉粥样硬化形成 ,其机制与抑制Fcγ受体介导的炎症作用有关。     

对氯苄基四氯小檗碱（CPU—86017）及L—甲状腺素对大鼠主动脉环α1A、α1B亚型的选择性

目的　研究CPU 86 0 17及L 甲状腺素对血管平滑肌收缩的影响及对α1A、α1B亚型的选择性。方法　以有钙、无钙液中由累积浓度去甲肾上腺素 (norepinephrine ,NE)引起的大鼠胸主动脉环的收缩 ,比较CPU 86 0 17(30 μmol·L-1)对正常及慢性甲状腺给药组 (Thy)大鼠血管平滑肌 (VSM)的α1受体的抑制作用。结果　在无钙液中由α1B引起的内钙释放所致VSM收缩占有钙液中VSM最大收缩的百分率 ,正常组和Thy组分别为 4 8 8%± 8 1%和 6 9.4 %± 9 7% (P <0 .0 1) ,复钙后由α1A引起的外钙内流所致VSM收缩百分率 ,分别为正常组 4 7 7%± 5 0 % ,Thy组为 2 2 1%± 9 4 % (P <0 .0 1)。加入CPU 86 0 17(30 μmol·L-1)后 ,对内钙释放所致的收缩 % ,正常对照组为 35 2 %± 10 1% ,Thy组为 35 2 %± 10 2 % ;而对外钙内流引起的收缩百分率则分别为 13 9%± 7 1%及 2 0 7%± 7 5 %。结论　L 甲状腺素使α1B的作用增强 ,而减弱α1A的作用。CPU 86 0 17在正常情况下对VSM的α1A的抑制强于α1B受体亚型     

西洛他唑对链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠肾脏细胞间粘附分子-1表达的影响

目的:探讨西洛他唑对糖尿病大鼠肾组织细胞间粘附分子1(ICAM-1)的影响及对肾脏的保护作用。方法:用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。正常对照组(10只),糖尿病对照组(15只),高剂量西洛他唑组(11只,25 mg.kg-1.d-1),低剂量西洛他唑组(13只,18 mg.kg-1.d-1),治疗12周。用微量法分别测血糖、糖化血红蛋白及肾重/体重的比值,分别检测肾脏ICAM-1 mRNA及ICAM-1蛋白表达。结果:与正常组相比,糖尿病组血糖、糖化血红蛋白明显升高;与糖尿病组相比,高、低剂量西洛他唑组血糖、糖化血红蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病组肾重/体重比值明显增加,高、低剂量西洛他唑有减轻肾脏肥大趋势,但与糖尿病组的差别无统计学意义(P>0.05);ICAM-1 mRNA表达在糖尿病组明显升高,西洛他唑组有显著改善(P<0.01);免疫荧光染色显示,糖尿病组ICAM-1在肾组织分布广且呈强阳性表达,而西洛他唑组ICAM-1着色弱,分布局限;Western blot检测显示,正常组ICAM-1蛋白表达较弱,糖尿病组显著增强,经西洛他唑治疗的糖尿病大鼠ICAM-1蛋白表达降低。结论:链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠肾脏ICAM-1表达增加,西洛他唑可降低糖尿病大鼠肾组织ICAM-1 mRNA和蛋白表达,可能对糖尿病肾病具有保护作用。     

HIV感染和AIDS患者T淋巴细胞免疫病理改变的研究

目的　探讨我国HIV感染和AIDS患者T淋巴细胞的免疫病理改变情况及其临床意义。方法　收集 13例HIV感染患者 (HIV组 )、2 7例AIDS患者 (AIDS组 )和 5 1名健康献血员 (正常对照组 )的抗凝血 ,用人T淋巴细胞亚群的特异性荧光抗体标记 ,通过流式细胞仪检测外周血CD4 + T淋巴细胞 (T4细胞 )、CD8+ T淋巴细胞 (T8细胞 )及其亚群 ,并检测患者血浆HIV载量。结果　正常对照组、HIV组和AIDS组外周血T4细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 84 9± 2 88,4 37± 184 ,5 0± 5 1,组间比较P <0 0 1;T8细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 5 79± 175 ,10 31± 345 ,5 35± 338,HIV组明显高于正常对照组(P <0 0 5 ) ;T4纯真细胞 (CD4 + CD4 5RA+ CD6 2L+ )亚群比例分别为 4 3 0 %± 11 4 % ,4 4 2 %± 12 8% ,2 4 8%± 15 5 % ,AIDS组明显为低 (P <0 0 5 ) ;T4纯真细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 36 8± 16 2 ,185±134,18± 2 0 ,组间比较P <0 0 1;T4功能细胞 (CD4 + CD2 8+ )亚群比例分别为 93 1%± 8 1% ,6 2 6 %±2 8 2 % ,5 6 9%± 2 6 4 % ,组间比较P <0 0 1;T4和T8激活细胞 (CD4 + HLA DR+ ,CD8+ HLA DR+ ,CD8+CD38+ )亚群比例均表现为AIDS组 >HIV组 >正常对照组 (P <0 0 5 ) ;T4和T8凋亡细胞 (CD4 +CD95 + ,C     

大鼠慢性容量超负荷心力衰竭模型的建立

目的 :构建大鼠慢性容量超负荷肥大心肌心力衰竭模型 .方法 :改进传统腹腔动 静脉造瘘术 ,用 9/ 0无损缝线U型缝合腹主动脉表面壁腹膜 ,于肾动脉下暂时阻断腹主动脉 ,用弯成 135°角的注射针 (外径 0 .9mm)向上刺入U型缝合处腹主动脉 ,继续向左上进针刺穿动 静脉联合壁造成动 静脉瘘 ,回退穿剌针于腹主动脉内 ,于第一次动 静脉联合壁瘘口下方同法再次穿剌 ,造成 2个瘘口 ,退出针头 ,立即收紧腹主动脉外膜U型缝线并打结 ,开放动脉阻断夹 ,可见下腔静脉较前增粗变红 ,证明动 静脉造瘘成功 .结果 :围手术期死亡率仅 10 % .5mo后动 静脉瘘组大鼠心脏肥大 ,心脏质量增加 (动 静脉瘘组为 32 87.3± 12 6 .6mg·kg -1,而对照组为 2 2 6 5 .8± 118.8mg·kg-1,P <0 .0 1) ,血压、心率、左室收缩末压显著降低 ,左室舒张末压增加 ,心室肌细胞长度和容积增大 ,代表左室收缩功能的 +dp/dtmax降低 (动 静脉瘘组为30 39± 10 98kPa·s-1,而对照组为 4 6 95± 76 3kPa·s-1,P <0 .0 1) ,代表左室舒张功能的 dp/dtmax也降低 (动 静脉瘘组为- 2 5 32± 86 5kPa·s-1,而对照组为 - 4 332± 797kPa·s-1,P<0 .0 1) .结论 :腹主动脉外膜U型缝线针刺 2口造瘘法 ,可成功复制大鼠慢性容量超负荷心力衰竭模型 ,且简便、成功率     

从ICAM-1介导的炎症反应探讨下肢缺血再灌注对糖尿病大鼠坐骨神经的损伤机制

目的观察下肢缺血再灌注后糖尿病大鼠血清、坐骨神经组织中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和髓过氧化物酶（MPO）的表达情况,探讨下肢缺血再灌注对糖尿病大鼠坐骨神经的损伤机制。方法24只清洁级SD雄性大鼠,分为正常组（n=6）和糖尿病组（n=18）,糖尿病组采用链脲佐菌素造模,饲养1个月后,选择部分糖尿病大鼠（n=9）作为糖尿病缺血再灌注组,暂时阻断腹主动脉、髂总动脉和股动脉3h,再灌注7天后检测各组大鼠血清、坐骨神经中ICAM-1和MPO的表达情况。结果糖尿病缺血再灌注大鼠血清、坐骨神经组织中ICAM-1和MPO含量明显高于糖尿病大鼠和正常大鼠（P〈0．01）。结论糖尿病大鼠下肢缺血再灌注通过提高血清、坐骨神经组织中ICAM-1和MPO的表达水平参与坐骨神经的损伤过程。     

消渴灵浓缩液对糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的影响

目的：探讨消渴灵浓缩液对糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的影响。方法：将30只链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型随机分为模型组、西药对照组、中药治疗组,每组10只。另选10只鼠龄、体重相匹配的大鼠作为正常组。采用相对定量逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测病程8周后各组大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA表达的水平。结果：中药组、西药组、正常大鼠组坐骨神经IGF-1 mRNA相对表达量均增加,差异无统计学意义（P=0.213,P=0.822,P=0.304）;模型组坐骨神经IGF-1 mRNA相对表达量下降,与中药组、西药组、正常大鼠组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。IGF-1 mRNA表达水平与血糖呈负相关（P<0.05）。结论：糖尿病大鼠坐骨神经组织IGF-1 mRNA的表达下降,消渴灵浓缩液可上调糖尿病大鼠坐骨神经IGF-1 mRNA的表达水平,可能是消渴灵浓缩液防治糖尿病周围神经病变的作用机制之一。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏CD62P、ICAM-1表达的影响

目的观察糖尿病大鼠肾组织P-选择素(CD62P)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达及辛伐他汀的影响。初步探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠肾组织的保护作用机制。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)和辛伐他汀治疗组(D),DM组和D组腹腔注射链尿佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模后8周、12周免疫组化法测定CD62P、ICAM-1水平;用放射免疫分析法测大鼠24h尿白蛋白排泄率。结果与NC组相比,DM及D组CD62P、ICAM-1表达增加(P<0.01);D组CD62P、ICAM-1表达低于DM组(P<0.01);并且CD62P、ICAM-1水平与尿白蛋白排泄率呈正相关。结论辛伐他汀通过降低CD62P、ICAM-1的表达,减少血管内皮损伤,减轻肾脏炎症反应及微血栓形成,进而对肾脏起到保护作用。     

葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经损伤的影响

目的：探讨葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经的保护作用及其机制。方法：雄性SD大鼠随机分成6组：正常对照组,糖尿病模型组,葛根素高（160mg·kg^-1）、中（120mg·kg^-1）、低（80mg·kg^-1）剂量治疗组,氨基胍（100mg·kg^-1）治疗组;各组大鼠每天腹腔注射相应药物1次,正常对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积丙二醇。治疗12周后,测定6组大鼠血清、坐骨神经一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性和血浆内皮素-1（ET-1）、降钙素基因相关肽（CGRP）含量及坐骨神经丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、Ca^2＋-ATPase、Na^＋-K^＋-ATPase活性和神经元型NOS（nNOS）、醛糖还原酶（AR） mRNA的表达水平。结果：糖尿病组大鼠血液NO、CGRP含量及坐骨神经NOS、SOD、Ca^2＋-ATPase、Na^＋-K^＋-ATPase活性、NO含量和nNOS mRNA的表达均明显低于正常对照组（P〈0.01或P〈0.05）,而血液NOS活性、ET-1含量和坐骨神经MDA含量、AR mRNA的表达均明显高于正常对照组（P〈0.01或P〈0.05）;经葛根素治疗后,上述改变逆转,与糖尿病模型组比较差异有显著性（P〈0.01或P〈0.05）。结论：葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经具有一定的保护作用,其机制可能与改善神经内膜血供及减轻氧化应激损伤有关。     

CD62P在糖尿病肾病患者血浆中的水平及发病机制的探讨

目的检测血小板活化依赖性颗粒表面膜蛋白（CD62P）在糖尿病肾病患者血浆中的表达水平,探讨它在糖尿病肾病发病机制中的作用。方法58例糖尿病人根据尿蛋白排泄率（UAE）及肾功能变化分为三组,正常尿蛋白组;尿蛋白持续阳性肾功能正常组;肾功能异常组。并设立对照组。流式细胞仪检测CD62P。同时检测血糖,肾功能,行血小板及血小板分布宽度检测;行即日尿白蛋白排泄率（UAE）检验;记录患者的血压。结果血CD62P浓度检测：Ⅰ组与Ⅳ组比较没有显著性差异（P=0.303）、与Ⅱ组比较有显著性差异（P=0.033）、与Ⅲ组比较有显著性差异,P〈0.001;Ⅱ组与Ⅳ比较有显著性差异,P〈0.05,与Ⅲ组比较有显著性差异,P=0.001。血常规检测血小板及血小板分布宽度,各组之间比较没有显著性差异,P〉0.05。结论CD62P在糖尿病肾病各期都有不同程度的表达,且随着糖尿病肾病病情的发展,CD62P表达更加明显。提示CD62P在糖尿病肾病的发生发展中可能起重要的作用。粘附分子CD62P的高表达与与高血糖等因素有关。CD62P介导淋巴细胞、单核细胞和T淋巴细胞聚集于肾小球和肾间质中,可能是其在DN发病中起作用的机制。在糖尿病肾病的发生发展中,CD62P的高表达不依赖于血小板数量及血小板分布宽度变化。     

低强度脉冲超声对大鼠糖尿病周围神经病坐骨神经p53表达的影响

目的：探讨低强度脉冲超声（LIPUS）对大鼠糖尿病周围神经病（DPN）模型中坐骨神经中转录因子p53表达的影响。方法：大鼠随机分为正常组、模型组和LIPUS组。链脲佐菌素腹腔注射制备实验DPN大鼠模型,LIPUS组以低强度脉冲超声进行体外治疗,造模后4周检测各组血糖及坐骨神经传导速度,实时荧光定量PCR检测坐骨神经P53 mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组和LIPUS组血糖显著增高,神经传导速度显著降低,坐骨神经p53 mRNA表达增加（ P＜0．05）。与模型组比较,LIPUS组神经传导速度显著增高,坐骨神经P53 mRNA表达显著下降（ P＜0．05）。结论：低强度脉冲超声可通过抑制受损神经中轴突抑制因子P53表达,促进糖尿病周围神经病坐骨神经功能恢复。     

糖尿病周围神经病变大鼠金属硫蛋白表达意义

目的:探讨糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经中金属硫蛋白(metallothionein,MT)的表达意义。方法:测定糖尿病大鼠坐骨神经MT含量及MT亚型(MT-1和MT-3)mRNA的表达。结果:随着糖尿病病程进展,大鼠表现血糖、坐骨神经MT含量逐渐增高。RT-PCR结果显示,4周、8周和16周糖尿病大鼠坐骨神经MT-1及MT-3mRNA表达均出现明显上调(P<0.05)。结论:糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经MT表达增高,可能与抗氧化应激、神经修复有关。