三碘甲状腺原氨酸促进2VO大鼠侧脑室下区的神经再生

目的：探讨三碘甲状腺原氨酸（triiodothyronine,T3）对双侧颈总动脉结扎（2-vessel occlusion,2VO）大鼠侧脑室下区（subventri（sular zone．svz）神经再生的影响。方法：雄性SD大鼠完全随机分为假手术组,2VO组和缺血后T3干预组,每组8只,采用双侧颈总动脉永久性结扎术制备慢性脑缺血模型,术后各组大鼠连续7d腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromo-2′-deoxyuridine,BrdU）标记增殖细胞。各组5只分别于第7、14天灌注取脑组织,采用BrdU与Doublecortin（DCX）免疫荧光双染法标记新生神经元;各组3只取新鲜脑组织分离SVZ,采用免疫印迹法检测DCX蛋白的表达水平。结果：T3作用7d后,T3干预组BrdU阳性细胞较假手术组显著增多（P=0．002）,与2VO组差异无统计学意义（P=0．084）;且BrdU／DCX阳性细胞较2VO组和假手术组均显著增多（均P〈0．05）。T3作用14d后,T3干预组BrdU阳性细胞和BrdU／DCX阳性细胞均显著多于2VO组和假手术组（P〈0．01）。与2VO7d组相比,2VO14d组BrdU阳性细胞和BrdU／DCX阳性细胞显著减少（P〈0．05）。免疫印迹法也显示T3组DCX蛋白的表达水平较多、结论：T3可促进慢性脑缺血大鼠侧脑室下区新生神经元的增殖,提高存活率,促进神经再生。     

Changes of thyroid hormone and mRNA of OATP1C1 and MCT8 in serum and brain of rat with nonthyroidal illness syndrome

目的 观察非甲状腺疾病综合征(nonthyroidal illness syndrome,NTIS)大鼠血清及脑组织甲状腺激素水平及其转运蛋白有机阴离子转运多肽(organic anion transporting polypeptide 1 C1,OATP1C1)和单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter 8,MCT8)mRNA的变化.方法 选取成年SPF级SD雄性大鼠23只,分为正常组(n=12)和NTIS组(n=11).NTIS动物采用肝纤维化模型,利用四氯化碳(1:6)用玉米油稀释,0.025 ml腹腔注射,3次/周,共8周.正常组大鼠相同剂量玉米油,腹腔注射,3次/周,共8周.造模成功后2组利用水迷宫法测试学习记忆能力.随后处死,取血及脑组织,放免法测定血清甲状腺激素(T3、T4、rT3、TSH)及脑组织甲状腺激素(T3、T4、rT3);RT-PCR法测定脑组织中OATP1C1及MCT8 mRNA水平.结果 ①NTIS组血清T3、T4水平较正常组明显降低[T3 (0.53±0.18) mmol/Lvs(0.73±0.22) mmol/L,P ＜0.05;T4 (24.58±7.73) mmol/L vs( 39.97±14.74) mmol/L,P＜0.01],rT3、TSH水平2组之间无显著性差异(P＞0.05);NTIS组脑组织中T3、T4浓度较正常组稍升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);②NTIS组OATP1C1和MCT8 mRNA水平较正常组明显升高[ OATP1C1 mRNA(0.054±0.032) vs (0.019±0.016),P＜0.01;MCT8 mRNA(0.058±0.048) vs(0.017±0.012),P＜0.05];③2组大鼠空间探索和定位航行之间无显著性差异(P＞0.05).结论 NTIS大鼠脑内通过OATP1C1和MCT8代偿,保持脑内T3、T4水平相对稳定,从而维持中枢甲状腺功能正常.     

NTIS大鼠血清及脑组织甲状腺激素水平及其转运蛋白OATP1C1和MCT8 mRNA变化

目的观察非甲状腺疾病综合征(nonthyroidal illness syndrome,NTIS)大鼠血清及脑组织甲状腺激素水平及其转运蛋白有机阴离子转运多肽(organic anion transporting polypeptide 1C1,OATP1C1)和单羧酸转运蛋白(monocarboxylatetransporter 8,MCT8)mRNA的变化。方法选取成年SPF级SD雄性大鼠23只,分为正常组(n=12)和NTIS组(n=11)。NTIS动物采用肝纤维化模型,利用四氯化碳(1∶6)用玉米油稀释,0.025 ml腹腔注射,3次/周,共8周。正常组大鼠相同剂量玉米油,腹腔注射,3次/周,共8周。造模成功后2组利用水迷宫法测试学习记忆能力。随后处死,取血及脑组织,放免法测定血清甲状腺激素(T3、T4、rT3、TSH)及脑组织甲状腺激素(T3、T4、rT3);RT-PCR法测定脑组织中OATP1C1及MCT8 mRNA水平。结果①NTIS组血清T3、T4水平较正常组明显降低[T3(0.53±0.18)mmol/L vs(0.73±0.22)mmol/L,P<0.05;T4(24.58±7.73)mmol/L vs(39.97±14.74)mmol/L,P<0.01],rT3、TSH水平2组之间无显著性差异(P>0.05);NTIS组脑组织中T3、T4浓度较正常组稍升高,但差异无统计学意义(P>0.05);②NTIS组OATP1C1和MCT8 mRNA水平较正常组明显升高[OATP1C1 mRNA(0.054±0.032)vs(0.019±0.016),P<0.01;MCT8 mRNA(0.058±0.048)vs(0.017±0.012),P<0.05];③2组大鼠空间探索和定位航行之间无显著性差异(P>0.05)。结论 NTIS大鼠脑内通过OATP1C1和MCT8代偿,保持脑内T3、T4水平相对稳定,从而维持中枢甲状腺功能正常。     

P-糖蛋白在大鼠脑缺血再灌注后的表达变化

目的 观察大鼠局灶性脑缺血90 min再灌注后p-糖蛋白(P-gp)在脑组织中的表达及其变化规律.方法 采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,选取26只成年健康SD雄性大鼠,其中1只用于2,3,5--三苯基氯化四氮唑(TTC)染色,其余25只随机分为对照组(n=5)、假手术组(n=5)、脑缺血再灌注1、3、7d组(n=5).用免疫组织化学DAB单标,观察P-gp在正常脑组织和缺血脑组织中的分布变化;用Mdr-1抗体分别和神经元标记物(Neun)、星形胶质细胞标记物(GFAP)、微血管内皮细胞标记物(CD31)进行免疫荧光双标,观察P-gp在缺血再灌注后脑组织的表达;用实时定量PCR技术检测脑缺血再灌注后大脑皮质及纹状体微血管P-gp mRNA的表达变化.结果 对照组仅在脑组织微血管内皮细胞表达P-gp,缺血再灌注组除微血管内皮细胞表达P-gp外,在部分神经元及星形胶质细胞的突起也有表达.脑缺血再灌注后1d皮质P-gp mRNA表达降低,但3d表达明显增高,7d又下降,其升高和降低水平与对照组及假手术组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).脑缺血再灌注后1、3、7d纹状体P-gp mRNA表达均增多,其中以1、3d增多明显,与对照组和假手术组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脑缺血再灌注后P-gp在大脑皮层及纹状体微血管P-gp的表达呈现不同的趋势,这可能是脑组织的自我保护机制之一.     

全脑缺血大鼠海马自体神经干细胞动员与5-HT1A受体表达关系的初步研究

目的探讨西酞普兰对血管性痴呆大鼠海马自体神经干细胞动员的作用及与5-HT1A受体表达的关系。方法实验动物随机分为正常对照组(NC)、假手术对照组(SC)、血管性痴呆组(4VO)和西酞普兰干预的血管性痴呆组(4VO C)共4个组;采用改良的Pulsinelli′s四血管阻断(4-vessle occlusion,4VO)方法制作血管性痴呆动物模型;BrdU免疫荧光和激光共聚焦方法观察海马齿状回神经干细胞增殖状况;RT-PCR法测定大鼠海马5-HT1A受体mRNA相对表达丰度。结果(1)海马BrdU阳性细胞主要表达在DG,多成对或成团排列于颗粒细胞层与海马门区。4VO组及4VO C组造模后1d,BrdU阳性细胞数显著下降(P=0.002),此后逐渐增加,到术后14d达峰值(4VO C组约为4VO组2倍),且4VO C组海马神经干细胞活跃增生的情况一直延续到术后21d(与4VO组比较P=0.000 17)。(2)术后1d,4VO组和4VO C组大鼠海马5-HT1A受体mRNA相对表达丰度均显著下降(P<0.01);两组从术后3~14d表达持续回升,4VO组于14d表达至高峰,而4VO C组于术后7d表达至峰值;术后21d两组受体表达均有所回落且显著高于正常水平(P<0.01)。和4VO组比较,4VO C组除术后1d组外其余各组大鼠海马5-HT1A受体mRNA表达到丰度均显著升高(P<0.01)。(3)大鼠海马DG神经干细胞增殖趋势与海马5-HT1A受体mRNA表达有明显的相关性(r=0.849 8)。结论在大鼠四血管阻断血管性痴呆模型中,全脑缺血可刺激海马DG神经干细胞增殖,且给予外源性SSRI类抗抑郁药物西酞普兰可显著增强海马神经发生,同时该作用可能与刺激海马5-HT1A受体表达有关。     

高原肺动脉高压大鼠重返平原后肺组织中5-HTT基因表达变化

目的 探讨高原肺动脉高压大鼠重返平原后肺组织中5-羟色胺转运体基因表达变化.方法 46只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（C组,8只）,高原低压低氧组（H组,8只）,重返平原组（R10组,R20组,R30组,每组10只）,正常对照组大鼠置于平原常压常氧处喂养,高原低压低氧组和重返平原组置于模拟海拔5000米高原环境喂养建立肺动脉高压动物模型,重返平原组大鼠建立肺动脉高压动物模型后再于平原饲养,应用RT-PCR方法检测各组大鼠肺组织中5-羟色胺转运体基因表达水平 结果 与正常对照组（0.11±0.03）相比较,5-羟色胺转运体mRNA在高原低压低氧组表达明显增高（0.92±0.03,P＜0.01）,重返平原组10d,20 d组表达增高（0.57±0.02,0.38±0.02,P＜0.01）,随重返平原时间的延长其表达量不断下降,R30组表达无差异（0.14±0.04,P＞0.05）.结论 5-羟色胺转运体基因在高原低压低氧环境中表达量明显增高,重返平原后,5-羟色胺转运体基因表达降低并逐渐恢复.     

腺病毒介导HSP70对大鼠缺血低氧脑组织保护作用

目的探讨外源性热休克蛋白70(HSP70)表达对脑缺血低氧模型大鼠脑组织保护作用。方法小鼠尾静脉注射携带全长HSP70基因vAd-HSP70,采用RT-PCR方法分别检测注射24、487、2 h后脑组织HSP70mRNA的转录水平。大鼠随机分为缺血低氧组(HI组)、vAd-HSP70静脉注射转染缺血低氧组(vAd-HSP70组,静脉注射转染vAd-HSP70的48 h后予缺血低氧处理)和正常对照组(NC组),各25只。用免疫组织化学技术对各组2、24、487、2 h及7 d脑组织中HSP70蛋白表达进行检测。结果小鼠尾静脉注射含HSP70重组腺病毒后可检测到HSP70基因的有效表达,且在注射48 h后表达水平最高,与247、2 h比较有显著性(F=18.58,P<0.05)。缺血低氧后大鼠脑组织中HSP70的水平增高,在缺血低氧后24 h达高峰,并在24~48 h内维持较高水平,以后逐渐下降。vAd-HSP70组HSP70各时间点的表达水平均高于HI组,在2、48、72 h差异有显著意义(F=85.36~866.67,q=6.71~88.43,P<0.05)。病理学检测显示HI组大鼠脑组织有较严重的缺血损伤性改变,vAd-HSP70组大鼠脑组织损伤较轻。结论外源性HSP70可在大鼠脑组织有效表达,并可减轻脑缺血低氧后病理损伤,对大鼠缺血低氧性脑损伤具有保护作用。     

甲亢大鼠心肌甲状腺激素受体mRNA的表达

【目的】探讨正常与甲亢大鼠心肌甲状腺激素受体mRNA表达差异。【方法】将16只实验大鼠随机分为正常对照组和甲亢组两组,每组8只:实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测正常对照组与甲亢组大鼠心肌甲状腺激素受体各亚型mRNA表达差异。【结果】与正常大鼠心肌相比,甲亢大鼠心肌甲状腺激素受体α1 mRNA表达上调51%(t=9.17,P<0.01),甲状腺激素受体α2 mRNA表达下调58%(t=10.02,P<0.01),甲状腺激素受体β1 mRNA表达不受影响(t=0.96,P>0.05)。【结论】高甲状腺激素水平对甲状腺激素受体α1、α2、β1mRNA表达影响不一致,甲亢大鼠心肌甲状腺激素受体αmRNA的异常表达变化可能与甲亢心脏病的发病密切相关。     

长期远隔后适应对脑缺血再灌注大鼠脑组织神经中丝200表达的影响

目的研究长期远隔缺血后适应对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织神经中丝200(NF200)表达的影响。方法应用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注损伤模型,再灌注即刻给予远端肢体缺血后适应,即双侧股动脉夹闭10 min/放开10 min,反复3次。此后每天给予一次远端肢体缺血后适应。实验分为4组:缺血再灌注7 d组(C7组);缺血再灌注后适应7d组(P7组);缺血再灌注28 d组(C28组);缺血再灌注后适应28 d组(P28组)。每组6只大鼠。采用免疫印迹法研究各组大鼠脑组织中NF200蛋白的表达水平,并采用免疫荧光法观察大鼠脑组织NF200蛋白的表达部位。结果 P7组大鼠脑组织内NF200表达比C7组明显增高(P<0.05),P28组大鼠脑组织内NF200表达比C28组及P7组明显增高(P均<0.05),而C28组大鼠与C7组相比脑组织内NF200表达无明显变化。免疫荧光染色结果显示NF200在神经元胞体及轴突中均有表达。结论长期远隔缺血后适应可增加大鼠脑组织内NF200的表达,可能与减轻脑缺血损伤相关。     

大鼠脑缺血再灌注后NGF mRNA和NGFR的表达及其意义

①目的　观察脑缺血再灌注对大鼠神经生长因子信使核糖核酸 (NGFmRNA)和神经生长因子受体(NGFR)表达的影响。②方法　线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型 ,采用原位杂交方法检测脑组织NGFmRNA的变化 ,免疫组织化学方法检测脑组织NGFR的变化。③结果　NGFmRNA在缺血周围区的表达 ,缺血再灌注 4h、1d、3d和 7d组较对照组明显增高 (t=9.3 2～ 13 9.5 0 ,P <0 .0 0 1) ;在缺血中心区 ,再灌注 4h组NGFmRNA表达也明显增高 (t=3 3 .0 9,P <0 .0 0 1)。NGFR在缺血周围区的表达 ,缺血再灌注 4h、1d、3d和 7d组较对照组明显增高 (t =17.2 8～ 40 .83 ,P <0 .0 0 1) ;在缺血中心区 ,再灌注 4h组较对照组明显增高 (t=13 .5 6,P <0 .0 1)。④结论　NGF与NGFR表达参与缺血再灌注后脑组织的保护作用     

电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区皮层神经生长因子表达的影响

探讨针刺对缺血性脑损伤的保护作用。【方法】SD大鼠36只,随机分为假手术组、缺血模型组和电针组, 每组又分为2周和5周两个时间段组;除假手术组外,其他组均采用热凝闭大鼠大脑中动脉法复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组化法观察缺血2周和5周后缺血区皮层神经生长因子(NGF)的变化规律以及针刺对其影响。【结果】两个假手术组大鼠手术侧皮层只见到很少的NGF免疫阳性细胞;两个缺血组大鼠脑缺血区皮层NGF免疫活性细胞的表达与假手术组比较显著增多(P<0．01),缺血5周组与缺血2周组相比缺血区皮层NGF阳性细胞的数量下降(P<0．01);电针组在2周时缺血区皮层NGF免疫阳性细胞的表达增高,与缺血2周组、假手术2周组相比差异具有显著性意义(P<0．01);电针5周组大鼠脑缺血区皮层NGF免疫阳性细胞表达虽呈下降趋势,但仍高于同时间段的缺血组大鼠(P<0．01)。【结论】电针可以增加大鼠脑缺血区皮层NGF的分泌和表达时程,这可能是其保护缺血性脑损伤的机制之一。     

大鼠慢性前脑缺血解除后脑过度灌注模型的建立

目的 建立大鼠慢性前脑缺血基础上的脑过度灌注模型.方法 选取雄性Wistar大鼠72只依随机数字表均分为两个模型建造组.缺血模型采用双侧颈总动脉结扎,随机数字表分为空白对照、假手术组、缺血2周组、缺血4周组,每组9只,结扎前后分别测定脑额叶血流、比较各组行为学评分、脑梗死面积.过度灌注模型是在缺血模型基础上,再灌注同时经尾静脉持续输注去氧肾上腺素4μg·kg-1·min-1,使再灌注后脑额叶血流超过基础值的200%.随机分为空白对照组、盐水组、过度灌注0.5 h组、过度灌注2 h组,每组9只,再灌注前后分别测定脑额叶血流,比较各组行为学评分、血脑屏障通透性、脑干湿重比值.结果 大鼠双侧颈动脉结扎后前脑血流减少可达67%±2%,脑过度灌注组与盐水输注组的脑血流变化值差异有统计学意义(P＜0.01).缺血2周组的神经功能评分、脑梗死面积与正常对照组差异无统计学意义,缺血4周组的脑梗死面积与正常对照组差异有统计学意义.脑过度灌注2 h组的血脑屏障通透性改变有统计学意义(P＜0.05).结论 结扎大鼠双侧颈总动脉2周后脑过度灌注2 h可较好地建立大鼠脑过度灌注综合征模型.

Abstract：

Objective To establish the cerebral hyper-perfusion model after chronic forebrain ischemia in rats. Methods A total of 72 male rats were equally randomized into 2 modeling groups. The ligation of bilateral common carotid artery could induce chronic forebrain ischemia. And 36 rats were randomly grouped by ischemia duration: control group ( n = 9 ), sham group ( n = 9 ), 2-wcek ischemia group ( n = 9 ) and 4-wcek ischemia group ( n = 9 ). The blood flow in frontal lobe was measured at pre- and post-ligation. The neurological score and cerebral infarction area were also compared among the groups. The min-1 via tail vein to produce cerebrally hyperperfused blood flow rate over 200% of baseline following chronic ischemia. According to cerebral hyper-perfusion duration, 36 rats were randomly assigned into 4 groups: control group ( n = 9 ), saline infusion group ( n = 9 ), 30-minute cerebral hyper-perfusion group ( n = 9) and 2-hour cerebral hyper-perfusion group ( n = 9). The blood flow in frontal lobe was measured before and after cerebral hyper-perfusion. The neurological score, blood-brain barrier permeability and drywet weight ratio of brain also were compared among the groups. Results The forebrain blood flow decreased by 67% ± 2% after the ligation of bilateral common carotid artery. There was significant difference between cerebral hyper-perfusion and saline infusion groups ( P ＜ 0. 01 ). No statistic difference was observed in neurological score and cerebral infarction area between 2-week ischemia and control groups. But it was obvious between 4-week ischemia and control groups. The permeability in blood-brain barrier of rats significantly increased in 2-hour hyper-perfusion group ( P ＜ 0.05 ). Conclusion The 2-hour duration of cerebral hyper-perfusion following a 2-week ligation of bilateral common carotid artery may establish a reliable cerebral hyper-perfusion model in rats.     

AQP-4蛋白和AQP-4mRNA在新生鼠缺氧缺血脑组织的表达变化

目的探讨新生鼠缺氧缺血损伤脑组织水通道蛋白4的蛋白和mRNA（aquaporin-4,AQP-4）表达的变化及意义。方法健康7d龄SD大鼠共80只,分为对照组和缺氧缺血性脑损伤模型组（HIBD组）。每组动物8只。HIBD组经右侧颈总动脉结扎后,吸入8%O21h,建立HIBD模型。对照组仅行假手术,不予颈总动脉结扎和缺氧。HIBD组于HIBD模型制成后0、6、24、48h和72h分别处死动物（各时间点动物8只）,对照组与HIBD组相对应时间点分别处死动物,对两组动物进行脑组织病理学观察,Western Blot免疫印迹法检测脑组织AQP-4蛋白的表达和RealtimePCR检测脑组织AQP-4mRNA的表达。结果 HIBD组在HIBD后6、24、48h和72h脑组织病理学出现脑水肿及软化、梗死等改变,并随缺氧缺血后时间延长病理学改变加重。与对照组比较,HIBD组脑组织AQP-4蛋白和AQP-4mRNA表达从HIBD后6h即开始下降,48h内下降至最低,72h出现恢复,但仍低于对照组（P〈0.05）。结论 AQP-4可能参与脑内渗透平衡的重建,AQP-4表达下降可能与HIBD脑组织脑水肿及病理学变化的发生发展有关。     

强力霉素对大鼠急性心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶及其组织型抑制剂表达的影响

目的 评价基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂强力霉素(Dox)对急性心肌梗死(AMI)大鼠左室非MI区心肌MMP-8和13、MMP组织型抑制剂(TIMP)-1和2的表达及胶原重构的影响。方法 将雌性SD大鼠于AMI术后24 h随机分为:AMI对照组和Dox(30 mg·kg-1·d-1)治疗组,并开始给药治疗。另设假手术组。上述各组再均随机分为1周、2周和4周3个疗程亚组。满疗程后处死大鼠,测定左室MI面积;以RT-PCR和Western印迹法测定非MI区两种MMP和TIMP的mRNA和蛋白表达;免疫组化染色测定非MI区Ⅰ/Ⅲ型胶原含量(CVF)。结果 MI面积在AMI对照和治疗组各时间点亚组间差异均无显著意义(42％-48％,均P>0.05)。与假手术组相比,AMI对照组的MMP-8和13蛋白表达在各时间亚组均显著增高(均P<0.05),mRNA表达则在1周和4周亚组均显著增高(均P<0.05);而TIMP-1 mRNA和蛋白表达仅在1周亚组时均显著增高(均P<0.05);TIMP-2 mRNA表达在各时间点亚组均显著增高(均P<0.05),而蛋白表达仅在2和4周亚组时均显著增高(均P<0.05);最后非MI区Ⅰ/Ⅲ型CVF在各时间亚组均显著升高(P<0.05-0.001)。与AMI对照组相比,Dox对大鼠AMI后MMP-8、13和TIMP-1、2 mRNA和蛋白表达的增强均有显著抑制作用(均P<0.05);使Ⅰ型CVF减少(P<0.01-0.001),但对Ⅲ型CVF于各时间点亚组均无显著影响。结论 MM     

EphB2-Fc融合蛋白促进实验性大脑皮层梗死后内源性神经干细胞的活化

目的探讨脑室内注入EphB2-Fc融合蛋白对大脑皮层梗死后内源性神经干细胞活化的影响。方法采用易卒中型肾血管性高血压大鼠,建立大脑中动脉闭塞模型（MCAO）,并将其随机分成：（1）假手术组,（2）脑梗死组,（3）梗死＋IgG—Fc组,（4）梗死＋EphB2-Fc组,每组24只。MCAO术后第4天,EphB2-Fc组大鼠经侧脑室注入20μl浓度为200μg／ml的EphB2-Fc融合蛋白,IgG—Fc组大鼠注入等量等浓度的IgG—Fc。MCAO术后第1和第4周,将各组大鼠处死取脑,用免疫组化和原位杂交检测各组大鼠不同时点梗死侧EphB2及其mRNA、巢蛋白（nestin）和多聚唾液酸-神经细胞黏附分子（PSA—NCAM）表达,Western蛋白印迹检测各组大鼠不同时点梗死侧EphB2和nestin蛋白量的变化。结果MCAO术后1周,脑梗死组梗死侧大脑皮层和侧脑室下区EphB2及其mRNA的表达低于假手术组,梗死＋EphB2-Fc组高于梗死＋IgG—Fc组（均P〈0．05）,脑梗死组与梗死＋IgG—Fc组间差异无统计学意义（P〉0．05）;脑梗死组梗死侧侧脑室下区nestin、PSA—NCAM的表达高于假手术组,梗死＋EphB2一Fc组高于梗死＋IgG—Fc组（均P〈0．05）,并可见PSA—NCAM阳性细胞沿胼胝体向梗死灶迁移。MCAO术后4周,各组间梗死侧EphB2及其mRNA表达水平差异无统计学意义（均P〉0．05）,各组脑梗死大鼠梗死侧nestin、PSA—NCAM表达水平下降,各组间nestin表达水平差异无统计学意义,但脑梗死组PSA—NCAM表达水平仍高于假手术组。结论阻断内源性EphB2的活化可促进实验性大脑皮层梗死后脑室下区神经干细胞的增殖和迁移。     

Effects of Electroacupuncture at the Conception Vessel on Proliferation and Differentiation of Nerve Stem Cells in the Inferior Zone of the Lateral Ventricle in Cerebral Ischemia Rats

Objective: To observe the effects of electroacupuncture (EA) at the Conception Vessel on proliferation and differentiation of the nerve stem cells in the inferior zone of the lateral ventricle in cerebral ischemia rats. Methods: The model rats were prepared by occlusion of the middle cerebral artery for 2 hours and then by reperfusion. They were randomly divided into two groups: a control group and an EA group. Changes in differentiation and proliferation of the nerve stem cells were observed 7, 14 and 28 days after successful modeling. Results: As compared with the 7-day control group (C-7d group), there was no significant difference (P>0.05) in the numbers of 5-bromodeoxyuridine (Brdu) positive cells, Brdu/GFAP, Brdu/Nestin and Brdu/Nse double-labeled cells in the inferior zone of the lateral ventricle in the EA group 7 days after modeling. However, in the 14-day EA group (R-14d group) and the 28-day EA group (R-28d group), the numbers of Brdu positive cells and Brdu/GFAP, Brdu/Nestin, Brdu/Nse double-labeled cells significantly increased as compared respectively with the 14-day control (C-14d group) and the 28-day control (C-28d) group (P<0.05 or P<0.01). Conclusions: EA at the Conception Vessel promotes differentiation and proliferation of the nerve stem cells in the inferior zone of the lateral ventricle in the cerebral ischemia rats, and may stimulate differentiation of the proliferous nerve stem cells towards the astrocytes.     

针刺百会、大椎穴对局灶性脑缺血大鼠皮层脑源性神经营养因子表达的影响

[目的]观察电针对不同时间段局灶性脑缺血大鼠缺血区皮层脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。[方法]SD大鼠36只,随机分为6组,分别为假手术2周与5周组、缺血2周与5周模型组、电针2周与5周组;除假手术组外.其他动物均采用热凝闭大鼠大脑中动脉法复制局灶性脑缺血模型,观察缺血2周和5周后缺血区皮层BDNF的变化规律及针刺对其影响。[结果]假手术组大鼠相应区域仅见少量BDNF阳性细胞,且强度较弱;脑缺血2周及5周组大鼠缺血区BDNF的免疫阳性细胞数量比假手术组增多(P<0.01),但脑缺血2周组与5周组大鼠缺血区脑片比较,BDNF阳性细胞数量无显著性差异(P>0.05);电针2周组与5周组脑片中免疫阳性细胞数量增加,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),但随着时间的推移,此表达呈下降趋势。[结论]电针可以通过提高BDNF在缺血区周围皮层的表达,保护缺血性脑损伤,并可能与大脑可塑性的形成有一定的关系。     

BMP-7在大鼠肝纤维化组织中的动态表达和意义

目的探讨大鼠肝纤维化组织中骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)的表达趋势及意义。方法采用腹腔内注射二甲基亚硝胺(DMN)构建大鼠肝纤维化模型,造模后4天、1、2、4、6、8周分别检测血清ALT、AST、ALB的变化,同时取肝组织用半定量RT-PCR方法检测BMP-7 mRNA的表达。采用HE染色及Masson三色染色,光学显微镜下观察肝组织损伤情况。采用单因素方差分析进行多组均数间的比较。结果肝纤维化模型组血清ALT、AST明显升高,ALB明显下降。BMP-7 mRNA在对照组大鼠和肝纤维化模型组大鼠肝组织中均有表达。与对照组相比,肝纤维化模型组4天时BMP-7mRNA表达显著减少(P<0.05)。1～2周与对照组差别无显著性(P均>0.05),1周与4天比较差异无显著性(P>0.05),2周与4天比较显著升高(P<0.05)。4周较对照组显著升高,达高峰(P<0.05)。6周较对照组显著升高(P<0.05),较4周下降(P<0.05)。8周较6周有显著下降(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。结论 BMP-7 mRNA在正常SD大鼠肝脏有表达,在肝纤维化大鼠肝组织中的表达呈动态改变,在炎症早期表达减少,随着肝纤维化进展,表达增加,在肝纤维化后期表达减少,提示BMP-7参与肝纤维化的发生、发展过程。     

西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3表达的影响

目的研究西洛他唑对全脑缺血大鼠学习记忆功能及半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)表达的影响。方法采用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组（n=8×1）、缺血模型组(n=8×7)和治疗组(n=8×7)。治疗组于缺血前6h和2h各灌胃给予西洛他唑(30mg/kg)，以后每隔24h重复给药，其他各组灌胃给予30%二甲基亚砜(30mg/kg)。缺血模型组和治疗组于缺血10min再灌注，6、12、24、48、72h、5d和7d 7个亚组灌注后断头取脑, 采用免疫组织化学方法分析再灌注后不同时间点海马CA1区caspase-3表达水平的变化。另取24只大鼠随机分为假手术组、缺血模型组及治疗组，每个亚组8只。应用Morris水迷宫对全脑缺血再灌注7d的大鼠进行缺血后学习记忆功能的测定。结果caspase-3在假手术组极少见阳性表达；缺血模型组caspase-3的表达于再灌注6h增加，72h达高峰，7d接近正常；治疗组48h、72h、5d和7d亚组caspase-3平均阳性细胞数明显低于缺血模型组(P＜0.05)；与假手术组比较，5d之中缺血模型组和治疗组平均逃避潜伏期明显延长（P＜0.01)；与缺血模型组比较，前4d治疗组平均逃避潜伏期明显缩短（P＜0.01)，第5天两组大鼠的平均逃避潜伏期差异无统计学意义（P＞0.05）。结论西洛他唑可以有效地抑制caspase-3升高，这可能是西洛他唑改善缺血大鼠学习记忆功能的机制之一。