MsPG肾小球Ⅳ－Col及LN的免疫组化和定量分析

取１１例系膜增生性肾炎（ＭｓＰＧ），活检新鲜标本，用ＡＢＣ免疫组化方法显示Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃｏｌ）和层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）在肾小球中的分布，并经计算机图像分析系统进行定量分析。结果表明，实验组基膜的ＬＮ灰度明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），而ＬＮ在系膜区的密度以及Ⅳ型胶原在系膜区和基膜的密度与对照组比较无显著性差异。提示ＭｓＰＧ肾小球毛细血管基底膜的ＬＮ含量增多。     

鼻咽癌中FN、LN和Col.IV的免疫组化研究

本文采有免疫组化方法用纤维连接蛋白（fibronectin,FN),层粘连蛋白（laminin,LN),和Ⅳ型胶原（collagenIV,Col,IV)抗体对54例鼻咽癌及1例鼻咽鳞状上皮瘤的基底膜进行了研究。结果显示鼻咽鳞状上皮瘤中的基底膜呈连续线状,而鼻咽癌的癌巢周围基底膜通常是不完整的,呈断续甚至消失的改变。高分化鳞癌显示连续线状基膜,偶有中断。低分化腺癌则显示断续不完整的基膜,大圆型细胞癌,低分化鳞癌部分显示连续线状基膜,偶有中断,未分化癌的基膜显示断线和消失的改变,癌瘤中基底膜的分布情况与癌实质类型,间质结构以及间质中淋巴细胞,浆细胞数量,嗜银纤维分布类型有关。     

系膜增生性肾小球肾炎中的Ⅲ,Ⅳ型胶原和层粘连蛋白变化探讨

系膜增生性肾小球肾炎中的Ⅲ、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白变化探讨第二军医大学长征医院病理科叶廷军，陈泳莲，刘会敏系膜增生性肾小球肾炎（ｍｅｓａｎｇｉａｌｐｒｏ－ｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ＭｓＰＧＮ）是以系膜区细胞外基质的进行性...     

系膜增生性肾小球肾炎组织中TIMP-1mRNA及蛋白的表达

1　对象和方法1 1　对象　 16例系膜增生性肾小球肾炎 (ｍｅｓａｎｇｉｏｐｒｏ ｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｙｉｔｉｓ,ＭｓＰＧＮ)选自我科肾活检穿刺标本 ,根据系膜增生的程度 ,分为轻度组 7例 ;中度组 5例 ;重度组 4例。所有标本均制成 3μｍ厚的石蜡切片。1 2　免疫组化　采用免疫组化ＳＡＢＣ法。鼠抗人组织金属蛋白酶抑制因子 1(ｔｉｓｓｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＴＩＭＰ 1)单克隆抗体 (购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司 ) ,免疫组化试剂盒用ＳＡＢＣＫＩＴ(购自武汉博士…     

Laminins Expression in Children with Mesangial Proliferative Glomerulonephritis

Objective: To investigate the role of laminins in the pathogensis of mesangial praliferalive glomeruonephritis (MsPGN ) in children. Methods: Eighteen renal biopsy specimens of MsPGN and 6 normal kidneys were studied by means of immunohistochemistry and in situ hybridization.Results: ① Protein of α1 chain and γ1 chain of laminin increased around the segments of proliferative mesangium. Increased expression of α2 and βl proteins was found in the segments with mesangial proliferation whereas the β2 chain expression decreased in these areas. ② The mRNA expression of αl,α2,β1 and γ1 increased to different degrees in glomeeruli with mesangial proliferation. But no difference was detected among Mild, Moderate, and Severe MsPGN. Conclusion:①The quantitative and qualitative alterations of laminin chains’ distribution were found in the measngial proliferative glomeruli. The proliferative mesougial cells were the origins of abnormal accumulation and expression of laminins.③ These changes may be the basis of the progresses of MsPGN.     

基膜粘连蛋白和IV型胶原对培养脊髓神经细胞突起生长的作用

目的：观察基膜粘连蛋白和IV型胶原在体外培养条件下对脊髓神经细胞突起生长的作用．方法：用基膜粘连蛋白和IV型胶原包被培养板，以结合了相应抗体的培养板及包被I型胶原和多聚赖氨酸的培养板为对照，将培养的脊髓细胞以相同浓度加入各组培养板内．培养5d后将各组细胞进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化染色，利用计算机图像分析技术测定各组神经元突起的长度并进行统计学分析．结果：免疫组化染色可见各组均有较多的神经细胞及其突起生长，统计分析结果表明基膜粘连蛋白组与IV型胶原组间神经元突起生长长度无显差异，基膜粘连蛋白组神经元突起生长长度长于其它各组．IV型胶原组神经元轴突生长长度与I型胶原组间无显差异，与多聚赖氨酸组有显性差异．基膜粘连蛋白组和IV型胶原组神经元轴突生长情况优于相应的抗体组．结论：基膜粘连蛋白和IV型胶原均可促进脊髓神经元突起的生长。     

大鼠实验性肝纤维化过程中血清和肝组织PC—Ⅲ,HA,LN水平…

用四氯化碳制作大鼠肝纤维化模型，采用放免法测定大鼠血清及肝匀浆中Ⅲ型胶胶原、透明质酸、层粘连蛋白的含量。结果发现，随着实验时间的延长，肝匀浆ＰＣ－Ⅲ、ＨＡ、ＬＮ含量逐渐升高、血清ＰＣ－Ⅲ、ＨＡ、ＬＮ水平平均与肝匀浆中三者的含量有显著相关性。     

Alport综合征患者肾小球基底膜超微结构改变与层粘连蛋白的异常分布

目的：观测Alport综合征患者肾小球基底膜(GBM)超微结构改变与GBM上层粘连蛋白α1 (laminin α1)和α5 (laminin α5)分布的关系。方法：1998年1月至2008年7月在北京大学第一医院经肾活检病理确诊为Alport综合征的患者20例,另外选择6例肾肿瘤切除术后患者的正常肾组织作为对照。在透射电镜下测量GBM厚度以及增厚和撕裂的范围。对肾组织石蜡切片进行laminin α1、laminin α5免疫组织化学染色,对其在GBM的分布进行半定量评分：0分为0%,1分为≤25%,2分为25%~50%,3分为50%~75%,4分为≥75%。结果：透射电镜下观察Alport综合征患者的GBM均出现不同程度的增厚和撕裂分层。免疫组织化学显示,正常对照组的laminin α1主要在肾小球系膜区,GBM无显色;laminin α5则沿着GBM均匀显色。Alport患者的laminin α1在肾小球系膜区的分布低于对照组,主要在GBM上显色;laminin α5在GBM上的分布低于对照组;GBM上laminin α1与laminin α5半定量评分呈高度负相关(r=-0.83,P<0.001)。GBM增厚及撕裂范围与laminin α1的半定量评分均呈正相关(分别为r=0.76, P<0.001; r=0.56, P=0.015),与laminin α5的半定量评分均呈负相关(分别为r=-0.59, P=0.010; r=-0.53, P=0.025)。结论：Alport综合征患者GBM中异常分布的laminin α1和laminin α5与GBM增厚和撕裂的超微病理改变有关。     

白血病患者血清PCⅢ,HA和LN含量变化的研究

为探讨血清Ⅱ型前胶原(PCⅡ)、透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)变化与白血病病情的关系,采用放射免疫分析法(RIA)对41例白血病患者血清3项指标进行了动态观察。结果显示,急性白血病(AL)、慢性粒细胞白血病(CML)急变治疗前3项指标血清含量均高于对照组(均P<0.01或0.05),CML慢性期治疗前血清PCⅡ和HA含量高于正常对照组(P<0.01和0.05),AL完全缓解(CR)期血清3项指标含量与治疗前比较均有明显下降(均P<0.05或0.01)。伴或不伴肝大者3项指标血清含量均有明显差异(P<0.05),伴或不伴感染者血清HA含量亦有显著性差异(P<0.01)。3项指标血清水平增高与骨髓白血病细胞百分数呈正相关。提示动态检测血清PCⅡ、HA和LN可以作为考察白血病病情变化状态的一组辅助指标。     

肾小球肾炎中系膜细胞α—SMA表达的分析

目的：探讨α－平滑肌肌动蛋白（α－SMA）在系膜细胞表型转化中的变化及意义。方法：应用免疫组化技术检测不同类型肾小球肾炎中系膜细胞α－SMA的表达程度。结果：α－SMA的表达程度与系膜细胞增生程度成正比。结论：肾小球肾炎中α－SMA的阳性表达标志着系膜细胞受损激活,细胞表型发生转化,功能恢复至胚胎状态,处于增殖／分泌表型。     

急性心肌梗死患者血清Ⅳ-C、PC-Ⅲ、LN、HA水平测定的临床意义

采用放免法测定20例急性心肌梗死(AMI)患者发病后5d、15d血清Ⅳ型胶原-C(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)的含量。结果：AMI发病后15d血清Ⅳ-C、PC-Ⅲ、LN、HA含量较健康对照组明显升高；并与心肌梗死后血浆肌钙蛋白I(Tn-I)峰值水平呈明显正相关。认为血清Ⅳ-C、PC-Ⅱ、LN、HA可反映心肌梗死后心肌间质重构，其测定对评价心肌梗死的预后有一定临床意义。     

地塞米松对肾小球系膜细胞肿瘤坏死因子α产生和基因表达的影响

为观察地塞米松对内毒素诱导的肾小球系膜细胞肿瘤坏死因子α（TNFα）的产生及其mRNA表达的影响，采用免疫学和分子生物学方法，对正常、内毒素诱导后及加入地塞米松的内毒素诱导后大鼠系膜细胞的TNFα水平及TNFαmRNA表达进行了检测。结果：（1）TNFα在正常系膜细胞中分泌量极微，TNFαmRNA的表达处于低水平；（2）内毒素诱导系膜细胞TNFα的产生及mRNA表达增加；（3）地塞米松对内毒素诱导的系膜细胞TNFα的产生及其mRNA表达有明显的抑制作用，呈剂量依赖关系。结论：地塞米松是系膜产生细胞团子TNFα的较强抑制剂。     

单核细胞趋化蛋白-1在系膜增生性肾小球肾炎中的表达

目的用免疫组化的方法来分析单核细胞趋化蛋白-1在系膜增生性肾小球肾炎中表达的变化规律,揭示单核细胞趋化蛋白-1是否可做为病理条件下系膜细胞增生程度评判的一项指标。方法应用链霉素抗卵白素-过氧化酶连接法(S-P法)检测正常肾组织、42例轻至重度系膜增生性肾小球肾炎肾组织标本肾小球区单核细胞趋化蛋白-1表达的相对面积的变化。利用HPIAS-1000采集的图像对肾小球区的阳性表达区域所占相对面积进行测算。结果在正常肾组织切片中,仅部分肾小球内系膜细胞、肾小管上皮细胞及灶性炎细胞浸润区域单核细胞趋化蛋白-1阳性表达,绝大多数没有表达,染色阴性。不同程度增生肾小球区单核细胞趋化蛋白-1表达的相对面积不同,单核细胞趋化蛋白-1阳性表达的相对面积随系膜增生病变程度加重而增加,存在统计学差异。结论单核细胞趋化蛋白-1在肾小球区的表达随系膜增生病变程度加重而增加。在不同病变程度系膜增生性肾小球肾炎的肾小管、间质存在强、弱不等的表达。正常肾组织中,仅有少量单核细胞趋化蛋白-1表达。     

CD10和CD34免疫组化双染色在增生性肾小球肾炎病理诊断中的意义分析

目的分析研讨CD10和CD34免疫组化双染色在增生性肾小球肾炎病理诊断中的意义。方法随机从该院2016年4月-2018年2月期间收治的肾疾病患者116例进行讨论,根据患者疾病分组,对照组中共35例肾小球微小病变,研究组(81例)中包含新月体性肾小球肾炎21例、膜增生性肾小球肾炎25例、毛细血管内增生性肾小球肾炎12例、系膜增生性肾小球肾炎23例,两组患者均接受免疫组化双染色法肾活检,标记CD10和CD34,并分析检测结果。结果肾小球系膜基质和细胞CD10、CD34表现为(-),颜色为无色;肾小囊上皮细胞,壁层CD10表现为(+++),颜色为红色,脏层CD10(+++),颜色为红色;肾小球毛细血管内皮CD34(+++),颜色为棕色。肾小球系膜基质和细胞呈显著增生状,毛细血管基膜中存在系膜基质,肾小囊脏层上皮细胞增生突出,挤压血管管腔。新月体性肾小球肾炎、膜增生性肾小球肾炎、毛细血管内增生性肾小球肾炎、系膜增生性肾小球肾炎患者CD10、CD34检测结果均与病理结果相符。结论肾活检病理光镜检查包含马松染色、六胺银染色、过碘酸雪夫反应染色、苏木精-伊红等染色,联合CD10、CD34免疫组化双染色,有利于提升增生性肾小球肾炎病理类型和病理变化的诊断准确性,值得推广。     

中医药治疗系膜增生性肾小球肾炎的研究进展

系膜增生性肾小球肾炎(M sPGN)是一组以弥漫性肾小球系膜细胞增生及不同程度系膜基质增多为主要特征的原发性肾小球疾病[1]。根据其免疫病理可将其分为IgA肾病及非IgA肾病两型,其中非IgA系膜增生性肾小球肾炎是我国最常见的原发性肾小球疾病,占成人原发性肾小球疾病肾活检病例的24.7%~30.3%[2]。对于该病现代医学尚无特效治疗方法,临床仍以糖皮质激素、免疫抑制剂及对症治疗为主,存在一定的不确定性及毒性和不良反应,而中医药对于M sPGN的治疗则具有一定的疗效且毒性和不良反应小。现将近年来有关文献综述如下。1中医治法研究楼季华等…     

苯那普利对系膜增生性肾小球肾炎患者血清层粘蛋白及Ⅳ型胶原的影响

目的 探讨苯那普利对系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）患者细胞外基质（ECM）成分的抑制作用。方法 60例MsPGN患者分成一般治疗组和苯那普利治疗组，治疗前后用放射免疫法检测血清层粘蛋白（Laminin,LN）和Ⅳ型胶原（CollagenⅣ,ColⅣ）水平并比较各组差异。结果 MsPGN患者血清LN、ColⅣ水平高于正常对照组（均P＜0.01）。苯那普利能下调MsPGN患者血清LN和ColⅣ水平（治疗前后比较均P＜0.01），而一般治疗组治疗前后血清LN、ColⅣ水平差别均无显著性意义（均P＞0.05）。结论 苯那普利可能具有通过减少LN、CloⅣ的产生或促进其降解而抑制ECM沉积的作用。     

咪唑立宾对急性肾炎大鼠肾小球系膜区Ⅳ型胶原的影响

目的探讨咪唑立宾对急性Thy1肾炎大鼠肾小球系膜区Ⅳ型胶原(COL4)的影响。方法将81只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和咪唑立宾组,每组27只。第5天,比较3组大鼠24 h尿蛋白定量,采用PAS染色评估3组大鼠肾小球系膜区细胞外基质(ECM)增殖情况,采用PCR检测3组大鼠肾小球系膜区COL4 mRNA表达水平,采用Western blot检测3组大鼠肾小球系膜区COL4蛋白表达水平。结果对照组大鼠平均24 h尿蛋白定量、肾小球系膜区基质与肾小球面积比值(ECM/GA)、系膜区COL4 mRNA表达水平、系膜区COL4蛋白表达水平均低于模型组和咪唑立宾组,咪唑立宾组以上各指标均低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论咪唑立宾抑制系膜增生的机制可能是下调COL4 mRNA及蛋白的表达。     

人系膜增生性肾小球肾炎中转化生长因子β1在肾纤维化中的作用

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在人系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)患者肾组织中对Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的影响及在肾纤维化中的作用.方法:采用免疫组织化学技术、天狼猩红染色偏振光法及计算机图像分析系统,观测31例MsPGN患者肾组织中TGF-β1的表达和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的分布,分析它们之间的相互关系.结果:MsPGN患者随着肾纤维化的加重,在肾小球增生扩张系膜中Ⅳ型胶原明显增加,并出现了Ⅰ、Ⅲ型胶原;在肾间质中TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的表达明显增加,且以Ⅲ、Ⅳ型胶原的增加为主.TGF-β1与肾间质中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原呈正相关(r=0.82、0.92,P<0.01),与Ⅰ/Ⅲ、Ⅰ/Ⅳ、Ⅲ/Ⅳ呈负相关(r=-0.83、0.92,P<0.001).结论:在MsPGN中TGFβ1的过度表达和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的增加与肾小球和肾小管纤维异常分布关系密切,可能是其导致肾小球硬化和肾间质纤维化的主要机理之一.