热休克预处理对小鼠烧伤的保护作用及机制初探

观察热休克预处理对小鼠烧伤的保护作用。结果发现经热休克（肛温４２℃，１５ｍｉｎ）预处理后小鼠对烧伤的抵抗力明显增强，表现为烧伤后４８ｈ内小鼠存活率和心肌组织中过氧化氢酶活性明显高于对照组，而硫代巴比妥酸反应物质则低于对照组。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳表明，热处理可能导致多种热休克蛋白合成增加。其保护机制可能与热休克诱导的热休克蛋白表达及其抗氧自由基作用有关。     

热休克蛋白对烧伤后肾脏抗氧化酶的保护作用

目的 研究严重烧伤和热预处理大鼠肾脏热休克蛋白72(HSP72)表达，严重烧伤和热预处理后大鼠肾脏杭氧化酶的变化，讨论了热休克蛋白72的细胞保护机制。方法 将大鼠分为烧伤组，热休克预处理后烧伤组，对照组三组。观察对照及处理后1、3、6、12、24h共6个点；采用用免疫印迹观察蛋白质表达的变化。结果 (1)热休克预处理后大鼠肾脏热休克蛋白表达峰值是在12h，在24h其表达水平仍比正常对照高。(2)热预处理后大鼠肾脏MDA含量低于烧伤组；SOD、CAT活性高于烧伤组。结论 热休克蛋白具有保护肾脏抗氧化酶活性的作用，热预处理能够减轻严重烧伤后，肾损伤。     

热休克反应对大鼠油酸肺保护作用的机制研究

未研究发现，经热休克处理的大鼠注油酸后，肺组织损伤明显减轻，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示热休克使大鼠肺组织中ＨＳＰ７０含量明显增多；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析证实此乃由于ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录增加所致。说明热休克处理使肺组织ＨＳＰ７０基因表达增强；提示热休克反应对大鼠油酸肺的保护作用与肺组织细胞中ＨＳＰ７０基因表达增强及与ＨＳＰ７０增多有关。     

严重烧伤大鼠肾脏热休克蛋白72基因表达的研究

目的：研究严重烧伤和热休克处理大鼠肾脏热休克蛋白７２（ＨＳＰ７２）基因表达，并讨论其作用和意义。方法：采用ＨＳＰ７２特异性引物，利用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和原位杂交技术观察肾脏ＨＳＰ７２ｍＲＮＡ变化；用免疫印迹观察蛋白质表达的变化。结果：①烧伤早期大鼠肾脏热休克蛋白表达是逐渐增加的，到２４ｈ，其ｍＲＮＡ和蛋白质均处于高表达水平。②热休克预处理后大鼠肾脏热休克蛋白表达峰值在６ｈ￣１２ｈ     

热休克反应对大鼠油酸肺保护作用的机制研究

本研究发现，经热休克处理的大鼠注油酸后，肺组织损伤明显减轻。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示热休克使大鼠肺组织中ＨＳＰ７０含量明显增多；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析产此乃由于ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录增加所致。说明热休克处理使肺组织ＨＳＰ７０基因表达增强；提示热休克反应对大鼠油酸肺的保护作用与肺组织细胞中ＨＳＰ７０基因表达增强及与ＨＳＰ７０增多有关。     

热休克预处理对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究热休克预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法 将新西兰白兔66只随机分为3组：①假手术组(sham-operation，s组)6只；②缺血再灌注组(ischemia／reperfusion，I／R组)30只；③热休克预处理组(heat shock precondit，ioning，HP组)30只。缺血再灌注后8h，16h，24h，48h，72h从I／R组和HP组随机抽取6只兔，检测后肢运动功能，并取脊髓组织行免疫组化染色观察热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)的表达，TUNEL染色观察神经元凋亡情况。脊髓匀浆液检测超氧化物歧化酶(SOD)活力及脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量。结果 各个时间点上，HP组的运动功能评分优于I／R组；免疫组化染色，HP组阳性率远高于I／R组；TUNEL染色，HP组阳性率低于I／R组；SOD的活力HP组高于I／R组，MDA含量HP组低于I／R组。结论 热休克预处理后可能产生了大量HSP，并提高了SOD活力，通过抑制神经元周亡，减少自由基对脂质膜的破坏等途径对脊髓缺血再灌注损伤产生保护作用。     

热休克基因表达对过氧化氢所致肺泡巨噬细胞损伤的保护作用

经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析发现热休克预处理使肺泡巨噬细胞中热休克蛋白（ＨＳＰ）７０ｍＲＮＡ增多，ＨＳＰ７０合成增加，且获得抵抗Ｈ２Ｏ２损伤的能力，用效放线菌酮和放线菌素Ｄ分别从蛋白合成及基因转录水平阻断热休克蛋白基因的表达，能取消热休克对Ｈ２Ｏ２所致ＰＡＭｓ损伤的保护效应。提示热休克系通过使热休克蛋白基因表达增强，ＨＳＰ７０合成增多，从而保护Ｈ２Ｏ２所致的ＰＡＭｓ损伤 。     

诱导型热休克蛋白在对小鼠缺血性急性肾衰的保护作用

目的：采用HSF1基因敲除小鼠模型探讨诱导型热休克蛋白（HSP）对小鼠缺血性急性肾衰的保护作用。方法：野生型及HSF1基因敲除小鼠经钳夹左右两肾肾蒂30min以阻断肾动脉血流，松开钳夹24h后聚血测定尿素氮（BUN）及血清肌酐浓度；部分动物于肾缺血－再灌注前24h进行热休克处理（肛温42℃，15min）以诱导各种HSP的表达。结果：肾缺血－再灌注导致BUN及血清肌酐浓度明显升高，HSF1基因敲除导致二者上升更加明显。热休克预处理使野生型及杂合子小鼠肾中HSP70，HSP90α及HSP25表达明显升高，并明显减轻了因－再灌注所致BUN及血清肌酐浓度的升高。HSF1基因敲除废除了热休克所致的HSP诱导表达及其对缺血性急性肾衰的保护作用。结论：诱导型HSP在保护缺血所致的小鼠急性肾衰中发挥重要作用。     

热休克对犬心脏体外循环手术中心肌的保护作用

目的：通过热休克的研究为心脏外科手术心肌保护探索新的途径。方法：实验犬全身加热至肛温４２℃，保持１５ｍｉｎ，２４ｈ后建立全身体外循环，监测心脏停跳前及再灌注后心脏复跳和血压，心率的变化及心肌损伤的改变。结果：热休克组心脏自动复跳率高，血压及心率值较稳定；冠状动脉溢出液中血清肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）含量较对照组低（Ｐ〈０．０５），心肌超微结构损伤程度明显轻于对照组。结论：热休克预     

热休克因子1及热休克蛋白对慢性心理应激鼠工作记忆的保护作用

目的采用HSF1基因敲除小鼠模型探讨热休克因子1及热休克蛋白(heat shock prote in,HSP)在慢性心理应激中对工作记忆的保护作用。方法将热休克因子1(heat shock factor 1)基因野生型小鼠(HSF1 / )和热休克因子1基因敲除小鼠(HSF1-/-)暴露于2个月的慢性心理应激,部分小鼠在暴露于心理应激前给予热休克预处理,2个月后采用T迷宫检测各组小鼠工作记忆,western b lots检测和比较HSP72,HSP25表达,采用单因素方差分析和多因素析因设计方差分析对各组小鼠T迷宫转换正确数和HSP72,HSP25表达进行比较。结果HSF1基因野生型小鼠中,慢性心理应激对T迷宫转换正确数(8.90±0.46)次与对照组(9.58±0.48)次没有明显影响(F(1,65)=0.23,P>0.05),HSF1基因敲除小鼠中,慢性心理应激引起T迷宫转换正确数(4.00±0.26)次明显低于对照组(7.33±0.43)次,F(1,65)=32.39,P<0.05)。同时野生型小鼠心理应激后海马组织中HSP72表达(1.35±0.11),HSP25表达(1.05±0.03)明显高于HSF1基因敲除小鼠(0.23±0.03),(0.26±0.02),均P<0.05)。热应激也诱导HSP72(1.71±0.05),HSP25(1.33±0.05)表达增加,明显高于HSF1基因敲除小鼠[(0.26±0.03),(0.23±0.08),均P<0.05],但未发现热应激预处理对T迷宫转换正确数有影响(F(1,65)=0.32,P>0.05)。结论HSF1以及慢性心理应激诱导的HSP72,HSP25表达,在慢性心理应激中对工作记忆具有保护作用。     

热休克预处理对大鼠在体MIRI的保护效应

目的 探讨热休克预处理对大鼠在体MIRI的保护效应.方法 健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分三组:SO组、MIRI组、HS组.左冠状动脉结扎法建立MIRI模型.各组经预处理后,动态监测LVSP、±dp/dtmax、LVEDP等血流动力学指标,检测血浆CK-MB、SOD、MDA等生化指标.术毕光镜下观察心肌组织病理变化.结果 与MIRI组比较,HS组复灌末LVEDP水平明显降低(P＜0.05)、LVSP、±dp/dtmax水平升高(P＜0.05)、血浆CK-MB漏出量明显减少(P＜0.05)、血浆MDA水平降低(P＜0.05)、SOD活性升高(P＜0.05).光镜下,HS组心肌纤维排列较整齐,未见细胞间连接点断裂,闰盘少见.结论 热休克预处理对大鼠在体MIRI具有保护作用,其保护机制可能与抗自由基损伤有关.     

热休克因子1及热休克蛋白对慢性心理应激鼠工作记忆的保护作用

目的 采用HSF1基因敲除小鼠模型探讨热休克因子1及热休克蛋白(heat shock protein,HSP)在慢性心理应激中对工作记忆的保护作用.方法 将热休克因子1(heat shock factor 1)基因野生型小鼠(HSF1+/+)和热休克因子1基因敲除小鼠(HSF1-/-)暴露于2个月的慢性心理应激,部分小鼠在暴露于心理应激前给予热休克预处理,2个月后采用T迷宫检测各组小鼠工作记忆,western blots检测和比较HSP72,HSP25表达,采用单因素方差分析和多因素析因设计方差分析对各组小鼠T迷宫转换正确数和HSP72,HSP25表达进行比较.结果 HSF1基因野生型小鼠中,慢性心理应激对T迷宫转换正确数(8.90±0.46)次与对照组(9.58±0.48)次没有明显影响(F(1,65)=0.23,P＞0.05),HSF1基因敲除小鼠中,慢性心理应激引起T迷宫转换正确数(4.00±0.26)次明显低于对照组(7.33±0.43)次,F(1,65)=32.39,P＜0.05).同时野生型小鼠心理应激后海马组织中HSP72表达(1.35±0.11),HSP25表达(1.05±0.03)明显高于HSF1基因敲除小鼠(0.23±0.03),(0.26±0.02),均P＜0.05).热应激也诱导HSP72(1.71±0.05),HSP25(1.33±0.05)表达增加,明显高于HSF1基因敲除小鼠[(0.26±0.03),(0.23±0.08),均P＜0.05],但未发现热应激预处理对T迷宫转换正确数有影响(F(1,65)=0.32,P＞0.05).结论 HSF1以及慢性心理应激诱导的HSP72,HSP25表达,在慢性心理应激中对工作记忆具有保护作用.     

热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜细胞线粒体结构和功能的影响

目的 探讨热休克预处理(HS)对严重烫伤大鼠胃黏膜细胞线粒体的保护作用及机制.方法 观察热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜细胞超微结构及线粒体超氧化物歧化酶(mSOD)和线粒体细胞色素氧化酶(mCCO)活力的影响.将Wistar大鼠随机分为烫伤组(40只):烫伤后即制作急性胃黏膜损伤模型,另取8只大鼠不致伤作为空白对照(伤前);HS组(40只):于烧伤前20 h行热休克预处理,另取8只行热休克预处理不烫伤,作为实验对照(伤前).各组于伤后3、6、12、24、48 h处死大鼠(每组每时相点8只大鼠)后留取标本检测大鼠胃黏膜损伤指数(UI)、胃黏膜细胞超微结构改变,热休克蛋白(HSP)60、HSP70、mSOD、mCCO变化,并进行相关分析.结果 大鼠严重烫伤后胃黏膜损害明显(伤后24 h UI值12.7±1.9),胃黏膜细胞超微结构改变显著,mSOD和mCCO活力随烧伤时间延长而降低,伤后24 h分别降至0.64±0.05、0.28±0.04.热休克预处理能诱导烫伤大鼠胃黏膜HSP60和HSP70表达显著增加.伤后24 h分别为0.53±0.08和0.64±0.09,明显高于烫伤组0.31±0.04(P＜0.05)和0.27±0.04(P＜0.01),并明显减轻大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害(伤后24 h UI值6.3±0.7 vs 12.7±1.9,P＜0.01);热休克预处理能显著降低胃黏膜mSOD的消耗(伤后24 h值293±32 vs 108±11,P＜0.01),提高mCCO活性(伤后24 h值0.64±0.05vs 0.28±0.04,P＜0.01);电镜观察显示热休克预处理大鼠胃黏膜细胞超微结构受损程度减轻,线粒体改变不明显.相关分析结果显示,mSOD与HSP70呈显著正相关(r=0.436,P＜0.05);mCCO与HSP60呈显著正相关(r=0.679,P＜0.05).结论 热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜细胞线粒体具有保护作用,可显著减轻大鼠烫伤后急性胃黏膜损害,保护线粒体机制与HSP60、HSP70保护抗氧化酶mSOD及呼吸酶mCCO活性密切相关.     

严重烧伤患者热休克蛋白70的表达规律及临床意义

目的 探讨热休克蛋白70的表达在严重烧伤中的作用及其与临床特点的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测42例严重烧伤患者(试验组)和20例健康体检者(对照组)外周血白细胞热休克蛋白70表达情况.结果 试验组烧伤1期和2期热休克蛋白70的表达明显高于对照组(P＜0.05),烧伤3期其表达明显降低,趋于对照组表达水平;且试验组中合并代谢性酸中毒、血尿、低蛋白血症、高血糖者其表达明显增高(P＜0.05).结论 烧伤可诱导热休克蛋白70表达,且与烧伤患者的临床表现密切相关,热休克蛋白70对机体具有保护作用,可作为疾病早期活动的参考指标之一.     

可乐定对小鼠和大鼠烧伤休克的保护作用

<正> 可乐定1mg/kg ip及0.2(小鼠)或0.025(大鼠)mg/kg icv,可提高烫伤小鼠的存活率,延长烫伤大鼠的存活时间。育亨宾对抗其保护烫伤小鼠的作用,哌唑嗪无明显影响。可乐定在使烫伤大鼠颈交感神经放电频率明显减慢的同时,使其存活时间明显延长。提     

热休克蛋白与心肌缺血预处理

热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是一组在进化上高度保守的蛋白质,在正常的生理条件下,一些HSP有组织型表达,它们参与一些重要的细胞生理活动,如多肽的折叠、跨膜转位,因此又被称为"分子伴侣".但通常在多种应激条件下产生,在高热、缺氧、组织损伤、病毒、细菌及其产物以及某些化学物质如乙醇、亚砷酸钠的条件下均可诱导HSP的产生.在临床上,可产生于缺血再灌注损伤、失血性休克之后.目前认为各种刺激因素引起的热休克反应是细胞对于各种不利于自身的因素所表现出的一种以基因表达和调控方面发生改变的反应.在这种反应过程中,转录和翻译合成某些蛋白质的基因被关闭,而HSP基因被激活,产生一组大量的保护性蛋白,又称应激蛋白(stress protein, SP).HSP通过阻止蛋白的聚集,协助受损蛋白的重新折叠,或将无法恢复的蛋白转移给蛋白质降解系统,使之降解,产生应激状态下的保护作用.     

HSP70在严重烧伤大鼠心肌中的表达及其保护作用的研究

目的 研究热休克蛋白70(HSP70)在严重烧伤大鼠心肌中的表达变化规律，并观察诱导热休克反应对烧伤后心肌损害的保护作用。方法 72只Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组(B组)、亚砷酸钠预处理组(SA组)，于致伤前及30％TBSAⅢ度烫伤后3、6、12、24、48h检测血清心肌钙蛋白Ⅰ含量变化，Western blot检测心肌组织HSP70蛋白表达情况。结果 大鼠严重烧伤后3h心肌组织HSP70蛋白表达显著升高，伤后48h达高峰。大鼠烫伤后3h血清心肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量即开始明显升高，伤后12h达高峰。亚砷酸钠预处理可显著诱导机体的热休克反应，SA组伤后多数时相点血清cTnⅠ含量显著低于B组，且波动幅度较小。结论 严重烧伤早期即可引起心肌组织HSP70蛋白表达显著增强，HSP70蛋白可能在烧伤后早期心肌损害中发挥其内源性抗损伤机制。     

热休克预处理对大鼠脊髓损伤的影响和意义

目的探讨热休克预处理对大鼠脊髓损伤的影响。方法将96只大鼠随机分为对照组,损伤组和热休克预处理组。采用静压型脊髓损伤模型,分别在伤后6H、12H、1D、2D、3D、1周、2周和3周处死动物。用原位杂交和免疫组化LSAB法检测HSP70MRNA和蛋白在以上各时点的表达。用CBS评分来评估神经功能。结果CBS评分显示,热休克预处理组在1周、2周、3周的CBS评分分别是:35±7.29,69±9.12,76.5±6.02;而损伤组分别为:21.5±6.02,45±8.48,48±6.94;前者的神经功能明显好于后者(P<0.05)。通过原位杂交和免疫组化发现,在6H、12H预处理组的HSP70MRNA阳性细胞率分别是6.18%±1.17%,2.58%±0.89%;而损伤组分别是1.92%±1.31%,0.32%±0.41%(P<0.05)。预处理组的HSP70蛋白阳性细胞数在12H至两周分别是13±3.27,20.74±4.17,27.72±2.26,43.86±4.82,15.56±3.61,6.76±1.86;损伤组分别是7.96±2.34,11.74±2.64,16.5±4.44,22.66±3.34,10.32±3.16,3.72±2.04(P<0.05)。结论热休克预处理对脊髓损伤有一定的保护作用,其保护机理可能同内源性HSP70增加有关。     

热休克预处理对化疗环境下骨髓间充质干细胞存活率的影响及机制

目的:探索热休克预处理(heat shock pretreatment,HSP)对化疗微环境下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响及其潜在机制.方法:探索HSP最佳条件,往热休克预处理BMSCs(heat shock pretreated bone ...