不同浓度芦荟多糖对外周血单个核细胞和HepG2 生长的影响

目的:为芦荟多糖的抗肿瘤作用研究提供实验用细胞模犁,筛选最佳干预药物及其浓度.方法:采用人淋巴细胞分离液,Ficoll Hypaque密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),Alamar Blue法观察芦荟多糖对PBMc生长的影响,四唑氮蓝(Methylthiazolctrazolium,MTT)法观察芦荟多糖对HepG2生长的影响.结果:密度梯度离心法成功分离PBMC.芦荟多糖AP11在200μg·mL-1时已较明显促进和维持PBMc的生长(P<0.01).各不同浓度芦荟多糖对HepG2的生长无显著影响(P>0.05).结论:芦荟多糖AP11(200μg·mL-1)可作为开展抗肿瘤作用机理的理想实验用药.     

自体外周血单个核细胞对原代肝癌细胞生长的影响及芦荟多糖对其干预作用

目的 观察、探讨自体外周血单个核细胞(PBMC)对原代肝癌细胞生长的影响及芦荟多糖AP11的干预作用.方法 以手术切除肝癌组织为标本,胰酶短暂消化加吹打、单细胞悬液培养法原代培养肝癌细胞.通过倒置显微镜观察其形态学特征.于分离培养第2天,加芦荟多糖AP11、芦荟多糖AP11干预及未干预的PBMC于癌细胞中,倒置显微镜观察其对癌细胞形态的影响,MTT法观察其对癌细胞生长的影响.结果 采用胰酶短暂消化加吹打分离、单细胞悬液原代培养的方法,可成功获取原代肝癌细胞;与空白对照组相比,芦荟多糖组癌细胞在形态上无明显差别,MTT实验结果表明其对癌细胞的生长无明显影响;与空白对照组相比,芦荟多糖AP11干预与未干预PBMC组癌细胞形态均有较大变化,MTT实验结果表明,其对癌细胞的生长有显著抑制作用.结论 芦荟多糖AP11无直接体外抗肿瘤活性,其抗肿瘤活性可能是通过与PBMC的相互作用,通过调节机体的免疫系统而达到的.     

电针结合天麻多糖对局灶性脑缺血大鼠丘脑腹后外侧核巢蛋白和干细胞因子表达的影响

目的:探讨电针结合天麻多糖治疗局灶性脑缺血继发丘脑损害的神经再生机制.方法:将40只成年SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、天麻多糖组和电针+天麻多糖组,每组8只.以线栓法建立右侧大脑中动脉栓塞脑缺血大鼠模型.造模成功后2周,正常组和模型组不予治疗;电针组给予电针“百会”和左侧“足三里”穴治疗,30 min/次,每天1次,共14 d;天麻多糖组给予天麻多糖(100mg/kg)灌胃治疗14d,每天1次;电针+天麻多糖组予以电针和天麻多糖联合治疗,每天1次,共治疗14 d.采用免疫组织化学方法检测各组大鼠丘脑腹后外侧核(thalamic ventroposterolateral nucleus,VPL)神经巢蛋白(nestin)和干细胞因子(stem cell factor, SCF)的表达.结果:模型组大鼠缺血侧VPI出现nestin阳性细胞,SCF阳性细胞数量较正常组增加(P＜0.05);电针组、天麻多糖组和电针+天麻多糖组缺血侧VPL中nestin和SCF阳性细胞数量均较模型组增加(均P＜0.05),免疫阳性产物单位面积平均灰度值均降低(均P＜0.05);电针+天麻多糖组nestin和SCF阳性细胞数量均较电针组、天麻多糖组增多(均P＜0.05).结论:电针结合天麻多糖可协同增加缺血同侧VPL中SCF的表达,共同促进神经干细胞增殖,可能是针药结合治疗脑缺血继发丘脑损害的神经再生机制之一.     

当归多糖组分促进淋巴细胞增殖及对IL-2和IFN-γ的诱生作用

目的:观察当归多糖及其3个组分对淋巴细胞增殖和细胞因子IL-2、IFN-γ的影响.方法:机械分散法制备小鼠单个脾细胞悬液;MTT法检测细胞增殖;酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度.结果:当归多糖及其3个组分在30～100 μg/ml剂量范围内,能显著促进脾细胞的增殖;其中组分AP-3能够显著促进巨噬细胞、混合淋巴细胞的增殖反应,剂量依赖性地增加细胞上清液中IL-2和IFN-γ的浓度.结论:当归多糖能够活化巨噬细胞和T细胞,还可以通过细胞因子IL-2、IFN￣γ发挥免疫调节作用.     

5种中药多糖及其含药血清对MSCs增殖的影响

目的：探讨当归多糖、何首乌多糖、熟地多糖、枸杞多糖、黄芪多糖及其含药血清对骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖的影响。方法：分离、培养大鼠MSCs,各中药多糖及其含药血清,分别加入培养基诱导72h后,MTT法检测大鼠MSCs增殖情况。结果：1mg/mL黄芪多糖及其10%含药血清对大鼠MSCs增殖的影响,与相应浓度的空白组及空白血清组比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：黄芪多糖及其含药血清可促进大鼠MSCs增殖。     

胀果甘草多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生细胞因子的影响

目的:研究胀果甘草多糖Gi P-B1对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IL-2、IL-13、TNF-α等细胞因子的影响。方法:采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度Gi P-B1单独作用及其与有丝分裂原Con A、LPS共同作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELSA)法检测不同浓度Gi P-B1体外刺激对小鼠脾淋巴细胞诱生白介素-2(IL-2)、白介素-13(IL-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子的影响。结果:Gi P-B1在25~100μg/m L浓度范围内能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,并与Con A、LPS协同促进T、B淋巴细胞增殖,还能诱导脾淋巴细胞分泌l L-2、TNF-α。结论:Gi P-B1具有免疫增强作用。     

黑木耳多糖对人红白血病K562细胞周期和凋亡的影响

目的:观察黑木耳多糖(Auricularia auricula polysaccharide,AAP)体外对人红白血病K562细胞的抗肿瘤作用及其机制。方法:将K562细胞与AAP以及AAP作用于体外培养人外周血单个核细胞(PBMCs)的上清液培养,用MTT法检测K562细胞增殖和流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。结果:AAP对K562细胞没有显示直接的细胞毒作用,但AAP作用的PBMC上清液能显著抑制K562细胞的增殖,抑制率最大可达49.68%;AAP作用的PBMCs上清液能使G0/G1期细胞显著增加(P0.05,P0.01);200μg/mL到800μg/mL浓度AAP刺激的PBMCs上清液能显著诱导K562细胞凋亡(P0.05,P0.01),其凋亡率可达24.70%。结论:AAP通过激活免疫细胞抑制肿瘤细胞生长,诱导其凋亡并使细胞阻滞于G0/G1期。     

黑木耳多糖降血糖作用的研究

目的：研究黑木耳多糖对正常小鼠及四氧嘧啶小鼠的降血糖作用。方法：黑木耳多糖灌胃30天，观察其对正常小鼠血糖的影响、对四氧嘧啶高血糖小鼠血糖的影响、对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响。结果：黑木耳多糖对正常小鼠血糖有降低作用；四氧嘧啶高血糖小鼠血糖无明显升高；糖尿病小鼠血糖显著降低。结论：黑木耳多糖具有显著的降血糖作用。     

红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和VEGF表达的影响

目的:通过研究红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况的影响,探讨红花多糖抗宫颈癌作用的分子机制。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,加入含不同质量浓度(0.02,0.04,0.08,0.16,0.32,0.64和1.28 g·L-1)红花多糖的培养液,培养48 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测红花多糖对Hela细胞增殖的影响;以不同质量浓度(0.16,0.32,0.64 g·L-1)的红花多糖处理Hela细胞48 h,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中VEGF的表达,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGF mRNA的表达,免疫印迹法(Western blot)检测VEGF蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,(0.16,0.32,0.64 g·L-1)的红花多糖作用于宫颈癌Hela细胞48 h后能显著抑制细胞的体外增殖,呈现剂量依赖性(P0.05)。红花多糖能明显下调Hela细胞VEGF mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论:红花多糖可通过抑制VEGF的表达抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,发挥抗肿瘤作用。     

黄芪多糖对斑马鱼发育及与衰老相关基因表达的影响

 目的 研究黄芪多糖抗衰老的作用机制。方法 β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）及吖啶橙（AO）的荧光染色分析黄芪多糖对斑马鱼胚胎细胞衰老及凋亡的影响;RT-PCR检测与衰老相关基因的表达。结果 当黄芪多糖质量浓度为0.25 mg·mL^-1时,可以延缓斑马鱼细胞凋亡;增强斑马鱼端粒酶基因（TERT）基因的表达,降低bax、p21、p53基因的表达。结论 黄芪多糖具有改善细胞复制性衰老的作用,其分子机制可能与上调TERT和下调p21、p53和bax基因的表达,从而起到一定的抗衰老作用。     

黑木耳多糖对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：探讨黑木耳多糖（Auriculariaauricularpolysaecharide＊,AAP）后处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的影响。方法：新生7日龄SD大鼠60只随机分为空白对照组,模型组,低、中、高剂量AAP治疗组。缺氧缺血脑损伤后即刻腹腔注射AAP或生理盐水,观察AAP对缺氧缺血24小时后脑组织中超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（N0）含量、72小时后脑组织含水量、神经元凋亡的影响。结果：模型组新生大鼠SOD活性下降,MDA、NO含量升高,不同剂量AAP后处理均能使SOD活性升高,MDA、NO含量下降,并呈剂量依赖性。中、高剂量AAP治疗组新生大鼠较模型组脑含水量及神经元凋亡数目明显减少（P〈0．05,P〈0．01）。结论：缺氧缺血后AAP干预对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤有保护作用,其作用机制可能与减少氧化应激,降低NO含量有关。     

黑木耳多糖、红菇多糖的降胆固醇作用研究

目的：对黑木耳多糖和红菇多糖进行降胆固醇作用研究，方法：给予大鼠高脂饲料1周，建立高脂血症大白鼠模型，用黑木耳多糖，红菇多糖对具高脂血症的大白鼠进行股部肌肉注射1周，剂量为每日15mg/kgd，测定血清中总胆固醇含量，结果：注射红菇多糖后大鼠总胆固醇含量比对照组降低了45．2％，注射黑木耳多糖后大鼠的总胆固醇含量比对照组降低了42．2％，均达到了显著水平，结论：黑木耳多糖，红菇多糖有显著的降低胆固醇作用。     

蛇葡萄素对大鼠肝星状细胞增殖及胶原蛋白、细胞因子生成的影响

目的：研究蛇葡萄素对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）的增殖及胶原蛋白、细胞因子生成的影响。方法：对HSC-T6增殖的影响：用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养液制备成HSC-T6细胞3×10⁴个/mL细胞悬液100 μL/孔接种于96孔培养板。设细胞对照组、秋水仙碱1.0 mg·L^-1组和100.0,75.0,50.0,25.0,12.5 mg·L^-15个不同质量浓度蛇葡萄素组,置37 ℃ 5%CO₂培养48 h。采用MTT法检测蛇葡萄素对大鼠肝细胞HSC-T6增殖的影响。对HSC-T6生成Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原蛋白及细胞因子（TGF-β₁,PDGF）含量的影响：取终质量浓度分别为50.0,25.0,12.5 mg·L^-1蛇葡萄素,3×10⁴个/mL细胞悬液100 μL/孔细胞液接种于96孔培养板。阳性组秋水仙碱的质量浓度为1.0 mg·L^-1。置37 ℃ 5%CO₂培养48 h。ELISA法检测HSC-T6细胞生成的胶原蛋白（Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ）、转化生长因子（TGF-β₁）及血小板衍生因子（PDGF）含量。结果：蛇葡萄素100.0,75.0 mg·L^-1对HSC-T6细胞的增殖有明显抑制作用,其无毒浓度为50.0 mg·L^-1。50 mg·L^-1的蛇葡萄素可使HSC-T6细胞生成的Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原蛋白,TGF-β₁,PDGF含量明显低于细胞对照组（P<0.05）,25 mg·L^-1的蛇葡萄素也可使HSC-T6细胞生成的Ⅲ型胶原蛋白含量明显低于细胞对照组（P<0.05）。结论：蛇葡萄素能抑制HSC-T6增殖并可使HSC-T6生成的Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原蛋白,TGF-β₁,PDGF含量降低。