急性髓系白血病PRAME基因转录本的定量研究

目的 探讨黑色素瘤优先表达抗原(preferentially expressed antigen of melanoma,PRAME)基因转录本在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中的表达和临床意义.方法 建立荧光染料EvaGreen实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)对56例初诊AML患者和20例对照的骨髓单个核细胞标本中PRAME转录本进行检测,分析其临床相关性.结果 PRAME转录本含量在对照组和AML患者中分别为0～1.46%(中位0.18%)和0～21 618.09%(中位9.79%)(P＜0.01);FAB亚型中M1、M2、M3和M4患者中PRAME转录本含量较对照组明显增高,而M5患者与对照组差异无统计学意义.PRAME转录本含量与染色体预后分组显著负相关(r=-0.438,P=0.001),低危组患者中PRAME转录本含量显著高于中危组和高危组患者.AML-M2患者中t(8;21)易位阳性者PRAME转录本含量(135.06%～21 618.09%,中位2 201.88%)明显高于无t(8;21)易位者(0.14%～1696.30%,中位17.97%)(P=0.002).对1例AML患者不同阶段的标本检测发现诱导缓解后PRAME转录本明显下降,复发时又明显升高.结论 PRAME转录本在AML患者中高表达,是患者预后良好的一个标记,可用于AML患者的随访监测.     

急性髓系白血病干细胞研究进展

急性髓系白血病干细胞多数亚型的干细胞具有相似的免疫表型(CD34+、Cd38-、CD90-、CD117-、CD123+),表达核因子NF-KB。急性髓系白血病干细胞对化疗和放疗均不敏感,是急性髓系白血病复发的原因之一。选择急性髓系白血病干细胞高表达的抗原CD123或核因子NF-KB,作为清除急性髓系白血病干细胞或诱导急性髓系白血病干细胞凋亡的标记,是探索彻底治愈急性髓系白血病的最佳途径。     

建立实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARa融合基因转录本

目的 建立实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)法榆测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)PML/RARa融合基因转录本,评价其在APL患者诊断和微小残留病(minimal residual disease,MRD)监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-PCR法对长型(L-form)、短型(S-form)、变异型(V-form)不同类型PML/RARa阳性模板进行扩增,并检测6例APL患者PML/RARa融合基因转录本含量.结果 RQ-PCR法最低可检测到10个拷贝/μL的阳性模板,但重复性较差,而108～102拷贝/μL阳模的重复性良好,止常对照无扩增信号.6例初诊APL患者不同类型PML/RARa融合基因转录本绝对含量为4.27×103～3.36×105拷贝/50 ng(中位4.33×104拷贝/50 ng),ABL纠正后的相对含量为29.38%～600.53%(中位48.12%).1例患者诱导缓解后PML/RAHa融合基因转录本下降,复发时义明显升高.结论 RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于APL患者的诊断和MRD监测.     

急性髓系白血病患者化疗后微小残留病与多药耐药基因表达相关

目的明确急性髓系白血病(AML)中微小残留病(MRD)与多药耐药基因表达的相关性。方法收集初诊AML患者骨髓52例,用real-time PCR检测患者化疗前ABCB1、ABCC1、ABCC4及ABCG2 4种多药耐药基因的表达,同时用多参数流式细胞术(MFC)检测患者诱导化疗后和化疗3、6和9个月后的MRD表达水平。结果 52例AML患者MRD表达水平与ABCB1(P0.01)、ABCC1(P0.01)、ABCC4(P0.01)和ABCG2(P0.01)的mRNA表达水平具有明显相关性。持续监测9个月后,MRD再次转阳者ABC基因表达水平显著高于持续阴性者:ABCB1(P0.05)、ABCC1(P0.05)、ABCC4(P0.01)和ABCG2(P0.01)。结论 MRD表达水平与多药耐药基因表达水平显著正相关。     

急性髓系白血病中CD64表达的敏感性及特异性研究

研究急性髓系白血病(AML)免疫分型中CD64的敏感性和特异性.用系列抗原对132例AML患者的骨髓细胞进行直接标记,并用流式细胞术进行分析.结果表明:在AML中,CD64对急性粒-单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)中敏感性最高(分别为96.4%和100%),在其他AML(M0、M1、M2、M3,M6、M7)中表达均较低.CD64对M4和M5中的特异性为56.5%.因此,CD64有助于AML中M4、M5的鉴别诊断.     

多探针荧光原位杂交检测急性髓系白血病常见细胞遗传学异常

目的:评价多探针荧光原位杂交(FISH)在检测急性髓系白血病(AML)常见细胞遗传学异常中的价值,探讨细胞遗传学异常与临床诊断、治疗、预后的关系。方法:采用针对AML/MDS的FISH多探针诊断系统,即以针对AML1/ETO融合基因、PML-RARα融合基因、CBFβ/MYH11融合基因、MLL基因、P53基因、Del(5q)、Del(7q)、Del(20q)8种DNA探针对40例患者进行多探针FISH检测,同时联合染色体核型、临床资料进行研究。结果:40例AML中,共22例多探针FISH检出了细胞遗传学改变,包括:AML1/ETO、PML-RARα、MLL基因断裂重排、Del(5q)、Del(7q)、P53基因缺失、8号染色体三体7种细胞遗传学异常。而常规染色体核型分析仅检出11例遗传学异常。多探针FISH与染色体核型分析的总阳性率分别为57.50%及27.50%。AML1/ETO、PML/RARα阳性者首次诱导化疗效果较理想;而Del(7q)、MLL基因断裂重排阳性、伴复杂细胞遗传学改变者可能预示不良预后。结论:FISH多探针诊断系统检测AML患者常见遗传学异常更省时、准确、高效,有利于完善白血病的分层诊断及指导临床个体化治疗。     

PD-L1在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的 探究程序性死亡分子1配体-1（PD-L1）在急性髓系白血病（AML）中的表达作用和临床意义。方法 选取2013年1月~2016年12月在我院进行治疗并确诊为AML的初治患者49例为观察组,选择同期在我院接受治疗的27例非恶性疾病如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血者作为对照组。对比两组患者血液中的PD-L1表达水平,分析患者性别、年龄、初诊白细胞计数、亚型的对血液中PD-L1的影响,确定PD-L1表达与临床疗效的相关性。结果 对照组患者治疗前的PD-L1表达与观察组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后,观察组的PD-L1表达高于对照组,统计学意义显著（P＜0.01）。单因素结果显示,PD-L1在AML初诊患者中的表达水平与患者的性别、年龄、初诊WBC数、分型无相关性（P＞0.05）;未缓解AML患者组PD-L1表达水平高于持续完全缓解组AML患者（P＜0.01）。结论 PD-L1可能参与AML的免疫逃逸机制,并可能与病情进展及治疗效果相关。     

伴11q23异常的急性髓系白血病的细胞遗传学分析

11q23易位在急性白血病（acute leukemia，AL）中是常发生的遗传学改变，表现异常的临床和生物学特征，可见于急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia，AML）、急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）、骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）、Ph染色体阴性的慢性粒细胞白血病和治疗相关性白血病等多种恶性血液病。     

慢性粒细胞白血病患者中C/EBPζ基因转录本的定量研究

目的研究慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）患者中CCAAT／增强子结合蛋白ξ（CCAAT／enhancer binding protein，C／EBPξ）的表达及其意义。方法建立实时定量聚合酶链反应对76例不同阶段CML患者和16名正常对照的骨髓单个核细胞中C／EBPξ转录本含量进行检测。结果与正常对照（中位12．20）相比，慢性期、加速期和急变期CML患者中C/EBPξ转录本明显降低，中位含量分别为2，5、3．31和2，22（P〈0，01、〈0，05，〈0，01），8例治疗后达到细胞遗传学缓解者则恢复至正常水平（中位15．43，P〉0．05），而干扰素治疗无效的4例患者中表达水平则进一步下降（中位1．56，P〈0．01）。结论CML患者中C／EBPξ基因表达下降，可能与其发病相关。     

Serum MicroRNA-370 as a potential diagnostic and prognostic biomarker for pediatric acute myeloid leukemia

Background: Controversial data on the expression pattern of microRNA-370 (miR-370) in acute myeloid leukemia (AML) were previously reported. Objective: To clarify the expression pattern of miR-370 and its clinical implications in pediatric AML patients. Methods: Real-time quantitative PCR was performed to detect the expression of miR-370 in both bone marrow mononuclear cells and sera obtained from pediatric AML patients and healthy controls. Results: Compared with healthy controls, the expression levels of miR-370 in the bone marrow and sera of pediatric AML patients were both decreased significantly (both P=0.001). Importantly, serum miR-370 level could efficiently screen pediatric AML patients from healthy controls (Area under receiver operating characteristic curve, AUC =0.993). Then, low serum miR-370 level was significantly associated with French-American-British (FAB) classification subtype M7 subtype (P=0.02) and unfavorable karyotype (P=0.01). Moreover, pediatric AML patients with low serum miR-370 level had shorter relapse-free and overall survivals than those with high serum miR-370 level (both P=0.001). Multivariate analysis further identified serum miR-370 level as an independent prognostic factor for both relapse-free and overall survivals. Interestingly, the prognostic relevance of serum miR-370 level was more obvious in the subgroup of patients with intermediate-risk cytogenetics. Conclusions: MiR-370 expression may be markedly and consistently decreased in pediatric AML patients and in turn contributes to aggressive progression of this malignancy. Serum miR-370 may serve as a potential non-invasive diagnostic/prognostic marker for pediatric AML patients.     

Myeloperoxidase expression in acute myeloid leukemia helps identifying patients to benefit from transplant

Purpose

Despite extensive study, the use of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation in acute myeloid leukemia (AML) vary considerably. The decision of which of these options to choose is complex and depends on both clinical and molecular variables as well as the availability and histocompatability of donor stem cells. So far there is no clear explanation on whether the expression of myeloperoxidase (MPO) relates to the prognosis of AML.

Materials and Methods

We retrospectively analyzed the prognostic significance of the MPO expression in the 140 patients with diagnosed AML treated at a single institution.

Results

In our study, MPO expression was associated with disease-free survival (DFS) and transplant was beneficial to overcome a negative prognostic effect of MPO-negative at diagnosis based upon the result that the DFS in patients received transplants are not significant between the MPO-positive group and MPO-negative group although DFS in all patients was different according to MPO expression.

Conclusion

MPO expression at diagnosis helps to choose therapy for each AML patient and can differentiate AML patients who need transplantation.     

急性髓细胞白血病患者CD56抗原表达与MDR1基因表达量的关系研究

目的 研究初治急性髓细胞白血病(AML)患者CD56抗原表达与多药耐药(MDR)1基因表达量的关系,探讨CD56抗原表达与MDR1基因表达量在AML耐药中的作用及相互关系.方法 采用流式细胞术(FCM)和建立实时荧光定量PCR技术分别检测79例AML患者CD56抗原表达及MDR1基因表达水平并分析两者之间的关系及临床意义.结果 24.1%AML患者表达CD56抗原,FAB亚型中M5 AML患者表达阳性率高于其他亚型.遗传学危险度分级高危组患者CD56抗原表达阳性率显著高于中危组(P<0.01),伴t(8:21)AML患者CD56抗原表达阳性率(57.1%)显著高于其他低危组AML(P<0.05).CD56抗原表达阳性初治AML患者MDR1基因表达水平显著高于表达阴性患者(P<0.001).MDR1基因高表达且CD56抗原阳性AML组的CR率(58.8%)显著低于MDR1基因低表达且CD56表达阴性组(89.2%,P<0.01).结论 AML患者CD56抗原表达与MDR1基因表达水平存在相关性;同时定量检测MDR1基因表达及CD56抗原表达更有助于判断预后.