活血通脉汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血浆TXB2、6-keto-PGF1α的影响

目的探讨活血通脉汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮前列环素F1α(6-keto-PGF1α)的影响。方法制作脑缺血再灌注模型,70只大鼠随机平均分为活血通脉汤组、阿司匹林阳性对照组、手术组和假手术组,应用放免法分别测定缺血再灌注24、48 h血浆TXB2、6-keto-PGF1α及其比值。结果手术组大鼠脑缺血再灌注24、48h血浆TXB2水平明显高于假手术对照组(P<0.01),6-keto-PGF1α显著低于假手术对照组(P<0.01),血浆TXB2/6-keto-PGF1α比值增加(P<0.01),缺血再灌注24、48 h脑组织缺血范围显著大于假手术对照组(P<0.01)。使用活血通脉汤治疗能降低TXB2水平,升高6-keto-PGF1α水平,使血浆TXB2/6-keto-PGF1α比值保持在正常水平,减少缺血脑组织范围。结论活血通脉汤可纠正脑缺血再灌注后循环血中TXB2/6-keto-PGF1α的平衡失调及降低脑组织缺血程度,减轻脑缺血再灌注损伤。     

降钙素基因相关肽和神经生长因子对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨外源性降钙素基因相关肽（CGRP）和神经生长因子（NGF）对短暂性全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达的影响。方法原位杂交和免疫组织化学结合显微图像分析方法。结果假手术组大鼠纹皮质c-jun mRNA表达弱；缺血组较假手术组c-jun mRNA表达显著强（P〈0．01）；CGRP组和NGF组c-jun mRNA表达弱于缺血组（P〈0．05）；CGRP和NGF合用组c-jun mRNA表达明显弱于缺血组（P〈0．01），分别弱于CGRP组和NGF组（P〈0．05）。假手术组大鼠纹皮质未见c-Jun蛋白表达；缺血组较假手术组c-Jun蛋白表达明显强（P〈0．01），缺血后再灌注3h强，1d、3d时弱；CGRP组和NGF组c-Jun蛋白表达较缺血组弱（P〈0．05）；CGRP和NGF合用组较缺血组c-Jun蛋白表达明显弱（P〈0．01），分别弱于CGRP组和NGF组（P〈0．05）；CGRP和NGF合用组缺血后再灌注3h时强，1d、3d时弱。结论CGRP和NGF分别抑制全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达，联合应用显著抑制全脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-jun mRNA及蛋白表达，两者对保护缺血神经元可能有协同作用。     

亚低温对急性脑缺血再灌注大鼠TNF-α表达的影响

目的：探讨亚低温对大鼠急性脑缺血／再灌注损伤后神经功能及缺血脑组织中TNF—α表达的影响。方法：取健康成年雄性SD大鼠150只。随机均分为假手术组、脑缺血再灌注常温组、脑缺血再灌注亚低温组；根据再灌注时间不同，每组分别于再灌注8h，24h，3d，7d，30d各处死10只大鼠，并取其缺血脑组织，其中5只用于免疫组化染色，另外5只用于RT—PCR检测TNF—αmRNA。结果：脑缺血再灌注后，TNF—α阳性细胞数在再灌注1d时即达高峰，3d后迅速下降，再灌注7d时即降到较低水平，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。TNF—α及其mRNA表达假手术组很弱，缺血再灌注后TNF—α及其mRNA在8h表达为顶峰，随后有所下降，但直到再灌注7d仍然保持相对高的表达水平，一个月基本恢复正常；其表达在亚低温组较常温脑缺血组有显著地下降（P〈0．05），但仍较假手术组高（P〈0．05）。结论：脑缺血再灌注损伤后TNF—α明显升高，应用亚低温可以降低TNF—α升高的程度；亚低温可以明显减少缺血再灌注后脑梗死的区域，并能明显改善缺血再灌注大鼠的神经功能。提示亚低温治疗对脑的保护作用有可能通过降低TNF—α水平来实现的。     

脑络欣通及其拆方对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区Fas、Fas L蛋白及皮质Fas mRNA表达影响的实验研究

目的： 探讨脑络欣通及其拆方对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区Fas、FasL蛋白及皮质Fas mRNA表达的影响。方法： 采用线栓法大鼠大脑中动脉阻塞复制局部脑缺血再灌注模型,缺血2 h分别再灌注 1 d、3 d、7 d，随机分为假手术组、模型组、益气药组、活血药组和脑络欣通组。应用免疫组化和原位杂交法,观察缺血侧海马CA1区Fas、FasL蛋白及额顶叶皮质Fas mRNA表达。结果： 局灶性脑缺血再灌注后,缺血侧海马CA1区Fas、FasL蛋白表达平均吸光度值比假手术组增强(P＜0.01），额顶叶皮质Fas mRNA表达平均吸光度和阳性面积值强于假手术组(P＜0.01），脑络欣通组Fas、FasL蛋白和Fas mRNA表达各时段均显著低于模型组(P＜0.05或P＜0.01)；其拆方益气药、活血药组于3 d、7 d显著低于模型组(P＜0.05或P＜0.01)；脑络欣通组于3 d或/和 7 d 显著低于其拆方益气药、活血药组(P＜0.05或P＜0.01)。结论： 脑络欣通及其拆方益气药、活血药可通过抑制海马CA1区Fas、FasL蛋白和Fas mRNA表达，抗局部脑缺血再灌注神经细胞的凋亡，减轻病理性损伤。     

局灶性脑缺血大鼠脑细胞超微结构及线粒体呼吸功能变化的研究

目的研究大鼠脑细胞超微结构及脑组织线粒体呼吸链功能在局灶性脑缺血前后的变化。方法采用改良Zea-Longa方法复制大鼠大脑中动脉缺血（middle cerebral anery occlusion MCAO）模型，透射电镜观察缺血后脑组织神经元超微结构的改变；检测线粒体NAD链及FAD链R3、R4、RCR、P／O等评价呼吸功能的指标。结果局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元细胞结构严重破坏，线粒体NAD链和FAD链的R3（P〈0．01）、P／O（NAD链P〈0．01，FAD链P〈0．05）、RCR（P〈0．01）明显低于假手术组，R4明显高于假手术组（P〈0．05）。结论脑缺血后线粒体结构破坏，功能受损，通过保护线粒体呼吸链可能对脑缺血损伤有保护作用。     

红景天苷对大鼠脑缺血再灌注氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨红景天苷(SAL)对大鼠脑缺血再灌注损伤(IRI)的神经保护作用。方法:建立大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。实验分为假手术组、IRI模型组、SAL预处理+IRI组(每日10 g/kg,溶于生理盐水,浓度为1. 5 g/ml,连续灌胃14 d),于再灌注24 h应用试剂盒检测大鼠缺血脑组织中丙二醛(MDA)、活性氧簇(ROS)及超氧化物岐化酶(SOD)的表达水平;应用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色方法评定脑梗死体积,计算梗死体积百分比;用Western Blot和免疫荧光染色方法观察大鼠缺血侧脑组织神经元表达的变化。结果:与假手术组相比,IRI模型组MDA、ROS的表达水平明显升高,SOD的表达水平明显降低(P 0. 01),脑梗死体积百分比增大(P 0. 01),Neu N的表达降低(P 0. 01);与IRI模型组相比,红景天苷预处理+IRI组MDA、ROS的表达明显降低,SOD的表达明显升高(P 0. 05),脑梗死体积百分比明显减小(P 0. 01),Neu N的表达升高(P 0. 05)。结论:红景天苷可通过抑制脑缺血再灌注损伤大鼠的氧化应激来减少脑梗死体积而发挥神经保护作用。     

贝沙罗汀对小鼠脑缺血再灌注损伤神经元的保护作用及机制

目的 探讨贝沙罗汀(Bexarotene)对脑缺血再灌注(CIR)损伤神经元的保护作用及机制。方法 将45只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组及贝沙罗汀组(5 mg/kg),每组15只。采用线栓法建立短暂小鼠中动脉栓塞(t MCAO)模型,再灌注后通过神经行为学评分观察小鼠神经功能缺损情况; HE染色观察脑部皮层损伤侧神经元病理变化; TUNEL染色检测脑部皮层损伤侧神经元凋亡;免疫荧光染色检测损伤部位Cleaved Caspase-3表达; Western blot检测小鼠损伤脑组织中JNK信号通路相关蛋白P-C-Jun、P-JNK及Cleaved Caspase-3的表达情况。结果 与假手术组相比,模型组和贝沙罗汀组小鼠神经功能缺损明显较重(P 0. 05),皮层神经元损伤分级明显增加(P 0. 05),损伤部位TUNEL阳性细胞数及Cleaved Caspase-3的表达明显较高(P 0. 05),同时损伤侧小鼠脑组织JNK、C-Jun、Cleaved Caspase-3的蛋白表达水平显著上调(P 0. 05);与模型组相比,贝沙罗汀组小鼠神经行为学评分较低(P 0. 05),贝沙罗汀可有效阻止t MCAO后脑组织形态学的改变(P 0. 05),降低小鼠损伤侧脑组织TUNEL染色阳性细胞数及P-JNK、P-C-Jun、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平(P 0. 05)。结论 贝沙罗汀对CIR神经元损伤具有保护作用,且该作用可能通过抑制JNK/Caspase-3信号通路的激活来实现。     

大鼠脑缺血后IFN-γ mRNA的表达

目的：检测SD大鼠脑缺血后缺血脑组织和外周免疫淋巴细胞干扰素-γ（IFN-γ）mRNA的表达，探讨IFN-γ在脑缺血中的作用。方法：用线拴封闭大脑中动脉的方法制作脑缺血动物模型，采用原位杂交的方法检测缺血脑组织及外周淋巴组织中IFN-γ mRNA动态的变化情况。采用免疫组织化学方法检测缺血脑组织中浸润的T淋巴细胞数量。结合免疫组化和寡核苷酸探针杂交方法，检测T细胞表达IFN-γ。结果：①缺血脑半球IFN-γ mRNA含量较假手术组明显增高（P〈0．001），且随着脑缺血时间延长其表达量增加；②IFN-γ mRNA表达数量随损伤面积扩大而增加（R=0．9780，P〈0．001）；③缺血组外周血单核细胞IFN-γ mRNA水平较假手术组明显增高，12小时达高峰（P〈0．001），而脾淋巴细胞、淋巴结细胞IFN-γ mRNA水平也均比假手术组明显增高，且随着脑缺血时间延长表达量增加（P〈0．05、P〈0．01、P〈0．001）；④随着脑缺血时间的延长，脑内浸润的T细胞数量显著增加（P〈0．05、P〈0．01、P〈0．001）。结论：IFN-γ mRNA表达主要参与大脑损伤后期反应过程，可能加重脑缺血后期的炎症反应。     

大黄对大鼠脑缺血-再灌注损伤bcl-2、bax表达的影响

目的探讨大黄对大鼠脑缺血-再灌注损伤过程中的抗凋亡作用及机制。方法sD大鼠64只分假手术组、模型组、大黄组和尼莫地平组，每组16只。线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型，以HE染色和免疫组化的方法观察大黄0．45g/（kg·d）、尼莫地平1mg／（kg·d）对大鼠大脑海马回CA1区细胞形态以及bcl-2、bax蛋白表达的细胞数目。结果大黄组显示海马回细胞病理改变较模型组差异显著，bcl-2表达水平增高（P〈0．05），bax表达水平降低（P〈0．05），bcl-2／bax的表达比例增加（P〈0．05），大黄组和尼莫地平组差异无显著意义（P〉0．05）。结论大黄有明显减少脑梗死边缘区域凋亡水平的作用，其机制与bcl-2表达增高，bax表达降低，降低bcl-2／bax值有关。     

UCF-101对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的观察UCF-101对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元凋亡及Caspase-9蛋白表达的影响,探讨UCF-101对缺血性脑损伤的神经保护作用。方法随机将大鼠分为假手术组、缺血再灌注组及UCF-101处理组。采用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)2h再灌注模型,于再灌注后24h取脑,采用TTC法测梗死体积,TUNEL法检测神经元凋亡,免疫组化法观察脑组织神经元Caspase-9蛋白的表达。结果假手术组未见梗死现象,与假手术组比较,缺血再灌注组脑组织凋亡细胞数和Caspase-9的表达均明显升高(P0.05)。与缺血再灌注组相比,UCF-101处理组梗死体积明显缩小(P0.05),UCF-101处理组脑组织凋亡细胞数和Caspase-9的表达均明显减少(P0.05)。结论 UCF-101可能通过下调脑组织神经元Caspase-9蛋白的表达,抑制神经元的凋亡而发挥神经保护作用。     

转染Akt-1基因对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用研究

目的通过观察转染Akt-1基因对大鼠心肌缺血-再灌注（I-R）损伤心脏功能及细胞凋亡相关蛋白的影响,探讨Akt-1基因对心肌I-R损伤保护作用的机制。方法使用结扎／松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30min,再灌注2h,建立大鼠在体心肌I-R模型。40只雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组（S组）,缺血-再灌注组（I—R组）,转染Akt-1基因组（Gene组）,空载体组（VC组）,抑制剂组（AB组）,每组8只。Gene组术前48h开胸心肌内直接分点注射脂质体Akt-1质粒复合物,S组和I-R组分别注射同等体积PBS,VC组注射等体积脂质体,AB组注射等体积脂质体Akt-1质粒LY294002混合物。所有大鼠经颈动脉插管至左心室记录HR、LVSP、LVEDP和±do／dtmax变化,TTC染色法测定心肌梗死范围,TUNEL法原位标记凋亡心肌细胞,Western Blot测定Akt-1、Casepase-3蛋白表达,免疫组化检测Bcl-2、Bax表达。结果1．Gene组较I—R组、VC组和AB组左室心功能（HR、LVSP、LVEDP、±dp／dtmax）改善（P〈0．05）。2．Gene组凋亡指数（AI）及心肌梗死范围较I-R组、VC组及AB组均显著减少（P〈0．05）,但仍高于S组（P〈0．05）;S组细胞凋亡阳性细胞几无表达,心肌细胞凋亡指数（AI）明显低于其余各组（P〈0．05）。3．各组均可见Akt-1、Casepase-3蛋白表达,但S组中蛋白较其余各组减少（P〈0．05）;Gene组Akt-1蛋白表达较I-R组、VC组及AB组均增加（P〈0．05）;Gene组Casepase-3蛋白表达则较I-R组、VC组及AB组减少。4．S组Bcl-2和Bax表达较其余各组减少（P〈0．05）;Gene组较I-R组、VC组及AB组Bcl-2表达上调而Bax表达下调（P〈0．05）。结论Akt-1基因转染对I—R心肌具有保护作用,该作用可能与促进Bcl-2表达,抑制Bax和Casepase-3表达从而抑制凋亡的发生有关。     

活脉通络饮对大鼠脑缺血再灌注脑组织NF-κB和IL-1β表达的影响

目的观察活脉通络饮对脑缺血再灌注大鼠脑组织核转录因子-κB(NF-κB)和白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的影响,探讨活脉通络饮防治脑缺血的作用机制。方法采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)脑缺血再灌注模型。分别设正常对照组、缺血再灌注组、活脉通络饮低剂量组、活脉通络饮中剂量组、活脉通络饮高剂量组和银杏叶片阳性对照组。分别于脑缺血再灌注术后24h后开始灌胃给药,每d给药2次,连续3 d。采用Western Blot定性和定量法检测脑组织中NF-κB和IL-1β蛋白的表达。结果与对照组相比,缺血再灌注组大鼠脑组织NF-κB和IL-1β蛋白表达增强(P0.01);与缺血再灌注组比较,活脉通络饮低剂量组和中剂量组及银杏叶片阳性对照组大鼠脑组织NF-κB和IL-1β蛋白表达明显减少(P0.01或P0.05),而活脉通络饮高剂量组与缺血再灌注组相比没有统计学差异。结论活脉通络饮对脑缺血再灌注脑损伤的治疗作用可能与其下调大鼠脑组织NF-κB和IL-1β蛋白表达相关。     

脑室亚低温对急性脑梗塞脑组织兔细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的检测低温组和常温组家兔大脑中动脉脑梗塞周边缺血区脑组织细胞凋亡和Caspase-3表达,探讨脑室内低温对家兔大脑中动脉梗塞模型脑组织细胞凋亡影响。方法选用4-6个月龄雄性家兔20只,随机分为常温组(10只)和低温组(10只)。应用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,进行脑室内穿刺低温液体灌注亚低温干预,术后动物行为观察,SP和Western blot法检测各组脑组织Caspase-3的表达,TUNEL方法检测细胞凋亡。结果术后24h神经病学体征评分低温组明显优于常温组(P0.05),低温组的TUNEL染色凋亡细胞数和Caspase-3染色阳性细胞数明显低于常温组(P0.05),Western blot表明低温组脑组织中Caspase-3的表达水平明显低于常温组(P0.05)。结论脑室内穿刺低温干预对急性脑梗塞动物模型有脑保护作用。     

L-精氨酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤研究

目的 探讨一氧化氮（NO）前体L-精氨酸（L-Arg）对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤的影响.方法 建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,设立假手术组、缺血组（ischemia/reperfusion,IS组）,L-Arg治疗组（n=10）.L-Arg治疗组于缺血2h再灌注即刻给予L-Arg,缺血组给予生理盐水.将大鼠于缺血再灌注6h后断头取脑,检测脑组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）的活性,测定脑组织含水量和脑梗死体积.结果 局灶性脑缺血再灌注大鼠给予L-Arg治疗组TNF-α和IL-6的表达下降,IL-10升高,脑组织含水量及脑梗死面积减少.结论 L-精氨酸可以通过抑制脑组织炎性因子TNF-α和IL-6的表达,上调IL-10的含量来发挥抗炎作用,从而对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期产生一定程度的保护作用.     

NF—KBp65在糖尿病大鼠脑缺血再灌注中的表达

目的：通过观察糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后转录核因子NF-kBp65表达的动态变化,以探讨糖尿病在脑缺血再灌注损伤中的可能机制。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、假手术组（B组）、脑缺血再灌注组（C组）、糖尿病脑缺血再灌注组（D组）,链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型,线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型,免疫组织化学方法观察再灌注第3、第6、第24、第48小时脑组织中NFxBp65表达的动态变化。结果：脑缺血再灌注后,C组在第6小时、D组在第3小时即可见到NF-kBp65免疫阳性细胞,随着再灌注时间的延长,NF—KBp65免疫阳性细胞表达增加,第24小时达高峰,第48小时开始下降;NF_xBp65表达在各个缺血再灌注时间点上,D组较c组增加（P〈0．05）。结论：糖尿病可促进NF-kBp65活化加重脑缺血再灌注损伤。     

黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马神经元凋亡及相关基因表达的影响

目的 探讨黄芪皂甙Ⅳ联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对缺血再灌注大鼠海马神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法 实验动物随机分为假手术组、模型组、BMSCs组、BMSCs+黄芪组.采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,BMSCs组、BMSCs+黄芪组分别于建模成功后3 h...     

γ-促分泌酶抑制剂对脑缺血再灌注小鼠海马CREB表达的影响

目的研究γ-促分泌酶抑制剂MW167阻断Notch信号对脑缺血再灌注小鼠海马cAMP反应元件结合蛋白（CREB）表达的影响。方法72只昆明小鼠随机分为：假手术组（Sham,8只）、γ-促分泌酶抑制剂组（MW167,32只）、缺血再灌注组（I／R,32只）。γ-促分泌酶抑制剂组和I／R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为1、3、7、14d4个亚组。应用免疫组织化学方法和Westernblot方法检测各组小鼠海马CREB蛋白的表达。结果免疫组织化学方法检测时发现．缺血处理后1d时,CREB表达迅速增高,之后持续激活,与假手术组相比,显著升高（P〈0．01）;与相同时间点的缺血组比较,MW167组的CREB蛋白阳性表达则明显升高（P〈0．05）;Westernblot方法也得到了相同的结论。结论γ-促分泌酶抑制剂很可通过上调CREB蛋白的表达参与脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。     

NBD多肽预处理对局灶脑缺血再灌注大鼠脑内核因子-κB核转位活化的影响

目的探讨NBD多肽预处理对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑缺血皮质细胞内核因子-κB活化的影响。方法将SD健康雄性大鼠（280～300g）共36只随机分为假手术组（n=6）、模型组（n=15）、药物组（n=15）。缺血模型制备前2h经右侧侧脑室注射NBD多肽25μl进行预处理。运用改良线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞再灌注大鼠模型。运用免疫组化检测再灌注后72hNF-κBp65在胞浆／胞核的蛋白表达变化;运用免疫荧光定位及Western印迹（半定量）检测NF-κB p65及IκBα的蛋白表达情况。结果免疫组化结果显示与假手术组比较,再灌注72h模型组胞浆／胞核内NF-κB p65大量表达（P〈0．05）;NBD多肽预处理后NF-κB p65主要在胞浆表达,胞核内表达明显减少（P〈0．05）;免疫荧光双标定位及Western印迹半定量检测显示模型组胞浆／胞核内NF-κB p65蛋白均大量表达（P〈0．05）,IκBα蛋白呈现低表达（P〈0．05）;NBD多肽预处理后胞核内NF-κB p65蛋白表达明显减少,主要以胞浆表达为主（P〈0．05）,IκBα胞浆／胞核内表达显著增加（P〈0．05）。结论局灶脑缺血再灌注72hNF-κB p65蛋白胞核表达明显增加．NF-κB核转位／活化过程被激活：NBD多肽预处理后通过增加胞核／胞浆内IκBα表达有效阻止NF-κB的核转位／活化过程,从而有效地减轻再灌注后72h局灶脑缺血再灌注对脑组织的损害。