晚期糖基化终末产物（AGEs）与衰老

晚期糖基化终末产物（advanced glycosylation end products, AGEs）是人体内的还原糖与蛋白质或脂质发生不可逆反应所肜成的,是非酶糖基化衰老理论的最终产物。近年来的研究表明,AGEs的存在不仅与糖尿病关系密切,还与衰老有着紧密的联系。AGEs在人类和动物的多种组织中随着年龄的增长不断的积聚,可作为研究衰老的一项重要指标。本文从AGEs和衰老的角度综述了AGEs的形成过程、化学结构、以及在组织器官中的致衰老的机理。     

晚期糖基化终末产物（AGEs）与衰老

晚期糖基化终末产物（advanced glycosylation end products, AGEs）是人体内的还原糖与蛋白质或脂质发生不可逆反应所肜成的,是非酶糖基化衰老理论的最终产物。近年来的研究表明,AGEs的存在不仅与糖尿病关系密切,还与衰老有着紧密的联系。AGEs在人类和动物的多种组织中随着年龄的增长不断的积聚,可作为研究衰老的一项重要指标。本文从AGEs和衰老的角度综述了AGEs的形成过程、化学结构、以及在组织器官中的致衰老的机理。     

糖基化终末产物受体对牙周炎的促进作用

晚期糖基化终末产物受体（RAGE）是一种多配体受体,它通过与相应的配体结合后启动若干信号通路,影响机体的免疫防御和创伤愈合,参与炎症的恶性循环。在牙周组织中,RAGE在病理状态下的表达增加,提示该受体可能是牙周炎的促进因子之一,并有可能参与糖尿病和吸烟时牙周组织的损伤。下面就RAGE及其在牙周慢性炎症中的作用和在牙周组织中的表达,以及RAGE配体在牙周组织中的作用等作一综述。     

糖基化终末产物对人牙周膜干细胞骨向分化能力影响的研究

目的:探讨糖基化终末产物(AGEs-HSA)对人牙周膜干细胞(HPDLSC)骨向分化能力的影响。方法:体外组织块法和有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞,流式细胞仪检测牙周膜细胞表型分子CD44、CD146、stor-1、CD90,对其进行干细胞鉴定,将培养出的牙周膜干细胞与不同浓度的AGE-HSA共同培养,并矿化诱导后茜素红染色观察钙结节形成情况、碱性磷酸酶染色观察ALP活性、实时定量聚合酶链反应(real timePCR)检测成骨基因表达情况。结果:流式细胞仪细胞表型分析CD44、CD146、stor-1、CD90表达呈阳性。成骨诱导21 d后茜素红染色,对照组和实验组均出现不同程度的矿化结节,定量分析显示1、10、100、200μg/mLAGEs组矿化能力均比对照组低,差异均有统计学意义(P<0.05);不同浓度的实验组之间矿化能力均有统计学差异(P<0.05),且随着AGEs浓度的升高,矿化能力逐渐降低。成骨诱导7 d ALP染色比较发现各实验组均比对照组减弱。成骨诱导1周后RT-PCR检测各实验组的成骨基因ALP、Runx-2、Col-1、Runx-2 mRNA表达水平均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度的实验组之间各成骨基因的表达也有统计学差异(P<0.05)。结论:AGEs能抑制HPDLSC的骨向分化,并在一定范围内呈浓度依赖性。     

晚期糖基化终末产物受体在2型糖尿病伴牙周炎患者牙龈中表达

目的:探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)在非胰岛素依赖型糖尿病伴发牙周炎患者牙龈组织中的分布及其在牙周组织破坏中的作用。方法:用免疫组化方法检测9名患者共20个位点牙龈组织中RAGE和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分布,并进行了半定量检测。其中慢性牙周炎(CP)患者5名,非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)伴发牙周炎患者4名。同时,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对相应位点龈沟液及外周血中的白细胞介素6(IL-6)及TNF-α进行测量。结果:RAGE阳性细胞在2组的龈组织中的差异具有极显著性,且RAGE的表达与TNF-α的表达显著相关(P<0.05)。2组龈沟液中IL-6及TNF-α浓度的差异无显著性,但二者的浓度在NIDDM组有高于CP组的趋势。结论:RAGE参与了NIDDM伴发牙周炎患者的牙周组织的破坏。     

糖基化终末产物对人牙周膜干细胞骨向分化过程中的Wnt经典信号通路研究

目的 探讨Wnt经典通路相关因子Dickkopf蛋白1（DKK-1）、β-链蛋白（β-catenin）在糖基化终末产物（AGEs）介导的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）骨分化过程中的变化。方法 通过体外组织块法和有限稀释法克隆化培养获取hPDLSCs,实验分两组：正常hPDLSCs组（N-hPDLSCs组）和AGEs刺激的正常hPDLSCs组（A-hPDLSCs组）。对2组细胞成骨矿化诱导后行碱性磷酸酶（ALP）和茜素红染色;实时聚合酶链反应（real time PCR）检测成骨基因,以及Wnt经典通路中相关因子DKK-1、β-catenin;Western blot检测相关成骨蛋白、细胞核蛋白β-catenin。结果 成骨诱导后,A-hPDLSCs组ALP染色明显浅于N-hPDLSCs组;茜素红染色A-hPDLSCs组钙化结节少于N-hPDLSCs组;real time PCR与Western blot的结果显示A-hPDLSCs组BSP、ALP、Runx-2的表达都较低,差异有统计学意义（P<0.05）。Wnt经典信号通路中相关因子：A-hPDLSCs组β-catenin表达高于N-hPDLSCs组,A-hPDLSCs组DKK-1表达明显低于N-hPDLSCs组,并且Weston blot显示A-hPDLSCs组核蛋白β-catenin的表达高于N-hPDLSCs组。结论AGEs可以使hPDLSCs骨向分化过程中Wnt经典通路的抑制因子DKK-1下调,细胞核中的β-catenin表达升高,激活了Wnt经典通路,并且抑制了骨分化。     

晚期糖基化终产物在口腔鳞状细胞癌发展及治疗的研究进展

了解口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生、发展的分子机制仍然是认识OSCC恶性生物学特点及探索针对性治疗方法的研究热点。晚期糖基化终末产物（AGE）及其受体RAGE与其他受体在体内相互作用,从而激活多个信号通路,诱导白细胞介素、生长因子和细胞因子的合成。近期的研究表明,AGE/RAGE相关信号传导通路的激活影响OSCC的增殖、侵袭、血管生成、局部复发,与晚期OSCC症患者的预后不良有关。本文对AGE/RAGE与OSCC恶性演进进行综述,以期为OSCC治疗提供潜在靶点。     

糖基化终末产物介导的牙周膜干细胞成骨分化过程中Wnt经典信号通路相关作用机制的研究

目的:探讨人牙周膜干细胞(human periodontal stem cells,HPDLSCs)成骨分化过程中在糖基化终末产物(AGE-HSA)介导下Wnt经典通路β-catenin的变化.方法:体外组织块法和有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞,流式细胞仪进行干细胞表型分子鉴定后,根据不同刺激环境随机分为OS组(单纯成骨诱导对照组)、OSA组(成骨诱导液+10 μg/mL AGEs)、OSDKK-1组(成骨诱导液+100 μg/mL DKK-1)、OSA+ DKK-1组(成骨诱导液+ 10 μg/mL AGEs+ 100 ng/mL DKK-1)4组,并进行相应的诱导培养.诱导培养7d后,碱性磷酸酶染色检测ALP活性;RT-PCR检测Wnt经典通路基因3-catenin mRNA以及成骨相关基因Runx2、ALP mRNA的表达变化情况;Western Blot检测细胞核蛋白β-catenin和细胞总蛋白Runx2的表达变化情况.结果:纯化的人牙周膜干细胞各表型分子CD29、CD90、CD146、stro-l均阳性表达,ALP染色结果显示:OSA组颜色最浅,OSDKK-1组颜色最深,OSA+ DKK-1组颜色介于两者之间;RT-PCR及Western Blot结果显示:与OS组相比,OSDKK-1组β-catenin的表达水平明显降低,Runx2、ALP的表达水平明显升高(P＜0.05),表明DKK-1抑制了经典wnt通路,而使HPDLSCs的成骨能力增强;而OSA组β-catenin的表达水平明显升高,Runx2、ALP表达水平明显降低(P＜0.05),表明激活了经典wnt通路,而使HPDLSCs的成骨能力下降;当联合加入AGEs和DKK-1(OSA+ DKK-1组)时,成骨能力与OSDKK-1组相比明显降低,而与OSA组相比明显升高(P＜0.05).结论:在HPDLSCs成骨分化过程中,抑制经典wnt通路可以促进其骨向分化;而10 ng/mL的AGEs可通过激活wnt经典通路从而抑制其成骨分化.     

糖基化终末产物对牙周膜干细胞增殖及其Wnt经典信号通路相关基因表达的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)对人牙周膜干细胞(HPDLSC)增殖及其Wnt经典信号通路相关基因DKK-1、β-catenin表达的影响。方法:体外组织块法和有限稀释法克隆化培养HPDLSC,并与100μg/mL AGEs共同培养,通过细胞克隆形成率、细胞生长曲线观察AGEs对HPDLSC增殖能力的影响;RT-PCR和Western Blot检测实验组和对照组DKK-1、β-catenin mRNA以及核蛋白β-catenin的表达量。结果:经100μg/mL AGEs刺激的HPDLSC,其克隆形成率、增殖速度以及β-catenin mRNA和核蛋白β-catenin的表达量均明显低于对照组(P<0.05);而DKK-1 mRNA则明显高于对照组(P<0.05)。结论:AGEs能抑制HPDLSC的增殖及其Wnt经典信号通路。     

微小RNA-17在糖基化终末产物刺激下人牙周膜干细胞骨向分化过程中的调控作用

目的 检测微小RNA-17（mir-17）在糖基化终末产物（AGEs）刺激下人牙周膜干细胞（HPDLSCs）骨向分化过程中的表达,并分析其对该过程的影响。方法 体外组织块法和有限稀释法克隆化培养HPDLSCs。实时定量聚合酶链反应（real time PCR）检测实验组细胞在骨向分化过程中不同时间点mir-17的表达;采用细胞转染技术过表达和抑制mir-17的表达,real time PCR和Western blot分别检测转染前后其成骨基因mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果 成骨诱导3、7、14 d后,对照组和实验组mir-17的表达均下调,差异有统计学意义（P<0.05）。上调mir-17后,与对照组相比,实验组骨涎蛋白（BSP）、碱性磷酸酶（ALP）、Runt相关转录因子-2（Runx-2）mRNA表达水平以及Runx-2蛋白水平均明显降低;下调mir-17后,实验组BSP、ALP、Runx-2 mRNA表达水平以及Runx-2蛋白水平均高于对照组。结论 AGEs通过影响HPDLSCs骨向分化过程中mir-17的表达从而抑制了HPDLSCs的骨向分化。     

糖基化终末产物对人牙周膜干细胞增殖及相关基因HSG、cyclinD1表达的影响

目的:探讨糖基化终末产物(AGEs)对人牙周膜干细胞(HPDLSC)增殖能力以及增殖相关基因HSG、cyclinD1的影响。方法:体外组织块法和有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞;成骨、成脂诱导牙周膜细胞,对其进行干细胞鉴定;将培养出的牙周膜干细胞与不同浓度的AGEs 共培养,MTT检测不同浓度下牙周膜干细胞增殖的改变;实时定量聚合酶链反应(real time PCR)检测AGEs刺激后HSG、cyclin D1表达的改变。结果:牙周膜细胞成骨诱导21 d后茜素红染色出现钙化结节;成脂诱导21 d后油红O染色出现脂滴;MTT显示不同浓度的AGEs对HPDLSCs增殖能力的影响有所差别,高浓度(100 mg/L,200 mg/L)明显抑制HPDLSCs的增殖,差异有统计学意义(P<0.05),低浓度(1 mg/L,10 mg/L)对HPDLSCs的增殖能力影响不大,差异无统计学意义;Real time PCR结果显示:AGEs(100 mg/L)刺激3 d后HSG mRNA表达水平较对照组升高、cyclinD1 mRNA的表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:高浓度的AGEs能抑制人牙周膜干细胞的增殖并能改变HSG、cyclinD1 mRNA的表达。     

P物质与骨代谢关系的研究进展

P物质在骨代谢过程中起着重要作用，它在骨修复与重建过程中的作用逐渐成为人们研究的热点。作者重点就P物质在骨形成和骨吸收中作用的研究进展，尤其是在正畸过程中牙周组织的改建方面加以阐述，为进一步明确P物质在骨代谢过程中的作用机制提供理论依据     

一氧化氮在骨改建中的作用机制

随着对一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ,ＮＯ）生理机制的不断深入了解,对ＮＯ的研究成为医学各领域的研究热点。目前的研究证实骨组织细胞在受到各种炎性因子因素及机械应力的刺激后,将促进ＮＯ的生成,并通过自分泌和旁分泌旁式调节细胞的生理功能,在维持骨形态,在骨改建过程中起着重要的作用。     

一氧化氮在骨改建中作用的研究进展

一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）是一种毒性强、易扩散、不稳定、化学性质极其活泼、半衰期极短（３ｓ～５ｓ）的自由基。由源性ＮＯ是一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）以左型精氨酸（Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ，Ｌ－Ａｒｇ）为底物...     

血管内皮生长因子在骨代谢中的研究进展

血管内皮生长因子（VEGF）既是主要的血管形成因子，又是骨生长因子，现就VEGF与骨代谢关系的最新研究进展作一综述。     

糖酵解与骨代谢关系的研究进展

骨骼是一个动态器官,其不断通过成骨细胞介导的骨形成与破骨细胞介导的骨吸收进行骨重建,维持自身骨代谢动态平衡,保持其结构稳定。在成骨细胞与破骨细胞的生理活动中,葡萄糖源源不断地为其提供能量,保证骨代谢平衡稳定。近年来,葡萄糖代谢方式之一糖酵解被认为与骨代谢过程密切相关。糖酵解途径本身、相关酶与代谢产物均被证明参与成骨细胞与破骨细胞的分化与功能调节,影响骨代谢平衡。本文就糖酵解途径与骨代谢的关系进行综述,并期望对寻找骨代谢相关疾病潜在治疗靶点提供新的思路。     

糖基化终末产物对小鼠骨髓间充质干细胞增殖及相关基因P27、cyclinD1 的影响

目的:探讨糖基化终末产物(AGEs)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖能力以及相关基因P27、cyclinD1的影响。方法:全骨髓法培养小鼠骨髓间充质干细胞;成骨、成脂诱导骨髓间充质细胞,对其进行干细胞鉴定;将培养出的骨髓间充质干细胞与不同浓度的AGEs 共培养,MTT检测不同浓度下骨髓间充质干细胞增殖的改变;实时定量聚合酶链反应(Real time PCR)检测AGEs刺激后P27、cyclin D1表达的改变。结果:小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导21 d后茜素红染色出现钙化结节;成脂诱导21 d后油红O染色出现脂滴;MTT显示不同浓度的AGEs(10、50、100、200 mg/L)均能抑制BMSCs的增殖差异有统计学意义(P<0.05),且随着浓度的增加抑制越明显;Real time PCR结果显示:AGEs(50 mg/L)刺激3 d后P27 mRNA的表达水平较对照组升高,cyclinD1 mRNA的表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AGEs能抑制小鼠骨髓间充质干细胞的增殖并能改变P27 、cyclinD1 mRNA的表达。     

骨形成蛋白对破骨细胞的调节作用

骨形成蛋白与骨、软骨、肌腱、牙周组织、牙本质的形成有极为密切的关系,具有明确的诱导骨形成作用。但是,国外学者研究发现,骨形成蛋白对破骨细胞也具有正向作用,可以促进骨髓基质细胞和脾细胞等分化成为多核的破骨样细胞。本文就骨形成蛋白对破骨细胞调节作用的研究进展作一综述。