β-actin在无菌性前列腺炎大鼠模型中免疫抑制治疗前后的表达及意义

目的:检测β-aetin在大鼠慢性无菌性前列腺炎(nonbacterial chronic prostatitis,CAP)动物模型免疫抑制治疗前后的表达,探讨其与慢性无菌性前列腺炎发病机制的相关性.方法:成年Sprague-Dawley大鼠40只,随机分成4组:正常对照组(A),单纯造模组(B),造模后免疫抑制治疗组(C),造模后安慰剂治疗组(D).采用去势后苯甲酸雌二醇皮下注射30 d造模,成功复制出大鼠无菌性前列腺炎模型.采用免疫组化SP法分别检测β-actin在各组中的表达,并对检测结果进行统计学分析.结果:单纯造模组β-actin表达明显减弱,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05).经过环孢素A免疫抑制治疗后β-actin表达明显恢复,与单纯造模组相比有显著性差异(P<0.05).而安慰剂治疗组β-actin表达几近消失,染色面积为(0.22±0.31)%,与环孢素A治疗组相比均有显著性差异(P<0.01).结论:β-actin作为紧密连接中的关键性调节因子,在慢性无菌性前列腺炎的发病过程中可能具有重要的调节作用.     

17β-雌二醇对大鼠神经病理性疼痛阈值的影响

目的 探讨17β-雌二醇对神经病理性大鼠疼痛阈值的影响.方法 SD雌性大鼠50只,采用随机数字表法分5组,假手术组(分离暴露左侧坐骨神经但不结扎,注射生理盐水),其余4组建立坐骨神经慢性压榨损伤(CCI)模型,CCI组(注射生理盐水),雌二醇组(注射17β-雌二醇),拮抗剂组(注射AP-5),复合组(注射17β-雌二醇+ AP-5),每组10只.采用机械刺激缩足反射阈值(PWMT)检测大鼠的机械痛阈值,热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)检测大鼠的热痛阈值,免疫组织化学法和Western blot法测定脊髓背根神经节 N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDARl)蛋白的表达.结果 与假手术组比较,CCI组和雌二醇组大鼠PWMT 降低(P<0.05),PWTL缩短(P<0.05),NMDARl蛋白的表达显著增加(P< 0.05).与 CCI组比较,雌二醇组大鼠PWMT 降低(P<0.05),PWTL缩短(P<0.05),NMDARl蛋白的表达显著增加(P<0.05).结论 17β-雌二醇可以通过增加NMDARl的表达,降低神经病理性大鼠的疼痛阈值.     

异黄酮改构化合物F11对去势大鼠乳腺的影响

目的 探讨异黄酮改构化合物F11对去势大鼠乳腺的生物学效应.方法 选用雌性Wistar大鼠,制作去势模型分为生理盐水组、雌二醇组、F11组、假手术组,腹腔给药每日1次,连续给药12周,每4周测血清中雌二醇含量,12周后处死大鼠取乳腺组织观察乳腺组织形态学变化,免疫组化及Western blot检测PCNA、Erα、Erβ表达情况.结果 F11早期可使血清E2升高;减缓去势大鼠乳腺组织的萎缩;可上调Erβ及PCNA在去势大鼠乳腺组织中的表达.结论 F11有类似雌激素样作用,能有效缓解去势大鼠乳腺的萎缩,可能是通过上调Erβ实现的.     

戊酸雌二醇对去势大鼠阴道雌激素受体亚型α、β表达的影响

目的通过研究戊酸雌二醇对去势大鼠阴道雌激素受体（estrogen receptor,ER）亚型α、β表达的调节,探讨雌激素受体亚型与绝经期泌尿生殖道萎缩的相关性。方法4月龄SD雌性大鼠80只,分为正常组、假手术组、去势组、药物干预组,每组20只。药物组大鼠于术后4周每天戊酸雌二醇灌胃给药,其余3组给予等量生理盐水灌胃。8周后处死大鼠,分离摘取阴道进行ERα、ERβ免疫组织化学染色及mRNA半定量RT-PCR检测。结果①ERα、ERβ在正常阴道鳞状上皮细胞、基质纤维细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞核及细胞质中均有表达,以阴道鳞状上皮细胞表达最强,且ERβ较ERα表达弱（P〈0．05）。②去势组ERα较正常组、假手术组表达减弱（P〈0．05）,ERβ表达减弱更为明显（P〈0．01）。③药物干预组ERα表达较去势组明显增强（P〈0．05）,与正常组、假手术组比较无显著差异（P〉0．05）,ERβ表达无明显增强。结论ERα是大鼠阴道优势表达的雌激素受体亚型;去势后阴道ER亚型表达下调,以ERβ明显;戊酸雌二醇可明显上调去势大鼠阴道ERα的表达,但不上调ERβ的表达。     

建立大鼠慢性非细菌性前列炎模型两种方法的比较研究

目的：比较去势结合雌激素诱导法与自身免疫反应诱导法建立慢性非细菌性前列腺炎（CNP模型大鼠的生物学特性及稳定性。方法：去势激素组采用去势结合17β-雌二醇诱导法、自身免疫组分别采用40、20、10 mg/mL三种浓度前列腺蛋白匀浆制备CNP大鼠模型，采用病理学（HE染色）评价前列腺组织损伤程度，免疫比浊法测定免疫球蛋白IgA、IgM、IgG含量，ELISA法测定白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高敏-C反应蛋白（hs-CRP），电化学发光法测定睾酮（T）表达水平，应用上诉指标对两种模型方法进行比较。结果：与假手术组比较，取材前去势激素组和自身免疫组两种模型大鼠体质量均显著降低（P<0.01,P<0.01），两种模型大鼠前列腺组织病理显示腺体结构破坏，炎性细胞明显增多。去势激素组同自身免疫组比较，去势激素组前列腺组织病理变化和炎症病理评分、免疫指标IgA、IgM、IgG含量均具有显著差异（P<0.05,P<0.05,P<0.05），自身免疫组IL-1β、IL-10、TNF-α、hs-CRP、T水平...     

白细胞介素-1β在SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型中的表达及其意义

目的 通过构建雄性SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎(CNP)模型研究白细胞介素-1β(IL-1β)的表达,探讨IL-1β在CNP中的可能发挥的作用.方法 取3月龄雄性SD大鼠30只随机分为正常对照组和CNP模型组,每组15只.造模后通过HE染色观察两组大鼠前列腺组织炎症浸润情况,并应用Western blot法、免疫组化SABC法检测两组SD大鼠前列腺组织中IL-1β表达情况.结果 HE染色结果证实成功构建出SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型,Western blot法、免疫组化法检测都显示CNP模型组IL-1β的表达水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 IL-1β在SD大鼠CNP模型中表达水平增高,在前列腺炎症的发生发展过程中起着重要作用.     

肾炎四味片可减轻5/6肾切除大鼠的肾脏纤维化

目的 观察肾炎四味片对5/6肾切除大鼠肾组织核转录因子-kB(NF-kB)、转化生长因子-β1(TGF-31)表达的影响.方法 24只Wistar大鼠分成4组:假手术组、模型组、干预组、空白对照组.肾切除术后3d,各组予生理盐水2 mL灌胃,干预组、空白对照组加入肾炎四味片2.16 g/(kg·d)灌胃,术后第90天处死大鼠.Real-Time PCR和Western blot分别测定各组大鼠肾脏组织中NF-kB、TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平.免疫组化检测各组NF-kB、TGF-β1、ColⅢ 的表达.结果 与假手术组比较,模型组的NF-kB、TGF-31的mRNA和蛋白水平表达增强,差异具有统计学意义(P＜0.05),干预组高于假手术组(P＜0.05),低于模型组(P＜0.05);免疫组化结果类似.结论 肾炎四味片可能通过下调NF-kB、TGF-β1的mRNA和蛋白的表达发挥延缓肾脏纤维化的作用.     

白藜芦醇对急性心肌梗死大鼠核因子-κB信号通路表达的影响

目的探讨白藜芦醇对急性心肌梗死(AMI)大鼠核因子-κB(NF-κB)信号通路表达的干预作用。方法将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、AMI组和白藜芦醇组,每组10只;AMI和白藜芦醇组大鼠采用结扎大鼠左冠状动脉前降支法制备AMI模型,假手术组大鼠不结扎左冠状动脉前降支;术后第1天白藜芦醇组大鼠开始腹腔注射白藜芦醇10 mg·kg~(-1)·d~(-1),假手术组及AMI组大鼠分别注射等剂量生理盐水;每日1次,持续用药至术后4周。然后处死各组大鼠,取梗死区域的心肌组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测大鼠心肌组织中NF-κB、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、IκB激酶α(IKKα)蛋白及其mRNA的表达。结果 AMI组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKαmRNA表达显著高于假手术组(P<0.05),白藜芦醇组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKαmRNA表达显著低于AMI组(P<0.05),白藜芦醇组与假手术组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKαmRNA表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。AMI组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKα蛋白表达显著高于假手术组(P<0.05),白藜芦醇组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα和IKKα蛋白表达显著低于AMI组(P<0.05);白藜芦醇组大鼠心肌组织中NF-κB、IκBα蛋白表达显著高于假手术组(P<0.05),但2组大鼠心肌组织中IKKα蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白藜芦醇可以抑制AMI大鼠NF-κB信号通路表达情况,具有心脏保护效应。     

姜黄素对阿尔茨海默病模型大鼠海马区GSK3β蛋白表达的影响

目的 探讨姜黄素对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及海马区糖原合成酶激酶3β(GSK3β)蛋白表达的影响。方法 将60只SD雄性大鼠分为4组,即假手术组、Aβ模型组、低剂量姜黄素干预组和高剂量姜黄素干预组。假手术组注射生理盐水,模型组和干预组直接注射Aβ_1-42于大鼠海马区,姜黄素干预组分别采用剂量150、300mg/kg姜黄素给予大鼠连续灌胃30天。采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,比较GSK3β蛋白表达阳性细胞的单位面积和平均吸光度值,采用Western blot法检测GSK3β蛋白表达水平。结果 与假手术组、模型组比较,姜黄素干预组大鼠的逃避潜伏时间和穿越平台次数均有显著改善(P<0.05)。姜黄素干预组大鼠海马区GSK3β蛋白表达均明显减弱,其阳性面积单位和平均吸光度值均低于Aβ模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 姜黄素可明显改善阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力,抑制大鼠海马区GSK3β蛋白的表达,改善Aβ诱导的神经细胞损伤。     

脾虚1号方对功能性消化不良脾虚证大鼠胃体组织MLC蛋白与基因表达的影响

目的探讨功能性消化不良(FD)脾虚证大鼠胃体组织肌球蛋白轻链(MLC)蛋白与mRNA表达及脾虚1号方的干预作用。方法 60只7 d龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、FD脾虚证模型组(n=50)。正常组给予2%蔗糖溶液灌胃,FD脾虚证模型组给予0.1%蔗糖碘乙酰胺溶液灌胃,0.2 m L/(只·d),连续6 d。FD脾虚证模型组正常饲料喂养至6周龄后叠加改良小平台站立,连续14 d。造模结束后随机分为模型组、多潘立酮组、脾虚1号方低、中、高剂量组,各10只,连同正常组,分别给予蒸馏水10 m L/(kg·d)、多潘立酮3.125 mg/(kg·d)、脾虚1号方1.275、2.550、5.100 g/(kg·d),灌胃14 d。采用免疫组化、蛋白质印迹(Western blot)和RT-PCR方法检测胃体组织MLC蛋白及mRNA表达量。结果与正常组相比,免疫组化检测模型组大鼠胃体肌层MLC蛋白定位表达降低;Western blot检测模型组胃体组织MLC蛋白表达量降低;RT-PCR检测模型组大鼠胃体组织MLC mRNA表达量降低,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,免疫组化检测脾虚1号方低、中、高剂量组大鼠胃体肌层MLC蛋白定位表达增加,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);Western blot检测脾虚1号方中、高剂量组大鼠胃体MLC蛋白表达量增加,差异均有统计学意义(P0.01);RT-PCR检测脾虚1号方高剂量组MLC mRNA表达量升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论 FD脾虚证模型大鼠存在胃体组织MLC蛋白及基因表达的降低,而脾虚1号方能够上调MLC蛋白及基因的表达。     

不同比例浓度雌雄激素诱导下大鼠前列腺炎症反应模型的建立

  目的  建立不同比例浓度雌雄激素诱导下SD大鼠实验性前列腺炎动物模型。  方法  3～4月龄雄性SD大鼠53只,采用摘取双侧睾丸建立雄性大鼠去势模型。大鼠随机分为空白组、去势组和去势后不同比例浓度雌雄激素处理组,每组4只。处理组每日皮下注射双氢睾酮（dihydrotestosterone, DHT）及雌二醇（estradiol, E）,1月后采用断颈法处死各组大鼠,ELISA法检测各组大鼠血清DHT及E质量浓度;取前列腺标本,计算各组大鼠前列腺相对重量;对前列腺组织进行HE染色,光镜下观察前列腺组织结构变化以及前列腺炎症反应情况;免疫组织化学法检测大鼠前列腺组织中转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、白细胞介素 （Interleukin,IL）-6、-8 三种炎症因子的表达。  结果  大鼠前列腺组织HE染色结果显示,与空白组和去势组对比,E0.05+DHT0.5 mg/kg组、DHT0.15+E0.15 mg/kg组炎症加深程度明显（P<0.05）;但当DHT质量浓度超过0.5 mg/kg后炎症程度也无进一步加重。免疫组化染色结果显示,当外源性E质量浓度恒定,与空白组对比,E0.05+DHT0.15 mg/kg组、E0.05+DHT0.5 mg/kg组和E0.05+DHT1.5 mg/kg组TGF-β1、IL-8表达升高明显（P<0.05）;与去势组对比,E0.05+DHT0.15 mg/kg组和E0.05+DHT0.5 mg/kg组二者表达增加（P<0.05）;而当DHT质量浓度达到0.5 mg/kg后进一步提高DHT质量浓度,TGF-β1、IL-8表达无显著变化。此外,当外源性DHT质量浓度不变,与空白组和去势组对比,DHT0.15+E0.05 mg/kg组和DHT0.15+E0.5 mg/kg组TGF-β1、IL-6、IL-8表达增加明显（P<0.05）。  结论  去势联合不同比例雌雄激素可成功诱导SD大鼠前列腺炎症反应模型。     

RhoA/ROCK信号系统对血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉平滑肌细胞增殖和表型变化的影响

 目的 探讨RhoA/ROCK信号系统在血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖和表型变化中的作用机制。 方法 将20只Wistar大鼠按随机数字表法均分为模型组（用硅胶管包裹大鼠颈动脉1周,造成血管外膜的慢性炎性损伤）和对照组,取材后HE染色,分别观察2组血管形态学变化,采用RT-PCR和Western blot检测血管组织中SM α-actin 与ROCK2的表达。 结果 与对照组相比,模型组颈动脉血管外膜增厚,炎性细胞浸润,中膜平滑肌细胞增生,排列紊乱,VSMC中SM α-actin mRNA水平和蛋白表达水平均增高,ROCK2 mRNA水平与对照组相比无显著差异,蛋白表达水平均明显增高。 结论 RhoA/ROCK信号系统可能参与血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉VSMC增殖和表型变化的调控。     

自噬相关基因在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型中的表达及意义

目的 检测慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型中自噬相关基因表达的水平及时序变化,探讨自噬在CNP病程中的可能作用.方法 取3月龄雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组和2、4、6周CNP模型组,每组10只.HE染色观察各组前列腺组织炎性细胞浸润情况,采用Western blot、免疫组化SABC法检测各组前列腺组织中自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达.结果 HE染色结果提示成功构建大鼠CNP模型,Western blot法、免疫组化法检测显示各实验组LC3、Beclin-1蛋白的表达均高于正常对照组,并随时间的推移表达量逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 自噬相关基因可能在CNP的发病过程中发挥重要作用.     

电针对慢性非细菌性前列腺炎大鼠膀胱Cajal样间质细胞的影响

目的：探讨电针治疗慢性前列腺炎及其膀胱功能异常的机理。方法：大鼠分组制作免疫性慢性非细菌性前列腺炎模型,电针中膂俞和会阳,10日后观察前列腺组织病理学变化以及膀胱逼尿肌ICC样细胞检测。结果：电针后慢性前列腺炎大鼠前列腺炎性反应减轻。同时,膀胱ICC样细胞数量较模型组明显减少,IOD增加（P〈0.05）,细胞排列明显有序,相互间的联系明显加强。结论：慢性前列腺炎膀胱ICC样细胞数量和分布发生改变,电针在改善前列腺炎慢性症病理改变同时,可能通过影响膀胱ICC样细胞的结构和功能,而发挥调节膀胱功能的作用。     

血管平滑肌肌动蛋白α在移植心脏血管病变及纤维化中的作用

目的：探讨血管平滑肌肌动蛋白α（vascular smooth muscle α-actin, VSMA-α）表达变化在移植心脏血管病变及纤维化中的作用。方法：建立大鼠心脏移植模型,并将实验大鼠分为急性排斥组、慢性排斥组、同系移植组、正常心脏组。采用Masson和Van Gieson染色观察心肌的纤维化,计算血管狭窄的指数。免疫组织化学染色分析VSMA-α表达变化与心肌纤维化和血管病变的关系。结果：正常心脏组、同系移植组、急性排斥组、慢性排斥组心肌纤维化评分分别为0.00±0.00, 0.63±0.52,1.75±0.71和2.75±0.46,慢性排斥组心肌纤维化明显高于正常心脏及同系移植心脏(均P＜0.01)。而冠状动脉狭窄指数分别为0.08±0.02,0.09±0.04,0.12±0.05和62.86±17.18,其中慢性排斥组移植心脏血管较其它组明显狭窄（均P＜0.01）。慢性排斥组移植心脏的心肌细胞大量表达VSMA-α。 结论：血管平滑肌肌动蛋白α基因的重新激活及其蛋白的异位表达与移植心脏血管病变及心肌纤维化有关。     

心肌胶原蛋白和肌动蛋白对糖尿病心肌病变的研究

目的研究糖尿病大鼠不同病程心肌胶原蛋白和骨架蛋白含量的变化,阐明两者对糖尿病心肌病变发生的作用.方法制造糖尿病大鼠心肌模型随机分组.氯胺T法测定羟脯氨酸含量,代表心肌胶原总含量.心肌免疫组织化学染色测定心肌胶原蛋白(Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ)和心肌型α肌动蛋白(α-actin)及转化生长因子β1(TGF-β1)平均积分光密度(IOD).心肌病理改变的光镜和透射电镜观察.结果糖尿病痛程6个月组心肌胶原总含量明显高于病程3个月以内组(P＜0.01).病程3个月之后Ⅰ型胶原蛋白表达伴随TGF-β1的表达开始较健康鼠明显增加(P＜0.01).α-actin蛋白表达较健康鼠明显减少(P＜O.01).糖尿病鼠心肌横切面可见粗大胶原纤维相互连接成网状,排列紊乱,分布不匀.心肌细胞心肌型α-actin蛋白分布不均匀,着色呈浅黄色,心肌纵切面可见α-actin蛋白表达主要分布于心肌肌膜处.病程3个月后大鼠心肌细胞核皱缩,线粒体肿胀、模糊,闰盘不连续,α-actin蛋白表达明显减少,有糖原沉积现象.结论Ⅰ型心肌胶原蛋白呈现持续性增加是糖尿病鼠心肌纤维化的主要原因.心肌细胞核皱缩,线粒体肿胀、模糊,闰盘不连续,糖原沉积和心肌型actin表达减少是糖尿病心肌病病理基础.     

高脂和低雄激素对SD雄性大鼠阴茎COX-2表达的影响

目的通过建立高脂饮食和低雄激素水平SD大鼠模型,探讨高脂和低雄激素对SD雄性大鼠阴茎结构及其COX-2（环氧化酶-2）表达的影响。方法将10周龄SD大鼠随机分为6组：正常饮食对照组,正常饮食去势组,正常饮食去势＋激素替代治疗组,高脂饮食对照组,高脂饮食去势组,高脂饮食去势＋激素替代治疗组。10周后,检测各组大鼠体内雄激素水平,及其阴茎结构和海绵体中COX-2的表达。结果去势组大鼠体内雄激素水平明显下降,替代治疗组激素水平有所升高。高脂饮食喂养组中,阴茎结构破坏明显,海绵体中COX-2表达呈阳性。结论去势手术可以导致SD雄性大鼠体内雄激素水平低下的模型,低雄激素水平可导致阴茎海绵体结构损伤,高脂饮食大鼠组的COX-2表达阳性,提示高脂诱导低雄激素大鼠炎症激活。     

α1肾上腺素能受体亚型在慢性前列腺炎前列腺、后尿道及膀胱逼尿肌组织中的分布及其意义

目的 研究慢性前列腺炎(CP)患者的前列腺、后尿道和膀胱逼尿肌组织α1肾上腺素能受体(α1-AR)亚型的分布.方法 前列腺标本取自30例猝死于非前列腺疾痫的器官捐献者,年龄(26.3±4.5)岁.对前列腺外周带组织进行病理检查.运用实时荧光逆转录聚合酶链反应定量检测前列腺移行带、周围带、后尿道及膀胱逼尿肌组织中α1a-AR和α1b-AR的mRNA含量.结果 病理炎症组24例,正常组6例.炎症组的α1受体亚型在膀胱逼尿肌(1.56±0.12)和后尿道中(5.08±0.68)的表达相对于正常组(为1)大致呈上调趋势(P＜0.05);炎症组的α1受体亚型在前列腺外周带(0.30±0.11)及移行带中(0.75±0.11)的表达相对于正常组大致呈下调趋势(P＜0.05).结论 后尿道、膀胱逼尿肌α1受体亚型的表达异常可解释前列腺炎患者存在的多种尿流动力学改变.后尿道、膀胱逼尿肌和前列腺的α1受体的表达异常参与了CP的发生、发展.     

电化学介入辅助利湿清热汤灌注膀胱治疗慢性前列腺炎疗效观察

目的 探讨电化学介入辅助利湿清热汤灌注膀胱治疗Ⅱ型和ⅢA型慢性前列腺炎的临床疗效.方法 将未曾接受过经尿道电化学介入、确诊为Ⅱ型和ⅢA型的慢性前列腺炎100例门诊患者随机分成治疗组和对照组各50例,分别采用利湿清热汤和抗生素灌注膀胱配合经尿道电化学介入治疗,在治疗后第2、4、8周及6个月对比NIH-CPSI症状评分及实...