聚合酶链反应检测丙肝产妇乳汁丙型肝炎病毒

聚合酶链反应检测丙肝产妇乳汁丙型肝炎病毒上海第二医科大学瑞金医院临床病毒研究室（２０００２５）陆建春，陆志檬，张东华，仇德琪，王耆煌常州市妇产医院检验科郑亚芬聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术应用于丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶＲＮＡ）检测业已证明是诊断ＨＣＶ...     

逆转录－套式PCR检测血清中丙肝病毒RNA

利用与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组５＇非编码区保守序列同源的套式引物，建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，由于在引物设计中选择了最保守的区域且避开了与黄病毒属的同源序列，保证了ＰＣＲ检测的灵敏度和特异性。经逆转录和两轮ＰＣＲ扩增，可检出１×１０－３ｕｌ血清中的ＨＣＶＲＮＡ。研究了影响ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ检测的各种因素，并对ＲＮＡ分离及ＲＴ－ＰＣＲ反应体系进行了优化，在此基础上研制了ＨＣＶ的ＰＣＲ检测试剂盒。     

逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA

逆转录ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒ＲＮＡ王捷，杨太成，江悦华，王晓怀（广州军区总医院医学实验科，５１００１０）丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是单股正链ＲＮＡ病毒，流行病学研究表明，大约９０％的输血后肝炎均由ＨＣＶ引起，原发性肝癌的发生也与ＨＣＶ感染相关［１］。目前...     

标本冻融对PCR检测HCV RNA结果的影响

标本冻融对ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ结果的影响满昌军周均启毕金剑（济宁市传染病医院，山东济宁２７２１３１）关键词丙型肝炎病毒检测影响因素血液中ＨＣＶＲＮＡ浓度很低，标本保存或处理不当容易使ＨＣＶＲＮＡ水平降低而导致假阴性结果。我们用ＲＴ－ＲＣＲ检测冻融前...     

二重RT—PCR同时检测HGV与HCV RNA

庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）具有相近的传播途径与类似的检测方法，本文建立了二重ＲＴ－ＰＣＲ法，用于同时检测ＨＧＶ与ＨＣＶ病毒核酸，其扩增产物分别为６０９ｂｐ与２５７ｂｐ在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的均能安全分离，ＨＧＶ产物经测序显示与报道的核酸序列同源性为８９．２％～９２．６％，该法具较好的批间重复性，二重ＰＣＲ法减轻了实验人员的操作强度，可降低测定费用近５０％，７６例样本检测显示     

输血后急性丙型肝炎患者抗-HCV和病毒血症观察

输血后急性丙型肝炎患者抗－ＨＣＶ和病毒血症观察４３００７１湖北医科大学附属第二医院左学兰骆名其许友芝第２代ＥＬＩＳＡ法（ＥＬＩＳＡⅡ）检测丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ，已常规应用于临床，为了估价这些血清学和分...     

亚甲蓝与可见光联合作用对血浆中病毒核酸的影响

用ＲＴ—ＰＣＲ方法检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，以了解亚甲蓝与可见光联合作用对ＨＣＶ ＲＮＡ的影响。结果，向含ＨＣＶ血浆中加１μｍｏｌ／Ｌ亚甲蓝，经可见光（３ ０００ Ｌｕｘ）照射１５ ｍｉｎ或３０ ｍｉｎ，ＨＣＶ ＲＮＡ含量随照射时间延长而减少；仅加亚甲蓝不经光照者，与阳性对照者基本相同。说明仅甲亚蓝对ＨＣＶ ＲＮＡ基本无损伤作用，结合可见光照射时才可。     

PCR与ELISA检测HCV感染的比较

ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ检测ＨＣＶ感染的比较北京市海军总医院（１０００３７）韩善桥，关淑珍，陈菡丙型肝炎病毒（ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣＶｉｒｕｓ，ＨＣＶ）是１９８９年由美国Ｃｈｉｒｏｎ公司的研究人员首次克隆的单股正链ＲＮＡ病毒，它可以经输血、输注血制品、静脉吸...     

血液病患者输血与庚型肝炎病毒感染的研究

目的：了解血液病患者输血后的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染情况。方法：对６３例血液病患者采用ＲＴＰＣＲ方法检测ＨＧＶＲＮＡ、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，应用ＥＬＩＳＡ方法检测抗ＨＧＶ、ＨＢｓＡｇ。结果：ＨＧＶＲＮＡ阳性率为７．９％，抗ＨＧＶ阳性率６．３％；ＨＣＶＲＮＡ阳性率为４６．０％。ＨＧＶ感染通常伴有ＨＣＶ感染及丙氨酸转氨酶升高。ＨＧＶ感染与输血量有关，与血液病种类无关。结论：血液病输血可引起ＨＣＶ、ＨＧＶ的传播     

＂套式＂PCR检测丙型肝炎病毒

取临床上检测乙肝ＨＢｓＡｇ阳性之血清标本，用＂套式＂ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ分别检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染情况，结果显示，２０份血清标本用ＥＬＬＳＡ检测仅１例阳性，而用＂套式＂ＰＣＲ有６例阳性。     

江门市120例静脉毒瘾者HBV,HCV,HGV感染状况调查分析

目的：了解静脉毒瘾者乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）及庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的感染状况。方法：对广东省江门市１２０例静脉毒产瘾者血浆ＨＢＶ,ＨＣＶ和ＨＧＶ的标记物进行检测,采用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ,抗ＨＢｃＡｂ,抗ＨＢｓＡｂ,抗ＨＣＶ抗体;逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果：１２０例静脉毒瘾者中ＨＢｓＡｇ转阳１３例（１０．８３％）,抗ＨＢｓＡｂ     

TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用

用ＴｔｈＤＮＡ聚合酶行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＶＣ）５’端非编码序列，对２６２例肝炎患者血清进行ＨＣＶＲＮＡ测定，结果ＨＣＶＲＮＡ阳性者５３例，阳性率２０．２％。凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗ＨＣＶＩｇＧ，其中３０例测到抗ＨＣＶ，阳性重叠率５６％（３０／５３）；ＨＣＶＲＮＡ阳性中的１５例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录。套式聚合酶链反应检测对照，１４例阳性，符合率达９３．３％（１４／１５）。ＴｔｈＤＮＡ聚合酶用于ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ５’端非编码序列片段具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点。     

丙型肝炎病毒不同基因区的聚合酶链反应扩增

目的探讨提高聚合酶链反应（ＰＣＲ）对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）病毒血症的检出率和对变异较大区域的扩增效率的方法。方法分别以ＨＣＶ基因组５＇端非编码区（５＇ＵＴＲ）、非结构基因４区（ＮＳ４）及ＮＳ５ｂ区的引物检测ＨＣＶ，并比较双退火温度与单一退火温度对ＨＣＶ基因扩增效率的影响。结果ＨＣＶ不同基因区（５′ＵＴＲ、ＮＳ４、ＮＳ５ｂ）引物的ＰＣＲ扩增阳性率分别为９２％、６２％、５９％。以双退火温度扩增ＮＳ４区与ＮＳ５ｂ区基因，扩增阳性率分别提高到７７％与７９％。将血清按原血清、１０－１～１０－１０系列稀释后检测，发现２份血清单退火温度ＰＣＲ的检出水平分别为１０－５与１０－７，双退火温度ＰＣＲ检出水平则分别提高至１０－８与１０－９稀释血清。结论５′ＵＴＲ引物对ＨＣＶＲＮＡ的检出率明显高于ＮＳ４区与ＮＳ５ｂ区引物。双退火温度ＰＣＲ可显著提高ＨＣＶＲＮＡ检出的敏感性     

逆转录套式ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒感染者ＨＣＶ ＲＮＡ

目的　探讨人血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ与血清ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体联合检测对丙型肝炎的诊断价值。方法对以ＥＬＩＳＡ方法检测所得的４６例ＨＣＶ—ＩｇＧ阳性的标本用逆转录套式聚合酶锭反应（ＲＴ—ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ。结果血清中有１７例ＨＣＶ　ＲＮＡ阳性和６例ＨＣＶ—ＩｇＭ阳性，而ＰＢＭＣ中有１９例ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为丙型肝炎的初筛诊断，ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为ＨＣＶ近期感染的指标，但二者均不能准确反映病毒在体内的存在情况，而套式ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ可直接反映ＨＣＶ在体内的活动情况，其中ＰＢＭＣ中检测ＨＣＶＲＮＡ的阳性率高于血清，提示ＨＣＶ可能在ＰＢＭＣ中潜伏乃至复制。     

TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用

用ＴｔｈＤＮＡ聚合酶行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＶＣ）５′端非编码序列，对２６２例肝炎患者血清进行ＨＣＶＲＮＡ测定，结果ＨＣＶＲＮＡ阳性者５３例，阳性率２０．２％，凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗ＨＣＶＩｇＧ，其中３０例测到抗ＨＣＶ，阳性重叠率５６％（３０／５３）；ＨＣＶ ＲＮＡ阳性中的１５例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录－套式聚合酶链反应检测对照，１４例阳性，符合率     

酶免疫法检测丙型肝炎病毒RNA的聚合酶链反应产物

目的建立一灵敏、快速的检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ逆转录－套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物的酶免疫法。方法对第２次ＰＣＲ所用的引物进行双标记，使扩增产物同时被修饰有生物素和荧光素（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ）成分，再经过固相的链亲合素进行捕获、辣根过氧化物酶标记的抗－ｆｌｕｏｒｅｓ－ｃｅｉｎ反应后显色测定。结果所建立的方法与常规聚丙烯酰胺凝胶电泳法相比灵敏、快速、准确，结果判断客观，重复性也较好；所测结果可反映ＰＣＲ产物量的多少，但不能准确表示模板量的大小。结论建立的方法可取代电泳法而成为ＨＣＶＲＮＡ常规ＰＣＲ反应产物的检测技术。     

聚合酶链反应检出石蜡包埋肝癌组织的乙型肝炎病毒DNA

传统免疫组织化学方法及分子杂交检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ灵敏度低，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法能否检测到石蜡肝癌组织中的ＨＢＶＤＮＡ报道尚不多见。为此，采用ＨＢＶ与丙型肝炎病毒二合一ＰＣＲ试剂盒对１７例肝癌患者的石蜡包埋癌组织进行了ＨＢＶＤＮＡ检测，结果７例阳性，阳性率为４１％，而８例非肝癌对照患者则均阴性。组织ＨＢＶＤＮＡ结果与血清ＨＢｓＡｇ比较显示，该试剂盒有较高的检出率及符合率。这为今后进一步研究大量保存的肝病石蜡包埋组织的ＨＢＶ感染提供了一个可靠灵敏的方法，也为研究其他病毒感染的石蜡包埋材料提供了参考。     

丙型肝炎病毒抗体检测1144例结果分析

丙型肝炎病毒抗体检测１１４４例结果分析河北省沧州地区医院（０６１００１）刘凤茹，王秀文，刘可魂，马翠丽为了解本地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染情况，我们检测了１１４４例血清标本中丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ），并对结果进行了分析。一、检测对象健康献血员...     

丙型肝炎病毒的母婴传播

丙型肝炎病毒的母婴传播广东省三水市人民医院血库（５２８１００）李爱华，陈锐强自从丙型肝炎特异检测方法建立后，国外已有丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）母婴传播的报道，但国内报道甚少，我们曾对采集脐血的质控检验中发现抗－ＨＣＶ阳性血液，再进一步对母婴抗－ＨＣＶ检测...     

孕妇丙型、戊型肝炎病毒抗体检测结果及探讨

孕妇丙型、戊型肝炎病毒抗体检测结果及探讨浙医大附属妇产科医院（杭州３１０００６）黄雅萍本文对孕妇血清用ＥＬＩＳＡ检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗体和戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）抗体，以了解本地区孕妇ＨＣＶ和ＨＥＶ感染状况及孕妇乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和Ｈ...