抗TG独特型抗体对小鼠脾细胞抗体分泌的免疫调节

用鼠抗人甲状腺球蛋白(TG)单克隆抗体(18A_1,IgG_1)免疫家兔,抗血清流穿正常小鼠 Ig 与无关单抗(MIg-Lp-1-32)亲和层析柱,吸除抗同种型、同种异型抗体。经 ELISA 竞争抑制、中和抑制试验证明制备出抗 TG 独特型抗体(ATG-Ab_2)。ATG-Ab_2与 TG 免疫小鼠的脾细胞体外作用18h,能特异地抑制小鼠脾细胞分泌抗 TG,而对经 Fn 免疫的小鼠脾细胞分泌抗 Fn 无影响,表明其具有下调节免疫的作用。     

抗抗总黄曲霉毒素单抗F(ab’)2多克隆抗体的制备及特性

目的:以抗总黄曲霉毒素单抗2G2株F(ab’)2片段作为免疫原制备抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体。方法:制备抗总黄曲霉毒素单抗2G2株F(ab’)2片段,分别用F(ab’)2片段和F(ab’)2-KLH免疫日本大耳白兔,制备抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体。采用ELISA检测该抗体替代黄曲霉毒素B1(AFB1)的情况,并分析与其他单克隆抗体的交叉反应情况。用该多克隆抗体免疫BALB/C小鼠,采用间接非竞争ELISA检测小鼠血清,鉴定该抗体的亚型。结果:由2G2株F(ab’)2片段所得的抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体纯化后,替代游离AFB1达到20%、50%和80%竞争抑制时的质量浓度分别为1、4和25mg/L,分别相当于0.47、2.74和16.00μg/L游离AFB1;该抗体替代AFB1包被抗原达到20%、50%和80%竞争抑制时的质量浓度分别为1、4和19mg/L,分别相当于0.33、1.35和5.45μg/L游离AFB1。小鼠生物鉴定显示该多克隆抗体为Ab2β型。结论:成功制备了抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体,为研制AFB1无毒检测试剂盒提供了依据。     

苦参、甘草、枸杞子抗过敏作用机制的研究

为阐明苦参、甘草、枸把子的抗过敏机制。本文观察了3种中药对小鼠IgE抗体合成及其T细胞亚群的影响。采用被动皮肤过敏试验检测血清IgE水平；间接空斑形成细胞法检测抗体彤成细胞；问接免疫荧光法检测淋巴结．T11／Ts比值。结果甘草明显抑制小鼠lgE水平及抗体形成细胞，T11／Ts比值倒置，枸杞子抑制小鼠血清IgE，T11/Ts比值下降，但对抗体形成细胞无显著抑制作用。苦参对小鼠血清IgE、抗体形成细胞及T11／Ts比值均无明显影响。     

测定血清DNP抗体-乳胶凝集试验法(简报)

系统性红斑狼疮(简称SLE)病人及其它胶原病患者血清中存在一种脱氧核糖核蛋白抗体(DNP抗体,Deoxyribonucleoproteid antibody)。此抗体是形成红红斑狼疮细胞(简称LE细胞)的活性物质,即LE因子。本文以乳胶微粒为载体,吸附DNP抗原,制成DNP乳胶凝集试剂,在玻片上与病人血清反应,肉眼观察有凝集颗粒出现为阳性,即判断为DNP抗体的存在,无凝集即为阴性。     

草苁蓉对小鼠抗体分泌细胞的影响

用改进的Kappler溶血空斑试验微孔法检测了草苁蓉乙醇提取物对小鼠抗体分泌细胞的影响。结果表明,用药组小鼠脾细胞对绵羊红细胞的IgM空斑形成细胞(PFC)数比对照组明显增加(P<0.01),在47～375mg/(kg·d)剂量范围内,随着剂量的增加,PFC数也增加,二者呈正相关(r=0.951)。证明草苁蓉可增强小鼠抗体分泌细胞的功能,改进后的方法比原法更简单、快速,重复性好,适合大量标本的检测。     

移植前诱导抗独特型抗体对小鼠皮肤排斥反应的抑制作用

目的　探讨抗独特型抗体诱导对异品系小鼠皮肤移植排斥反应的影响.方法　以C57BL/6小鼠脾细胞免疫BALB/c小鼠制备抗同种异品系抗体(Ab1).将Ab1与KLH交联后,免疫BALB/c小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体(Ab2),并以之为受体,观察Ab2对小鼠皮肤移植排斥反应的影响.结果　Ab1交联KLH加弗氏佐剂免疫可有效地诱导抗独特型抗体(Ab2)产生.与对照组相比较,Ab2诱导组小鼠移植物存活时间明显延长.结论　移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型抗体,可对移植排斥反应产生有效的抑制作用移植前诱导抗独特型抗体对小鼠皮肤排斥…     

Monoclonal anti-idiotype antibody bearing the internal image of nasopharyngeal carcinoma associated antigen

目的　制备和鉴定具有鼻咽癌相关抗原内影像的抗独特型单克隆抗体 (Ab2 )。方法　用鼻咽癌单抗 (Ab1)免疫小鼠 ,免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2 / 0融合获得杂交瘤细胞系。用SandwichELISA和结合抑制试验筛选阳性克隆。为进一步证实Ab2是否具有鼻咽癌相关抗原的内影像 ,用Ab2免疫小鼠获得抗血清 ,以ELISA和竞争抑制试验检测Ab3。用迟发性变态反应和T细胞增殖试验检测Ab2诱导的细胞免疫反应。结果　选用两株抗鼻咽癌单抗FC2、HNL5 (Ab1)为免疫原 ,制备两株抗相应Ab1独特型的抗独特型抗体 2H4和5D3(Ab2 )。 2H4、5D3能分别与FC2、HNL5特异性结合 ,并能抑制相应Ab1与靶细胞HNE2的反应 ,诱导产生能与相应Ab1竞争结合靶抗原的抗抗独特型抗体 (Ab3)。并能诱发特异性迟发型超敏反应 (DTH)和细胞增殖反应。结论　抗独特型抗体 2H4、5D3具有鼻咽癌相关抗原的内影像 (Ab2 β) ,能模拟鼻咽癌相关抗原诱导体液和细胞免疫反应。     

固相反向间接血凝试验检测抗-HBs的抗独特型抗体

目的建立固相反向间接血凝试验检测抗 HBs的抗独特型抗体的方法。方法用羊抗人IgG包被聚苯乙烯微孔板 (V型 ) ,捕捉血清中的抗 HBs的抗独特型抗体 (IgG) ,再加入抗 HBs致敏的血球 ,观察其凝集结果。结果对正常人血清标本 116例以及HBsAg阳性血清标本 10 2例进行了抗 HBs的抗独特型抗体检测 ,在HBsAg阳性血清标本中共检出抗 HBs的抗独特型抗体阳性标本 2 4例 ,阳性率为 2 3 7%。结论该方法具有简便、快速 ,又不需要特殊设备等优点。     

慢性淋巴细胞性白血病独特型McAb的研究

作者通过细胞融合技术获得10株抗独特型McAb,并对抗独特型McAb与各类免疫球蛋白及细胞反应性进行了检测。 作者以纯化的慢性B淋巴细胞性白血病(B-CLL)患者血清IgM免疫经耐受原刺激的BALB/c小鼠,通过两次细胞融合和克隆化,建立分泌抗独特型McAb的杂交瘤细胞株。该McAb属小鼠IgM和IgG亚类,经ELISA和间接混合ELISA夹心法证明,其特异性针对同源患者血清IgM,而对正常人血清及一系列骨髓瘤     

人单克隆抗独特型抗体诱导动物产生有中和活性的抗HFRSV抗体

在建立稳定分泌具有肾综合征出血热病毒(HFRSV)抗原内影像的抗独特型(αId)人单抗(Ab_2β)的基础上,用纯化的αId人单抗免疫6只BALB/c小鼠和2只大耳白兔,均有效地诱导产生特异性的抗HFRSV抗体(Ab_3)(IFAT),抗体滴度随加强免疫次数的增加而增高。αId诱导的抗HFRSV抗体与HFRSV野鼠型76/118株和家鼠型L99株均起反应,其中免疫小鼠血清具有一定效价的血凝抑制活性和中和活性。从而进一     

应激引起小鼠体液免疫功能增强作用机理的初步探讨

本研究用溶血空斑试验作为反映体液免疫功能的指标,探讨应激对小鼠体液免疫功能的影响及肾上腺素能与胆硷能活性物质在其中的作用.结果发现:①在应激过程中小鼠对绵羊红细胞的抗体生成反应呈现先增强、后抑制的双相变化.30min应激组的空斑形成细胞数(PFC值)明显高于对照组的PFC值(P<0.01,n=7),120min应激组的PFC值则明显低于对照组的PFC值(P<0.05,n=5).②皮下注射肾     

抗DNP、Sm、ds-DNA抗体检测在系统性红斑狼疮诊断中的应用

目的: 探讨抗DNP抗体、抗Sm抗体、抗ds-DNA抗体联合检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法: 用免疫印迹法检测抗Sm抗体,免疫斑点法检测抗ds-DNA抗体,胶乳免疫法检测抗DNP抗体。结果: 57例SLE患者,抗DNP抗体阳性率为73.7%,抗Sm抗体阳性率33.3%,抗ds-DNA抗体阳性率61.4%,三者联合检测阳性率达94.7%。结论: 抗DNP抗体、抗Sm抗体、抗ds-DNA抗体联合检测可提高对SLE诊断的阳性率;对SLE病情的追踪和预后判定有重要作用;用抗DNP抗体检测代替LEC检测可直接检测血清中的狼疮因子,弥补了因实验条件所致LEC检测阳性率低等缺陷。     

小细胞肺癌抗独特型疫苗功能的试验研究

目的探讨小细胞肺癌(SLCL)抗独特型抗体3F6和其单链抗体(3F6SeFv)诱导体液和细胞免疫应答的能力,以证明其作为抗SCLC疫苗的可行性。方法3F6和3F6SeFv(Ab2)免疫BALB/c小鼠获得抗血清,以ELISA和Western blot方法分别检测抗血清中Ab3结合SCLC细胞膜表面特异抗原(NCI-H128抗原)的能力,用竞争Western blot检测Ab3与2F7竞争结合NCI-H128抗原的能力。以迟发型超敏反应(DTH反应)和小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验检测3F6及3F6SeFv诱发细胞免疫应答的潜能。结果ELISA和Western blot方法均证明,3F6和3F6SeFv免疫同系小鼠所产生的Ab3能特异的与NCI-H128抗原相结合,与对照血清相比,差异有统计学意义(P<0.001),且有很强的与2F7(Ab1)竞争结合靶抗原的能力。在DTH反应中,3F6和3F6SeFv所致小鼠足垫肿胀的程度均明显高于对照组(P<0.001)。小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应试验证明,用3F6和3F6SeFv免疫的小鼠脾脏淋巴细胞对靶细胞的再次刺激有明显的增殖反应,与阴性肿瘤细胞对照组和阴性抗体对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗独特型抗体3F6和3F6ScFv均有模拟SCLC细胞膜表面特异抗原的能力,成功诱导了相应的体液和细胞免疫应答,可作为抗SCLC疫苗进行深入研究。     

卵巢癌抗独特型微抗体主动免疫治疗卵巢癌动物实验

目的用模拟人卵巢癌抗原并有满意免疫原性的抗独特型微抗体进行临床前动物实验研究.方法将已构建的抗独特型微抗体融合基因在大肠杆菌进行表达,用Western blot、竞争抑制ELISA进行微抗体活性测定.20只人淋巴细胞免疫功能重建的荷卵巢癌腹腔瘤SCID小鼠分2组,10只用微抗体免疫后取血采用间接ELISA检测Ab3.观察小鼠腹腔积液生成时间、生存期,取脾做流式细胞分析CD4+、CD8+.结果在宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功诱导表达出微抗体,Western blot结果表明微抗体可同时与COC166-9(6B11的一抗)及羊抗人的IgG1反应.竞争抑制ELISA表明微抗体可模拟原始抗原与一抗结合.微抗体免疫小鼠后可诱导产生Ab3,在末次免疫14 d时最高,持续6周降至对照组水平;CD4+/CD8+在末次免疫13 d达最高值.对照组和微抗体治疗组小鼠分别在(37.7±5.5)d和(48.6±14.3)d长出血性腹腔积液(P=0.04);两组小鼠生存期分别为(42.5±1.8)d和(59.4±16.8)d(P=0.011).结论微抗体保留了6B11scFv和人IgG的双重免疫学活性,达到了部分人源化的目的,并有满意的免疫原性,可诱导小鼠产生特异性体液免疫反应,抑制荷瘤小鼠腹腔积液的生成,延长生存期,或许将来可作为卵巢癌疫苗用于临床.     

麻风杆菌特异性抗原酚糖脂-Ⅰ的单克隆抗独特型抗体的制备及初步鉴定

作者将BALB/c鼠造成对人IgM分子的耐受状态后,再用从麻风病患者血清中分离的IgM型抗酚糖脂-Ⅰ(PGL-Ⅰ)抗体免疫,并经细胞融合,获得持续分泌单克隆抗独特型抗体(McAb_2)的细胞株4C_4。经鉴定,该McAb_2与兔抗PGL-Ⅰ抗体(Ab_1)的结合能被NT-O-BSA(PGL-Ⅰ的人工类似物)竞争抑制;McAb_2还能阻断纯化人Ab_1与NT-O-BSA的结合。以上均表明该McAb_2为具有PGL-Ⅰ抗原内影像作用的单克隆抗独特型抗体;McAb_2模拟抗原试验结果显示,该McAb_2具有代替PGL-Ⅰ用于麻风血清学诊断的可能性。     

固相反向间接血凝试验检测抗-HBS的抗独特型抗体

本文建立了固相反向间接血凝检测抗-HBS 的抗独特型抗体的方法。该方法是用羊抗人 IgG 包被聚苯乙稀微孔板(V型),捕捉血清中的抗-HBS 的抗独特型抗体(IgG),再加抗-HBS 致敏的血球,观察其凝集结果。用本法对正常人血清际本116例以及 HBsAg 阳性血清标本102例进行了抗-HBS 的抗独特型抗体检测。在 HBsAg 阳性血清标本中共检出抗-HBS 的抗独特型抗体阳型标本24例,阳性率为23.7％。实验表明,该方法具有简便、准确、快速等优点,又不需要特殊设备,适合于各级医疗单位。     

具有鼻咽癌相关抗原内影像的抗独特型抗体研究

用抗人鼻咽癌单抗FC2 ,HNL5 (Ab1)分别免疫Balb/C小鼠 ,制备了两株抗独特型抗体 2H4和 5D3(Ab2 )。结果显示 :2H4和 5D3分别与FC2和HNL5特异性结合 ,抑制Ab1与靶细胞的反应 ,诱导产生能与相应Ab1竞争结合靶抗原的抗抗独特型抗体 (Ab3) ;并能诱发特异性迟发型超敏反应 (DTH)和细胞增殖反应。表明 2H4和 5D3具有鼻咽癌相关抗原的内影像 (Ab2 β) ,能模拟鼻咽癌相关抗原诱导体液和细胞免疫反应。     

IL-2与TCRγ独特型DNA疫苗联合诱导小鼠特异性免疫反应

目的:观察白细胞介素 2 (IL- 2)与TCRγ独特型DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗肿瘤独特型免疫反应。方法: 24只 6~8周的健康纯系雄性BALB/c小鼠随机均分为 3组,在小鼠双侧股四头肌肌内注射 2. 5g/L盐酸布比卡因,每侧 50μl, 1次 /d, 5d后分组免疫。各小鼠分别于第 1周、2周、4周各免疫 1次,共 3次。①A组: 每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 100μg; ②B组:每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 TCRγ100μg;②C组:每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 -TCRγ100μg及IL 2 5μg。于末次免疫接种后第 5d将每组小鼠随机选 2只处死,分离出胫前肌,RT PCR法检测重组质粒在小鼠骨骼肌中的mRNA表达;间接免疫荧光法检测小鼠血清中抗体生成情况。结果:在pcDNA3. 1 TCRγ组及pcDNA3. 1- TCRγ+IL- 2组小鼠中用RT PCR法均检测到了重组质粒在肌肉中的mRNA表达。pcDNA3. 1- TCRγ组及pcDNA3. 1 -TCRγ+IL 2组小鼠血清中均产生了特异性抗独特型抗体。在第 6周时,pcDNA3. 1 -TCRγ组小鼠抗体滴度最高达 1160;pcDNA3. 1 TCRγ+IL 2组小鼠抗体的滴度最高达 1640, 2组差异有统计学意义 (P< 0. 01 )。结论:TCRγ表达载体pcDNA3. 1 -TCRγ可以诱导小鼠产生特异性抗淋巴瘤细胞独特型抗体;应用IL -2免疫佐剂可使TCRγ独特型DNA疫苗     

湖南省2000年医药卫生科研进展

一、基础医学研究 1.鼻咽癌抗独特型抗体的制备及主动免疫机制研究:中南大学湘雅医学院研究人员根据Jerne免疫网络理论,首先用小鼠杂交瘤单克隆抗体技术,以鼻咽癌细胞株为免疫原,制备了一系列抗鼻咽癌的单抗(Ab1)。再用与钥孔(虫戚)血兰素的交联物抗体为免疫原和小鼠杂交瘤技术制备了作用与Ab1的V区的抗独特型抗体(Ab2),并证实其中某些Ab2具有鼻咽癌相关抗原的内影像(Ab2β),以此抗体(Ab2)免疫小鼠,诱导与鼻咽癌细胞发生特     

抗体依赖性细胞对曼氏吸虫的杀伤作用

<正> 感染寄生虫后,不同时期以不同抗体参与抗体依赖性细胞介导的细胞毒活性(简称ADCC)反应,这种反应涉及到IgG、IgE等抗体。本文就IgG、IgG_2α、IgE介导的嗜酸性粒细胞、巨噬胞细对曼氏血吸虫的粘附和细胞毒作用做综述。一、IgE介导的巨噬细胞毒作用 (一) 血吸虫感染时IgE的变化: Sodum和Gore最先提出在血吸虫感染时IgE参与机体的免疫反应,证明在不同动物模型中IgE和血吸虫感染有关系。观察156例曼氏血吸虫患者中,77.5％的病人IgE水平增高,其中21.8％病人血清IgE浓度超过500mg/L,在大鼠感染血吸虫后,血清IgE总量增加,抗血吸虫特异性IgE也增加。治愈后IgE总