CX3CLl、CX3CRl在胃癌及癌旁组织中的表达研究

目的：探讨CX3CLl、CX3CRl在胃癌组织及癌旁组织中的表达及其意义。方法：收集30例胃癌患者手术切除的癌组织及对应癌旁组织,用ELISA和westernblot法分别检测标本中CX3CLl及CX3CRl的蛋白水平。结果：ELISA法显示CX3CLl在胃癌组织中的表达水平高于对应癌旁组织（P〈0．05）,westernblot法显示CX3CRl蛋白在胃癌组织中的表达水平高于对应癌旁组织（P〈0．05）。结论：胃癌组织中CX3CLl、CX3CRl的高表达可能与胃癌的发生发展密切相关。     

5-羟色胺4受体激动剂对糖尿病小鼠结肠黏膜巨噬细胞极化的影响

目的研究5-羟色胺4受体（5-hydroxytryptamine 4 receptor, 5-HT4R）激动剂对糖尿病结肠黏膜巨噬细胞极化的影响。方法使用链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）建立小鼠1型糖尿病模型,使用5-HT4R激动剂RS67333进行治疗干预,实验动物随机分为3组,即非糖尿病组、糖尿病对照组和糖尿病给药组。通过免疫荧光方法验证巨噬细胞标记物F4/80和iba1在CX3CR1-GFP+细胞中的表达;通过激光共聚焦显微镜观察CX3CR1-GFP+细胞形态和数目分析结肠黏膜巨噬细胞的活化数量;通过RNAscope技术检测精氨酸酶1（arginase 1, Arg1）和一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）的表达和分布变化。结果免疫荧光结果显示F4/80和iba1免疫阳性的细胞与CX3CR1-GFP+的细胞基本共定位。与非糖尿病小鼠相比,STZ诱导的1型糖尿病模型小鼠结肠黏膜层活化的巨噬细胞数目增多（P<0.001）,且M1型巨噬细胞产物iNOS在黏膜层腔侧表达增加（P<0.001）,而M2型巨噬细胞产物Arg1在黏膜固有层表达下降（P<0.001）;与糖尿病对照组相比,给予5-HT4R激动剂可以抑制活化的巨噬细胞数目（P<0.001）,结肠黏膜iNOS的表达上调（P<0.01）和Arg1的表达下调（P<0.05）。 结论5-HT4R激动剂可以抑制糖尿病小鼠结肠黏膜巨噬细胞向M1型极化。     

FKN/CX3CR1信号途径抗凋亡作用的研究进展

不规则趋化因子(fractalkine,FKN)又称为CX3CL1,是CX3C家族的唯一成员,它以膜结合型和可溶型两种活性形式存在。FKN在人体内皮细胞以及大多数器官上均有表达,如心、肝和脑等。近年来发现FKN不仅涉及到趋化、粘附和炎症反应,也参与某些细胞的增殖和凋亡。FKN作为抗凋亡因子,通过其唯一受体CX3CR1,在各种疾病模型中发挥抗凋亡作用,它们介导的生存信号参与调控正常的生理病理过程,且与疾病的发生发展密切相关。FKN/CX3CR1可望成为疾病预防治疗的新靶点。     

辛伐他汀对急性冠脉综合症患者单核细胞CX3CR1表达的影响

目的 观察辛伐他汀对CX3CR1表达的影响,探讨他汀类药物可能的非调脂抗动脉粥样硬化作用.方法 63例冠状动脉造影确诊为急性冠脉综合征的患者按照处理因素不同分为对照组、10-7～10-5mol/L辛伐他汀不同浓度组和作用4、8、12 h不同时间组,用荧光定量RT-PCR技术检测各组患者中外周血单核细胞CX3CR1的表达情况.结果 不同浓度组中CX3CR1的表达均低于正常对照组(P<0.05),不同作用时间组中CX3CR1的表达均低于正常对照组(P<0.01).结论 辛伐他汀可降低CX3CR1的表达且呈浓度和时间依赖性,从而发挥抗炎及稳定斑块的作用.     

Effective chemotherapy induce apoptosis in vivo in patients with leukemia

Ｓｏｍｅｓｔｕｄｉｅｓｉｎｖｉｔｒｏｓｕｇｇｅｓｔｔｈａｔａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｓｔｈｅｍｏｄｅｏｆｃｅｌｌｄｅａｔｈｉｎｌｅｕｋｅｍｉａｃｅｌｌｓ ,1 3 　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｄｒｕｇｓｋｉｌｌｌｅｕｋｅｍｉａｃｅｌｌｓｔｈｒｏｕｇｈｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ 4 ,5　Ｂｌｏｃｋｉｎｇｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｓｉｇｎａｌｉｎｇｃｏｕｌｄｂｅａｎｏｔｈｅｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｆｏｒｍｕｌｔｉ ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ 6　Ｈｏｗｅｖｅｒｌｉｔｔｌｅｉｓｋｎｏｗｎａｂｏｕｔａｐｏｐｔｏｓ…     

Action of inhibitor released from neutrophils and leukemic blast cells.

The concept that polymorphonuclear leukocytes, or neutrophils, play a role in feedback control of granulopoiesis has been supported by the finding in bone marrow culture studies that mature neutrophils inhibited formation of granulocytic colonies. The study described in this paper was done to investigate the mechanisms involved. With the use of a modified assay it was found that mature neutrophils released factors that reduced the proliferation of colony-forming cells in cultures stimulated by cell-free colony-stimulating factor. In myeloproliferative and myelodysplastic disorders the amount of inhibitor released by the neutrophils varied greatly. Leukemic blast cells also released inhibitor, and in some cases the amount released per cell was greater than the amount released from normal mature neutrophils. The inhibitory factors released from the neutrophils differed from those previously described in the literature in terms of mode of action and apparent molecular size.     

新生期小鼠多次氯胺酮麻醉对远期认知功能的影响及其机制研究

目的研究多次氯胺酮麻醉是否影响新生期小鼠学龄期及成年后认知功能,并进一步探讨小胶质细胞及其特异性受体CX3CR1相关信号通路在该过程中发挥的作用。方法将出生后6 d(P6)的同窝昆明小鼠随机分为对照组和氯胺酮组,每组20只。氯胺酮组连续5 d腹腔注射氯胺酮80 mg/(kg·d),对照组注射同等体积生理盐水;给药1个月和2个月后分别行Morris水迷宫实验,检测学龄期及成年后两组小鼠的空间学习记忆能力;观察海马齿状回小胶质细胞数的变化,检测双侧海马组织CX3CR1蛋白相对表达量。结果氯胺酮组与对照组学龄期和成年小鼠训练前第1天、第2天、第3天、第4天、第5天逃避潜伏期比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点学龄期和成年小鼠逃避潜伏期有差异(F=34.213和41.527,均P=0.000)。(2)氯胺酮组与对照组学龄期和成年小鼠逃避潜伏期有差异(F=19.856和21.365,均P=0.000);氯胺酮组与对照组相比逃避潜伏期较长(P <0.05)。(3)两组学龄期和成年小鼠逃避潜伏期变化趋势有差异(F=12.436和17.548,均P=0.000)。对照组学龄期...     

脑白质高信号患者血清CX3CL1水平与认知功能障碍的关系

目的 探究脑白质高信号(white matter hyperintensity, WMH)患者血清趋化因子C-X3-C配体1(chemokine C-X3-C-motif ligand 1, CX3CL1),也被称作分形趋化因子(fractalkine, Fkn)的水平与认知功能障碍的相关性。方法 纳入2020年3月至2022年8月于新乡医学院第一附属医院神经内科影像学表现有WMH的脑小血管病(cerebral small vessel disease, CSVD)住院患者,收集患者一般临床资料、头颅核磁常规序列、生化指标,测定CX3CL1水平及评估简易认知量表(Mini-mental State Examination, MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment, MoCA),分析血清CX3CL1水平与WMH及认知功能的相关性。结果 共纳入152例受试者,根据MMSE结果分为认知功能正常组(77例)及认知功能障碍组(75例),平均年龄分别为(59.60±8.84)岁和(62.91±7.99)岁。相关性分析结果显示CX3CL1水平与视...     

CX3CR1参与NF-κB在脊髓水平调控大鼠炎性痛的研究

目的：观察鞘内注射核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC) 对单关节炎（monoarthritis,MA）模型大鼠痛阈值和脊髓中CX3C趋化因子受体-1（CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)表达的影响。方法：48只成年雄性Sprague-Dawley大鼠鞘内置管成功后,随机分为4组,即sham组（假手术组）、MA组（单关节炎组）、PDTC预处理组及PDTC后处理组,每组大鼠均为12只。鞘内置管5 d后制作MA模型。Sham组：左侧踝关节腔内注射50 μL生理盐水,鞘内注射10 μL生理盐水;MA组：左侧踝关节腔内注射50 μL完全弗氏佐剂（complete Freund’s adjuvant,CFA）,鞘内注射10 μL生理盐水;PDTC预处理组：鞘内注射10 μL PDTC (100 μmol/L),30 min后左侧踝关节腔内注射50 μL CFA;PDTC后处理组：左侧踝关节腔内注射50 μL CFA,30 min后鞘内注射10 μL PDTC (100 μmol/L)。于术前及术后不同时间点测定痛阈值,用免疫组织化学法观察L5脊髓节段小胶质细胞的表达情况,并在鞘内注射后第1,3,5,7天取L4-L5脊髓膨大节段检测NF-κB mRNA和CX3CR1 mRNA的表达。结果：与MA组相比,sham组、PDTC预处理组及PDTC后处理组的大鼠同侧后肢各时间点痛阈值明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与MA组相比,PDTC预处理组及PDTC后处理组大鼠的L5脊髓节段的小胶质细胞数量明显减少,脊髓中CX3CR1 mRNA和NF-κB mRNA的表达均明显减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：鞘内注射NF-κB抑制剂PDTC可以缓解CFA所致MA模型大鼠的痛觉异常。其机制可能与NF-κB信号通路通过调节CX3CR1的表达而参与炎性痛的发生、发展有关。     

右美托咪定可减轻大鼠胫骨骨折手术所致的术后认知功能障碍

目的研究右美托咪定对大鼠胫骨骨折手术所致术后认知功能障碍的影响。方法第1阶段：选择16只雄性SD大鼠，随机 分为对照组和胫骨骨折组，于胫骨骨折手术造模后1、3、5、7 d分别测定两组大鼠行为学指标及海马区CX3CL1蛋白及CX3CL1 mRNA的表达变化。第2阶段：选择24只雄性SD大鼠，随机分为对照组、胫骨骨折组和胫骨骨折+CX3CL1中和抗体组。分别 测定各组大鼠行为学指标及海马区CX3CL1蛋白的表达变化。第3阶段：选择24只雄性SD大鼠，随机分为对照组、胫骨骨折组 及胫骨骨折+Dex组。分别测定各组大鼠行为学指标及海马区CX3CL1蛋白和CX3CL1mRNA的表达变化。结果造模后1、3、 5、7 d，胫骨骨折组大鼠的新异臂探索时间明显低于对照组（P<0.05）；胫骨骨折组大鼠海马区CX3CL1蛋白和CX3CL1 mRNA 的表达明显低于对照组（P<0.05）；胫骨骨折+CX3CL1 中和抗体组大鼠新异臂探索时间明显低于胫骨骨折组；胫骨骨折+ CX3CL1中和抗体组大鼠海马区CX3CL1蛋白的表达明显低于胫骨骨折组；Dex组大鼠新异臂探索时间明显长于胫骨骨折组 （P<0.05）；Dex组大鼠海马区CX3CL1蛋白及CX3CL1 mRNA的表达明显高于胫骨骨折组（P<0.05）。结论Dex可以通过提高 CX3CL1的表达减轻大鼠胫骨骨折手术所致的术后认知功能障碍。     

趋化因子受体CX3CR1基因T280M多态性在云南彝族人群中的分布

目的 研究云南省晋宁县彝族人群CX3CR1基因T280M多态性分布的情况, 为探讨CX3CR1基因相关性疾病的发病机制奠定基础.方法 采用PCR-RFLP技术对居住在云南省晋宁县268例彝族健康个体的CX3CR1基因T280M多态性进行分析, 计算MM、MT、TT基因型频率和M、T等位基因频率, 与其他人群该位点多态性进行比较.结果 云南省晋宁县彝族CX3CR1基因的MM、MT、TT基因型频率分别为1.12%、11.94%和86.94%, M和T等位基因频率分别为7.09%和92.91%.与汉族、维吾尔族、希腊、法国、塞尔维亚、印度、意大利和高加索人群比较, 无论是基因型分布还是基因频率差异有统计学意义 (P<0.05) ;但与景颇族比较中差异无统计学意义 (P>0.05) .结论 CX3CR1基因T280M多态性分布存在民族、种族差异, 且种族间的差异大于民族间的差异.     

天然自身抗体在清除凋亡细胞中的作用研究

凋亡每时每刻都在发生,对凋亡细胞的清除是免疫系统的基本功能,其中天然抗体发挥了重要的作用。天然抗体可以通过Fab部分结合凋亡细胞表面的LPC,LPC由PLA2水解凋亡细胞膜表面的PC形成。这种抗原抗体的结合可以激活补体C1q,进一步激活经典补体激活途径,于是补体C3b/bi在凋亡细胞表面沉积。巨噬细胞表面的CR3和CR4两个补体受体可以结合C3b/bi,完成对凋亡细胞的吞噬。所以天然抗体参与了凋亡细胞的吞噬,在避免凋亡细胞导致的自身免疫疾病的发生中可能具有重要的作用。     

NF-κB上调神经病理性疼痛大鼠脊髓CX3CR1表达

目的：观察鞘内注射核转录因子-κB（NF-κB）抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）对坐骨神经慢性挤压伤（CCI）大鼠痛阈和脊髓CX3CR1受体表达的影响.方法：60只成年雄性SD大鼠,体质量250～300g,鞘内置管成功后,随机分5组（n=12）：假手术＋生理盐水（sham组）、CCI＋生理盐水（CCI组）、假手术＋PDTC1000pmol/d（PDTC＋sham组）、CCI＋PDTC100pmol/d（PDTC＋CCI组1）、CCI＋PDTC1000pmol/d（PDTC＋CCI组2）.鞘内置管5d后开始鞘内输注生理盐水或不同剂量的PDTC,鞘内注射1d后建立大鼠CCI神经病理性疼痛模型或者假手术模型,分别于术前及术后不同时点测定5组大鼠的痛敏值,并在鞘内注射4d后取脊髓腰膨大部进行Western Blot实验检测CX3CR1的表达.结果：CCI组与sham组比较大鼠术后各时点痛敏阈值明显下降,并在术后第3日降至最低点（P〈0.05）,脊髓CX3CR1的表达明显升高（P〈0.01）.PDTC＋CCI组与CCI组比较,术后各时点大鼠痛敏阈值增高（P〈0.05）,脊髓CX3CR1的表达下降（P〈0.01）.结论：鞘内给予PDTC可减轻CCI大鼠的病理性疼痛,并抑制脊髓CX3CR1的表达.活化的NF-κB可能通过上调脊髓CX3CR1表达而参与了神经病理性疼痛的发生.     

膜微粒抑制缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞的凋亡

目的：明确心肌梗死后血液来源的膜微粒（MPs）抑制缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞（BMSCs）凋亡的作用并探讨其相关机制。方法：利用结扎SD大鼠左冠脉前降支的方法来制作急性心肌梗死模型,然后提取血液中的MPs。提取培养SD大鼠的BMSCs,并建立缺氧无血清的干细胞凋亡模型。分别按照不同浓度（即0.5 μg/mL、1 μg/mL和2 μg/mL）的MPs对干细胞进行预处理,分别利用Hoechst染色、Tunel检测、AnnexinV/PI流式细胞学、Western blot检测caspase-3来揭示MPs抑制BMSCs的凋亡作用,并用Akt信号通路的通路抑制剂AZD5363来初步探讨其抗凋亡的相关机制。结果：大鼠心肌梗死后血液来源的MPs能够有效抑制缺氧无血清诱导的BMSCs的凋亡（P＜0.01）;并且其抗凋亡作用呈现出浓度依赖性,0.5 μg/mL 浓度的MPs亦能达到显著抗凋亡作用（P＜0.05）。其机制主要是通过激活Akt信号通路来实现。结论：心肌梗死后血液来源的MPs能有效抑制缺氧无血清诱导的BMSCs的凋亡。     

SiRNA-HDAC5 对非肥胖型糖尿病鼠组蛋白修饰异常的干预及其治疗作用

目的：通过小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)干预非肥胖型糖尿病(non-obese diabetic，NOD)鼠脾 CD4+ T细胞组蛋白去乙酰化酶5(histone deactylase 5，HDAC5)的表达，检测免疫、炎症及肾功能相关指标，评估siRNAHDAC5 对NOD鼠的治疗作用，探讨HDAC5与糖尿病肾病之间的关系。方法：随机将NOD鼠分为3组，在12周龄时分 别于尾静脉注射siRNA-HDAC5，siRNA-Control或生理盐水，于18，24和30周龄取样本检测，以血糖仪检测各组NOD 鼠血糖，ELISA检测尿白蛋白排泄率及血清细胞因子IL-1，IL-6，IL-18和TNF-α水平。实时定量PCR检测各组NOD鼠 CD4+ T细胞CD11a，CCR5以及CX3CR1 转录水平，Western印迹检测NOD鼠脾脏CD4+ T细胞HDAC5蛋白水平。结果： 与未干预对照组相比，HDAC5干预组小鼠血糖和尿白蛋白排泄率均显著降低，血清IL-1，IL-6，IL-18及TNF-α细胞因 子水平下降，脾CD4+ T细胞CD11a，CCR5以及CX3CR1明显降低。结论：阻断NOD鼠的HDAC5表达能减缓糖尿病鼠 肾损伤的发生和发展。     

毛酸浆内酯诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制研究

[目的] 探讨毛酸浆活性成分毛酸浆内酯（PPB）诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制。[方法] 采用噻唑蓝法（MTT法）检测PPB对MCF-7细胞及人外周血单核细胞（hPBMC）增殖的影响;克隆形成实验考察PPB对MCF-7细胞克隆形成的影响;MTT法考察泛半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）抑制剂Z-VAD-fmk对PPB诱导MCF-7细胞死亡的作用;Western Blot法考察PPB处理后凋亡相关蛋白PARP、Caspase-7/8/9、Cytochrome c、Bax、Bcl-2、Fas及FADD的表达水平。[结果] PPB时间、剂量依赖性抑制MCF-7细胞生长,且对hPBMC无明显细胞毒性;PPB呈剂量依赖性地抑制MCF-7细胞克隆形成;PPB处理后,凋亡特征性蛋白PARP、原型Caspase-7蛋白表达量显著减少,而Cleaved PARP、Cleaved Caspase-7显著增加;同时内源性凋亡途径相关蛋白Bax、Cleaved Caspase-9、Cytochrome c表达量显著上调,而Bcl-2及Caspase-9原型形式显著下调。外源性凋亡相关蛋白Fas、Cleaved Caspase-8及FADD表达量上调,而Caspase-8原型形式显著下调;加入Z-VAD-fmk可显著逆转PPB诱导的MCF-7细胞死亡。[结论] 毛酸浆活性成分PPB可以诱导MCF-7细胞发生内源性和外源性凋亡。     

参芪扶正注射液对溃疡性结肠炎患者大肠黏膜CX3CR1的影响

目的：观察参芪扶正注射液联合柳氮磺吡啶（SASP）治疗溃疡性结肠炎（UC）的临床治疗效果,并探讨参芪扶正注射液对UC患者大肠黏膜CX3CR1的影响。方法选择2012年1月至2014年6月在该院就诊的轻中度活动期UC患者50例,将其分为观察组、对照组,另设健康组15例,观察组予以参芪扶正注射液联合SASP治疗,对照组予以SASP治疗,健康组为空白对照。观察所有UC患者治疗前和治疗2周后的改良Mayo评分结果,并观察健康组及观察组、对照组患者治疗前和治疗后2周同一病变部位大肠黏膜CX3CR1的表达情况。结果 UC患者治疗前大肠黏膜CX3CR1总阳性率为88．37％,健康组大肠黏膜CX3CR1总阳性率为20．00％,两者比较差异有统计学意义（Z＝－2．689,P＜0．01）;治疗后2周,观察组大肠黏膜CX3CR1的表达和改良 Mayo 评分结果均明显低于对照组（P＜0．05）;观察组临床综合疗效明显优于对照组（Z＝－2．085,P＜0．05）。结论参芪扶正注射液联合SASP治疗UC疗效明显优于单纯口服SASP ,参芪扶正注射液可能通过抑制大肠黏膜CX3CR1的表达而参与了UC的治疗。     

Altered gene expression reveals molecular mechanisms underlying oridonin-induced apoptosis of multiple myeloma LP-1 cells

Objective: To investigate the effect of oridonin on proliferation and invasion of human multiple myeloma LP-1 cells and the underlying mechanism. Methods: LP-1 cells in culture medium in vitro were treated with oridonin at the different concentration. Cell proliferation was measured by Microwave Theory and Techniques (MTT) assay and cell apoptotic rate was detected by flow cytometry. Morphology of cell apoptosis was observed by transmission electron microscope. Expressions of Bax, Bcl-2, Caspase-3, NF-κB as well as I-κB mRNA were detected by real-time PCR. Results: The MTT assays and flow cytometry revealed that oridonin could inhibit the growth of LP-1 cells and cause apoptosis significantly; the suppression was both in time- and dose-dependent manner. Marked morphological changes of cell apoptosis were found under a transmission electron microscope after the cells were treated with oridonin at 25 μmol/L for 24 h. Along with the apoptotic process, Bcl-2, Caspase-3,NF-κB gene expressions were down-regulated (P<0.05). On the contrast, the Bax and I-κB gene expressions were up-regulated (P<0.05). Conclusion: Oridonin could inhibit the proliferation of LP-1 cells via inducing apoptosis. We concluded that oridonin induces apoptosis in LP-1 cells via activation of caspase-3 as well as down-regulation of Bcl-2 and up-regulation of Bax expression. The results suggested that oridonin could induce apoptosis of LP-1 cells through mitochondria- and caspase3-dependent pathways. Meanwhile, the inhibition of NF-κB and the activation of I-κB indicate pro-apoptotic stimuli. In one word, oridonin might be an important potential anti-myeloma reagent.     

七叶皂苷钠抑制人白血病Jurkat细胞增殖的机制研究

目的 研究七叶皂苷钠抑制人白血病Jurkat细胞增殖的作用及其机制。方法 MTT法分析七叶皂苷钠对Jurkat细胞增殖的抑制作用,Hoechst 33258染色、FITC-Annexin V/PI双染、DNA Ladder、流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blotting法分析凋亡相关蛋白变化。结果 七叶皂苷钠呈质量浓度和时间相关方式抑制Jurkat细胞增殖;经七叶皂苷钠处理后的Jurkat细胞出现凋亡的形态学特征、DNA条带,Annexin V⁺/PI^?细胞（早期凋亡细胞）显著增加;七叶皂苷钠可活化Jurkat细胞中Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3,引起PARP的切割,并减少Bcl-2蛋白的表达。结论 七叶皂苷钠能有效地通过诱导细胞凋亡抑制Jurkat细胞增殖。     

KLF4过表达对热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡的影响

目的:探讨Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)对热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡的影响.方法:构建pcDNA3.1-KLF4真核表达质粒,采用脂质体转染法建立KLF4过表达Raw264.7巨噬细胞株,用免疫印迹法检测KLF4的过表达,采用热应激(42 ℃)处理稳定表达小鼠KLF4基因的Raw264.7巨噬细胞1 h,37 ℃恢复12 h,采用流式细胞术、Hoechest33258染色及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡.结果:获得了KLF4过表达的Raw264.7细胞株,流式细胞术结果显示,转空载体组和KLF4过表达组细胞凋亡百分率较热应激前均升高,但与转空载体组相比较KLF4过表达组升高更明显;荧光染色可见细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学改变;KLF4过表达细胞琼脂糖凝胶电泳能检测到明显的DNA"梯状条带".结论:KLF4可以促进热应激所致Raw264.7巨噬细胞凋亡.