基于相关性分析的山楂炮制过程气味变化机制研究

该文研究山楂炮制过程气味变化与5-羟甲基糠醛(5-HMF)的相关性,探讨气味变化机制。取净山楂炮制成山楂炭过程中的不同样品,采用电子鼻获取其气味传感器响应值,运用统计质量控制法(SQC)客观描述山楂炮制过程气味的变化;高效液相色谱法(HPLC)测定样品中5-HMF的含量;采用相关性分析法分析二者相关性。实验结果表明,建立的SQC模型显示出山楂炒制过程气味变化呈一定的规律性;5-HMF的含量先升后降;相关性分析显示山楂炮制过程气味变化与5-HMF呈显著性相关(P<0.05)。山楂炮制过程气味变化与5-HMF含量变化有关,糖降解反应及美拉德反应可能是山楂炮制过程气味变化的作用机制之一。     

焦栀子炮制过程中饮片色泽变化与美拉德反应的相关性分析

利用视觉分析仪测定焦栀子炮制过程样品的色度空间参数,分析焦栀子炮制过程颜色变化规律,并测定美拉德反应相关成分总还原糖、总氨基酸、5-HMF(5-羟甲基糠醛)的含量变化情况,利用SPSS 24.0软件对数据进行Pearson相关及线性回归分析。实验结果显示,焦栀子炮制过程样品颜色客观化表达与焦栀子传统主观颜色判断基本相符;焦栀子炮制过程中总还原糖、总氨基酸含量均呈下降趋势,5-HMF含量呈上升趋势,符合美拉德反应规律;Pearson相关性分析结果显示焦栀子炮制过程样品色度空间参数L~*(明度值)、a~*(红绿色值)、b~*(黄蓝色值)、E~*ab(总色值)与总还原糖、总氨基酸、5-HMF含量均具有极显著相关性(P0.01),其中L~*,a~*,b~*,E~*ab与总还原糖含量和总氨基酸含量呈极显著正相关,与5-HMF含量呈极显著负相关;线性回归分析结果也表明,二者相关性较大。该研究通过建立焦栀子炮制过程颜色变化与美拉德反应物的对应关系,不仅可以为焦栀子主观颜色的客观数字化分析提供依据,也可为从新的角度阐释焦栀子炮制机制提供参考。     

基于颜色及成分动态变化的山楂炮制机理初探

目的研究山楂炮制过程颜色、化学成分动态变化规律,试探讨其炮制机理。方法取山楂炮制过程不同样品,利用机器视觉系统获取样品图像,提取其颜色特征值,运用统计质量控制法(SQC)客观描述山楂炮制过程颜色动态变化;高效液相色谱法(HPLC)测定样品中枸橼酸和5-羟甲基糠醛(5-HMF)的量,并测定水溶性提取液的A420(在420 nm处的吸光度);采用相关性分析法分析相关性。结果建立的SQC模型显示出山楂炮制过程颜色变化呈一定的规律性;枸橼酸量总体呈下降趋势,5-HMF量及A420总体呈增加趋势;相关性分析显示颜色变化与枸橼酸量、5-HMF量及A420呈显著相关。结论颜色作为山楂炮制过程控制指标具有一定的科学性;美拉德反应和焦糖化反应可能是山楂炮制过程的机理之一。     

基于HPLC-MS及网络药理学探讨熟地黄炮制过程与美拉德反应的相关性

目的:基于HPLC-MS法探讨九蒸九晒熟地黄炮制过程中与美拉德反应相关化学成分的变化及炮制辅料黄酒对其的影响,同时借助网络药理学探讨熟地黄炮制过程中美拉德反应产物对血液流变及止血作用影响。方法:对清蒸-九蒸九晒熟地黄及酒蒸-九蒸九晒熟地黄样品进行HPLC-MS测定及主成分分析,通过多级质谱离子碎片对各化学成分进行鉴定;运用网络药理学构建"化合物-靶点-基因"网络,基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)进行通路富集分析。结果:共鉴定出19种与美拉德反应相关的化学成分。随着蒸晒次数的增加,清蒸法和酒蒸法制熟地黄样品中部分成分的含量降低,蜜二糖及葡萄糖含量呈先增加后降低的趋势,5-HMF含量呈增加趋势。主成分分析结果显示,随着蒸晒次数的增加,清蒸法和酒蒸法制熟地黄样品均沿着PC1轴变化;酒蒸法制熟地黄样品在主成分分析得分图中的位置较离散。网络药理学研究结果表明,熟地黄发挥改变血液流变及止血功能的化合物多为美拉德反应产物。结论:熟地黄九蒸九晒的炮制过程中,以第5次蒸晒效果为最佳,而炮制辅料黄酒可能会加速美拉德反应的进程,美拉德反应产物是熟地黄发挥改变血液流变及止血的主要作用物质。     

不同炮制程度牡丹皮炭中5-羟甲基糠醛含量的变化

本研究将在不同的炒炭条件下,检测5-羟甲基糠醛（5-HMF）的含量变化,反映不同炮制程度对5-HMF含量变化的影响,为揭示牡丹皮炭的炮制机制提供依据。     

不同产地当归炮制前后多糖与新产生成分5-羟甲基糠醛和5-羟基麦芽酚含量变化规律性研究

目的:研究加热炮制对不同来源当归药材中多糖和炮制过程中新产生成分5-羟甲基糠醛(5-HMF)和5-羟基麦芽酚(DDMP)含量的影响,揭示当归炮制前后物质基础变化规律的关联性。方法:采用苯酚-硫酸比色法测定炮制前后当归中多糖含量。高效液相色谱法测定5-HMF和DDMP的含量,HPLC色谱条件:色谱柱为DiamonsilTM(钻石)C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(5∶95),检测波长为286 nm。结果:14批不同来源当归多糖含量均在10%以上,加热炮制后多糖含量均降低,但降低程度不同,并会生成5-HMF和DDMP两个新的化学成分。14批炮制品中5-HMF含量为0.382%¹.153%,并且5-HMF与DDMP峰面积比值差异较大。野生当归多糖含量最高,炮制后多糖含量下降最显著,而且生成的5-HMF含量最高。结论:当归加热炮制过程中化学成分发生了量变和质变。该研究为揭示当归炮制后药理活性变化与化学成分变化的相关性提供了实验依据。     

女贞子炮制前后5-羟甲基糠醛的含量变化

目的 研究女贞子炮制前后5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl furfural,5-HMF)的含量变化.方法 制备不同炮制条件的女贞子,采用HPLC法测定女贞子生品及炮制品中5-HMF的含量.结果 女贞子生品未检测到5-HMF,炮制后产生5-HMF,不同炮制品中的含量依次为:酒炖品＞清蒸品＞酒蒸品,且随蒸制时间延长含量增加.结论 首次建立了HPLC测定女贞子中5-HMF含量的方法,该法稳定可靠,可用于其质量控制;蒸制方法和蒸制时间均对5-HMF的含量变化有影响,这种改变是否与炮制增效有关,值得进一步研究.     

地黄不同工艺炮制过程中主要活性成分的变化规律研究

目的:研究地黄在常压一次蒸制工艺和"九蒸九晒"工艺炮制过程中主要成分的变化规律,并比较两者之间的差异。方法:采用高效液相色谱法测定地黄不同工艺炮制品中梓醇、毛蕊花糖苷、地黄苷A、5-羟甲基糠醛(5-HMF)和葡萄糖的含量。结果:在常压一次蒸制和"九蒸九晒"工艺过程中,随着炮制程度的加深,梓醇、地黄苷A和毛蕊花糖苷的含量下降幅度较大,5-HMF和葡萄糖的含量逐渐增加,且不同炮制工艺会使熟地黄中主要成分含量有着不同程度的改变。结论:常压一次蒸制16 h熟地黄与"九蒸九晒"熟地黄在主要成分含量上有很大差异,炮制过程中增量成分5-HMF可以作为评价地黄炮制质量的一个辅助指标。     

地黄炭炮制终点及其炮制机理研究

目的:确定地黄炭的炮制终点,探讨其炮制机理。方法:180℃炒制不同时间,测定饮片体积、失重率、水溶性浸出物含量及其提取液的pH值和A405(在405 nm处的吸收度),采用HPLC法测定梓醇和5-羟甲基糠醛(HMF)含量。结果:炒制过程中,样品质量、水溶性浸出物和梓醇含量持续下降,饮片体积、A405和HMF含量先升后降,pH值前期无明显变化,后期逐渐上升。样品达到传统炮制标准时,A405和HMF均处于最高水平。结论:炒制180 s,烟雾由黄转青,失重20%时,饮片符合传统炮制标准;美拉德反应和焦糖化反应可能是地黄炭的炮制机理之一。     

炮制对山茱萸有效成分含量的影响

目的:探索炮制对山茱萸有效成分含量的影响。方法:按照2015年版《中国药典》酒蒸法制备酒萸肉,应用HPLC法同时测定山茱萸生品及炮制品中5-羟甲基糠醛(5-HMF)、莫诺苷、马钱苷的含量,以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长240 nm;并采用DNS法测定还原糖的含量。结果:山茱萸经酒蒸后,新生成了5-HMF,酒萸肉中莫诺苷、马钱苷、还原糖的含量较生品分别减少了5.9%、3.9%和11.7%。结论:酒蒸工艺对山茱萸中有效成分的含量具有不同程度的影响,生成5-HMF,而莫诺苷、马钱苷、还原糖的含量均有不同程度的降低。     

山茱萸提取物抗肿瘤作用及机制探讨

目的:研究山茱萸提取物的抗肿瘤作用及其作用机制。方法:取生长良好接种10~14 d的Lewis肺癌C57BL小鼠,制备Lewis肺癌细胞,通过噻唑蓝(MTT)法检测山茱萸提取物对癌细胞的抑制情况,流式细胞仪检测山茱萸提取物对细胞周期和细胞凋亡的影响;激光共聚焦显微镜检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)及p53蛋白表达;用健康C57BL小鼠腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,接种成功后按山茱萸提取物100,200,400 mg·kg~(-1)剂量ig给药2周,检测小鼠体内瘤的质量、肺转移灶数;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定小鼠血清中癌胚抗原的含量。结果:与空白组比较,山茱萸提取物可明显抑制肿瘤细胞的增殖(P0.05),山茱萸提取物对Lewis肺癌细胞处理48 h后,细胞周期阻滞在G0/G1期(P0.05,P0.01);与空白组比较,山茱萸提取物400 mg·kg~(-1)组Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax及p53蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,山茱萸提取物400 mg·kg~(-1)组小鼠体内瘤的质量、肺转移灶数均显著降低,小鼠血清中癌胚抗原含量明显降低(P0.05)。结论:山茱萸提取物在体内外对Lewis肺癌细胞均有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡和干扰细胞周期分布有关。     

黄精炮制二氯甲烷组分Maillard反应产物及抗氧化活性研究

目的研究黄精炮制二氯甲烷组分Maillard反应产物及抗氧化活性。方法以《中国药典》2015年版收载的3个品种黄精为研究对象制备酒黄精。采用UV-Vis法和pH计测定褐变程度和酸度,GC-MS法分析Maillard反应产物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法评价抗氧化活性。结果随炮制时间延长酒黄精二氯甲烷组分在280nm吸光度值逐渐增加,pH值降低;3个品种黄精炮制16h后呈现相同的280nm吸光度和酸度变化趋势,显示Maillard反应物理化学特征。GC-MS分析检测到酒黄精中2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮、5-羟甲基糠醛等特征性Maillard反应产物。DPPH自由基清除活性显示,随着炮制时间的延长抗氧化活性增强,至16h达到最高随后趋于稳定。结论黄精炮制产生特征性Maillard反应产物,抗氧化活性增强。     

近红外漫反射光谱法快速测定山茱萸水分含量

目的: 利用近红外光谱建立一种快速测定山茱萸水分含量的方法。 方法: 采用烘干法测定山茱萸样品中的水分含量,运用偏最小二乘法（PLS）建立其含量与近红外光谱之间的校正模型,对山茱萸样品中的水分含量进行快速测定。 结果: 通过比较不同的建模参数,优化模型,建立水分模型的相关系数（R²）,校正均方差（RMSEC）和预测校正均方差（RMSEP）分别为0.990 52,0.297,0.819。 结论: 该方法具有简便快速、准确、无损的特点,可应用于大批量山茱萸药材中水分的快速检测。     

鹿茸加工过程中5-羟甲基糠醛的产生及影响因素探讨

目的探讨鹿茸加工过程中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的产生及影响因素。方法采用HPLC法对不同加工方式、不同部位鹿茸中的5-HMF含量进行测定。进一步对影响其含量的总糖、还原糖、氨基酸和Ca、Mg、Fe、Cu含量进行测定,通过比较不同加工方式鹿茸中上述物质含量的差异,讨论几种影响因素对加工过程中5-HMF产生的影响。结果煮炸茸各部位5-HMF含量均显著高于冻干茸(P0.05),高温加剧了焦糖化反应和美拉德反应,使煮炸茸产生更多的5-HMF;带血茸各部位5-HMF含量均显著高于排血茸(P0.05),总糖、还原糖和氨基酸含量丰富的带血茸为产生更多5-HMF提供充足底物;蜡片中5-HMF含量均显著高于其他部位(P0.05),含量丰富的总糖、还原糖、氨基酸和差异分布的矿质元素均促进蜡片中5-HMF的产生。结论鹿茸加工过程中5-HMF的产生是总糖、还原糖、氨基酸和矿质元素含量在不同温度下共同作用的结果。     

苍术麸炒过程中5-羟甲基糠醛的转化机制研究

目的研究苍术麸炒后5-羟甲基糠醛(5-HMF)量的增加机制。方法在模拟苍术麸炒工艺条件下,对果糖和葡萄糖分别加热处理,采用HPLC法测定果糖和葡萄糖转化为5-HMF的量;并对麸炒前后苍术中的果糖进行定量测定,比较其量变化。结果在模拟条件下葡萄糖中未能检测到5-HMF,而果糖在相同条件下则能检测到5-HMF,且在最佳麸炒工艺下果糖的量明显降低,5-HMF的量增加最多。结论苍术麸炒后5-HMF的量显著增加的主要原因是麸炒过程中果糖的转化。     

Quantification of Chinese yam processing methods based on pyrolysis characteristics and its relation to Maillard reaction

Objective: Chinese yam (Shanyao in Chinese, SY) as one of the representatives for Chinese medicines can be used as both of medicine and food with rich nutritional and medicinal value. Most of Chinese herbal medicines need to be processed prior to be used in clinical practice. SY was divided into Maoshanyao (Hairy Shanyao, MSY) and Guangshanyao (Smooth Shanyao, GSY) based on different processing methods at the place of origin, and it also could be processed as stir-fried SY and bran stir-fried SY to meet the different clinical use. Moreover, during the processing of Chinese herbal medicines, more complicated Maillard reaction occurs compared to food processing. Therefore, the objective of this research is to quantify the firepower of SY processing, and combined this with the relevant parameters of Maillard reaction. Methods: The MSY and GSY produced in Shanxi and Henan Provinces were chosen as the research objects. By using thermal analysis technology, we first established the correlation between pyrolysis and processing of SY and its mixtures. We also quantified the firepower of Shaoyao processing, and combined this with the relevant parameters of Maillard reaction (pH value, amino acid, and 5-HMF) and the changes in medicinal ingredients (Allantoin). Results: The SY was mainly fried with moderate-fire (190?200 °C), and the starting temperatures of different SY–ingredient mixtures were (176.3 ± 5.33) °C for (honey) bran, and (205.9 ± 8.05) °C for rice. The upper limits of processing temperature were (289.9 ± 6.47) °C for (honey) bran and (298.9 ± 1.15) °C for rice. The cooking time was (10.80 ± 1.76) min for soil stir-fry, (10.31 ± 1.06) min for bran stir-fry, and (8.43 ± 0.68) min for rice stir-fry. Moreover, the pH values and the content of 5-HMF were increased (P < 0.001), while the glycine content was decreased significantly (P < 0.001) after processing. Conclusion: The results verified and quantified the firepower of traditional processing of SY, and also provided scientific reference for other studies related to SY processing.     

基于熵权法结合层次分析法和反向传播神经网络优选酒萸肉蒸制工艺

目的 优选酒萸肉蒸制最佳工艺。方法 基于L₉（3⁴）正交试验,以没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、齐墩果酸、熊果酸、多糖、水溶性浸出物含量为指标,采用熵权法结合层次分析法（analytic hierarchy process,AHP）计算复合评分,考察黄酒量、闷润时间、蒸制时间对酒萸肉质量的影响,采用反向传播（back propagation,BP）神经网络寻求最佳工艺参数,并进行工艺验证。结果 正交试验筛选的酒萸肉最佳蒸制工艺为黄酒量20%,即每100 kg山萸肉,用黄酒20 kg,闷润1 h,蒸制8 h,正交试验最高复合评分工艺为黄酒量20%,闷润4 h,蒸制8 h;BP神经网络模型优化的最佳炮制工艺为黄酒量20%,闷润4 h,蒸制7.5 h。BP神经网络优化工艺实际复合评分最高,为97.007 8,与预测值96.358 6较接近,正交试验筛选的最佳工艺实际复合评分排其次,BP神经网络优化工艺优于正交筛选工艺,且预测结果稳定可靠。酒萸肉最佳蒸制工艺为每100 kg山萸肉,用黄酒20 kg,闷润4 h,蒸制7.5 h。结论 建立的酒萸肉炮制工艺稳定可行,得到的炮制品质量较佳,为酒萸肉工艺研究提供了依据。     

正交实验优选山茱萸炮制工艺

目的优选酒蒸山茱萸的炮制工艺。方法以山茱萸多糖得率作为考察指标,采用正交设计法对炮制工艺中酒的用量、闷润时间、蒸制时间3个因素进行优选研究。结果酒蒸山茱萸的炮制工艺,以酒的用量25%,闷润时间2h,蒸制时间4h为最佳炮制工艺。结论优选得到的山茱萸炮制工艺是合理的。     

一种适用于不同发育期山楂果实总RNA提取的方法

目的:筛选从不同发育期山楂果实中提取RNA的最佳方法。方法:对不同发育期山楂果实总RNA提取方法进行了探索,考察了Trizol法、改良Trizol法、经典十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和改良CTAB法提取RNA的效果,采用琼脂糖凝胶电泳和核酸蛋白定量仪检测RNA质量。结果:Trizol法、改良Trizol法对成熟期山楂果实RNA提取效果不佳,琼脂糖凝胶电泳检测几乎看不到条带;经典CTAB法对各发育期样本RNA提取质量均不理想;改良CTAB法对不同发育期山楂果实总RNA有良好的提取效果,A_(260 nm)/A_(280 nm)均在2.0左右,28 S和18 S条带完整,满足反转录和聚合酶链式反应(PCR)扩增反应的需求。结论:建立的改良CTAB法是一种有效的山楂果实总RNA提取方法,适用于不同发育期山楂果实RNA的提取,为开展山楂有效成分的生物合成研究奠定了基础。