载多烯紫杉醇脂质微泡增强人胰腺癌BxPC3细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

制备载多烯紫杉醇脂质超声微泡,并研究其联合超声靶向微泡破裂技术（UTMD）对人胰腺癌BxPC3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,为临床应用载多烯紫杉醇超声造影剂治疗胰腺癌提供理论依据。方法 采用机械振荡法制备载多烯紫杉醇的脂质超声微泡,检测其粒径、zeta电位、载药量、包封率等性质,MTT法检测IC50,CCK-8法检测细胞毒性作用,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,TUNEL法检测细胞凋亡情况,并与单纯多烯紫杉醇药物组、多烯紫杉醇药物+超声组等进行比较。结果 载多烯紫杉醇超声微泡平均粒径1.6 μm,微泡的包封率为64.2%,平均载药量为16.1%;载多烯紫杉醇脂质微泡组的细胞毒性作用强于其他各组（P<0.01）,细胞凋亡率高于其他各组（P<0.01）;载多烯紫杉醇脂质微泡组G2/M期细胞增多,与其他组比较差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 载多烯紫杉醇脂质微泡联合UTMD能够增加G2/M 期细胞阻滞,增强对BxPC3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;载多烯紫杉醇脂质微泡有望成为一种治疗胰腺癌的新型药物载体。     

载多西紫杉醇脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤作用的初步研究

目的：初步探讨载多西紫杉醇脂质微泡（docetaxel-loaded lipid microbubbles,DLLM）联合超声靶向微泡破裂（ultrasound targeted microbubbles destruction,UTMD）对兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤的治疗作用。方法：成功建立兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤动物模型30只,随机分为A组、B组、C组、D组、E组、F组（n=5）：A组为单纯药物组、B组为单纯载药微泡组、C组为药物+超声组、D组为单纯微泡+超声组、E组为载药微泡+超声组、F组为对照组。治疗前后用超声测量各组动物颈部淋巴转移瘤大小,计算瘤体体积和抑瘤率;比较各组动物颈部淋巴转移瘤组织中CD34、微血管密度（microvessel density,MVD）及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达。结果：E组实验动物颈部淋巴转移瘤的抑瘤率高于其他组（P<0.05）,与其他各组相比差异有统计学意义;E组实验动物颈部淋巴转移瘤中CD34表达水平最低,MVD、VEGF表达水平显著低于其他各组（P<0.01）与其他各组相比差异有统计学意义。结论：DLLM联合UTMD不仅能在宏观表现上抑制兔VX2舌癌颈部淋巴转移瘤生长,更能一定程度上从分子生物学水平明显抑制兔VX2 舌癌颈部淋巴转移瘤的转移、生长。     

载多烯紫杉醇脂质微泡增强人胰腺癌BxPC3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的制备载多烯紫杉醇脂质超声微泡,并研究其联合超声靶向微泡破裂技术(UTMD)对人胰腺癌BxPC3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法采用机械振荡法制备载多烯紫杉醇的脂质超声微泡,检测其粒径、zeta电位、载药量、包封率等性质,MTT法检测IC50,CCK-8法检测细胞毒性作用,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,TUNEL法检测细胞凋亡情况,并与单纯多烯紫杉醇药物组、多烯紫杉醇药物+超声组等进行比较。结果载多烯紫杉醇超声微泡平均粒径1.6μm,微泡的包封率为64.2%,平均载药量为16.1%;载多烯紫杉醇脂质微泡组的细胞毒性作用强于其他各组(P<0.01),细胞凋亡率高于其他各组(P<0.01);载多烯紫杉醇脂质微泡组G2/M期细胞增多,与其他组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论载多烯紫杉醇脂质微泡联合UTMD能够增加G2/M期细胞阻滞,增强对BxPC3细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;载多烯紫杉醇脂质微泡有望成为一种治疗胰腺癌的新型药物载体。     

DR5介导的载多烯紫杉醇靶向脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对人肝癌HepG2细胞凋亡及增殖的影响

目的 探讨DR5介导的载多烯紫杉醇靶向脂质微泡联合超声靶向微泡破裂技术对人肝癌HepG2细胞凋亡以及Bcl-2、NF-κB、Caspase-8、DR5蛋白表达的影响。方法 体外培养HepG2细胞并分为9组：空白对照组（Con）,药物组（Drug）,药物联合超声组（Drug+US）,空白微泡组（MBs）,空白微泡联合超声组（MBs+US）,载药微泡组（DLLM）,载药微泡联合超声组（DLLM+US）,DR5介导的靶向载药微泡组（DR5-DLLM）,DR5介导的靶向载药微泡联合超声组（DR5-DLLM+US）。Drug、Drug+US、DLLM、DLLM+US、DR5-DLLM、DR5-DLLM+US组中的多烯紫杉醇以IC50的药物浓度（5 nmol/L）给药,Con组加入0.5 mL生理盐水,超声以0.5 W/cm2的声强辐照45s,分组处理后,继续培养细胞24 h,分别用CCK-8、TUNEL、流式细胞术检测各组细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期,并检测Bcl-2、NF-κB、Caspase-8、DR5的mRNA和蛋白表达水平。结果 与其他组相比,DR5介导的靶向载药微泡联合超声组对HepG2细胞的增殖抑制作用、凋亡诱导作用和G2/M细胞周期阻滞作用更强（P<0.001）,且该组的Bcl-2 和 NF-κB mRNA 和蛋白表达水平明显降低（P<0.001）,而 DR5 和 Caspase-8 的 mRNA 和蛋白表达水平明显升高（P< 0.001）。结论 DR5介导的载多烯紫杉醇靶向脂质微泡联合超声靶向微泡破裂技术可通过下调Bcl-2和NF-κB表达、上调Caspase-8和DR5表达,从而增强对人肝癌HepG2细胞周期阻滞、细胞增殖抑制和细胞凋亡诱导作用,因此有望成为一种新型、有效的肝癌超声靶向治疗方法。     

超声联合紫杉醇微泡对卵巢癌细胞株A2780/DDP增殖和凋亡的影响

目的：探讨超声联合紫杉醇微泡对人卵巢癌细胞A2780/DDP细胞的增殖和凋亡的影响。方法：将人卵巢癌细胞株A2780/DDP随机分为5组：对照组、紫杉醇组、紫杉醇+超声组、紫杉醇微泡组和紫杉醇微泡+超声组。采用噻唑蓝（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测作用24、48 h和72 h后卵巢癌细胞的增殖活性,并用Hochst 33258和TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。结果：MTT法检测显示紫杉醇微泡+超声组24、48 h和72 h抑制率分别为（37.20±2.01）%、（51.60±2.10）%和 （57.47±2.85）%,明显高于其他各处理组（P＜0.05）;Hochst 33258和TUNEL染色均显示紫杉醇微泡+超声组凋亡率最高,作用24 h后的凋亡率为(46.10±4.15)%,明显高于其余各组（P＜0.05）。结论：超声联合紫杉醇微泡能明显抑制人卵巢癌细胞A2780/DDP的增殖和诱导其凋亡。     

超声靶向介导载CD-TK双自杀基因的微泡对肺癌的治疗作用

目的：制备载胞苷脱氨酶-胸腺嘧啶激酶 （colicytocinedeaminase-thymidinekinase,CD-TK）双自杀基因的超声微泡,检测其对肺癌的杀伤效应。方法：制备载CD-TK双自杀基因的微泡,观察形态和大小,用碘化丙啶染质粒,观察荧光和计算微泡与基因的结合率。培养肺癌H1299细胞系和建立肺癌裸鼠模型,随机分为对照、超声（ultrasound,U）+微泡（microbubble,M）+CD-TK、U+M+CD-TK+5-FC（5- fluorcytosine,5-氟胞嘧啶）、U+M+CD-TK +GCV（ganciclovir,丙氧鸟苷）、U+M+CD-TK +5-FC+GCV 5组,每组1×107个细胞。微泡转染H1299肺癌细胞,24 h后观察细胞绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）荧光表达情况,测定细胞GFP转染效果和每组24 h细胞凋亡和周期。体内动物实验,每组6只裸鼠,对照组注射200 μL PBS,其余各组尾静脉注射等量的载CD-TK双自杀基因的微泡。观察微泡的显影,同时在肿瘤部位超声辐照转染基因,每组按实验分组连续腹腔注射5-FC、GCV 一周,每周记录每只裸鼠肿瘤的最长径和最短径,计算并记录肿瘤的体积变化。第5周取裸鼠肿瘤标本。免疫荧光测TdT（TUNEL法）和PCNA的表达,评估肿瘤组织细胞凋亡和增殖情况。结果：成功制备出载CD-TK双自杀基因的微泡,无毒前药5-FC和GCV联合载CD-TK双自杀基因的超声微泡治疗效果明显,有促进凋亡[凋亡率（28.45±1.75）%]、抑制增殖作用[S期（61.40±4.31）%],疗效明显优于对照组及单药组（5-FC组P=0.002和GCV组P=0.012,对照组P=0.000）。双药联合超声辐照载基因微泡组的肿瘤体积最小、质量最小、凋亡细胞最多、增殖受抑制最明显。结论：无毒前药5-FC+GCV联合微泡载CD-TK双自杀基因能促进肺癌细胞凋亡,抑制其增殖,对肺癌有明显杀伤作用。     

正电荷载基因纳米微泡的超声成像及靶向杀伤肝癌细胞的研究

目的：制备载基因纳米微泡并探讨其体内外超声成像和靶向杀伤肝癌细胞的效果。方法：采用薄膜水化?机械震荡法制备磷脂为壳膜、六氟化硫（suphurhexafluoride,SF6）气体为核心的正电荷纳米微泡,再偶联甲胎蛋白（alpha fetoprotein,AFP）启动子的单纯疱疹病毒胸苷激酶（simplex herpes virus thymidine kinase,HSV?TK）质粒DNA制备载基因纳泡。对其形态、平均粒径、zeta电位、DNA结合力、基因转染进行检测;然后对其体内外超声成像特性进行考察;最后采用CCK?8和流式细胞（FCM）分析检测载基因纳泡联合超声靶向微泡击破（ultrasound?targeted microbubble destruction,UTMD）技术对BEL?7402和SMCC?7721细胞的杀伤作用。结果：电镜显示纳泡呈圆球形壳核结构;平均水合粒径约为667 nm,带正电;琼脂糖凝胶电泳显示质量比≥5时,纳泡可有效结合质粒DNA;体内外超声显示载基因纳泡具有良好的超声对比增强特性;RT?PCR检测显示纳泡联合UTMD能使HSV?TK在AFP阳性肝癌细胞内表达。CCK?8 和FCM分析显示载基因纳泡+UTMD组能显著抑制BEL?7402细胞的增殖和诱导其凋亡,与其他组相比差异具有显著性（P < 0.05）。结论：具有良好超声成像功能的载基因纳泡能够高效靶向杀伤AFP阳性的肝癌细胞。     

超声联合紫杉醇微泡对卵巢癌细胞株A2780/DDP增殖和凋亡的影响

目的:探讨超声联合紫杉醇微泡对人卵巢癌细胞A2780/DDP细胞的增殖和凋亡的影响。方法:将人卵巢癌细胞株A2780/DDP随机分为5组:对照组、紫杉醇组、紫杉醇+超声组、紫杉醇微泡组和紫杉醇微泡+超声组。采用噻唑蓝(Methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测作用24、48 h和72 h后卵巢癌细胞的增殖活性,并用Hochst 33258和TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。结果:MTT法检测显示紫杉醇微泡+超声组24、48 h和72 h抑制率分别为(37.20±2.01)%、(51.60±2.10)%和(57.47±2.85)%,明显高于其他各处理组(P<0.05);Hochst 33258和TUNEL染色均显示紫杉醇微泡+超声组凋亡率最高,作用24 h后的凋亡率为(46.10±4.15)%,明显高于其余各组(P<0.05)。结论:超声联合紫杉醇微泡能明显抑制人卵巢癌细胞A2780/DDP的增殖和诱导其凋亡。     

低频超声联合微泡剂对血管内皮细胞的生物学效应

目的：研究低频超声联合微泡剂对血管内皮细胞VEC-304的作用，为超声治疗的临床应用提供实验依据。方法：将细胞分为空白对照（A）组；单纯微泡剂（B）组；单纯超声（C）组，因给予不同时间的超声辐照又分为C1组（60S）、C2组（90s）、C3组（120S）和C4组（150S）；超声联合微泡剂（D）组，因加入微泡剂后立即给予不同时间的超声辐照又分为D1组（60S）、D2组（90S）、D3组（120S）和D4组（150S）。MTT法观察细胞增殖的抑制作用，分光光度法检测细胞培养液中活性氧（ROS）和超氧化物歧化酶（SOD）活力的变化，流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡。结果：超声联合微泡剂能够显著抑制细胞增殖；C3、D3组培养液中ROS活力显著高于A、B两组（P〈0．01），SOD活力显著低于A、B两组（P〈0．01），且D3组效应比C3组更为明显；C3、D3组细胞凋亡率明显高于A、B组（P〈0．01），D3组高于C3组（P〈0．05）。结论：低频超声联合微泡剂可能是通过增加细胞外ROS的活力来诱导对细胞的损伤和凋亡。     

低频超声联合微泡造影剂通过激活内质网应激逆转前列腺癌紫杉醇耐药

目的 探讨低频超声联合微泡造影剂辅助紫杉醇逆转前列腺癌耐药的作用和机制.方法 筛选超声辐照紫杉醇耐药前列腺癌细胞株PC-3R的非毒性照射时间;将PC-3R细胞随机分为对照组、紫杉醇组(PTX组)、低频超声组(LFUS组)、紫杉醇和低频超声组(PTX+LFUS组),以及紫杉醇和低频超声联合微泡剂组(PTX+ LFUS+ UCA组),分别进行干预.AnnexinV-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡;q-PCR法检测各组细胞Bcl-2和多耐药基因表达变化;Western blot检测各组细胞GRP78和c-jun蛋白表达.GRP78 siRNA转染PC-3R细胞,微泡和低频超声联合处理后,Western blot检测GRP78蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测凋亡情况.结果 低频超声照射频率1 MHz,强度1.2 W/cm2,非毒性照射时间为10 s.与单纯应用紫杉醇相比低频超声辅助紫杉醇处理前列腺耐药细胞可显著提高细胞凋亡率(P＜0.01),联合微泡剂照射后,凋亡率进一步提高(P＜0.01),并下调Bcl-2和多耐药基因的表达.PTX+ LFUS+UCA组内质网应激相关蛋白GRP78的表达较PTX组和PTX+LFUS组升高,c-jun的表达下降(P＜0.01).应用siRNA干扰GRP78基因表达后,细胞凋亡率下降(P＜0.01).结论 低频超声联合微泡造影剂通过激活内质网应激,抑制其下游JNK/c-jun通路下调多耐药基因及凋亡抑制基因的表达,提高化疗药物诱导细胞凋亡的作用,逆转肿瘤细胞的耐药性.     

Preparation of thrombosis-targeted lipid microbubbles and determination of rabbit carotid artery thrombosis by microbubbles ultrasonogaphy

A kind of thrombus-targeted lipid-coated microbubbles were prepared, and the target property of the microbubbles and the effects of different methods detecting thrombosis in vessels were observed. Phospholipid-coated microbubbles were prepared by membrane-hydration method. Thrombus-targeted lipid-coated fluorocarbon microbubbles were labeled with specific fluorescence and then integrated to the thrombus in vivo and ex vivo through an avidin biotin system. The thrombus was immediately observed for the distribution and property of the thrombus-targeted microbubbles under the optical microscope, fluorescence microscope and transmission electron microscope. The carotid thrombosis models were set up in rabbits, and the effects of different methods detecting thrombosis in vessels were observed. The diameter of the phospholipid-coated microbubbles was 0.8-2.5μm, and even reached nanoscale in some of them. The zeta electric potential was about -11mV and the concentration was about 1.08×10 10/mL. Immunofluorescence of rapid frozen sections in vivo and ex vivo showed that massive targeted lipid-coated microbubbles flocked around fresh blood clots and some aggregated within them under the light and fluorescence microscope. The number of aggregated microbubbles ex vivo was greater than that observed in the experiment in vivo, and the fluorescence observed in the experiment ex vivo was stronger than that in the experiment in vivo. The same imaging was observed under the electron microscope. Models of carotid thrombosis in rabbits were established successfully. Effects of detecting thrombosis by means of thrombosis-targeted microbubble ultrasonoraphy and Sono Vue ultrasonography in vessels were more satisfactory than those by Color Doplor Flow Imaging (CDFI), ordinary microbubbles and Three Dimensions-time of flight MR angiography (3D-TOF-MRA) (P<0.01). Compared to ordinary microbubbles ultrasonography, thrombosis-targeted microbubbles ultrasonography had the advantages whenever in imaging quality or in imaging time. Thrombus-targeted phospholipid-coated microbubbles were prepared successfully by membrane-hydration method. They could aggregate rapidly in fresh blood clots and enter deep into the internal part of the thrombus both in vivo and ex vivo, and had the targeted property of strongly conjugating with the thrombus. Compared to other thrombosis detection methods, ultrasonography with thrombosis-targeted microbubbles has obvious advantages in detecting thrombosis in vessels, mainly in:non-invasiveness, safety, good image quality, accuracy, and longer imaging time.     

Effect of pressure on intracardiac backscatter from microbubbles

Echocardiographic contrast agent is a solutionwhich contains microbubbles or can produce mi-crobubbles rapidly after injection into blood.The in-vestigators are now trying to find a contrast agentthat can yield opacification of left heart system andmyocardium after intravenous injection to evaluatethe myocardial perfusion.A systolic decrease in leftventricularcontrastintensities wasobserved in there-search of intravenous contrast echocardiography withthe use of sonicated albumin in human[1] .T…     

Effect of ultrasound exposure on sonicated microbubbles stability

The study of intlavenous myocedal coneest echocedo~ (IVMCE) is a hot topic in the Pursuit ofcoronap healt disease, and much achievement has beenmade in ash ultheound etwpment development and cont. .[if ~t agent improvement. Most colltrsst opllts such asMiunex, Ophson etc. are pIDduced by sonication, andcan be used as echogenic bacers of blood flow in WMCE.SOme studies have suggested, however, that the ndcrobubbles exposed to ultrasound are Open to mpture[']. Ihan effort to detendne the o…     

超声照射对声振微泡稳定性的影响

目的与方法造影剂微泡浓度、大小是影响心肌声学显影最重要因素。本研究采用２×２×４析因分析法分析不同超声照射条件对造影剂微泡浓度及直径的影响,即声波频率、能量以及照射时间对微泡浓度、大小的单独及交互作用。为临床行静脉心肌声学造影检查时选择适宜的超声照射条件提供参考。结果能量越大、照射时间越长,微泡破坏越多,平均直径越小：照射频率对微泡浓度影响不大,但影响微泡大小,频率越高,微泡越小。结论为减少超声照射对微泡的破坏,提高心肌声学造影效果,应尽可能选用低能量、低频率超声波,并减少不必要的照射时间。     

超声联合微泡对兔股动脉血栓的促溶作用

目的 探讨无溶栓药物条件下超声+微泡对血栓溶解的作用。方法 建立12只兔双侧股动脉急性血栓模型,对其中6只经静脉注射白蛋白微泡,一侧动脉接受经皮超声(超声+微泡组)而另一侧接受无超声治疗(微泡组)。另外6只兔一侧动脉只接受超声治疗(超声组)而另一侧不接受任何处理(对照组)。结果 单独超声治疗的6条动脉只有2条再通,接受超声+微泡治疗的6条动脉全部实现再通(P=0.014),微泡组和对照组动脉无再通。超声+微泡组动脉再通时间和残余血栓面积比值显著小于超声组(P=0.004,P=0.003 )。结论 超声作用下经静脉注射微泡能有效促进在体动脉血栓溶解,这对临床急性血栓形成患者有潜在的应用意义。     

超声及超声微泡介导基因转染的安全性研究

目的:探讨超声及超声微泡介导基因转染的安全性。方法:将人脐静脉内皮细胞分别按超声辐照时长及所加入的微泡剂量分组,超声辐照后分别培养24h及48h,应用台盼蓝拒染法进行细胞计数,与对照组进行比较。超声辐照含有不同微泡剂量的细胞后,行扫描电镜观察细胞膜形态。结果:不同辐照时长组经超声辐照后培养24h,10min、15min、30min组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05);继续培养48h,各组与对照组比较无统计学差异。不同微泡剂量组经超声辐照5min后培养24h,200μl、500μl组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05);继续培养48h,500μl组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05)。扫描电镜可见超声辐照后细胞膜完整性变差,继续培养24h后有一定程度改善。结论:超声辐照+微泡对细胞增殖有一定的抑制作用,对细胞膜有一定程度的损害,但这些作用在超声辐照时长不超过5min及微泡剂量不超过100μl时是轻微、可逆的。超声及超声微泡介导基因转染是相对安全的。     

载硫化氢气体超声微泡的制备及其性能评价

目的制备一种新型的载硫化氢气体的脂质微泡（HSMB）并评价其理化特性和超声显影能力。方法硫化氢和全氟丙烷
按4∶0、3∶1、2∶2、1∶3和0∶4混合后,机械震荡法制备5种载相应混合气体的HSMB,即HSMB4∶0、HSMB3∶1、HSMB2∶2、HSMB1∶3和
HSMB0∶4。检测微泡的粒径及浓度并评价其稳定性,优化气体混合比例。选取优化的混合气体制备的HSMB,观察超声辐照对
微泡浓度及下清液中硫化氢浓度的影响;观察大鼠心肌及肾脏的超声显影效果。结果HSMB外观呈乳白色,镜下呈球形结构,无
聚集现象。HSMB4∶0和HSMB3∶1微泡初始浓度较HSMB2∶2明显减少（P<0.05）,且均随时间的延长逐渐降低。HSMB2∶2、HSMB1∶3
和HSMB0∶4微泡初始浓度无差别（P>0.05）,72 h内浓度无变化（P>0.05）。超声辐照后,HSMB2∶2微泡浓度显著减少（P<0.05）,而
下清液中的硫化氢浓度明显增加（P<0.05）。HSMB2∶2静脉注射后获得良好的心脏及肾脏超声显影效果。结论硫化氢和全氟丙
烷以2∶2混合制备的HSMB浓度高、稳定性良好,可在超声辐照下释放硫化氢,具有良好的超声显像效果,有望实现硫化氢气体
可视化靶向传输。
     

亚微米级荧光脂质微泡的制备及其肝脏成像的实验研究

目的制备荧光标记的脂质微泡,检测一般物理性质、荧光标记情况以及评价在兔肝脏的显影效果。方法用二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)溶解细胞膜绿色荧光分子探针(3,3 dioetadeeyloxaearboeyanineperehlorate,DiO)后,抽取少量溶解液加至脂质冻干粉内与溶媒液相溶,全氟丙烷置换瓶内空气,最后机械振荡仪高速振荡制成带有荧光标记的脂质微泡,检测其微泡的一般物理性质、荧光标记情况;随机选取6只健康新西兰大白兔,雄性,体质量2.0～2.5 kg,经兔耳缘静脉团注荧光微泡后动态观察微泡在兔肝实质的显影效果,手术切取部分肝脏,冰冻切片后在荧光显微镜下观察荧光素在肝脏内的分布情况。结果荧光标记的脂质微泡形态呈圆形,大小均一,微泡浓度范围(4～7)×109/mL,微泡粒径为(429±119)nm,激光共聚焦显微镜下微泡外壳被绿色光圈环绕。兔肝脏造影可见持续饱满的增强显影效果,荧光显微镜下肝脏内荧光素面积分布较少。结论荧光标记的脂质微泡大小均一,粒径大小达到进入肺循环标准,在兔肝脏内显影效果显著。     

超声联合微泡造影剂对大鼠肾脏微血管通透性的影响

目的研究高机械指数诊断超声爆破微泡造影剂对大鼠肾脏微血管通透性的影响。方法实验中以伊文氏蓝(Evans blue,EB)为示踪剂检测超声爆破微泡对正常大鼠肾脏组织微血管通透性的影响。15只健康Sprague Daw-ley大鼠,雌雄不限,随机分为A、B、C三组,每组5只,A组为单纯注射EB组;B组为注射EB后接受超声辐照组;C组为注射EB和微泡后再接受超声辐照组。使用西门子S2000超声诊断仪,4P1探头,辐照方式为连续辐照。三组采用相同的频率(2MHz)、机械指数(1.4)、微泡剂量0.5ml/kg,超声辐照时间1min。15只大鼠均在EB注射30min后灌注、取材,使用Image-Pro Plus 6.0软件测量肾脏表面EB渗出面积百分比;使用激光共聚焦显微镜观察肾脏微血管周围EB外溢情况并进行视觉评分;使用标准曲线和分光光度法测量各组大鼠肾脏组织中EB含量,作为反映血管通透性的指标。结果 A组肾脏表面无EB渗出,B组肾脏表面有微量EB渗出,面积百分比为(0.089±0.013)%,C组肾脏表面有部分EB渗出,渗出面积(17.596±0.243)%明显高于A组和B组(P<0.05);C组激光共聚焦显微镜下可见肾脏微血管周围EB外溢,视觉评分等级为2级,显著高于A组(0级)及B组(0～1级);C组肾脏组织中EB含量为(28.11±0.97)μg/g,比A组(11.48±1.05)μg/g和B组(13.18±1.28)μg/g明显增加(P<0.05)。结论高机械指数超声联合微泡造影剂可使肾脏微血管通透性增加。