1-磷酸鞘氨醇预处理对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞磷酸化Akt1水平的影响

目的：探究1-磷酸鞘氨醇（S1P）预处理能否激活Akt1而保护缺氧复氧心肌细胞。方法：原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,制备缺氧／复氧心肌细胞损伤模型,应用台盼兰排斥法和Western blot分别检测S1P预处理对心肌细胞死亡率和磷酸化Akt1（p-Akt1）水平的影响。结果：SIP预处理能够明显降低缺氧／复氧心肌细胞死亡率,提高缺氧／复氧心肌细胞磷酸化Akt1水平。结论：SIP预处理可能通过激活Akt1而保护缺氧复氧心肌细胞。     

瘦素对血管内皮细胞ECV-304缺氧/复氧损伤的保护作用

探讨外源性瘦素（Leptin）对血管内皮细胞ECV-304缺氧／复氧（H／R）损伤保护作用及其作用机制。建立人脐静脉（ECV．304）内皮细胞缺影复氧损伤模型,观察不同的缺氧和复氧时间对内皮细胞的损伤作用。设立正常对照组、损伤组、干预组,每组6例;利用试剂盒测定乳酸脱氢酶、丙二醛和超氧化物歧化酶的释放量;四唑盐比色法（MTT）测定血管内皮细胞的存活率。结果显示,单纯缺氧组和缺彰复氧组均可见细胞变圆、收缩、脱落;细胞死亡率较正常组增加;细胞上清中丙二醛（MDA）与乳酸脱氢酶（LDH）含量增加,超氧化物歧化酶（SOD）含量降低;缺氧／复氧组较单纯缺氧组损伤更加明显,与正常培养组相比具有显著意义（P〈0．05）。Leptin晚期预处理后,细胞形态基本上保持正常,上述检测指标与缺氧／复氧组相比有显著意义（P〈0．05）。并且50μg／L Leptin的保护作用最为明显。表明Leptin对ECV-304细胞缺氧／复氧损伤的保护作用具有剂量依赖性。     

阿魏酸钠预处理保护成年大鼠心肌细胞缺氧复氧的损伤

背景：阿魏酸钠预处理能对心肌细胞产生保护作用并已在大鼠体外心脏和乳鼠心肌细胞水平得以证实,尚缺乏在成年大鼠心肌细胞水平上的研究。 目的：探讨阿魏酸钠预处理对成年大鼠缺氧复氧心肌细胞的保护作用及其K+ATP通道机制。 方法：用Langendorff系统灌流心脏,以胶原酶消化法分离纯化成年大鼠心肌细胞并给予模拟缺氧复氧液以及干预因素阿魏酸钠、K+ATP通道阻断剂格列本脲处理,随机分为6组：正常对照组、缺氧复氧组、缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组、格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组。 结果与结论：①心肌细胞存活率：缺氧复氧组与对照组比较,细胞存活率明显降低(P < 0.01);缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组与缺氧复氧组比较,细胞存活率明显增高(P < 0.01);格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组与缺氧复氧组相比,差异无显著性意义,但明显高于缺氧预适应+缺氧复氧组(P < 0.01)。②乳酸脱氢酶活性：各组间乳酸脱氢酶活性比较结果与心肌细胞存活率比较结果吻合。③透射电镜观察：缺氧复氧组心肌细胞线粒体明显肿胀,嵴消失或变形,细胞膜结构破坏,有核边聚现象;缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组心肌细胞超微结构改变轻微,线粒体排列规则、大小均匀,嵴及内外膜清晰完整,核膜完整,较缺氧复氧组损伤明显减轻;格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组心肌细胞超微结构改变与缺氧复氧组相似。结果可见阿魏酸钠预处理对成年大鼠心肌细胞具有药理性心肌缺血预适应保护作用且该作用可能与K+ATP通道有关。 关键词：阿魏酸钠;成年大鼠;心肌细胞;缺氧复氧;心肌保护 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.012     

多胺对大鼠缺氧-复氧心肌细胞内钙的影响

目的：观察外源性低浓度多胺对大鼠缺氧-复氧心肌细胞钙超载的影响。 方法: 酶解分离大鼠心室肌细胞，用正常氧合Tyrode液灌流8 min, 换为缺氧液灌流32 min, 再转换为正常氧合Tyrode液灌流8 min,复制心肌缺氧-复氧模型。分别在缺氧前给予精胺，缺氧-复氧后给予精胺、精脒、腐胺。应用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）连续观察细胞内钙荧光强度的动态变化。 结果: 精胺（1 mol/L）对正常静息状态下大鼠心室肌［Ca2+］i无影响。缺氧前给予精胺，可取消复氧引起的心肌［Ca2+］i增高；缺氧-复氧后给予精胺、精脒、腐胺对缺氧-复氧引起［Ca2+］i升高也有不同程度的降低作用，其中以精胺的作用最强。复氧后给予精胺降低缺氧-复氧［Ca2+］i 升高的作用小于缺氧前给予。 结论: 缺氧前给予精胺可拮抗缺氧-复氧心肌细胞钙超载发生；复氧后给予精胺可使缺氧-复氧心肌细胞钙超载减轻，但其作用力度不如缺氧前给药。多胺拮抗缺氧-复氧心肌细胞钙超载的作用以精胺＞精脒＞腐胺的顺序递减。     

肥大心肌细胞缺氧复氧损伤特点及干预能量代谢的作用

目的：探讨肥大心肌细胞缺氧复氧损伤与能量代谢途径转换的关系。 方法: 应用血管紧张素Ⅱ (AngⅡ, 0.1 μmol/L)+去甲肾上腺素（NE 1 μmol/L）诱导培养大鼠心肌细胞肥大，以同位素液闪计数法测定葡萄糖有氧氧化率（GOR）、葡萄糖酵解率（GLR）和脂肪酸有氧氧化率（FOR），TUNEL法测定细胞凋亡。 结果: (1)常氧培养时，肥大心肌细胞的葡萄糖氧化率（GOR）、糖酵解率（GLR）均高于正常心肌细胞，而脂肪酸氧化率（FOR）低于正常心肌细胞，但与细胞凋亡率一样，与正常心肌细胞比较无显著差异。(2)肥大心肌细胞缺氧6 h后细胞凋亡率显著高于缺氧前，复氧后不仅细胞凋亡更显著高于缺氧前，还出现了细胞坏死。(3)正常心肌细胞和肥大心肌细胞缺氧后GLR无明显变化，GOR、FOR均低于缺氧前，缺氧6 h时出现显著差异，但肥大心肌细胞GOR在缺氧2 h时即显著低于缺氧前。缺氧复氧后，正常心肌细胞和肥大心肌细胞GOR均低于对应单纯缺氧时间组，而GLR和FOR轻度高于对应单纯缺氧2 h组，在肥大心肌细胞均显著高于对应单纯缺氧时间组，并随缺氧时间延长更明显。(4)二氯乙酸（DCA）和曲美他嗪（TMZ）预处理后的肥大心肌细胞缺氧复氧后的GOR显著高于对应的无干预肥大心肌细胞组，GLR、FOR和细胞凋亡率均显著低于无干预肥大心肌细胞组。 结论: 肥大心肌细胞更易于受到缺氧复氧刺激的损伤，活化糖代谢可部分抑制这种损伤。     

线粒体渗透转换孔在肿瘤坏死因子α诱导的抗心肌缺氧/复氧损伤中的作用

目的：研究肿瘤坏死因子α（TNFα）诱导的抗心肌缺氧/复氧损伤的保护作用是否与抑制线粒体渗透转换孔的开放有关。 方法： 采用离体大鼠心脏灌流方法，结扎冠状动脉左前降支30 min和复氧120 min复制局部缺氧/复氧损伤模型，测定心肌梗死面积、冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）含量及各项心室力学指标。 结果： 与单纯缺氧/复氧组相比，1×104 U/L TNFα预处理明显降低心脏缺氧/复氧后的梗死面积和复氧期冠脉流出液中LDH含量，促进左室发展压、左室做功和左室舒张末压力的恢复。线粒体渗透转换孔开放剂atractyloside和钙激活钾通道阻断剂paxilline减弱了TNFα的作用。 结论： TNFα诱导的抗心肌缺氧/复氧损伤的保护作用可能与其抑制线粒体渗透转换孔的开放及促进钙激活钾通道的开放有关。     

氯化钻预处理减轻缺氧复氧后大鼠海马神经元的凋亡

目的 研究氯化钴(CoCl2)预处理对大鼠海马神经元缺氧一复氧后凋亡的影响及其机制。方法用CoCl，处理原代培养大鼠海马神经元，并使其暴露于无氧环境。用TUNEL染色法和激光共聚焦显微镜分别检测缺氧后细胞凋亡率以及细胞线粒体膜电位和胞内游离钙。结果 CoCl。预处理明显减少海马神经元在缺氧一复氧后的凋亡数，并对急性缺氧期间海马神经元的细胞内ca2浓度和线粒体膜电位具有稳定作用。结论 CoCl：预处理对急性缺氧引起的海马神经元凋亡可能具有保护作用，其机制可能与其稳定缺氧时细胞内ca2浓度和线粒体膜电位有关。     

镁对血管内皮细胞缺氧再复氧损伤的保护作用

目的探讨镁离子对人脐静脉血管内皮细胞缺氧再复氧损伤的保护作用及其可能机制。方法取人脐静脉分离内皮细胞培养传代 ,至第三代分为对照组、缺氧复氧组和硫酸镁组。用缺氧再复氧诱导血管内皮细胞损伤。镁离子组浓度分别为 (2、4、8、11、16mmol/L)。对照组常规培养 ,硫酸镁组加入不同浓度的镁离子预处理后缺氧再复氧。分别测定细胞培养液中一氧化氮 (NO) ,丙二醛 (MDA)及内皮素(ET-1)的含量。结果缺氧复氧组NO含量较对照组明显降低 (x缺氧 ±svsx对照 ±s,P<0.01) ,MDA与ET -1含量显著上升 (x缺氧 ±svsx对照 ±s,P<0.01) ,硫酸镁组NO含量较缺氧复氧组明显升高(x硫酸镁±svsx缺氧 ±s,P<0.05) ,MDA和ET -1含量显著降低 (x硫酸镁±svsx缺氧±s,P<0.05) ,且一定范围内呈剂量依赖关系。结论缺氧再复氧能造成VECs损伤 ,镁离子能保护缺氧再复氧造成的VECs损伤 ,其机制可能与抗脂质过氧化、稳定细胞膜及促进自由基清除有关。     

缺氧/复氧对培养SD乳大鼠心肌细胞端粒酶逆转录酶的影响

目的了解缺氧／复氧对培养SD乳大鼠心肌细胞端粒酶逆转录酶（TERT）表达的影响。方法采用real—time quantitative PCR与免疫组化方法检测培养SD乳大鼠心肌细胞在对照组，缺氧6h，复氧24、48h，心肌细胞TERT表达的改变。结果与对照组相比，缺氧／复氧可以使培养SD乳大鼠心肌细胞在缺氧6h、复氧24、48h心肌细胞TERT在mRNA与蛋白水平表达明显增强，与对照组相比有统计学意义（P〈0．01）。结论缺氧／复氧可以使培养SD乳大鼠心肌细胞TERT表达明显增强，可能对抗缺氧／复氧造成端粒缩短而诱导的细胞衰老。     

缺氧—复氧损伤对大鼠脊髓组织牛磺酸转运的影响

本工作在大鼠离体脊髓缺氧－复氧损伤模型上，观察了脊髓组织牛磺酸转运的特片，结果发现：缺氧４５ｍｉｎ一复氧孵育１５ｍｉｎ，脊髓组织出现明显的牛磺酸转运的障碍，表现为Ｖｍａｘ明显降低（为正常组的７１％，Ｐ〈０．０１），Ｋｍ值无明显改变。推没缺氧－复氧可能通过影响能量代谢而导致脊髓组织牛磺酸转运的障碍。     

NO介导TNF-α诱导的培养大鼠缺氧/复氧心肌细胞的保护作用

目的:研究一氧化氮(NO)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的缺氧/复氧心肌细胞的保护作用。方法:在培养的大鼠乳鼠心肌细胞上,建立缺氧/复氧模型,测定复氧后培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和细胞内锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性。结果:(1)用TNF-α(10⁵U/L)预处理,缺氧/复氧后心肌细胞内Mn-SOD活性增高、LDH释放量减少;(2)NO供体硝普钠(SNP)(5μmol/L)和前体L-精氨酸(L-Arg)(5mmol/L)预处理心肌细胞3h,缺氧/复氧后细胞内Mn-SOD活性增高、LDH释放量减少,用Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)(100μmol/L)预处理减弱了TNF-α的抑制缺氧/复氧心肌细胞LDH释放和诱导Mn-SOD活性增高的作用;(3)可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)抑制剂ODQ(10μmol/L)和CPK抑制剂chelerythrine(5μmol/L)可分别减弱SNP、L-Arg和TNF-α对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用;(4)TNF-α对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用可被抗氧化剂2-巯基丙酰氨基乙酸(2-MPG,400μmol/L)削弱,但是酪氨酸蛋白激酶(TK)抑制剂4,5,7-三羟基异黄酮(genistein,50μmol/L)预处理对TNF-α诱导的心肌缺氧/复氧保护无影响。结论:NO参与TNF-α对缺氧/复氧损伤心肌细胞的保护作用,PKC和SGC可能为其下游信号途径成分。     

氯化钴预处理减轻缺氧复氧后大鼠海马神经元的凋亡

目的　研究氯化钴 (CoCl2 )预处理对大鼠海马神经元缺氧 复氧后凋亡的影响及其机制。　方法　用CoCl2 处理原代培养大鼠海马神经元 ,并使其暴露于无氧环境。用TUNEL染色法和激光共聚焦显微镜分别检测缺氧后细胞凋亡率以及细胞线粒体膜电位和胞内游离钙。　结果　CoCl2 预处理明显减少海马神经元在缺氧 复氧后的凋亡数 ,并对急性缺氧期间海马神经元的细胞内Ca2 +浓度和线粒体膜电位具有稳定作用。　结论　CoCl2 预处理对急性缺氧引起的海马神经元凋亡可能具有保护作用 ,其机制可能与其稳定缺氧时细胞内Ca2 +浓度和线粒体膜电位有关。     

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和bcl-2表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和 bcl-2表达的影响。结果显示 ,经低氧预处理的海马神经元缺氧 -复氧后 bcl-2表达较对照组明显增强 ,神经元损伤程度减轻 ,神经元存活数明显高于对照组。本结果表明 ,低氧预处理可使海马培养神经元对缺氧产生耐受 ,增加缺氧 -复氧后神经元 bcl-2的表达。提高神经元存活数     

缺氧－复氧损伤对大鼠脊髓组织牛磺酸转运的影响

本工作在大鼠离体脊髓缺氧－复氧损伤模型上，观察了脊髓组织牛磺酸转运的特征，结果发现：缺氧４５ｍｉｎ后复氧孵育１５ｍｉｎ，脊髓组织出现明显的牛磺酸转运的障碍，表现为Ｖ＿（ｍａｘ）明显降低（为正常组的７１％，Ｐ＜０．０１），Ｋｍ值无明显改变，推测缺氧。复氧可能通过影响能量代谢而导致脊髓组织牛磺酸转运的障碍。     

卡托普利对缺氧/复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响及其离子通道机制

目的：观察卡托普利晚期预处理对缺氧/复氧乳鼠心室肌细胞游离钙的影响及其离子通道机制。方法:建立培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。设正常对照组、缺氧/复氧组、缺氧预适应组和卡托普利组。经Flou-3/AM负载染色后，采用流式细胞分析技术，测定细胞内钙离子浓度(［Ca²⁺］i)；利用膜片钳技术，观察L-型钙通道和钠钙交换电流的变化。结果:（1）缺氧/复氧时，［Ca²⁺］i和Na⁺/Ca²⁺交换电流高于正常对照组（P<0.01），L-型钙电流（I_Ca-L）峰值下降，I-V曲线上移，半数失活电压(V_0.5)减小，ICa-L失活曲线左移。（2）晚期预处理和卡托普利使缺氧/复氧时［Ca²⁺］i低于缺氧/复氧组（P<0.01）；I_Ca-L增加，I-V曲线下移，V_0.5增大及稳态失活曲线右移；Na⁺/Ca²⁺ 交换电流减少；但［Ca²⁺］i和Na⁺/Ca²⁺交换电流高于对照组（P<0.05）。（3）卡托普利组与缺氧预适应组比较上述指标均无显著差异 。结论：心肌细胞缺氧/复氧，通过Na⁺/Ca²⁺交换电流的异常增加可引起［Ca²⁺］i的异常升高及其钙超载；卡托普利通过轻度增加Na⁺/Ca²⁺交换电流及其［Ca²⁺］i而触发晚期预处理，抑制后续缺氧/复氧引起的Na⁺/Ca²⁺交换电流及其［Ca²⁺］i的异常增加。     

维拉帕米和Mn~（2＋）对缺氧及复氧单心肌细胞游离Ca~（2＋）的影响

本文采用荧光探针Ｆｕｒａ－２结合计算机图像处理技术观察不同时间的缺氧及复氧单心肌细胞内游离Ｃａ￣（２＋）含量的变化以及Ｃａ￣（２＋）通道阻滞剂及Ｎａ￣＋－Ｃａ￣（２＋）交换抑制剂对其的响。结果显示随着缺氧和缺氧复氧时间的延长，细胞内Ｃａ￣（２＋）浓度逐渐增加。缺氧复氧时细胞内Ｃａ￣（２＋）增加幅度较单纯缺氧大。Ｍｎ￣（２＋）及维拉帕米均能降低缺氧时心肌细胞内Ｃａ￣（２＋）超负荷（Ｐ＜０．０５）。Ｍｎ￣（２＋）同时也能降低缺氧复氧时细胞内Ｃａ￣（２＋）含量（Ｐ＜０．０５），而维拉帕米降钙作用不明显（Ｐ＞０．０５）。本文提示缺氧和缺氧复氧时细胞内Ｃａ￣（２＋）超负荷的机制并非完全一致。     

ROS/PKC/p38 MAPK途径在山茱萸多糖抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用

 目的:观察山茱萸多糖（polysaccharide from Fructus corni,PFC）对缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）损伤心肌细胞的保护作用,并探讨其对ROS/PKC/p38 MAPK途径的影响。方法: 分离原代乳鼠心肌细胞,建立H/R模型,细胞分为7组：正常对照组（N组）、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧/复氧+PFC（终浓度20 mg/L、100 mg/L和200 mg/L）预处理组、缺氧/复氧+PFC（100 mg/L）预处理+蛋白激酶C特异性阻断剂chelerythrine（1 μmol/L）组及缺氧/复氧+PFC（100 mg/L）预处理+p38 MAPK特异性阻断剂SB203580（10 μmol/L）组。倒置显微镜下观察细胞形态和自发搏动频率,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡率,酶标仪测定ROS含量、SOD活性及LDH漏出量,免疫印迹法检测PKC、p-p38 MAPK和HSP70的蛋白水平。结果: H/R组细胞活力下降,搏动频率减慢,细胞ROS含量、LDH漏出量、细胞凋亡率及p-p38 MAPK的水平均较N组显著增加（P<0.01）。经PFC预处理后,细胞搏动频率、SOD活性及PKC、HSP70的水平较H/R 组显著增加（P<0.05,）,p-p38 MAPK的水平和细胞凋亡率均减少（P<0.05）,而PFC的保护作用能被chelerythrine或SB203580抑制。结论: 山茱萸多糖可抑制心肌细胞缺氧/复氧损伤,其作用可能与增加SOD活性、抑制ROS产生、激活PKC并抑制p38MAPK的过度激活有关。     

缺氧、复氧条件下低氧反应元件（HRE）对心肌细胞转染hVEGF165基因表达的调控作用

目的：探讨缺氧、复氧条件下，低氧反应元件(HRE)作为氧条件基因表达控制开关，对心肌细胞转染rAAV-HRE9-hVEGF165基因表达的调控作用。方法:分离新生SD大鼠心肌细胞,采用无血清培养,将在HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。实验共分为8组：Ⅰ组（空白对照组）：常氧培养 24 h（氧浓度21％）；Ⅱ组（缺氧对照组）：常氧培养16 h，缺氧8 h（氧浓度1％）；Ⅲ组（转基因对照组）：常氧培养 24 h；Ⅳ组（转基因缺氧1组）：转基因后缺氧8 h；Ⅴ组（复氧1组）：常氧培养16 h，缺氧8 h、复氧4 h；Ⅵ组（复氧2组）：常氧培养16 h，缺氧8 h、复氧8 h；Ⅶ组（复氧3组）：常氧培养16 h，缺氧8 h、复氧12 h；Ⅷ组（转基因缺氧2组）：转基因后常氧培养16 h，缺氧20 h。ELISA法测定培养液VEGF蛋白含量；细胞免疫荧光染色及RT-PCR分别检测细胞内VEGF蛋白及VEGF165 mRNA的表达。结果:95%的培养心肌细胞可见自律搏动，cTn-I染色阳性率为86%；病毒转染率约为87%。Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ组培养液中VEGF蛋白含量显著高于其它各组（P<0.01），细胞免疫荧光VEGF蛋白染色呈阳性；RT-PCR测定显示，Ⅳ、Ⅴ及Ⅷ组可见484 bp目的条带。结论：rAAV-HRE9-hVEGF165可成功地转染原代培养心肌细胞，在缺氧环境下，受HRE的调控，VEGF165 mRNA及VEGF165蛋白可有效表达，而在常氧状态下，目的基因的表达及蛋白合成即行中止。     

HO-1在保护缺氧-复氧心脏中的作用及其机制研究

目的：研究血红素氧化酶1（HO-1）在对抗 心肌缺氧-复氧损伤中的作用，并探讨环氧化酶2（COX-2）是否参与其作用机制。 方法：采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型，观察心功能和酶学等指标。 结果：（1）HO-1的诱导剂高铁血红素可明显抑制缺氧-复氧心脏LVEDP增高 ，LVDP和±dp/dtmax的下降；减少复氧期LDH释放，缩小心肌梗死面积（P <0.01）。（2）HO-1的抑制剂可加重缺氧-复氧心脏LVDP和±dp/dtmax下 降，LDH释放和梗死面积明显高于单纯缺氧-复氧组（P<0.05）。（3）GC的抑制剂亚甲 蓝和COX-2的抑制剂塞来昔布均可部分取消高铁血红素降低缺氧-复氧心脏LVEDP，增加LVDP 和±dp/dtmax的作用，使LDH的释放和梗死面积明显增加（P<0.05） 。 结论：诱导HO-1增加可保护缺氧-复氧心肌，其作用可能通过激动鸟苷酸 环化酶途径，继而调节COX-2的活性来完成。     

低氧预处理对缺氧-复氧后体外培养大鼠海马神经元Fos、Jun表达和神经元凋亡的影响

目的　观察低氧预处理对体外培养大鼠海马神经元缺氧 复氧后Fos、Jun表达和神经元凋亡的变化。方法　取培养 12d的两组 (对照组和低氧预处理组 )神经元 ,同时置于缺氧环境 (0 90l LN2 、0 10l LCO2 )中培养 4h后取出 ,置含 0 10l LCO2 和空气的培养箱内复氧培养 2 4和 72h。于不同时间取出 ,观察神经元存活数 ,并分别用抗Fos和Jun抗血清进行免疫组织化学染色 ,观察Fos、Jun表达阳性和阴性神经元数目 ,计数Fos和Jun表达神经元所占百分率。并用原位末端标记 (TUNEL)法和流式细胞术分别检测缺氧 复氧对体外培养海马神经元凋亡的影响。　结果　缺氧 复氧后大鼠海马培养神经元中Fos、Jun表达阳性神经元百分率和凋亡神经元百分率均较缺氧前显著增加。经低氧预处理的海马神经元缺氧 复氧后Fos、Jun表达神经元和凋亡神经元百分率均较对照组明显减少。神经元损伤程度减轻 ,神经元存活数明显高于对照组。　结论　低氧预处理可使培养中海马神经元对缺氧产生耐受 ,减少缺氧 复氧后神经元Fos和Jun表达 ,减少缺氧 复氧后神经元凋亡。