促红细胞生成素预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的影响

摘要：目的评估促红细胞生成素（EPO）预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的干预效果及探讨其可能机制。方法健康雄性
SD大鼠随机分成3组：假手术（SO）组、重症急性胰腺炎（SAP）组和EPO预处理组,每组各30只。SAP组和EPO组建立逆行胆
胰管注射3.5%牛黄胆酸钠法(1 ml/kg) SAP模型,EPO组建模前1 h予静脉注射促红细胞生成素（3000 U/kg,1000 U/ml）,而SO
组和SAP组予静脉注射等体积生理盐水。术后第1、3、6、12、24小时取血清和胰腺标本。检测血清淀粉酶活性;ELISA法检测
血清IL-18水平,放射免疫法检测血清IL-10水平。免疫荧光法检测胰腺组织核因子-kappaB转运激活情况;胰腺组织石蜡切片
HE染色,进行胰腺病理学评分。结果与SAP组相应时点比较,EPO组核因子-kappaB激活率（除12 h外）显著降低（P<0.05）;血
清淀粉酶活性显著降低,3、6、12 h（P<0.05）;血清IL-18水平显著降低,3、6、24 h（P<0.05）,血清IL-10水平无明显降低;病理总评
分降低,6、12、24 h（P<0.05）。结论EPO预处理可通过抑制核因子-kappaB激活,减少促炎细胞因子产生,而对抗炎细胞因子影
响不明显,进而调控促炎-抗炎失衡状态,改善SAP病情。
     

促红细胞生成素对急性心肌梗死家兔心室重构的影响

目的：探讨促红细胞生成素（EPO）对急性心肌梗死（AMI）家兔心室重构的影响。方法：开胸冠状动脉结扎法制备家兔AMI模型,随机分为假手术组、AMI对照组和EPO组,每组各10只。腹腔注射EPO5000U/kg,3次/周,24h后采血测心肌酶,4周后处死动物,获取心肌组织测定心室重量、心肌胶原含量及组织标本固定做病理分析。结果：与AMI组相比,EPO组的心肌酶水平、左心室重量（LVW）和右心室重量（RVW）、心肌胶原含量显著降低（P〈0.05）,心肌特殊染色可见左心室非梗死区AMI组变性的心肌细胞周围、血管周围胶原成分增生明显,而在EPO组胶原沉积比AMI对照组明显减轻。结论：EPO对AMI家兔有明显的心脏保护作用,抑制心室重构。     

重症急性胰腺炎与核转录因子

核因子-KB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是一种具有基因转录调节作用的核蛋白,广泛存在于真核生物中,参与免疫、细胞凋亡、肿瘤的发生、发展等多种生理、病理过程。重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是外科高危急腹症之一,发病时核因子-κB被激活,参与TNFα、IL-1等重要炎症因子及白细胞黏附分子的基因表达,调控胰腺细胞的凋     

促红细胞生成素的研究进展

以往研究认为,促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的主要生物学作用为促进红系祖细胞分裂分化为成熟的红细胞,增加循环中红细胞数量,因此,在临床上EPO被广泛应用于治疗各种原因引起的贫血,包括肾性贫血、新生儿贫血、癌性贫血等。但是,近年来研究发现,EPO受体(EPOR)还广泛分布     

促红细胞生成素对小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响

目的研究小鼠黑色素瘤细胞株B16促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)的表达,探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对B16细胞增殖作用的影响及与Bcl-2家族蛋白表达的关系。方法采用RT-PCR及Western blot方法检测B16细胞EPOR mRNA和蛋白的表达。B16细胞经不同浓度EPO(0、5、10、100 U/mL)处理后,应用MTT法检测EPO对B16细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期变化;实时荧光定量RT-PCR和Western blot法检测EPO对B16细胞Bcl-2、Bcl-xL和Bax mRNA和蛋白表达的影响。结果B16细胞表达EPOR mRNA和蛋白。EPO可明显促进B16细胞的增殖(P<0.05);EPO可增加B16细胞S期的比例,减少G0/G1期细胞比例(P<0.05)。EPO作用后,B16细胞Bcl-2、Bcl-xL mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达水平未见明显变化。结论 B16细胞表达EPOR,EPO可明显促进该细胞增殖,影响细胞周期发展。其作用机制可能与其影响Bcl-2家族蛋白表达有关。     

瑞香素对大鼠重症急性胰腺炎促炎因子的影响及意义

目的:研究瑞香素对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量的影响,探讨瑞香素对大鼠SAP的保护作用。方法:用5%牛磺胆酸钠1ml/kg经胆胰管逆行注射建立SAP模型。分为四组:假手术组(SO组)、药物对照组(SO-D组)、模型组(SAP组)和干预组(SAP-D组)。造模后分别在3,6,12h处死大鼠,对胰腺组织HE染色后观察病理损伤情况,用ELISA法测定血清中TNF-α和IL-1β的水平。结果:胰腺组织病理学评分,以及血清促炎细胞因子TNF-α和IL-1β水平,SAP-D组均较SAP组明显降低(P<0.05),SO组与SO-D组之间无明显差别(P>0.05)。结论:瑞香素具有较强抗炎活性,对大鼠SAP具有明显保护作用。     

急性脑出血患者血清中促红细胞生成素含量研究

目的研究急性脑出血患者血清中促红细胞生成素含量以及与病程、颅脑影响改变的关系。方法采用放射免疫分析法（RIA）检测112例脑出血（CH）患者（病程14天内）和对照组血清Epo含量。结果（1）急性脑出血患者血清Epo含量明显高于对照组（P〈0．01），并且和急性期病程呈负相关（r=-0．655，P〈0．01）；（2）少量组和中量组血清Epo与对照组相比有显著性的差异（P〈0．05或P〈0．01），大量组与对照组相比无显著性差异（P〉0．05），并且和急性期病程呈负相关（r=-0．695，P〈0．01）。结论Epo在急性脑出血患者中起重要作用，对以后的临床治疗和应用作初步探索。     

急性脑梗死患者血清中促红细胞生成素含量研究

目的研究急性脑梗死患者血清中促红细胞生成素（Epo）含量以及与病程、颅脑影响改变的关系。方法采用放射免疫分析法（RIA）检测104例脑梗死（cI）患者（病程14天内）和对照组血清Epo含量。结果（1）急性脑梗死患者血清Epo含量明显高于对照组（P〈0．01），并且和急性期病程呈负相关（r=-0．533，P〈0．01）；（2）小灶组和中灶组血清Epo与对照组相比差异有显著性（P〈0．05或P〈0．01），大灶组与对照组相比差异无显著性（P〉0．05），并且和急性期病程呈负相关（r=-0．650，P〈0．01）。结论Epo在急性脑梗死患者中起重要作用，对以后的临床治疗和应用获得初步的数据。     

添加低聚半乳糖肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子的作用

目的 研究给予添加低聚半乳糖(GOS)肠内营养对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清炎性细胞因子的作用.方法 将SAP造模成功的32只SD大鼠随机分为普通肠内营养(EN)组(n=16)和GOS-EN组(N=16),同时设立假手术对照组(n=16),然后按照动物处死时间每组又分为4 d和7 d两个时间点亚组,每个亚组各8只动物.采用胰被膜下均匀注射38 g/L牛磺胆酸钠法建立SAP大鼠模型,检测各时间点血清淀粉酶、血清促炎细胞因子TNF-α和抗炎细胞因子IL-2、IL-10水平.结果 各SAP组的血清淀粉酶水平显著高于假手术对照组(P<0.01),GOS-EN组显著低于EN组(P<0.01);各SAP组的TNF-α和IL-10水平均显著高于假手术对照组(P<0.01),而IL-2显著低于假手术对照组(P<0.01).GOS-EN组的TNF-α水平显著低于EN组(P<0.05),而IL-2、IL-10水平以及IL-10/TNF-α比值显著高于EN组(P<0.05).结论 早期给予GOS-EN能够调节SAP大鼠促、抗炎细胞因子平衡.     

添加低聚半乳糖肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子的作用

目的研究给予添加低聚半乳糖（GOS）肠内营养对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血清炎性细胞因子的作用。方法将SAP造模成功的32只SD大鼠随机分为普通肠内营养（EN）组（n=16）和GOS—EN组（N=16）,同时设立假手术对照组（n=16）,然后按照动物处死时间每组又分为4d和7d两个时间点亚组,每个亚组各8只动物。采用胰被膜下均匀注射38g／L牛磺胆酸钠法建立SAP大鼠模型,检测各时间点血清淀粉酶、血清促炎细胞因子TNF—α和抗炎细胞因子IL-2、IL-10水平。结果各SAP组的血清淀粉酶水平显著高于假手术对照组（P〈0．01）,GOS—EN组显著低于EN组（P〈0．01）;各SAP组的TNF-α和IL-10水平均显著高于假手术对照组（P〈0．01）,而IL-2显著低于假手术对照组（P〈0．01）。GOS—EN组的TNF-α水平显著低于EN组（P〈0．05）,而IL-2、IL-10水平以及IL-10／TNF—α比值显著高于EN组（P〈0．05）。结论早期给予GOS—EN能够调节SAP大鼠促、抗炎细胞因子平衡。     

TNFAIP3/A20协同地塞米松在重症急性胰腺炎发生早期的保护作用

目的 了解肿瘤坏死因子诱导蛋白3 (TNFAIP3/A20)在重症急性胰腺炎(SAP)起病早期胰腺中的表达情况,并探讨TNFAIP3/A20协同地塞米松(DEX)在重症急性胰腺炎早期发挥的作用.方法 96只SD大鼠随机分为空白组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、地塞米松组(DEX组),3组于2、6、12、24 h时间点每组分别处死8只.SAP组和DEX组用牛黄胆酸钠诱导大鼠建立SAP模型,DEX组大鼠下肢肌注0.5 mg/100 g地塞米松进行治疗,其余两组不干预.HE染色观察胰腺、肝脏病理损伤,碘比色法测血清淀粉酶(AMS)含量,ELISA法检测胰腺组织NF-κB、IκB表达量,RT-PCR法检测胰腺组织中TNFAIP3/A20 mRNA表达量.比较3组大鼠不同时段上述指标的差异.结果 24 h DEX组胰腺炎症损伤较SAP组减轻;各时间点DEX组血清AMS较SAP组降低(P＜0.01);各时间点SAP组、DEX组血清AMS均较SO组升高(P＜0.01).各时间点DEX组较SAP组胰腺组织中NF-κB、IκB含量降低(P＜0.01).各时间点DEX组较SAP组胰腺组织TNFAIP3/A20 mRNA含量表达升高(P＜0.05),且随时间推移呈递增趋势.各时间点DEX组、SAP组胰腺炎症损伤评分、血清AMS、组织NF-κB、IκB、A20含量较SO组升高.结论 TNFAIP3/A20可能协同DEX在SAP疾病发生早期发挥保护作用.     

液体负平衡对重症胰腺炎患者预后的意义

目的 评价液体负平衡对重症胰腺炎预后的预测作用。方法 对该院1997年1月～2006年8月收治的46例重症胰腺炎患者,以入院3d内是否出现液体负平衡分为液体负平衡组及液体正平衡组,对其资料进行回顾性分析。结果 所有患者入院时均存在全身炎症反应综合征（SIRS）,表现出液体正平衡。液体负平衡组（17例）在APACHEⅡ、MODS发生率、住ICU时间、病死率、与正平衡组（29例）之间的差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论 入院3d内液体负平衡的出现可预测重症胰腺炎患者有较好的预后。     

重症急性胰腺炎的心血管表现

目的分析重症急性胰腺炎患者的心血管表现.方法观察51例重症急性胰腺炎患者的胸片、心电图、心脏B超、心肌酶学和肌钙蛋白T以及休克、心衰等临床征象.结果病死率29%,休克发生率35%,心衰49%,心电图异常92%,胸腔积液20%,肺淤血40%,心包积液10%,心肌酶增高30%,肌钙蛋白T阳性6%.结论急性重症胰腺炎患者,绝大部分伴有心血管系统异常的体征及辅助检查阳性.所以在老年人应注意与急性心肌梗死鉴别.     

电针天枢穴对重症急性胰腺炎大鼠血清促炎和抗炎因子的影响

目的：探讨电针天枢穴对牛黄胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）大鼠血清促炎和抗炎因子的影响。方法：将66只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组22只。通过胆胰管注射3.5%牛黄胆酸钠制作SAP模型。电针组分别在模型制作成功后和处死前给予电针天枢穴治疗各30min（2/100Hz,2mA）。各组大鼠分别于术后3、6和12h分批处死,留取血液及胰腺组织标本,酶联免疫吸附法检测各组血清中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）和白细胞介素10（interleukin-10,IL-10）的浓度,苏木精和伊红染色观察各组胰腺组织病理变化并进行评分。结果：在术后3、6和12h时模型组血清TNF-α、IL-6浓度和3、6h时的IL-10浓度均高于假手术组（P〈0.05）。术后6和12h时,电针组血清TNF-α、IL-6浓度较模型组明显降低,IL-10浓度、IL-10/TNF-α浓度比值较模型组升高（P〈0.05）,胰腺组织病理学评分较模型组明显降低（P〈0.05）。结论：电针天枢穴可以减轻SAP大鼠胰腺病理损伤,其作用机制可能是通过下调TNF-α、IL-6等促炎细胞因子的释放,并一定程度提高抗炎细胞因子IL-10水平,重建促炎和抗炎细胞因子的平衡,减轻SAP炎症的进一步发展。     

重症急性胰腺炎治疗焦点的转移

【】重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis,SAP)是消化系统常见的危重急症,临床救治难度大,病死率高。随着近年来亚特兰大新分类标准的提出,急性胰腺炎的治疗重点聚焦于早期脏器功能的支持、抗炎症反应、肠道功能维护等措施,使救治成功率有显著提高。随着更多的SAP患者成功度过急性期,后期并发症的防治日益受到重视,围绕急性胰腺炎的“二次打击”,有必要开展针对胰周液体积聚、感染性坏死、血管并发症等后期并发症的临床研究,进一步降低后期病死率,是急性胰腺炎治疗焦点的再次转变,也是急性胰腺炎多学科协作(MDT)理念的进一步延伸。     

大鼠急性重症胰腺炎模型制备的技术改进

目的 探讨大鼠重症急性胰腺炎模型制备技术的改进。方法60只健康SD大鼠随机分为改进组（A组,n=30）和对照组（B组,n=30）。A组采用一次性BD胰岛素注射器以5～10°角（针头与肠胰平面夹角）、B组采用一次性1ml注射器以10～150角,分别经十二指肠乳头逆行胰胆管穿刺注射5％牛磺胆酸钠诱导大鼠重症急性胰腺炎模型。各组大鼠分别于术后24h处死,观察胰腺大体及光镜下病理改变,计算诱导成功率、24h存活率及肠坏死率,并进行统计学比较。结果两组大鼠胰腺均呈出血坏死性改变,光镜下均可见炎性细胞浸润。与对照组相比,改进组肠坏死率降低（P＜0．05）。结论应用此方法对逆行胰胆管穿刺注射法制作大鼠急性重症胰腺炎模型加以改进,具有创伤小,操作简单,模型肠坏死率低等优点,是一种较理想的制模方法。     

重症急性胰腺炎大鼠血清Chemerin水平变化的实验研究

目的探讨在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）大鼠血清中Chemerin、C反应蛋白（C—reative protein,CRP）、肿瘤坏死因子Ot（TNF—Ot）水平的变化。方法胆胰管内注射5％牛黄胆酸钠造模。将动物随机分为对照组、假手术组、重症急性胰腺炎组,各组于术后12h时间点处死动物,处死前抽血测血清淀粉酶、Chemerin、TNF—Ot、CRP水平,同时取处死大鼠的胰腺组织,测定胰腺／体重比值,行HE染色,观察大鼠胰腺组织病理变化。结果SAP组血清chemerin、CRP、TNF—Ot水平较正常对照组、假手术组均明显升高（P〈0．01）。血清Chemerin、CRP、TNF—Ot水平改变与胰腺组织病理评分呈正相关（r=0．802、0．785,0．769,P〈0．01）。结论Chemerin可能与重症急性胰腺炎的发生、发展有关,可作为早期预测急性胰腺炎严重程度的有效指标之一。     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎肠屏障作用的实验研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)肠屏障的作用及机制。方法:54只清洁健康雄性SD大鼠,随机分成假手术(Sham)组、SAP组和NAC+SAP3组,每组18只。建模后6、12、24h分批处死,采集腹主动脉血测定二胺氧化酶(DAO)及淀粉酶(AMY)含量;取胰腺和末端回肠标本进行组织病理诊断;小肠组织匀浆测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与Sham组比较,SAP组血AMY和DAO水平均明显增高(P<0.05),小肠组织中SOD和GSH水平明显降低(P<0.05),MDA水平明显增高(P<0.05)。与SAP组比较,NAC+SAP组其6 h时间点血清AMY、DAO水平与SAP组同时间点无明显变化(P>0.05),而12、24 h时间点较SAP组同时间点显著降低(P<0.05);其小肠组织中MDA、SOD和GSH水平在6 h时间点与SAP组同时间点无明显差异(P>0.05),12、24 h时间点SOD和GSH水平明显增高(P<0.05),MDA水平明显降低(P<0.05)。结论:NAC通过增强肠组织抗氧化能力、维护肠组织内氧化还原平衡,可以保护肠黏膜结构和功能的完整性,对预防SAP大鼠肠屏障损害具有重要意义。