掌叶半夏凝集素A的分离纯化及分析

首次从中草药掌叶半夏（ＰｔｎｅｌｌｉａｐｅｄａｔｉｓｅｃｔａＳｃｈｏｔｔ）中通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析、ＤＥ－３２离子交换层析和制备电泳分离纯化出一种对兔红血球有血凝活性的凝集素，称之为掌叶半夏凝集素Ａ（ＰｉｎｅｌｌｉａｐｅｄｔａｉｓｅｃｔａｌｅｃｔｉｎＡ，ＰＰＬ－Ａ）。在ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳上ＰＰＬ－Ａ均显示出一条蛋白质着色带，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其Ｍｒ为１６．３×１０３，用等电聚焦电泳测得其等电点为５．８，经ＤＮＳ－Ｃｌ分析法分析其氨基末端为丙氨酸。对所含的１８种氨基酸作了定量分析。通过Ｓｃｈｉｆｆ试剂电泳染色法鉴定ＰＰＬ－Ａ为糖蛋白，用酶标凝集素结合法分析了糖链的结构，糖链部分含有甘露糖，岩藻糖和乙酰氨基葡萄糖。     

中央灰质注射升压素和催产素受体拮抗剂对刺激视上核镇痛和加强电针镇痛效应的影响

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的镇痛和加强电针镇痛的影响。结果：ＰＡＧ内注射Ｖ１拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）ＡＶＰ对化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛和加强电针镇痛无影响；Ｖ１Ｖ２受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｅｔ）ＤＡＶＰ可部分抑制这种效应；ＰＡＧ内注射２００ｐｇＯＴ受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）２，Ｏｒｎ８－ｖａｓｏｔｏｃｉｎ（ＯＶＴ）则可完全阻断这种效应。结论：ＰＡＧ参与刺激ＳＯＮ镇痛和加强电针镇痛的过程，ＳＯＮ释放的ＯＴ通过作用于ＰＡＧ内的ＯＴ和Ｖ２受体而发挥镇痛和加强电针镇痛作用。     

镇痛灵辅助硬膜外阻滞的临床观察

观察镇痛灵辅助硬外阻滞对呼吸，循环及牵拉反应的影响。方法将２４例ＡＳＡⅠ－Ⅱ级择期行盆腔手术的病人随机分为哌替啶组和能灵组。麻醉平面固定后，Ｐ组静注哌替啶 ５０ｍｇ、氟哌啶 、２．５ｍｇ；Ｅ组静注镇痛灵１５ｍｇ、氟哌啶２．５ｍｇ。结果两组病人术中均无明显牵拉痛及恶心、呕吐等反应。Ｐ组给药后ＳｐＯ２，ｍａｐＦＱＵ ＪＥＪＯＷＱＡ ＧＦ ＥＴ ＡＸ ＵＥＪＰ（Ｐ〈０．０５，Ｐ〈０．０１），ＨＲ则明显增     

溶栓药APSAC的制备和鉴定

重组链激酶（ｒ－ＳＫ）由工程菌提取液经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱纯化，比活性达１０５ＩＵ／ｍｇ，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示分子量为７８．０２４７×１０－２４ｋｇ的一条带。人新鲜血浆经Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤制备纤溶酶原（ｐｌｇ），比活性达２３．７ＩＵ／ｍｇ，活性回收率为１３．６％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示分子量为１４７．７４８９×１０－２４ｋｇ的一条带。对－茴香酸－对－脒基ｒ－ＳＫ和ｐｌｇ的混合物经苯酯盐酸盐（ＡＰＡＮ）修饰后制备茴香酰纤溶酶原链激酶激活剂复合物（ＡＰＳＡＣ），产物经Ｌ－ｌｙｓｉｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示分子量为７８．０２４７×１０－２４ｋｇ和１４７．７４８９×１０－２４ｋｇ两条带，其拟一级水解速率常数为１．２６×１０－４ｓｅｃ－１。体外溶栓实验证明其有溶栓活性。     

掌叶半夏凝集素A的分离纯化及分析

首次从中草药堂叶半夏（Ｐｔｎｅｌｌｉａ ｐｅｄａｔｉｓｅｃｔａ Ｓｅｈｏｔｔ）中通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００分子筛层析、ＤＥ－３２离子交换层析和制备电泳分离纯化出一种对兔红血球有血凝生的凝信要素，称之为掌叶半夏凝集素Ａ（ｐｉｎｅｌｌｉａ ｐｅｄｔａｉｓｅｃｔａ ｌｅｃｔｉｎ Ａ，ＰＰＬ－Ａ）ｄ ＰＡＧＥ＇ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳上ＰＰＬ－Ａ均显示出一条蛋白质着色带。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定     

溶栓药APSAC的制备和鉴定

重组链激酶（ｒ－ＳＫ）由工程菌提取液经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌｓ－２００柱纯化，比活性达１０＾５ＴＵ／ｍｇ，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示分子量为７８．０２４７×１０＾－＾２＾４ｋｇ的一条带。人新鲜血浆经Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤制备纤溶酶原（ｐｌｇ），比活性达２３．７ＴＵ／ｍｇ，活性加收率为１３．６％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示     

The future pattern of surgical department and training of surgeons in community hospitals.

ＴＨＥＦＵＴＵＲＥＰＡＴＴＥＲＮＯＦＳＵＲＧＩＣＡＬＤＥＰＡＲＴＭＥＮＴＡＮＤＴＲＡＩＮＩＮＧＯＦＳＵＲＧＥＯＮＳＩＮＣＯＭＭＵＮＩＴＹＨＯＳＰＩＴＡＬＳＩｎｔｈｅｗａｋｅｏｆｔｈｅｒｅｆｏｒｍａｎｄｏｐｅｎｉｎｇｐｏｌｉｃｙ，ａｒａｐｉｄｅｃｏｎｏ...     

两种术后硬膜外镇痛泵自控镇痛作用临床观察

目的：对比观察电子泵与机械泵用于妇产科手术后硬膜外自控镇痛（ＰＣＥＡ）的镇痛效果，方法：将１５３例行妇产科手术患者分成两组，其中一组８９例，以电子泵行ＰＣＥＡ，另一组６４例，以机械泵行ＰＣＥＡ，比较观察两组的ＶＡＳ评分，追加用药量情况及镇痛泵使用时间，结果：两种镇痛泵镇痛效果均满意（ＶＡＳ＜３）。电子泵组需追加用药量的患者的百分比显著高于机械泵组（Ｐ＜０．０１），使用时间显著敌于机械泵（Ｐ＜０．０１）。结论：电子泵与机械泵用于妇产科手术后ＰＣＥＡ均有良好的镇痛效果，但机械泵在减少药物追加量，延长使用时间等方面比电子泵具有优势。     

高压液相色谱法纯化抗人大肠癌单克隆抗体

采用Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司的ＭＡＰＳ１００单克隆抗体纯化系统，利用羟基磷灰石层析柱对鼠腹水中抗人大肠癌单克隆抗体进行分离纯化。结果：还原性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示所获抗体为单一组分，ＥＬＩＳＡ证实抗体活性满意，所获抗体收率为２３％～５２％，重复进样收率稳定（３８．６３±２．２６）％，ｎ＝３。     

日本血吸虫多坐分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符     

蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离方法研究

目的：探索蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ(antineoplastic polypeptide-Ⅲfrom APBMV,AP-Ⅲ)的分离和纯化方法。方法：蝎毒经预处理后,分别采用pharose FF阳离子交换凝胶柱(cm×5 cm交换柱,流速0．8 ml／min,梯度洗脱1 200 min)层析法和Sepharose FF阳离子交换凝胶柱与Sephadex G-50凝胶柱(柱：100cm×5 cm;流速：0．5 ml／min)联合层析法,分离AP-Ⅲ,用HPLC仪检测2种方法分离出的AP-Ⅲ的纯度及产率。结果：单独用Sepharose FF阳离子交换凝胶柱分离,AP-Ⅲ产率为2．24％,纯度为89％。Sephadex G-50凝胶柱与Sepharose FF阳离子交换凝胶柱联用,其产率及纯度分别提高至4．72％和％。结论：Sephadex G-50与Sepharose FF联用可提高AP-Ⅲ的产率及纯度,从而为开发和利用AP-Ⅲ提供了实验依据。     

胰岛素受体的分离纯化及其酪氨酸蛋白激酶特性的研究

本文利用差速离心,2%Triton X-100增溶,伴刀豆球蛋白A-琼脂糖,胰岛素-亲和胶及麦胚凝集素-亲和胶亲和层析分离纯化了人胎盘的胰岛素受体。纯化的受体经圆盘电泳及HPLC凝胶过滤得单一峰。SDS-电泳显示分子量分别为135000及90000的两条带。纯受体有自身磷酸化作用,且对外源性底物呈现酪氨酸蛋白激酶活性。有意义地是纯化的受体的磷酸化可受促癌剂促癌因子抑制。     

长白山白眉蝮蛇毒磷脂酶A2的提纯

应用ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－５０离子交换层析法，从长白山白眉蝮蛇毒中分离出２个具有磷旨酶Ａ２（ＰｈｏｓｐｈｌｉｐａｓｅＡ２，ＰＬＡ２）活性的蛋白质组分。其中之一再经ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｌｏｓｅＡ－５２离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶过滤进一步纯化，经两种不同类型的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定均为单一条带，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶过滤呈单一对称的峰形。     

人胎盘催乳素的纯化与鉴定

以正常产妇的新鲜胎盘为原料，经过盐析、等电点沉淀、离心等粗提，再经ＤＥＡＥ─纤维素阴离子交换层析，Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００凝胶过滤，并首次利用圆盘制备电泳纯化。最后获得人胎盘催乳素纯品，其活性采用１２５Ｉ－ｈＰＬ放免检测药盒测定。     

酵母表达中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的初步纯化

目的：研究酵母表达中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的纯化方法。方法：表达上清用（NH4）2SO4盐析、凝胶过滤、阳、阴离子交换层析等方式进行纯化。通过比较产品纯度、收率与质量确定最佳实验方案。纯化产品用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western blot、等电聚焦与高效液相色谱进行鉴定。结果：获得较高纯度的NGAL。结论：（NH4）2SO4盐析、凝胶过滤和阳离子交换是纯化酵母表达NGAL的最佳实验方案。     

沉淀法和层析法结合分离纯化人血清HDL

本文用DS和Ca~(++)沉淀法结合凝胶过滤法分离纯化了人血清HDL。用电泳、免疫学、分析型超速离心对纯化的HDL进行了纯度和理化性质的鉴定,并进行了化学组成的分析。其结果与文献报道一致。免疫学分析其抗原性没有改变。该方法具有经济、制备量大、操作简单等优点。     

基因工程人生长激素的纯化及鉴定

将在中国仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中基因克隆表达的人生长激素（ｈＧＨ）培养物经Ｏｃｔｙｌ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ疏水层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤层析，ＤＥＡＥ－ＣｅｌｌｕｌｏｓｅＤＥ５２离子交换层析，得到了较纯的ｈＧＨ。通过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），Ｎ－末端氨基酸分析及放免分析，证明基因工程ｈＧＨ与天然ｈＧＨ性质相符。     

牛肾上腺皮质细胞合成蛋白多糖的研究

我们利用基础培养下的牛肾上腺皮质束、网状带细胞,通过代谢性标记、特异性酶或化学降解、离子交换色谱、凝胶滤过、免疫沉淀分析等方法,研究了该细胞合成蛋白多糖的性质和分子大小。结果表明该细胞在基础培养条件下合成的~(35)S-标记分子是硫酸乙酰肝素蛋白多糖。这种蛋白多糖表现出明显的不均一性。因为三种分子硫酸乙酰肝素蛋白多糖的分子量分别是230、8.3和330kDa。用链霉蛋白酶水解去角蛋白后,它们各自释放的相应的氨基葡聚糖链为30,2.2,150kDa。     

赤子爱胜蚓降血压成分的研究

赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)组织匀浆抽提液,经过Sephadex G-25凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换、Sephadex G-10凝胶过滤及透析,得到具有强烈而持久的降血压组分B-I-b,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,B-I-b有二个分子量分别为23 000和25 000的组分组成,其降血压作用的机理还需进一步探讨。     

The bovine immune response to Brucella abortus. III. Preparation of antisera against a Brucella component precipitated by sera of some infected cattle

Two methods are described for the partial purification of a high molecular weight, heat-resistant component (CO1) of sonicates of smooth and rough Brucella abortus which is precipitated by sera of some infected cattle. Method 1, a combination of gel filtration chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis, was used to prepare CO1 from sonicates of a smooth field strain of B. abortus. Method 2, a combination of gel filtration chromatography and heat treatment, was used to obtain CO1, from sonicates of rough B. abortus strain 45/20. Rabbit antisera produced against CO1 prepared by either method contained only CO1 precipitins but were negative in standard agglutination and complement fixation tests conducted with whole cell antigens. Evidence is presented that CO1 is identical to Brucella antigen A2, and it is proposed that in future the designation A2 be employed.