073 HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA-G分子是一种非经典HLA-Ⅰ类抗原,相对于经典的Ⅰ类抗原,它的组织分布非常局限,具有有限的多态性.它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异,HLA-G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异,导致NF-κB、IRF1、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA-G基因不能发挥作用.最早在母胎界面发现存在HLA-G分子表达,它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体(KIR)结合,从而抑制它们的杀伤作用,这可能是母胎耐受的重要机制.近来的研究表明HLA-G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞.它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点.     

HLA-G分子表达调控及其功能研究进展

HLA—G分子是一种非经典HLA—Ⅰ类抗原，相对于经典的Ⅰ类抗原，它的组织分布非常局限，具有有限的多态性。它的表达调控与经典Ⅰ类抗原存在着很大的差异，HLA—G基因内经典Ⅰ类基因反式活化的3个主要元件增强子A、ISRE和SXY均发生变异，导致NF—κB、IRFl、CⅡTA介导的反式激活途径对HLA—G基因不能发挥作用。最早在母胎界面发现存在HLA—G分子表达，它可以与NK细胞和CTL表面相应的杀伤细胞抑制性受体(KIR)结合，从而抑制它们的杀伤作用，这可能是母胎耐受的重要机制。近来的研究表明HLA—G分子还可表达于少数类型肿瘤细胞、一些受到感染的细胞和一些正常细胞。它的表达调控及其可能的功能是近来的研究热点。     

HLA-G分子的最新研究进展

HL A- G属于一种非经典 HL A- I类抗原 ,主要表达于母胎界面的滋养层细胞。迄今为止的研究表明 ,HL A- G分子可以与相应杀伤细胞抑制性受体 (killer inhibitory receptor,KIR)作用 ,抑制 NK细胞和 CTL 的杀伤作用 ,这可能是诱导和维持母胎耐受的一个重要机制。与经典 I类分子类似 ,HL A- G的凹槽结构可结合九肽抗原 ,从而可能向 TCR提呈抗原或直接与 T细胞表面 KIR结合 ,进而调控 T细胞功能     

HLA-G研究进展

HLA-G分子属MHC Ⅰ类非典型分子(MHC Ⅰb),组织特异性地高表达于胎母界面的滋养层细胞,MHC Ⅰ、Ⅱ类抗原是缺乏的。HLA-G分子通过NK细胞受体抑制NK细胞杀伤活性,并作为CD8~+细胞毒抑制性T细胞的识别和激活因子,抑制CTL的杀伤作用,HLA-G在胎母耐受中发挥重要作用。     

HLA-G基因表观遗传学调控研究进展

人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen G,HLA-G)是机体内重要的免疫耐受分子,具有组织限制性。生理条件下,HLA-G分子限制性分布于免疫豁免组织细胞上,但在病毒感染及肿瘤等病理状态下,HLA-G在相应组织细胞上可获诱导性表达。表观遗传学是研究基因核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表型发生改变的一门学科。HLA-G基因诱导性表达和表观遗传因素关系密切,本文就HLA-G抗原调控的表观遗传学机制作一综述。     

HLA-G结构与功能研究进展

胎盘组织外绒毛滋养层细胞不表达经典的HLAⅠ类分子 ,使这些细胞易感于NK细胞的攻击 ,但由于表达非经典的MHCⅠ类分子HLA G可以防止NK细胞识别这些细胞 ,HLA G至少是 3种NK细胞抑制受体的配体 ;表达HLA G的滋养层细胞可能递呈肽类给T细胞 ,转染膜结合型HLA G1, G2及可溶型HLA G分子的细胞能抑制同种T淋巴细胞的增殖反应及抗原特异性的CTL反应 ;以及HLA G基因的多态性程度是有限的 ,提示HLA G在母体对半异体的胎儿的免疫耐受中可能起一个重要的作用。     

HLA-G研究进展及与肿瘤的相关性

HLA-G属于非经典的HLA-Ⅰ类分子，特异性表达于母胎界面，对于维持人类正常妊娠有重要作用。在肿瘤细胞的异位表达，引起肿瘤细胞逃避宿主免疫监视日益受到重视。本就HLA-G基因结构、多态性、分布、免疫功能等方面的最新研究进展及与肿瘤的相关性作一综述。     

HLA-G多态性研究进展

HL A- G是非经典的 HL A- I类分子 ,限制性地表达在母胎界面的组织细胞上 ,对它在妊娠过程中所发挥的作用已引起广泛的兴趣 ,在肿瘤细胞的免疫逃逸方面的功能也日益受到重视 ,虽有各种假说 ,但具体的作用机制仍不清楚。 HL A- G多态性研究是探讨其作用机制的一条重要途径 ,近年来许多学者在这方面做了大量的工作 ,力求通过 HL A- G基因水平的研究进一步阐明 HL A - G的功能及作用机理。本文就 HL A - G基因结构、基因多态性及其与疾病相关性等方面作简要阐述     

HLA-Gα1结构域Met76和Gln79在KIR2DL4特异性识别中的作用研究

目的 探讨HLA-G α1结构域中特异的Met76和Gln79两个位点在HLA-G特异性受体KIR2DL4识别中的作用.方法 采用真核表达载体CD51neg1,克隆表达KIR2DL4胞外区与IgGFc段的可溶性融合蛋白;利用“桥式”PCR和“点突变”方法,将位于HLA-G目的基因α1结构域中编码Met76和Gln79的密码子突变为Ala76,79（HLA-mG）,通过逆转录病毒表达载体分别使野生型HLA-G及其突变体在HLAⅠ分子阴性的K562细胞上表达.流式细胞术分别测定KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白与野生型HLA-G及Met76、Gln79→Ala76,79 HLA-G突变体结合的荧光强度,通过比较两者的平均荧光强度分析HLA-G分子Met76、Gln79残基在HLA-G与其受体KIR2DL4识别过程中的作用.结果 Western blot结果显示,本实验成功表达KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白.FACS结果表明,野生型HLA-G及Met76、Gln79→Ala76,79 HLA-G突变体在K562细胞上高表达.Met76、Gln79突变为Ala76,79后能显著影响KIR2DL4对HLA-G分子的识别.结论 HLA-Gα1结构域中Met76和Gln79可能是其特异性受体KIR2DL4识别的关键位点.     

可溶性HLA-G上调蜕膜免疫细胞NK细胞受体的表达

sHLA-G是妊娠期特异的免疫抑制分子,在受孕子宫及妊娠期女性外周血中含量丰富,提示其在维持母胎耐受中发挥重要作用。我们前期研究发现:早期难免流产病人组蜕膜组织KIR2DL4、ILT-2、ILT-4分子表达的水平明显低于正常妊娠对照组。为进一步分析这些抑制性受体表达下降与sHLA-G是否存在联系,我们对sHLA-G与蜕膜组织免疫细胞NKR表达的关系进行了研究。我们将不同量的sHLA-G1、sHLA-G2蛋白加至蜕膜单个核细胞悬液、外周血单个核细胞悬液及NK92细胞株中,分别孵育12h、24h、48h后,用Real-Time RT-PCR、FACS对NKR的表达进行检测。研究发现sHLA-G可以不同程度地上调蜕膜单个核细胞、外周血单个核细胞、NK92细胞表面ILT-2、ILT-4、KIR2DL4的表达。这个发现让我们对sHLA-G诱导免疫耐受的机制有了更深的认识。sHLA-G上调抑制性受体表达这一作用具有重要生理意义,它可以抑制效应细胞的杀伤功能,使母胎界面微环境适于胎儿存活,从而维持母胎免疫耐受。     

HLA-G与HIV病毒感染的研究进展

影响和干预人类白细胞抗原(HLA)在宿主细胞表面表达是病毒逃避机体抗病毒免疫的重要途径之一。人类白细胞抗原G(HLA-G)是机体内一个重要的免疫耐受分子,多种病毒感染后均可诱导HLA-G分子的表达,促进病毒的免疫逃逸。在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染过程中,HIV可通过多种机制诱导HLA-G分子在单核细胞、T淋巴细胞表面的异常表达及分泌大量可溶性HLA-G(sHLA-G)。HIV诱导表达的HLA-G分子与其受体结合,通过直接抑制NK细胞、T淋巴细胞等免疫细胞的生物学活性或间接诱导HLA-G+Treg发挥免疫抑制功能,使HIV病毒有效逃避宿主的免疫监视及攻击。本文就HLA-G结构、受体、基因多态性与HIV易感性、HIV感染与HLA-G分子异常表达,和HLA-G对免疫细胞的影响等作一综述。     

HLA-G研究进展及与肿瘤的相关性

HLA G属于非经典的HLA Ⅰ类分子 ,特异性表达于母胎界面 ,对于维持人类正常妊娠有重要作用。在肿瘤细胞的异位表达 ,引起肿瘤细胞逃避宿主免疫监视日益受到重视。本文就HLA G基因结构、多态性、分布、免疫功能等方面的最新研究进展及与肿瘤的相关性作一综述     

HLA-G与移植免疫研究进展

人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen G,HLA-G)是机体内一种重要的免疫耐受分子。HLA-G分子通过直接与免疫细胞上的抑制性受体结合或间接诱导产生HLA-G依赖性调节性细胞,改变细胞因子表达谱,从而调节机体的免疫状态。随着研究的深入,HLA-G分子生物学功能及临床意义从最初的母胎免疫耐受延伸至肿瘤免疫,感染免疫和移植免疫等研究领域。本文就HLA-G在移植免疫中的表达意义及临床应用等相关研究进展作一综述。     

HLA-G与免疫耐受

HLA-G是一种非经典人类主要组织相容性复合物Ⅰ类分子,与器官移植、生殖及肿瘤等多种免疫反应有关,是引起免疫耐受的一种因子.     

HLA-G在肿瘤中的表达

自1987 年Geraghty等[1]同事第一次报道发现HLA-G 以来, 至今已有十余年, 人们对这个非经典HLA -I 类分子的了解逐渐深入.HLA-G（human leucocyte antigen-G） 即人类白细胞抗原系统-G 是一种非经典的HLA- I类抗原,它定位于6 号染色体短臂HLA 远端300bp以内, 并选择性的在胎盘表达,参与保护胚胎免受母体淋巴系统的攻击.1900年Kovats[2]发现它在胎盘绒毛远端的细胞滋养层特异表达.     

可溶性HLA-G1、-G2的原核表达及其蛋白质产物的功能检测

sHLA-G存在于整个妊娠期母胎接触面及母体血循环中,目前被认为是妊娠期一种特异性免疫抑制分子。实验将sHLA-G1、sHLA-G2基因克隆于原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导实现目标融合蛋白的高效表达,并通过Ni2+-NTA柱纯化、蛋白质透析梯度复性获得纯化的His-sHLA-G1、His-sHLA-G2融合蛋白。融合蛋白再经凝血酶酶切、苯甲脒琼脂糖凝胶吸附去除6-His标签后,用于体外功能鉴定。结果显示:sHLA-G2与sHLA-G1一样,同样具有抑制T细胞增殖、抑制NK细胞杀伤活性的功能,提示sHLA-G2为一种免疫致耐分子。     

针对HLA-G的siRNA的载体构建与表达及效应检测

目的构建针对HLA-G的siRNA的表达载体,研究其对NK细胞杀伤效应的影响。方法构建针对HLA-G的siRNA真核表达质粒pSuppressor-U6-neo-HLA-G,转染JEG-3滋养细胞系。采用RT-PCR、Western blot检测转染的JEG-3细胞中HLA-G的表达水平。将NK-92MI细胞(效应细胞)与滋养细胞(靶细胞)共同培养,以LDH释放法观察不同效靶比例时NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤效应。结果NK-92MI细胞对转染针对HLA-G的siRNA的JEG-3细胞的杀伤作用较未转染细胞明显升高(P<0.001)。结论针对HLA-G的SiRNA增加NK细胞对滋养细胞的杀伤,HLA-G具有保护滋养细胞免受NK细胞杀伤的作用。     

HLA-G蛋白在原因不明习惯性流产中的表达

目的探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)蛋白在早孕绒毛和原因不明习惯性流产中的表达及意义。方法应用免疫组化法检测30例早孕绒毛、25例原因不明习惯性流产的表达情况。结果 HLA-G蛋白在原因不明习惯性流产患者的绒毛表达明显低于早孕绒毛,两者比较,差异有显著(P<0.05)。结论 HLA-G蛋白的表达可能是原因不明习惯性流产患者的原因之一。     

NK细胞受体KIR2DL4的结构与功能

KIR2DL4分子是NK细胞受体(NKR)的一种,属于免疫球蛋白样(IgSF)受体家族成员,主要分布在自然杀伤(Natural killer,NK)细胞上。KIR2DL4是HLA-G分子的特异性受体,结构上具备激活性和抑制性受体的双重特点,能够通过不同途径影响NK细胞的活性,具有重要的免疫调节功能。     

HLA-G在妊娠中的研究进展

人类白细胞抗原G（HLA-G）属于非经典人类主要组织相容性复合体（MHC-Ib）类分子,具有低度多态性和限制性分布的特点,可以通过抑制自然杀伤（NK）细胞、细胞毒性T细胞等效应细胞在妊娠母胎界面免疫中发挥着重要的作用,本文对HLA-G的功能及在试管婴儿和病理妊娠中的研究进展进行了综述。