蛋白质组学法检测膀胱移行细胞癌患者尿液中特异性肿瘤标志物

 目的:检测膀胱移行细胞癌患者尿液中差异表达蛋白质,筛选新的肿瘤标志物,进而探讨其与TCC发病机制的相关性,以及蛋白质组学法在膀胱移行细胞癌早期无创诊断方面的研究应用价值。 方法:选取青岛大学医学院附属医院泌尿外科TCC住院病人尿液标本24例,另外选取12例TCC术后病人、12例健康志愿者的尿液标本作为对照。采用蛋白质芯片技术结合表面增强激光解析/离子化-飞行时间-质谱技术检测各组尿液标本的差异表达蛋白质,然后到蛋白数据库中鉴定筛选肿瘤标志物。 结果:TCC组与对照组尿液标本的蛋白质存在差异表达,IMAC-Cu-3蛋白质芯片共发现6个蛋白及2个蛋白簇表达水平发生变化。联合检测3438Da及8002Da蛋白可使诊断TCC的敏感度达83.3%,特异性达75.0%。3438Da蛋白已被鉴定为α-defensin蛋白;搜索SWISS-PRO蛋白数据库,4310Da~5150Da蛋白簇为gp40蛋白。 结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便易行、用量少和高通量分析方法,能直接筛选出膀胱移行细胞癌患者尿液中特异的肿瘤标志物,为蛋白组学方法在膀胱移行细胞癌早期无创诊断、判断预后及探讨发病机制方面的研究应用开拓了广阔前景。     

膀胱移行细胞癌的遗传学研究现状

膀胱移行细胞癌的遗传学研究主要围绕肿瘤的形成、诊断、治疗以及预后判断等方面进行,发现膀胱移行细胞癌的形成至少存在2条遗传学通路。由于膀胱移行细胞癌的遗传学改变缺乏特异性,利用单一遗传学改变诊断膀胱移行细胞癌敏感性低,采用多个遗传学指标诊断膀胱移行细胞癌可提高其敏感性,已有基因组水平的试剂盒应用于临床诊断。研究还发现一些可能与预后判断相关的遗传学改变。基于遗传学的诊断、分子分型和个体化治疗是今后研究的方向。     

少儿膀胱移行细胞癌

膀胱恶性肿瘤是泌尿外科中的常见病,多发于中老年,且92.8%为移行细胞癌;而在少儿(少年儿童,年龄≤20岁,下同)病例中,以横纹肌肉瘤最为多见,移行细胞癌非常少见,目前国内缺乏相关系统描述,我们复习了国内外的文献报道,在此对少儿膀胱移行细胞癌的流行病学、病因、临床表现、治疗     

p34 cyclinB1在膀胱移行细胞癌的表达及意义

目的：探讨p34cyclinB1与膀胱移行细胞癌病理分级分期的关系,评价是否可以作为判断膀胱移行细胞癌生物学行为的指标。方法：应用免疫组化法（SP法）,检测不同组织标本中p34及cyclin B1水平。结果：p34,cyclinB1在膀胱移行细胞癌中的阳性率分别为69.4%和75.5%,与癌旁粘膜和正常膀胱粘膜相比,有显著性差异（P〈0.05）,并与膀胱移行细胞癌的分级和分期呈正相关。结论：p34,cyclinB1在膀胱移行细胞癌的发生发展中起重要的作用。检测p34,cyclin B1可能对预测膀胱移行细胞癌预后有帮助。     

膀胱移行细胞癌中碱性成纤维细胞生长因子表达的意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌中碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的表达及其与临床病理指标的关系。方法 采用免疫组织化学方法，对８例正常膀胱组织及６２例原发性膀胱移行细胞癌中的ｂＦＧＦ进行检测。结果 膀胱移行细胞癌组织中ｂＦＧＦ阳性表达率为４６．８％。低分化癌和浸润性癌中的ｂＦＧＦ阳性表达率明显高于高分化癌和浅表性癌（Ｐ〈０．０５），复发者的阳性表达率明显高于未复发者（Ｐ〈０．０５），ｂＦＧＦ阳性表达者     

野生型PTEN基因高表达对膀胱移行细胞癌EJ细胞的抑癌作用

目的 探讨外源性野生型人酪氨酸磷酸酶（PTEN）基因的高表达对膀胱移行细胞癌EJ细胞的抑癌作用。方法 利用携带人PTEN基因的野生型、磷酸酶域突变型质粒体外分别转染人膀胱移行细胞癌EJ细胞。Western blot检测目的基因PTEN的表达,观察细胞形态变化及超微结构变化;MTIO法检测细胞增殖率及转染细胞对吡柔比星（THP）和丝裂霉素（MMC）的敏感性;Western blot法检测bcl-2蛋白的表达。以空载质粒作为对照。结果 质粒转染后,EJ细胞的PTEN蛋白表达上升75．0％。转染野生型质粒后,EJ细胞异型性低,出现典型凋亡小体,细胞增殖率下降40．1％,bcl-2蛋白表达被下调,并提高了对THP和MMC的敏感性。而转染突变型质粒的EJ细胞则无此作用。结论 野生型PTEN基因在体外对膀胱移行细胞癌EJ细胞增殖有明显抑制作用,诱导细胞凋亡,磷酸酶域突变型PTEN基因无此作用。野生型PTEN的抑癌作用可能与其对bcl-2蛋白表达的下调有关。     

膀胱移行细胞癌中Survivin的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制因子Survivin在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达情况及其与BTCC病理临床特征的关系。方法 68例膀胱移行细胞癌石蜡包埋标本作为实验组,另取10例非肿瘤患者的正常膀胱黏膜组织作为对照组。采用免疫组化SP法检测所有标本中Survivin的表达,并进行统计学分析。结果 BTCC组、正常组Survivin的阳性表达率分别为72.1%、0%(P<0.05)。病理Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级者Survivin的阳性表达率分别为45.8%、83.3%、92.9%,Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅲ级比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。浅表型、浸润型,淋巴结阴性、阳性,初发、复发者Survivin的阳性表达率分别为57.9%、90.0%,64.7%、94.1%,57.5%、92.9%,组间比较,P均<0.05。结论 Survivin的异常表达在BTCC的发生、发展中起重要作用。BTCC组织中Survivin表达的检测对判断BTCC的发生发展、转移、复发及预后有一定帮助。Survivin也可能为BTCC基因治疗提供新的靶点。     

膀胱移行细胞癌伴前列腺腺癌3例

我院自2003年7月至2004年5月共收治膀胱移行细 胞癌同时伴前列腺腺癌患者3例,现报道如下。     

脐尿管印戒细胞癌合并膀胱移行细胞癌1例报告与文献复习

临床上印戒细胞癌少见,膀胱及肺的印戒细胞癌时有报道^[1],脐尿管印戒细胞癌合并膀胱移行细胞癌罕见。该病早期确诊困难,肿瘤恶性程度高,进展迅速,预后较差^[2]。     

上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin) 在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

 目的　观察上皮细胞钙粘蛋白(E-cad)表达与膀胱移行细 胞癌(TCC)分级、分期等生物学行为的关系。方法　采用恒冷切片免疫组 织化学SP法,对28例TCC和10例正常膀胱粘膜新鲜冰冻标本进行E-cad表达的检测。结果　对照组10例正常膀胱粘膜E-cad均正常表达,实验组28例TCC,仅50%(14/ 28)正常表达,二组差异显著(P<0.01)。TCC不同分级、分期间E-cad表达有显著性差 异(P<0.05),G3比G1+G2表达低,浸润性TCC比浅表性TCC表达低。初发与复发、 单发与 多发TCC之间比较,E-cad表达均未见显著性差异(P>0.05)。本组未见E-cad表达完全 缺失的TCC。结论　正常膀胱粘膜组织E-cad保留表达,TCCE-cad表达降 低,E-cad表达与TCC分级、分期呈负相关;E-cad表达与TCC的数目,与肿瘤的初发或复发 无关。     

膀胱移行细胞癌血管生成拟态的实验

目的寻找在膀胱癌中是否存在血管生成拟态（VM）,探讨VM的生物学意义。方法对85例膀胱移行细胞癌存档石蜡标本采用过碘酸雪夫氏反应（periodic acid schiff,PAS）和CD31双重染色,寻找血管生成拟态,分析VM存在的临床意义。结果在85例膀胱癌组织中有8例存在血管生成拟态,这些管道呈现PAS阳性、CD31阴性,其中2例为中分化膀胱癌,6例为低分化膀胱癌,包括T2期1例,T3期4例,T4期3例。8例中有6例出现淋巴结转移。VM存在与否与膀胱癌的病理分级、临床分期和淋巴结转移均有相关性（P<0.05）。结论中低分化膀胱癌中存在血管生成拟态,VM可作为判定膀胱癌恶性程度的一个指标和膀胱癌治疗的新靶向。     

PTEN在膀胱癌组织中的表达及其意义

目的研究膀胱癌组织中抑癌基因PTEN的表达及其临床意义,评价FTEN在膀胱癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学S-P法检测62例膀胱癌组织和18例良性膀胱病变组织中PTEN的表达,同时结合相关临床因素进行分析。结果62例膀胱癌组织中PTEN阳性率为53.23%(33/62),18例良性膀胱病变组织PTEN全部阳性表达;PTEN的表达与肿瘤分级密切相关(P<0.05)。结论PTEN基因突变或缺失所导致的表达障碍可能在膀胱癌的发生、发展中发挥重要的作用;PTEN表达的检测有助于肿瘤的诊断和判断其预后。     

谷胱甘肽S-转移酶-π在膀胱移行细胞癌的表达及其临床意义

目的：探讨谷胱甘肽S-转移酶-π（Glutathione-S-Transferaseπ,GST-π）在膀胱移行细胞癌的表达情况及临床意义。方法：采用免疫组化SP法，检测107例未经化疗的原发性膀胱移行细胞癌中GST-π、P糖蛋白（P-glycoprotein,Pgp)表达情况。结果：GST-π染色分胞浆、胞核、胞浆与胞核共染三种情形，总阳性率为72.9%;GST-π浆染色（单独胞浆、胞浆与胞核共染）阳性率为58.9%,GST-π核染色（单独胞核、胞浆与胞核共染）阳性率为46.7%，其中GST-π总体染色阳性和浆染色阳性与膀胱癌的病理分级、分期和术后腔内化疗复发有关，并与Pgp表达密切相关；GST-π核染色阳性与膀胱癌的分级、术后腔内化疗复发无关，而与病理分期有关。结论：GsT-π表达情况是预测原发性膀胱移行细胞癌腔内化疗疗效的有效标志物，GST-π浆染色较核染色更能预测膀胱癌的耐药性，GST-π核染色可能与膀胱癌的进展有关。     

PTEN在膀胱癌组织中的表达及其意义(英文)

目的研究膀胱癌组织中抑癌基因 PTEN 的表达及其临床意义,评价PTEN 在膀胱癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学 S-P 法检测62例膀胱癌组织和18例良性膀胱病变组织中 PTEN 的表达,同时结合相关临床因素进行分析。结果 62例膀胱癌组织中 PTEN 阳性率为53.23%(33/62),18例良性膀胱病变组织 PTEN 全部阳性表达;PTEN 的表达与肿瘤分级密切相关(P<0.05)。结论 PTEN 基因突变或缺失所导致的表达障碍可能在膀胱癌的发生、发展中发挥重要的作用;PTEN 表达的检测有助于肿瘤的诊断和判断其预后。     

Isolated Meningeal Recurrence of Transitional Cell Carcinoma of the Bladder

Meningeal carcinomatosis occurs in 1–18% of patients with solid tumours, most commonly carcinomas of the breast and lung or melanomas. There are relatively few reports of meningeal carcinomatosis in transitional cell carcinoma of the bladder. Isolated meningeal recurrence is particularly uncommon, and we present an unusual case of this in a 58-year-old man. The case was further complicated by the somewhat atypical presentation with a confirmed ischaemic stroke. The patient died one month after presentation.Key Words: Meningeal carcinomatosis, Recurrence, Transitional cell carcinoma, Bladder     

膀胱移行上皮癌中P16蛋白的表达意义

采用免疫组织化学LSAB法对68例膀胱移行上皮癌标本中的抑癌基因p16表达产物进行检测，29例显示表达阳性，且阳性表达率在恶性度低、浅表性和未复发膀胱肿瘤中较高，Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰ级与Ⅲ级、Tis～T1与T2～T4、及复发与未复发比较均有显著性差异（P＜0．05）。表明p16蛋白表达与膀胱移行上皮癌的分化程度、浸润深度及预后有关。     

High Expression of Human Uroplakin Ia in Urinary Bladder Transitional Cell Carcinoma

Uroplakins (UPs) Ia, Ib, II, and III are tissue-specific and differentiation-dependent transmem-brane proteins of the urothelium. We assessed the usefulness of human UP Ia as a histological marker by examining its expression in urinary bladder transitional cell carcinoma (TCC). A polyclonal antibody against human UP Ia was raised using a synthesized polypeptide. We applied our antibody to various organ tissues, including urothelium, and observed no crossreactivity. Analysis by RT-PCR of normal urothelium, TCC and other organ tissues indicated that the human UP Ia gene expression is highly specialized to urothelium, and is conserved in TCC. Using immunohistochemistry, we investigated the expression of UP Ia in TCC from patients who had undergone radical cystectomy and from autopsy cases. Positive staining (10% or more positive cancer cells) was noted in primary lesions from 61 of 63 (96.8%) cystectomy patients. Depending on pathological grade, high expression (50% or more positive cancer cells) was observed in 17 of 18 (94.4%) moderately- to well-differentiated TCC and in 36 of 45 (80.0%) poorly differentiated TCC. With regard to tumor invasion, high expression was noted in 20 of 22 (90.9%) superficial and 33 of 41 (80.5%) muscle-invasive TCC. Cause-specific survival rates were 68.6% and 75.0% in high- and low-expression patients, respectively (log-rank test, P =0.855, mean follow-up; 65.0 months). In metastases, positive reactions were observed in 13 of 18 (72.2%) lesions. UP Ia may represent a specific histological marker judging from the stable expression, although its value as a prognostic factor remains undetermined.     

膀胱移行细胞癌中PCNA的表达与术后复发的相关性分析

目的 通过对膀胱移行细胞痛术后复发组与未复发组的增殖细胞核抗原(PCNA)表达的检测,探讨其与肿瘤术后复发的关系.方法 通过对膀胱手术后病理证实的65例膀胱移行细胞癌进行电话复访、信件回访及门诊复诊回访,以复查过膀胱B超为标准为复发组43例,末复发组22例,对其病理组织采用(S-P法)进行PCNA的测定,观察PCNA在不同组别中的表达.结果 复发组PCNA阳性表达率72.09%(31/43),未复发组40.91%(9/22),两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 PCNA的表达可作为预测膀胱移行细胞癌术后复发的指标.