IDA对白血病骨髓基质培养体系中HL-60细胞杀伤效应的观察

目的 :研究细胞毒药物对体外残留白血病模型中HL 6 0细胞的杀伤效应。方法 :采用Dexter型骨髓培养体系形成白血病骨髓基质细胞贴壁层 ,接种HL 6 0细胞共培养 ,用去甲氧基柔红霉素 (IDA)处理后 ,动态观察HL 6 0细胞的活性变化。结果 :随着IDA剂量的增加及培养时间的延长 ,HL 6 0细胞活力逐渐减弱 ,去甲氧基柔红霉素 (IDA)与骨髓基质细胞层或单纯的培养基体外孵育对HL 6 0细胞杀伤能力减弱。结论 :急性白血病骨髓基质有助于HL 6 0细胞逃避化疗药物杀伤 ,对残留白血病的形成具有重要作用。     

白血病细胞自分泌生长特性研究

骨髓净化是预防自身骨髓移植后白血病复发的有效手段之一。自身骨髓移植患者在移植前往往接受了多疗程化疗,缓解期体内残存的白血病细胞多具耐药性。因此选择新型的抗白血病药物作为体外净化剂,可能会收到较好的清除耐药白血病细胞的效果。本研究对4-去甲基柔红霉素(idarubicin,IDA)体外抗白血病细胞的作用及对正常造血祖细胞的作用进行了初步的实验研究。     

槲皮素恢复柔红霉素在白血病耐药细胞K562/ADM和HL-60/ADM中的分布

背景与目的：槲皮素是一种天然黄酮类中药成分,儿有多种生理活性,最近发现其有逆转白血病细胞耐药的作用,本研究旨在探讨槲皮素恢复柔红霉素在白血病耐药细胞的分布从而达到逆转耐药的机制：方法：通过MTT体外药敏法检测槲皮素对柔红霉素的增敏作用并确定逆转的浓度范围,作用于K562／ADM、HL-60／ADM细胞及相应敏感株K562和HL-60,借助激光共聚焦显微镜观察槲皮素怍用前后柔红霉素在亚细胞水平的分布变化：结果：20～40μmol／L槲皮素在体外能日月显提高柔红霉素对K562／ADM和HL-60／ADM的敏感性,恢复柔红霉素在亚细胞水平的分布,使其回归细胞核内,从而逆转多药耐药。结论：黄酬类中药槲皮素能够成为蒽环类药物治疗白血病中有效的化疗增敏剂。     

去甲氧柔红霉素治疗急性白血病临床观察

目的:分析和比较去甲氧柔红霉素(IDA)与柔红霉素(DNR)、米托蒽醌(MTN)治疗急性白血病的疗效和毒副反应。方法:将32例急性白血病患者分为两组,治疗组18例用IDA加阿糖胞苷(Ara蛳C)治疗,对照组14例用DNR或MTN加Ara蛳C治疗,两组均用标准3+7方案。结果:治疗组和对照组完全缓解率(CR)分别为66.7 %和43.8 %,总有效率(RR)分别为83.3 %和64.2 %。两组CR率和RR率差异有显著性(P<0.05)。治疗组骨髓抑制时间较对照组长(P<0.05),心脏毒性较小,其他毒副反应发生率基本相似。结论:去甲氧柔红霉素是效果可靠的抗白血病药物,以IDA组成联合化疗方案治疗急性白血病具有较好的疗效。     

白血病骨髓基质细胞对白血病细胞屏蔽效应的体外实验研究

背景与目的:肿瘤微环境是影响肿瘤细胞转归的关键因素之一。骨髓微环境能保护白血病细胞,促进白血病细胞耐药、抗凋亡存活,但机制未完全阐明。本研究中我们主要观察骨髓基质细胞促白血病细胞抵抗柔红霉素(daunorubicin,DNR)杀伤的屏蔽效应,旨在探讨骨髓基质细胞增强Jurkat细胞抗凋亡、抗药特性的可能机制。方法:应用Percoll分离正常及白血病性骨髓单个核细胞,体外培养骨髓基质细胞模拟骨髓微环境功能,与白血病细胞Jurkat体外共培养。AnnexinV/PI双标法流式细胞仪检测0.5μmol/LDNR处理后Jurkat细胞凋亡率的变化。PI染色流式细胞仪检测细胞周期分布。结果:共培养后正常骨髓基质细胞抑制DNR诱导的Jurkat细胞凋亡,与单独悬浮培养组比较显著降低[(8.39±4.08)%和(16.02±1.00)%,P<0.05]。白血病骨髓基质细胞对Jurkat细胞的屏蔽效应强于正常骨髓基质细胞[Jurkat细胞凋亡率分别是(5.73±1.78)%和(8.39±4.08)%,P<0.05]。DNR处理正常或白血病骨髓基质细胞共培养组G0/G1期Jurkat细胞比例高于悬浮培养DNR处理组,而正常与白血病骨髓基质细胞屏蔽的Jurkat细胞G0/G1期阻滞现象无显著性差异[(47.96±5.88)%和(39.25±3.04)%,P>0.05]。结论:骨髓基质细胞可能部分通过阻滞白血病细胞于G0/G1期,抑制DNR诱导的白血病细胞     

去甲氧基柔红霉素对小鼠腹腔细胞的激活作用

去甲氧基柔红霉素给小鼠腹腔注射1次后,4天可明显增强腹腔巨噬细胞对P815细胞的杀伤作用,比对照组增强1倍。同时也显著增强小鼠腹腔细胞的NK活性。且在最适剂量时对YAC—1细胞的杀伤率由对照组的3.5％提高列34.3％,结果提示去甲氧基柔红霉素可升高宿主的防御机能。     

米托蒽醌方案对CD+34高表达急性淋巴细胞白血病的临床疗效观察

目的 探讨米托蒽醌(MTZ)在急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗中的作用特点。方法 50例CD34^ 抗原高表达的ALL上,随机选择二种化疗方案(CPMP,CODP)。联合化疗1个疗程后分别比较CR率、骨髓抑制及其他毒副作用;同时将骨髓白血病细胞体外培养72h。进行药物杀伤效应实验。分别比较MTZ、柔红霉素(DNR)在体外对ALL细胞不同分化阶段的抑制作用。结果 CD34抗原高表达的ALL中,以MTZ为主的COMP方案的1个疗程缓解率为92．6％。比CODP方案高27．4％。体外白血病细胞培养加药物抑制试验结果显示,MTZ对分化较早阶段的CD34^ ALL细胞的抑制显著高于DNR。结论 MTZ对ALL具有较强的抗白血病活性,临床骨髓抑制明显。上述特点可能与其主要作用于白血病细胞的分化较早阶段有关。     

小鼠脾细胞胞质分裂阻断微核法检测去甲氧基柔红霉素致突变作用的研究

用小鼠脾细胞胞质分裂阻断微核法体外检测了去甲氧基柔红霉素的诱变作用。在０．００６μｇ／ｍｌ的浓度时既可见微核率明显升高，０．０５μｇ／ｍｌ时双核细胞的微核率可达２６．１％，与所用浓度呈正相关，并出现浓度依赖关系的细胞周期延迟现象。结果提示：去甲氧基柔红霉素具有较强的致突变作用。     

CRKL活性与白血病细胞多药耐药的关系

 目的　探讨CRKL活性在白血病细胞多药耐药中的作用,发现与耐药相关的新因素。方法　应用流式细胞术比较CRKL在K562、HL-60及其耐药细胞中的活性变化;对敏感细胞用柔红霉素处理后,检测CRKL活性与化疗作用时间的关系以及撤药后CRKL活性的改变。结果　与K562、HL-60敏感细胞比较,在K562、HL-60耐药细胞株中,CRKL的磷酸化水平明显升高;在用柔红霉素处理72 h后,K562和HL-60细胞CRKL的磷酸化水平与化疗药物作用呈时间依赖性,未发现Jurkat细胞CRKL磷酸化水平的改变。结论　CRKL活性变化与白血病细胞多药耐药的形成有关,是白血病细胞多药耐药的又一个新的影响因素。     

光卟啉-光照选择性杀灭白血病细胞株K562的研究

为研究光卟啉（ＹＨＰＤ）加光照对白血病细胞株Ｋ５６２的杀伤作用及对正常造血祖细胞的影响，通过细胞体外液体培养活细胞计数、体外半固体培养集落测定，以探讨该法用于体外净化自体移植骨髓中残留的白血病细胞的可能性。观察不同光敏剂剂量和光照时间的变化对杀伤白血病细胞作用的影响，结果表明，单用ＹＨＰＤ或单独日光荧光照射对Ｋ５６２细胞和正常人造血祖细胞均无明显杀伤作用。二者联合使用表现光敏效应。细胞存活率的对数与ＹＨＰＤ剂量、光照时间呈线性相关。ＹＨＰＤ加光照对Ｋ５６２细胞具有强大杀伤作用，对正常造血祖细胞影响较小，在能够杀伤白血病细胞大于５个对数级，其体外已不能形成集落的情况下，正常人骨髓－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）尚有１５．９７％，提示该法可望用于骨髓体外净化     

去甲氧柔红霉素治疗难治性急性髓系白血病的疗效分析

自从上20世纪70年代蒽环类化疗药柔红霉素用于治疗急性白血病(AL)以来，AL的疗效取得了突破性进展，但难治性急性白血病的治疗目前仍是一大难题。我院血液内科近5年来用蒽环类新药去甲氧柔红霉素(ldarubicin，IDA)治疗难治性急性髓系白血病(refractory acute myeloid leukemia，RAML)取得了较好的疗效。现将结果报告如下。……     

伊达比星与肿瘤细胞凋亡

伊达比星是柔红霉素的一个4-去甲氧基-蒽环霉素类似物，它的细胞毒性强于柔红霉素和阿霉素，在临床上具有广泛的应用前景。临床上，伊达比星被单独或与其它化疗药物结合用于治疗急性白血病、晚期乳腺癌、多发性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤和骨髓增生异常综合征。伊达比星能够诱导许多肿瘤细胞凋亡，它引起的肿瘤细胞凋亡具有细胞周期特异性，外源性制剂可通过调节细胞周期调节其引起的凋亡。伊达比星引起的肿瘤细胞凋亡与诱导分化及caspase家族的关系值得进一步探讨。     

水杨酸钠对HL—60／VCR细胞多药耐药的部分逆转

目的：研究水杨酸钠(Na-Sal对HL-60／VCR细胞多药耐药的部分逆转作用。方法：采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术等方法，观察非甾体抗炎药Na-Sal对HL-60／VCR细胞多药耐药的部分逆转作用。结果：Na-Sal对HL-60／VCR细胞的生长具有抑制作用并表现出剂量依赖性，1mmol/L的非细胞毒剂量的Na-Sal和化疗药物联合应用可以提高多种化疗药物的细胞毒性作用，逆转倍数为1．01-3．26，相对逆转效率为0．52％-73．62％。流式细胞仪测定细胞内柔红霉素(DNR)浓度发现，Na-Sal并不增加HL-60／VCR细胞内DNR浓度。结论：Na-Sal能有效地部分逆转HL-60／VCR细胞的多药耐药性。     

抗CXCR4单克隆抗体12G5对HL-60细胞粘附及增殖的影响

背景与目的:近年研究发现,骨髓基质细胞分泌的趋化因子SDF-1通过其分布于白血病细胞膜表面的生理性受体CXCR4可能参与了白血病细胞的髓内屏障,然而,SDF-1/CXCR4系统与白血病细胞之间的相互关系尚不清楚,因此,本研究采用抗CXCR4单克隆抗体12G5阻抑SDF-1活性,观察与白血病骨髓基质细胞共培养的HL-60细胞粘附性及细胞增殖的变化,以探讨从阻抑SDF-1活性入手治疗残留白血病的可能性。方法:培养并共培养HL-60细胞,采用12G5(10μg/ml)阻断SDF-1生物作用,观察HL-60细胞在骨髓基质层上的粘附情况并测定细胞粘附率,通过流式细胞仪检测凋亡率,并观察其增殖周期的变化;应用台盼蓝拒染法检测细胞存活情况,绘制细胞生长曲线。结果:(1)12G5孵育后24h,骨髓基质对HL-60的粘附率为(39.4±7.9)%,对照组为(51.4±5.9)%,二者具有显著差异(P<0.05)。(2)比较细胞增殖周期及凋亡率,实验组中G0/G1期细胞比例为(55.2±4.9)%,S期为(30.4±4.1)%,G2/M期为(14.4±5.2)%,细胞凋亡比例为(9.0±1.7)%;对照组中G0/G1期细胞比例为(44.7±2.2)%,S期为(45.3±3.7)%,G2/M期为(10.0±2.6)%,细胞凋亡比例为(4.0±2.4)%。(3)12G5孵育48h后,HL-60细胞生存率明显下降,增殖减缓。结论:12G5能在一定程度上抑制HL-60细胞的粘附性及增殖活性,因此,通过1     

肝脂素(YS2H)对体外人白血病细胞及基质细胞生长影响的研究

目的：研究肝脂素（YS2H）对人白血病细胞及基质细胞生长的影响。方法：采用白血病祖细胞集落生长方法、^3H-TdR掺入法,观察YS2H对25例急性髓细胞白血病患者的骨髓白血病细胞作用;采用骨髓基质细胞培养法观察经YS2H作用,培养4周时的正常人及白血病患者骨髓基质细胞形态变化。结果：YS2H对体外人的急性髓细胞白血病细胞有明显的生长抑制作用,存在剂量依赖关系,而对正常骨髓CFU－GM集落形成影响不大（P＞0．05）;同时发现,YS2H可使基质细胞悬浮液中的白血病细胞及集落数减少,并使白血病的骨髓基质细胞形态趋向正常骨髓基质细胞形态。结论：YS2H是一种有选择性抑制白血病细胞生长的脂类抗白血病药物,具有临床研究应用价值。     

NF-кB与柔红霉素对HL-60细胞凋亡作用关系的探讨

目的：探讨核因子NF-кB是否与柔红霉素(DNR)在体外诱导HL-60细胞凋亡的过程有关。方法：应用光镜、流式细胞技术(FCM)检测DNR对HL-60细胞的凋亡作用；并采用细胞免疫化学(IC)、FCM、电泳运动转移分析(EMSA)法分别检测对照细胞组、DNR诱导HL-60细胞凋亡组、PTDC或FBI抑制组细胞核内NF-кB的表达情况。结果：1.0μmol／L DNR对HL-60细胞作用5h时，有显著的凋亡现象发生，且细胞内NF-кB的表达较对照细胞显著增强，PDTC可显著抑制DNR作用HL-60后的凋亡率及NF-кB的表达，而FBI对此无明显作用。结论：DNR诱导HL-60凋亡的过程与细胞核因子NF-кB有关，ROS参与了此凋亡过程。     

IA方案治疗小儿难治性急性白血病

随着化疗药物的进步及化疗方案的改进,小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)的完全缓解(CR)率为98％,5年无病生存率达70％左右,但急性粒细胞白血病(AML)及复发ALL病例的治疗仍相当困难,缓解率低,预后不良。我们于1995年从来应用去甲氧柔红霉素(IDA)联合阿糖胞苷为主的方案(IA)治疗小儿AML及复发ALL共9例,取得较好疗效,报告如下。     

槲皮素逆转白血病细胞株HL-60/ADM多药耐药的研究

目的探讨槲皮素(Que)逆转白血病细胞多药耐药在膜转运蛋白方面的机制。方法通过四唑蓝体外药敏法,检测Que对柔红霉素(DNR)的增敏作用,并以不同浓度作用于HL-60／ADM耐药株及相应敏感株HL-60;运用逆转录多聚酶链式反应和流式细胞术,检测HL-60／ADM和HL-60细胞株多药耐药相关基因1(MRP1)及其膜蛋白产物MRP1蛋白的表达情况;借助激光共聚焦显微镜,观察DNR在亚细胞水平的分布变化。结果20～40μmol／L终浓度的Que在体外能明显提高DNR对HL-60／ADM耐药株的敏感性,并能下凋MRP1基因及其膜蛋白产物MRP1的表达,使DNR回归于细胞核内,从而逆转多药耐药,而且对细胞本身无明显毒性作用。结论Que有可能成为蒽环类药物治疗白血病的有效且低毒的化疗增敏剂。     

IE方案治疗难治性和复发性白血病20例疗效观察

我院应用去甲氧柔红霉素(indamycin,IDA,由法玛西亚普强公司提供)和依托泊苷(足叶乙甙)联合方案(IE)治疗20例难治性、复发性白血病(AL)取得了较好的疗效.现报告如下.     

光卟啉—光照选择性杀灭白血病细胞株K562的研究

为研究光卟啉（ＹＨＰＤ）加光照对白血病细胞株Ｋ５６２的杀伤作用及对正常造血祖细胞５的影响，通过细胞体外液体培养活细胞计数，体外半固体培养集落测定，以探讨该法用于体外净化自体移植骨髓中残留的白血病细胞的可能性。研究不同光敏剂剂量和光照时间的变化对杀伤白血病细胞作用的影响。结果表明，单用ＹＨＰＤ或单独日光荧光照射对Ｋ５６２细胞和正常人造血祖细胞均无明显杀伤作用。二者联合使用表现光敏效应，细胞存活率的对