高亲和力抗IBDV单克隆抗体的产生与免疫学鉴定

目的：生产高亲和力的抗ＩＢＤＶ不同抗原决定簇的单克隆抗体,为ＩＢＤ的快速检测准备试剂。方法：用ＩＢＤＶ抗原诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生最强最适当的反应,将免疫脾细胞与ＮＳＯ瘤细胞融合,通过对大量的杂交细胞培养上清进行检测和鉴定,筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果：获得分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤２１株,其中４株ＹＮＺ－１、ＹＮＺ－１２、ＹＮＺ－１８和ＹＮＺ－２６的间接ＥＬＩＳＡ效价分别为     

系列单克隆抗体分析癌胚抗原的决定簇图谱及生化特性

用7个抗癌胚抗原(CEA)、2个抗血型Lewis~v和H-2型抗原和2个抗上皮生长因子受体之系列单克隆抗体,分析了CEA的决定簇图谱、生化稳定性。结果表明,7个抗CEA的单抗有5个识别特异性抗原决定族,而另2个的决定簇与正常交叉抗原(NCA)有交叉。决定簇图谱分析表明,有2个单抗的对应决定簇是独立的,与其它的决定簇无交叉,且是识别CEA的特异决定簇;另5个单抗的决定簇彼此有交叉,但不完全一致。确定了CEA分子中包含血型前体抗原Lewis~y的决定簇。依据系列单抗对CEA的免疫学和生化稳定性分析,对其抗原决定簇进行了分类。     

环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性分析

目的:制备环丙沙星单克隆抗体,并分析其免疫学特性,为建立环丙沙星残留的免疫学检测方法服务。方法:用人工抗原环丙沙星-小牛血清白蛋白偶联物免疫BALB/c小鼠,产生预期免疫应答后,将小鼠脾细胞与瘤细胞融合,经初筛、复筛和再克隆,筛选得到1C9、3F6、6H2、6A7、6G11和8F56株分泌环丙沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞。对单克隆抗体的亚型、纯度、亲和力、灵敏度及特异性等免疫学特性进行鉴定和分析。结果:1C9、3F6和6A7的抗体亚型为IgG2a;6H2和8F5的抗体亚型为IgG1;6G11的抗体亚型为IgG3。SDS-PAGE电泳结果显示单抗蛋白重链分子量约为50kD,轻链分子量约为25kD。6株细胞产生的单抗均具有良好的特异性和灵敏度。其中,细胞株1C9细胞培养上清和腹水效价分别为1∶6.4×102和1∶5.6×105,亲和力常数可达2.85×109L/mol,IC50值可达245.86ng/ml,最低检测限为45.25ng/ml,对氧氟沙星、双氟沙星、沙拉沙星、左氧氟沙星、孔雀石绿、氯霉素、呋喃西林等药物几乎不存在交叉反应,与恩诺沙星存在交叉反应,交叉反应率为84.6%。结论:本方法制备的环丙沙星单克隆抗体具有较好的亲和力和特异性,可用于环丙沙星残留免疫学检测。     

抗人心肌单克隆抗体的制备及其生物学特性的初步研究

本文以人心肌抗原免疫BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,获2株(2F_1和1F_6)分泌抗人心肌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。免疫印迹试验证明,细胞培养上清及小鼠腹水中的特异性抗体均能与分子量为55KD蛋白带结合。抗原阻断试验结果,证明获得的两株单抗是人心肌抗原特异的。染色体数分别为102条和96条。1F_6和2F_1的Ig亚类型均为IgG_1。间接免疫荧光呈肌束膜型,ABC免疫组化显示肌束膜和肌原型(胞浆)。     

人Hb抗原的分离,纯化及其McAb,PcAb的制备与免疫学特性分析

人Ｈｂ抗原的分离、纯化及其ＭｃＡｂ、ＰｃＡｂ的制备与免疫学特性分析赵满仓马蕾刘菊林孙朝安（空军石家压医院，石家庄０５００８１＊河北省公安厅）近年来用于诊断消化道肿瘤的方法较多，如消化道钡餐造影、乙状结肠镜、胃镜，以及粪便隐血试验等。这些方法中对早期肿...     

抗幽门螺杆菌单克隆抗体的制备与特性研究

幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)感染是人类最常见的慢性细菌感染 ,可导致胃炎、消化性溃疡和胃癌等 ,还可引起口腔溃疡 ,与一些非胃肠疾病如发育不良、冠心病、糖尿病和胆石症等的发生有关[1,2 ] 。幽门螺杆菌粪抗原 (Ｈｐｓｔｏｏｌａｎｔｉｇｅｎ ,ＨｐＳＡ)检测是一种诊断Ｈｐ感染的新技术 ,其诊断准确性可达 90 %以上 ,同时具有简便快速、价格低廉、对病人无任何创伤 ,可不需任何仪器等优点[3 ,4 ] 。本研究采用传统的杂交瘤细胞技术 ,通过制备效价高、特异性好的抗Ｈｐ单克隆抗体 ,为Ｈｐ抗原检测技术的建立…     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合征出血热病毒(HFRSV)陈氏株免疫获得5株单克隆抗体(McAb).B_9株McAb具有血凝抑制和体内保护活性:F_-3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性;B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部分发生反应.与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株均发生反应.B_(11)、F_3、H_7、H_(11)等4株McAb可用于酶联免疫吸附试验。     

产毒性大肠杆菌菌毛F41抗原单克隆抗体及其免疫学特性的鉴定

产毒性大肠杆菌(ETEC)是婴儿和幼畜急性腹泻的重要病原之一，其致病因子主要有腑毒素和定居因子(又称粘附素)。现已证明，菌毛抗原是介导ETEC粘附肠上皮细胞的定居因子；是该茁感染的第一步．也是人们注目的预防该菌感染的菌毛疫苗组分。F41菌毛抗原是近年来才发现的畜源性ETEC的一种新的定居因子。因此．F41菌毛抗原单克隆抗体及其免疫学特性的研究，对探讨ETEC的致病与免疫机制，检验诊断及特异预防将提供有用的制剂。     

抗基孔肯雅病毒单克隆抗体对新分离病毒株的快速鉴定

抗基孔肯雅病毒单克隆抗体对新分离病毒株的快速鉴定袁晓平，张天寿，杨兰萍，张海林，米竹青（云南省流行病防治研究所，大理６７１０００）在血清学试验中，虫媒病毒组内存在着交叉反应，用多克隆抗体鉴定有很大的困难，需以交互中和试验（ＮＴ）方能确定。我们用本所自...     

hAR-N单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

前列腺癌组织中雄激素受体 (ＡＲ)含量与术后采用抗雄激素疗法的反应程度、术后复发、转移率的发生密切相关〔1〕。ＡＲ的检测方法多为免疫组化法〔2〕。其所需试剂———ＡＲＭｃＡｂ国内尚无 ,为此我们研制ＡＲＭｃＡｂ。以美国Ｚｙｍｅｄ公司ＡＲ多抗为标准对自制ＡＲＭｃＡｂ性能进行鉴定 ,以便为临床和科研工作提供性能稳定可靠、质优价廉的免疫试剂。材料与方法动物 :ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 ,雌性 ,6～ 8周龄 ,购自北京医科大学动物实验中心。抗原 :ｈＡＲ Ｎ段 2 0个氨基酸合成肽 (该区具有高亲水性 ,与其它类固醇激素具有很少同源性 )由北…     

抗人载脂蛋白E单克隆抗体制备及免疫学特性的研究

应用人血清纯化的ApoE免疫BALB/C小鼠,其脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,获得3株分泌抗人ApoE单克隆抗体的杂交瘤细胞株(E6C3,E4C2和E3C3),对其免疫学特性进行了研究。腹水效价为8×10~(-5)～2×10~(-6),与其它载脂蛋白没有交叉反应,制备免疫亲和层析柱纯化了ApoE,单抗相加试验和双抗体夹心试验证明,两株MeAb识别ApoE的两个不同抗原决定簇,抗体亚型均为IgG_1型。应用ELISA双抗体夹心法测定了人血清ApoE含量。     

病毒性出血性败血症病毒单克隆抗体的制备及其特性分析

目的 制备抗病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的单克隆抗体(mAb).方法 以差速离心法提纯VHSV作为免疫原,免疫BALB/c小鼠.应用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,间接ELISA进行筛选检测,且对mAb进行特性分析.结果 制备出1株抗VHSV mAb,命名为4A5.对其进行特性分析结果显示该抗体腹水效价104以上;属于IgG3型,K链;仅与VHSV本身反应,与其他病毒和细胞均不发生交叉反应;对应的抗原位点在VHSV蛋白的相对分子质量(Mr)70 000的条带处,该蛋白带是VHSV的G蛋白.结论 制备出的特异性好的抗VHSV mAb,为该病毒的快速诊断及流行病学监测提供了检测试剂.     

一株抗双链DNA单克隆抗体的制备及其特性研究

制备抗双链DNA(dsDNA)单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究。以活化淋巴细胞的DNA为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体;用体内诱生法制备腹水,以间接酶链反应吸附试验(ELISA)法分析抗体的亚类、特异性和亲和力;用免疫荧光法检测抗体的荧光核型;用考马斯亮蓝法检测注入杂交瘤细胞的小鼠的尿蛋白含量。结果显示,成功获得了1株持续稳定分泌抗dsDNA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6C2;该细胞株所分泌的抗体亚类为小鼠IgG2a,能特异性结合dsDNA,亲和力常数为2.67×10~8mol/L,免疫荧光核型为均质型;将6C2细胞注入正常BALB/c小鼠腹腔后,小鼠的尿蛋白含量较对照组明显增高。结果表明,抗dsDNA单克隆抗体6C2是致病性抗体,对于进一步研究抗dsDNA抗体的致病机制具有重要的价值。     

巨细胞病毒单克隆抗体的制备及其初步应用

用CMV AD-169株感染自制人胚肺纤维母细胞,制备抗原,免疫BALB/c小鼠,取其牌细胞与Sp2/0-Ag14细胞融合,建立了一株稳定分泌抗HCMV特异性McAb的3B_6杂交瘤细胞株。3B_6McAb经鉴定属于IgG_3亚类。用间接免疫荧光法和间接酶免疫法证实为抗CMV特异性抗体。用微量细胞培养中和试验证实3B_6McAb在加有豚鼠血清后可阻止HCMV感染后细胞病变的出现。3B_6 McAb经间接免疫荧光法检测中,晚期孕妇羊水细胞中HCMV抗原,在68例标本中有一例为阳性,阳性率为1.47％。该法方便,快速可为在胎儿时期诊断先天性HCMV感染提供依据。