快速免疫酶染色法检测实验家兔弓形体抗体的研究

应用快速免疫酶染色法(IESA)对弓形体感染的家兔进行抗体检测,并以IHA法作对照观察。以在被染成红色或淡红色弓形体虫体周围,形成的蓝色大小均匀的抗原抗体复合物颗粒的有、无、多、寡为判断阳性阴性标准。IESA法检测感染弓形体的家兔血清8份,标准阳性血清1份,均呈阳性反应,血清抗体滴度1:4～1:256,少数以1:1024试验也呈阳性;4份对照血清和1份阴性标准血清,除1份对照血清在1:4滴度出现可疑阳性外,其余均为阴性。IHA法9份阳性血清检测     

应用斑点酶联免疫结合试验检测弓形体血清抗体

以弓形体可溶性抗原进行斑点免疫结合试验(Dot-Immunobinding Assay,DIA),检测16份弓形体病人血清,结果全部阳性。检查山东省精神病院精神病人血清417份,阳性率为4.32％。此法与囊虫病、旋毛虫病、血吸虫病等均无交叉反应,表明对弓形体有较高的特异性。在同一批血样中,此法检出的阳性结果比常规ELISA和IHA均高,初步证实了DIA优于常规ELISA和IHA,具有简、快、敏、特等优点。     

应用PPA-ELISA检测实验家兔弓形虫抗体的研究

本文报告了应用过氧化物酶标记金葡菌A蛋白取代酶标第二抗体,进行酶联免疫吸附试验(PPA-ELISA)检测弓形虫实验感染家兔的结果。以胰蛋白酶处理纯化后的弓形虫速殖子制成可溶性抗原,对24只感染兔和32只正常兔血清进行检测。结果感染兔全部呈阳性反应,正常兔全部阴性。与爱美尔球虫病兔的     

5种试验方法检测弓形体抗体的比较

<正> 我们选择常用的IHA、DT以及我室新建立的SPA-ELISA,TSSEIS、TSIFA共5种试验方法对不同数量的同一份血清进行弓形体抗体检测,对其敏感性、特异性等指标进行比较。 材料和方法 一、SPA-ELISA 可溶性抗原由桂弓_1按本室常规制作,HRP-SPA(北京流研所提供,批号85007,工作稀释度为1∶200),G×M-201酶标比色计及5×11孔板(四川分析仪器厂出品),方法按Voller氏法,以     

凝胶扩散-酶联免疫吸附试验(DIG-ELISA)检测猪弓形体病抗体

本文介绍一种简单的DIG-ELISA方法作为定量诊断猪弓形体病新方法。在吸附有抗原的塑料平板上,使抗血清在凝胶中扩散并与平板表面抗原结合,再以酶结合物和底物之间的显色反应,间接地显示抗原抗体反应,测得其直径能定量反应特异性抗体的量。对人工感染猪和健康猪的试验取得满意结果后,进而对现场可疑猪检测并与ELEP对比。二法检出率相似,阳性符合率达94％,与猪瘟无交叉反应。     

应用免疫酶染色试验检测家兔的旋毛虫实验感染

<正> 为研究旋毛虫病的血清学诊断技术,我们应用免疫酶染色试验法(IEST)检测家兔实验感染旋毛虫后抗体出现和消长情况,现将结果报道如下。 一、材料和方法 (一)抗原片制备:旋毛虫(Trichinella spiralis)肌内蚴(MSL)6000条接种大白鼠,3个月后剖杀取隔肌,咬肌置正已烷于乙醚加Co_2干冰速冻后贮于-20℃中待切片。冰冻切片组织厚度为4μm,每张玻片上贴8块组织片,贴片干燥后丙酮固定10分钟,pH7.4PBS洗涤2次,干燥后4℃贮存备用。     

用酶连接免疫吸着试验(ELISA)检测血吸虫病抗体

血清反应有时不能测出血吸虫病患者的抗体,至少部分原因是由于抗体和抗原在体内的复合,因而有必要寻找更敏感的方法。1972年Engvall等报告在用抗原涂过的试管内,用酶标记的抗免疫球蛋白定量检测特异抗体。1974及1975年先后有人用于诊断     

应用染色试验检测血清中弓形体抗体的报告

<正> 我们于1986年9～10月对柳州区龙泉山医院489例精神病患者进行血清弓形体染色试验调查,现将结果报告如下。 材料与方法 一、材料准备 (一)猪株:桂弓-1980株系广西卫生防疫站从猪体内分离。 (二)碱性美蓝液配制:甲液系美蓝的95％乙醇饱和液;乙液用0.53％碳酸钠9.73ml加1.19％硼酸钠0.27ml,pH10.8。 (三)抗原制备:取含弓形体的腹水0.2ml接种小白鼠腹腔,3～4天发病后抽取腹水,以3000rpm/分离心15分钟,弃上清,然后加适量生理盐水,取0.1     

斑点免疫结合试验检测恶性疟抗体

我们用斑点结合试验(DIA)检测恶性疟抗体,并与间接荧光抗体试验(IFA)进行比较,结果证明该法具有经济、操作方便、特异性和敏感性高的特点。现报告如下。1.受检对象:实验组受检血清46份,其中恶性疟16例,间日疟30例。对照组81份,     

ELISA补体结合试验(COMPELISA)检测布鲁氏菌抗体的研究

我们参考Robertson氏介绍的方法,建立了ELISA补体结合试验(COMPELISA)、并以此方法检查了非布鲁氏菌病人血清120份、布鲁氏菌病人血清100份。结果表明此法敏感性比补体结合反应高得多,按Vecchio氏介绍的评价力法,COMPELISA试验诊断布鲁氏菌病的敏感性为96%,特异性100%。 此外,证实此试验结果的重现性较好。     

弓形虫感染家兔精液中虫体DNA检测初报

目的了解弓形虫感染家兔精液中是否有虫体存在，探明虫体在精液中动态变化情况。方法用RH株弓形虫速殖子不同剂量经腹腔感染家兔6只。在家兔感染前后分别采集精液，-40℃冻存备用，分别用普通PCR检测弓形虫感染家兔精液中弓形虫DNA。结果5只家兔在感染后的8～14d死亡，仅1只家兔在感染后的8d和72d，用PCR检测手段在精液中均可检测到弓形虫DNA。结论弓形虫感染雄兔精液中有虫体存在。     

Quantitative toxoplasma gondii oocyst detection by a modified Kato Katz test using Kinyoun staining (KKK) in ME49 strain experimentally infected cats

We detected Toxoplasma gondii oocysts in feces of experimentally infected cats, using a Kato Katz approach with subsequent Kinyoun staining. Animals serologically negative to T. gondii were infected orally with 5 x 10(2) mice brain cysts of ME49 strain. Feces were collected daily from the 3rd to the 30th day after challenge. Oocysts were detected by qualitative sugar flotation and the quantitative modified Kato Katz stained by Kinyoun (KKK). In the experimentally infected cats, oocysts were detected from the 7th to 15th day through sugar flotation technique, but oocysts were found in KKK from the 6th to 16th day, being sensitive for a larger period, with permanent documentation. The peak of oocysts excretion occurred between the 8th to 11th days after challenge, before any serological positive result. KKK could be used in the screening and quantification of oocysts excretion in feces of suspected animals, with reduced handling of infective material, decreasing the possibility of environmental and operator contamination.     

弓形虫感染家兔精液中虫体含量的动态变化

目的检测弓形虫感染家兔精液中虫体DNA,观察虫体在精液中动态变化情况。方法用RH株弓形虫速殖子105个/只的剂量腹腔感染雄性家兔16只。在家兔感染前后分别采集精液,-40℃冻存备用,采用两种方法提取精液中总DNA,用实时定量PCR(quantitativereal-timePCR,QRT-PCR)检测弓形虫感染家兔精液中弓形虫DNA,依据对照计算虫体拷贝量,绘制感染后时间与精液中虫体含量的动态曲线图。结果16只雄兔感染前其精液中均不能检测到弓形虫DNA,精液中虫体含量在感染后7wk左右达到高峰期,然后虫体含量逐渐下降。在感染9wk~15wk维持较低水平。结论弓形虫感染雄兔精液中虫体含量随感染后时间不同而变化。     

糖尿病并发弓形虫感染的初步研究

本文用ＩＨＡ、ＩＦＡ、Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种血清学方法检测３２０例糖尿病病人血清的弓形虫抗体，阳性率分别是１０．３１％、１８．１３％和１９．０６％。均高于对照组（Ｐ＜０．００５），这是糖尿病患者并发弓形虫感染的首次报告。     

弓形虫感染孕鼠T淋巴细胞亚群在外周血及蜕膜变化的研究

目的　探讨弓形虫感染孕鼠T淋巴细胞亚群在外周血及蜕膜的变化。方法　正常及弓形虫感染 (感染后 72h)孕鼠均于孕 1 8天 ,采用流式细胞仪技术检测外周血及蜕膜CD+ 4、CD+ 8T细胞百分率。结果　 (1 )在外周血 ,T淋巴细胞的变化表现为CD+ 4T细胞增多 (P <0 0 1 ) ,CD+ 8T细胞几乎无改变 ,CD+ 4/CD+ 8细胞比值增大 (P <0 0 1 )。 (2 )在蜕膜 ,T淋巴细胞的变化表现为CD+ 4T细胞减少 (P <0 0 5) ,CD+ 8T细胞增多 (P <0 0 5) ,CD+ 4/CD+ 8细胞比值减小 (P <0 0 1 )。结论　蜕膜局部对于阻断弓形虫感染孕鼠的母婴垂直传播可能起着重要的作用     

弓形虫感染家兔血液中虫体的动态观察

目的探明虫体在家兔血液中动态变化情况。方法用RH株弓形虫速殖子105个/只的剂量腹腔感染雄性家兔16只。在家兔感染前后分别采集家兔血液,抗凝处理后,-40℃冻存备用,用实时定量PCR检测弓形虫感染家兔血液中弓形虫DNA,依据对照计算虫体拷贝量,绘制感染后时间与血液中虫体含量的动态曲线图。结果雄兔弓形虫感染后4d血液中即可检测到虫体DNA,血液中虫体含量为217.887×103个/ml,血液中虫体含量在感染后8 d达到高峰期,血液中虫体含量为248.019×103个/ml,然后虫体含量逐渐下降,在感染后121 d雄兔血液中虫体密度为1.45×103/ml。结论弓形虫感染雄兔血液中虫体含量随感染后时间不同而变化。     

孕妇感染弓形虫后细胞因子水平的变化

弓形虫是人类和动物体内的专性细胞内机会寄生原虫,呈世界性分布。孕妇感染弓形虫后可影响胎儿生长发育、严重的可致畸或引起胎儿死亡。我院进行的孕妇感染弓形虫后胎儿生长发育的跟踪研究,提示随访孕妇感染弓形虫后的妊娠结局,与正常孕妇比较弓形虫感染胎儿致畸率及低...     

肺吸虫特异性IgG4快速检测方法的建立与应用

目的创建简易、快速、准确的肺吸虫病免疫诊断方法。方法用卫氏并殖吸虫成虫粗提液为抗原,以胶体金标记抗人IgG4单抗为检测探针,采用自行设计的垂直流渗滤装置,创建快速检测人血清肺吸虫特异性IgG4方法(P-IgG4-DIGFA),平行检测IgG作比较分析;以经典ELISA为对照,评价其诊断价值,应用P-IgG4-DIGFA检测有效治疗后病人血清,评价其疗效考核价值。结果P-IgG4-DIGFA检测人血清中肺吸虫特异性IgG4的敏感性和特异性分别为95.2%(40/42)、100%(50/50),与血吸虫病患者血清的交叉反应率仅为2%(1/50),未发现与华支睾吸虫病有交叉反应。P-IgG4-DIGFA的敏感性和特异性略高于经典ELISA,差异无统计学意义(χ2=0.25,P>0.05);应用P-IgG4-DIGFA检测有效治疗后3个月、6个月和12个月病人血清特异性IgG4,阴转率分别为0%、16.7%(1/6)和100%。结论金标渗滤法快速检测肺吸虫特异性IgG4,不仅操作简便、快速,而且敏感性高、特异性强,适用于临床检验和现场查病,对治疗后1年病人具有疗效考核价值,有待进一步开发应用。