用McAb—AST对黑热病患者疗效考核的进一步研究

用单克隆抗体一抗原斑点试验(McAb—AST)对我国山丘疫区27例(32人次)黑热病患者在斯锑黑克治疗前、后检测循环抗原作了对比观察,以考核疗效。其中25例治前骨髓涂片查见病原体,2例骨髓片漏诊。32人次治疗前MeAb—AST均显阳性反应。一个疗程后McAb—AST转为阴性的16人次,临床表现为痊愈,McAb—AST仍为阳性反应的9例,临床表现也未愈;余7人次McAb—AST与临床症状均有一定程度好转。本法显示的结果与患者病情的归转状况及病原体的查获与否是相吻合的。表明McAb—AST可用于黑热病治后近期疗效考核,且可弥补骨髓涂片的漏诊。     

应用AST-ELISA检测斯氏肺吸虫病人血清循环抗原

<正> 我们应用抗原斑点酶联免疫吸附试验(AST—ELISA)直接法检测26例斯氏肺吸虫病人血清循环抗原,结果满意,现报告如下。 材料和方法 一、硝化纤维滤膜。 二、酶标记兔抗肺吸虫抗体 为四川省医学科学院寄生虫病防治研究所提供。其制备方法参见文献[1]。     

应用单克隆抗体-抗原斑点试验检测斯氏狸殖吸虫循环抗原

刘纪伯等报道应用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)检测斯氏狸殖吸虫病人血清循环抗原。为了解其在亚临床型感染病人中的诊断价值,我们于1987年3月,在重庆南桐矿区对26例病人进行了检测。 材料和方法 一、硝化纤维滤膜 Whatman牌号。 二、单克隆抗体(McAb)四川省医学科学院     

酶标记抗原斑点试验检测间日疟抗体的研究

作者等在Hawkcs(1982)及Herbrink(1982)所建立的抗原斑点试验(Antigen Spot Test简称AST)的基础上,发展了一种用酶(HRP)标记疟疾抗原检测疟疾抗体的方法,即酶标记抗原斑点试验(Enzyme La-belled Antigen Spot Test,简称ELAST),具有简便、稳定、可靠的效果。 感染食蟹猴疟原虫(plasmodium cynomolgi,简称Pc)的恒河猴,切脾,待疟原虫增殖至10％虫血水平左右,且以裂殖体期和大滋养体期为主时放血。用肝素抗凝,离心去血浆,反复洗血球,分出棕褐色感染     

乙型肝炎核心抗原阳性患者的血清ALT和AST异常分析

乙型肝炎核心抗原(HBcAg)是Dane氏颗粒的核心部分,由于乙型肝炎病毒在肝细胞内的直接复制,可导致谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的增高。我们对346例血清HBcAg阳性患者同时检测了ALT和AST,其结果报告如下。     

四种抗原用于Dot-IGSS和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病的比较

以日本血吸虫可溶性成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA),用斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病.结果显示:Dot-IGSS法,4种抗原分别检测50例日本血吸虫病人血清,抗体检出率均达100.0%,50例正常人阴性符合率98.0%—100.0%,与肝吸虫病人的交叉反应率0%—2.0%(P>0.05),Dot-ELISA法、AWA、AW和SEA阳性符合率均为100.0%,JWU为90.0%,低于其它抗原(P<0.05),与正常人阴性符合率及肝吸虫病人交叉反应率分别为94.0%—100.0%及0%—6.0%.各抗原检出抗体滴度,Dot-IGSS均高于Dot-ELISA(P<0.05—0.01).抗原浓度在500.0μg/ml,两法抗体检出结果无差异(100.0%),至6.25μg/ml,酶标法检出率为0,而金标法仍为70.0%—80.0%(P<0.01).     

应用单克隆抗体—抗原斑点试验检测血清抗原诊断黑热病的进一步研究

用单克隆抗体—抗原斑点试验(McAb-AST)又一次对50例黑热病确诊患者作血清抗原检测,以诊断黑热病。阳性率达100％。与前文报道的51例共计101例的阳性率为97.03％。509份对照血清(合计)中,假阳性反应1例(0.2％),特异性达99.8％。本文新病例乃在改进及简化方法基础上获得了更满意的效果。分析甘肃陇南、四川北部63例患者的年龄分布可见:10岁以下占65.1％;11—20岁,12.7％;21—30岁, 17.4％;21—40岁,4.8％;40岁以上无病例。符合山丘型黑热病的特点。本文总结出McAb—AST为敏感性高(97.03％),特异性强(99.8％)的黑热病实验断方法。经简化后,适合于广大基层单位推广使用,由于所需血清样品量微,取材方便,在儿童多发的山丘型黑热病疫区的应用,较之骨髓涂片诊断法的优越性,更显而易见。     

单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫病人循环抗原

制备抗日本血吸虫排泄分泌抗原单克隆抗体(McAb),应用于斑点酶联免疫吸咐试验(Dot-ELISA)检测血吸虫病人循环抗原.血吸虫病人血清的阳性率为80.9％(152/188),其中EPG为1～24、25～99和≥100的病人检出率分别为76.8％、86、6％和100％。血吸虫病人经吡喹酮治疗1年以上粪检阴性者50例,均为阴性.并殖吸虫病人、华支睾吸虫病人、丝虫病人和健康人血清均为阴性.McAb-Dot-ELISA操作简便,试剂用量少,肉眼判断结果,可用于血吸虫病的诊断和疗效考核。     

斑点酶免疫法的技术关键

<正> 斑点酶免疫法(Dot-ELISA)是70年代末由Western-blot演变而来的,它是以微孔滤膜为载体的酶联免疫吸附试验。又称斑点免疫吸附试验,抗原斑点试验(Antigen-spot test),斑点免疫结合试验(Dot-Immunobinding assay)及斑点免疫测定(spot Immuno detection)等。该法具有操作简便,不需特殊仪器,敏感性与RIA及E1A相当,包被抗原或抗体用量少,一条膜可同时检测几种不同的抗原抗体系统,便于携带     

Dot—ELISA检测循环抗原在急性血吸虫病中的临床应用

1990年7～10月,我所收治急性血吸虫病(急血)97例,采用单克隆抗体(McAb)斑点酶联试验(Dot—ELISA)检测循环抗原(SCA)70例,应用于临床诊断及疗效考核。 材料与方法 一、待测血清:“急血”病人血清70份,取自本所住院病人。其中粪便单项检查阳性血清25份,双项检查粪阳及IHA(或COPT)阳性血清30份,IHA(或COPT)单项检查阳性血清13份,症状、体征阳性血清2份。经治疗6个月后病人血清40份。 二、粪检及IHA、COPT测定方法:均按血防手册方法。以粪检(1送1检)为依据,以IHA(冻干诊断血球由人民解放军163医院提供,批号:910406)、COPT(虫卵抗原由本所自制干虫卵粉,批号:9102)作对照。     

应用ABC—Dot—ELISA检测弓形虫抗体的研究

应用弓形虫可溶性抗原行ABC—Dot—ELISA,对10份病人血清28份感染兔血清和10份阴性人血清及38份阴性兔血清进行检测,与常规Dot—ELISA相比,两者的符合率一致,但其敏惑度可提高5.0倍。与卫氏并殖吸虫、华枝睾吸虫和日本血吸虫病人和感染动物,进行了交叉反应,除与急性血吸虫病人出现阳性反应(14/16)外,其余未见交叉反应。阳性血清经吸收抑制后,抗体滴度下降明显。本法特异性高、敏感性强、重复性好,抗原可长期保存;结果判断方便,阳性反应斑点经久不退,可待复查。     

检测阿米巴肝脓肿病人循环溶组织内阿米巴抗原—抗体复合物的一种简易斑点试验法

检测溶组织内阿米巴循环抗原可为阿米巴病侵袭期提供确实的证据。本文报道应用斑点试验检测阿米巴肝脓肿病人循环抗原-抗体(Ag-Ab)复合物的结果。血清样本收集系从:(1)47名阿米巴肝脓肿病人;(2)非阿米巴病患者43人,包括病毒性肝炎16人,肠结核9人,贾第虫病18人;(3)健康对照35人,其中19人粪检溶组织内阿米巴和抗阿米巴抗体均阴性,余16人均无阿米巴病病史。阿米巴肝脓肿患者的诊断按照WHO提出的依据,即临床症状、扫描或超声确定、吸出无菌脓液、血清学反应阳性和灭滴     

SPA—Dot—ELISA在华支睾吸虫病诊断中的应用

斑点酶联免疫吸附试验(Dot ELISA)是以硝酸纤维素薄膜为固相载体进行抗原抗体间免疫反应的一种敏感、简易的检测方法。本实验改用葡萄球菌A蛋白(SPA)替代第二抗体应用此法诊断该病也获得满意结果。材料和方法 (一)硝酸纤维素薄膜为西德Schleicher and Schuell产品,孔径0.45μl。     

降低斑点酶联免疫吸附试验检测人的内脏利什曼病的假阳性反应

本文报道了以辣根过氧化物酶(HRP)标记抗IgG重链替代标记IgG作结合物可使斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测人内脏利什曼病人的假阳性降低。血清取自确诊的30例肯尼亚内脏利什曼病人、10例锥虫病人和肯尼亚及北美正常人各30份。所有血清均贮于-20℃备用。抗原以杜氏利什曼原虫前鞭毛体制备,并以1.5%福尔马林-PBS固定。吸1μl(相当于蛋白量254ng)抗原滴于0.22μm的硝酸纤     

二种血吸虫循环抗原平行检测的效果观察

单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和快速检测血吸虫循环抗原酶法单独检测血吸虫循环抗原的效果已有报道,但未见其平行检测结果.为此,我们于1993年在云南省血吸虫病流行区进行了此项观察.     

用McAb—AST对山丘疫区黑热病漏诊的实验诊断研究

本文报道McAb-AST法对我国山丘疫区骨髓涂片检查漏诊的黑热病病例实验诊断价值。观察的81例中骨髓涂片法漏诊者有13例,经McAb-AST显阳性反应,而给予锑剂治疗,治后11例临床痊愈,用McAb-AST复查者也转为阴性反应(1例复发除外),从而表明骨髓涂片法漏诊率高达16.05％,而McAb—AST显假阴性反应者仅有1例(1.23％)。本文还对McAb-AST的实验条件进行了改进,并以实验结果论证了McAb-AST阳性反应系由于特异性McAb-与循环抗原的结合,而不是非特异性反应所致。     

高灵敏度血吸虫病疗效考核的试剂盒研制成功

近来,我所研制出一种灵敏度很高的检测血吸虫循环抗原的实用方法,敏感度达到10~(-9)g,比斑点试验查循环抗原的灵敏度提高了30倍。经检测轻、中、重不同流行区粪孵阳性的血吸虫病人621例,阳性率为92.9～100％;检测45例急性血吸虫病人,阳性率100％。检测951例正常人和其它寄生虫病感染者,假阳性率仅为0. 11％,显示有很高的敏感性和特异性。     

病毒性肝炎患者血清m—AST测定及意义

天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)主要存在于心肌、肝等组织器官中 ,系细胞内功能酶 ,细胞外液活性很低。 AST有两种同功酶 ,分别位于胞浆内 (c-AST)和线粒体内 (m- AST) ,血清中 c- AST升高表示细胞膜通透性增强 ,而 m- AST升高则提示线粒体膜的通透性增强和细胞坏死。我们采用免疫抑制法测定了 1 88例病毒性肝炎患者的血清 m- AST活性并进行动态观察 ,以探讨其临床应用价值。1　资料与方法1 .1　临床资料　病毒性肝炎患者 1 88例 ,男 1 0 8例、女 80例 ,年龄 1 2～ 74岁。按 1 995年全国传染病与寄生虫病学术会议修定的《病毒性肝炎防…     

快速微量Dot—IGSS检测日本血吸虫病人血清中抗体的研究

本文用日本血吸虫可溶性虫卵抗原点于微孔滤膜上,以快速微量斑点免疫金银染色法(Rapid microvolume Dot-IGSS,Rm Dot-IGSS)检测血吸虫病患者血清中相应抗体,并与Dot-IGSS相比较,检测血吸虫病人血清69份,两法阳性率均为100％。检测正常人血清50份,两法阴性率均为100％。检测华支睾吸虫病人血清10份,两法均未出现交叉反应。检测肺吸虫病人血清10份,Rm Dot-IGSS未出现交叉反应,Dot-IGSS有1例出现交叉反应。     

急性期并殖吸虫病检测循环抗原的诊断价值

采用纯化的抗卫氏并殖吸虫成虫抗体进行双抗体夹心HLISA,检测并殖吸虫病人体内特异的循环抗原。检测累计阳性率82.4％(75/91),假阳性率为4.9％(3/61)。其中感染3个月以上的病人血清测得阳性率为51.9％(14/27),感染不足3个月的急性期病人阳性率为85.9％(55/64)。表明此法对并殖吸虫病,尤其是急性期的诊断具有价值。此外还比较了斑点ELISA法与双抗体夹心ELISA法检测循环抗原的效果,发现斑点ELISA法检出率不低于双抗体夹心ELISA法。而且更为简便、省材,在并殖吸虫病诊断和流行病学调查中具有推广应用意义。