单胺类递质在迷走神经刺激抗癫痫中的作用研究

目的探讨迷走神经刺激（ｖａｇｕｓｎｅｒｖｅｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ,ＶＮＳ）抗癫痫的作用机制。方法成年健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只,随机分为正常对照组（ＮＣ组）、戊四氮（ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ,ＰＴＺ）致癫痫组（ＰＴＺ组）及ＶＮＳ后ＰＴＺ致癫痫组（ＶＮＳ组）。ＰＴＺ腹腔注射致癫痫后（６０ｍｇ／ｋｇ体重）,行左侧颈部迷走神经刺激。采用荧光光度法测定各组动物大脑顶叶皮层及海马的去甲肾上腺素（ＮＡ）、肾上腺素（Ａ）及五羟色胺（５ＨＴ）的含量。结果顶叶皮层Ａ及５ＨＴ的含量ＰＴＺ组明显高于ＮＣ组,而ＶＮＳ组则明显低于ＰＴＺ组;海马内ＮＡ、Ａ及５ＨＴ的含量ＰＴＺ组明显低于ＮＣ组,而ＶＮＳ组ＮＡ及５ＨＴ含量明显高于ＰＴＺ组。行为和ＥＥＧ结果显示,ＶＮＳ有明显的抗癫痫作用。结论单胺类递质ＮＡ、Ａ及５ＨＴ在ＶＮＳ抗癫痫中起重要作用。     

癫痫患者血清神经元特异性烯醇酶的测定

目的探讨癫痫持续状态（ＳＥ）和单次癫痫发作对癫痫患者大脑神经元的损伤。方法对４１例癫痫、７例假性发作患者（ＰＳＧ）和１４名正常人的血清神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）含量进行测定。癫痫组和ＰＳＧ组在发作间歇期、发作后当日、次日和第３日各抽血５ｍｌ,测定ＮＳＥ含量,取峰值与发作间期结果和对照组比较。结果４１例癫痫患者发作间歇期血清ＮＳＥ均值为（５９±０．７）μｇ／Ｌ,对照组为（６３±１４）μｇ／Ｌ,两组比较差异无显著意义。癫痫组２６例单次发作后血清ＮＳＥ峰值为（９２±１．６）μｇ／Ｌ,６例ＳＥ患者血清ＮＳＥ峰值为（１９５±１３２）μｇ／Ｌ,与发作前基线比较差异有显著意义。７例ＰＳＧ间歇期与发作后血清ＮＳＥ含量比较差异无显著意义。结论癫痫发作可导致血清ＮＳＥ水平升高,提示单次癫痫发作亦有神经元损伤,ＳＥ时神经元损伤更重。     

实验性癫痫大鼠乳头体中P物质含量变化的研究

本文采用戊四氮（ＰＴＺ）诱发大鼠癫痫模型，动态观察了癫痫大鼠脑组织中乳头体、海马及颞叶皮层Ｐ（ＳＰ）含量的变化。结果发现，癫痫后大鼠乳头体ＳＰ含量显著下降，１击后恢复至正常水平，海马及颞叶皮层的ＳＰ含量未发现明显变化。提示乳头体中ＳＰ与癫痫发作有关。     

戊四氮致痫对大鼠海马星形胶质细胞的影响

目的　探讨戊四氮（ＰＴＺ）致痫对大鼠海马星形胶质细胞的影响。方法　应用免疫组织化学方法观察ＰＴＺ致痫后大鼠海马内胶原纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）变化的特点,同时观察了不同强度的痫性发作与ＧＦＡＰ改变的关系。结果　ＧＦＡＰ改变于ＰＴＺ致痫后１２ｈ 开始,２４ｈ 达到高峰,７２ｈ 已开始回落,并且痫性发作的强度与ＧＦＡＰ改变有一定的联系。结论　癫痫与星形细胞之间确有一定联系。     

癫痫状态大鼠海马HSP70mRNA及GAD67mRNA表达水平的研究

目的 研究癫痫演变过程中特定脑区选择性神经元损伤与修复机制。方法 采用分子杂交方法动态观察了马桑内酯（coriaria Lactone,CL)诱导的癫痫状态大鼠海马区早期神经元损伤标志物热休克蛋白（heat shock protein,HSP)70mRNA及谷氨酸脱羧酶（glutamin acid decarboxylase,GAD)67mRNA表达水平的变化,同时也观察了大鼠行为学及脑电图改变。结果 侧脑室注射CL后20分钟,大鼠出现连续发作的四肢抽搐伴有EEG持续性的棘慢波及尖波发放。注射CL后2小时组大鼠海马GAD67 mRNA表达水平有所降低,但HSP70mRNA变化不明显,注射CL后8小时组大鼠海马GAD67mRNA表达水平有所降低,但HSP70mRNA表达变化不明显,注射CL后8小时组大鼠海马GAD67mRNA表达水平明显低于对照组（P＜0．01）,HSP70mRNA表达水平较对照组明显增高（P＜0．01）。结论 癫痫状态期间大鼠海马区可能存在神经元损伤与修复过程,而且GABA能神经元受到不同程度的损伤。     

癫痫持续状态大鼠内质网应激预适应对海马神经元保护作用的实验研究

目的 探讨2-脱氧葡萄糖诱导内质网应激预适应对癫痫持续状态大鼠海马神经元的保护作用及其可能机制。方法 采用2-脱氧葡萄糖连续腹腔注射诱导内质网应激,并在此基础上制备氯化锂-匹罗卡品癫痫持续状态大鼠模型。Nissl染色观察癫痫持续状态后海马神经元损伤情况、计数海马CA1和CA3区存活神经元数目;免疫组织化学检测海马CA3区内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和X盒结合蛋白1（XBP-1）表达变化。结果 与癫痫持续状态组相比,癫痫持续状态后第7天时内质网应激预适应组大鼠海马存活神经元数目增加,以CA1区显著（t=5.353,P=0.000）。癫痫持续状态组大鼠发作后6 h,海马CA3区GRP78和XBP-1表达水平升高且高于对照组（均P=0.000）,于发作第2天达峰值水平（均P=0.000）;内质网应激预适应组大鼠发作前海马CA3区GRP78和XBP-1表达即高于对照组（均P=0.000）,GRP78在发作后24 h和2 d时维持在峰值水平（均P=0.000）,XBP-1在发作后24 h达峰值水平（P=0.000）;内质网应激预适应组大鼠海马CA3区GRP78和XBP-1表达在癫痫持续状态前,以及癫痫持续状态后6、12、24 h均高于癫痫持续状态组（均P=0.000）,至第2和7天时与癫痫持续状态组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 经2-脱氧葡萄糖诱导的内质网应激预适应对癫痫持续状态大鼠海马神经元具有保护作用,而XBP-1-GRP78信号转导通路的活化可能是其机制之一。     

癫痫持续发作对大鼠海马神经元的影响

目的 研究实验性癫痫大鼠在癫痫发作持续不同时间对海马神经元的影响。方法24只SD大鼠随机分成4组：诱发火鼠瘢痫持续状态（status cpilepticus，SE）〈10、10～30、〉30min组及正常对照组。于电镜下观察各组海马神经元超微结构变化；采用免疫组化方法检测凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达及通过流式细胞技术检测细胞凋亡情况。结果SE〈10min组海马神经元所受影响不大．SE10～30min组海马神经元具有明显凋亡特征．SE〉30min组多数海马神经元呈坏死性改变。结论大鼠SE对海马神经元损伤有凋亡和坏死两种不同形式．这与癫痫发作的持续时间密切相关。     

损伤性窒息诱导癫痫的实验研究

目的：研究损伤性窒息致癫痫（ＥＰ）发生的神经细胞形态学改变，以探索ＥＰ发生的机制。方法：通过损伤性窒息ＥＰ的动物模型建立，观察损伤后ＥＰ发生率，神经细胞超微结构变化，海马神经元密度等分析与ＥＰ发作有关的神经细胞形态学改变及相互关系。结果：损伤性窒息后２４小时后ＥＰ发生率为４６．２％（Ｐ＜０．０５）。发作形式：主要为狂奔、全身性痉挛及局限性痉挛。神经细胞超微结构改变显示，除线粒体肿胀外，还有细胞固缩，胞浆浓缩，胞膜内陷，染色体呈块状集聚，细胞泡状改变及凋亡小体形成等凋亡特征。损伤后有ＥＰ发作比无ＥＰ发作者改变更为多见。海马ＣＡ１区神经元细胞密度分析显示，损伤性窒息可导致海马ＣＡ１区神经元密度减少（Ｐ＜０．０５）。结论：损伤性窒息引起脑损伤可诱发ＥＰ，而ＥＰ反复发作又加重神经细胞损害的程度和范围，两者互为因果，提示中断初始的ＥＰ发作，有利于治愈ＥＰ和保护神经细胞功能     

匹罗卡品致痫大鼠海马calpain活性变化和其对神经元死亡的影响

目的探讨在匹罗卡品致痫的癫痫持续状态（SE）大鼠模型中,钙蛋白酶在大鼠海马组织中的活性,及钙蛋白酶对神经元坏死、凋亡产生的影响。方法雄性成年wistar大鼠,应用匹罗卡品致痫产生SE后60min后终止发作,24h后取材,行HE染色及tunel染色,观察海马神经元的坏死及凋亡情况,以及western blot检测钙蛋白酶1（μ-calpain）的活性。结果癫痫持续状态后24h,海马组织HE染色神经元数量减少,tunel阳性细胞数增加,钙蛋白酶1出现76ku条带。结论大鼠癫痫持续状态后24h,钙蛋白酶1在海马组织神经元活性增加,海马神经元出现坏死及凋亡。钙蛋白酶1与神经元的死亡存在着正相关。     

实验性癫痫大鼠脑组织中生长抑素含量变化的研究

本文采用戊四氮（ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｒａｚｏｌ，ＰＴＺ）诱发大鼠癫痫模型，用放射免疫方法测定了癫痫大鼠乳头体、额叶皮层及海马中生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ，ＳＳ）含量的变化。结果发现，癫痫大鼠脑组织中乳头体及额叶皮层的ＳＳ含量显著升高，海马无明显。提示乳头体及额叶皮层中ＳＳＧ民癫痫发作有关，可能参与也癫痫的散过程。     

损伤性窒息诱导癫痫的实验研究

目的：研究损伤性窒息致癫痫（ＥＰ）发生的神经细胞形态学改变，以探索ＥＰ发生的机制。方法：通过损伤性窒息ＥＰ的动物模型建立，观察损伤后ＥＰ发生率，神经细胞超微结构变化，海马神经元密度等分析与ＥＰ发作有关的神经细胞形态学改变及相互关系。结果：损伤性窒息后２４小时后ＥＰ发生率为４６．２％（Ｐ〈０．０５）。发作形式：主要为狂奔、全身性痉挛及局限性痉挛。神经细胞超微结构改变显示，除线粒体肿胀外，还有细胞固缩     

实验性癫痫大鼠部分脑区亮──脑啡肽含量变化的研究

采用戊四氮（ＰＴＺ）诱发大鼠癫痫，并分为重度组（全身癫痫大发作者）及轻度组（没有全身大发作者），观察了部分脑区亮－脑啡肽（Ｌ—Ｅｎｋ）的变化。结果发现，在额叶、丘脑、纹状体及中脑，两组的Ｌ—Ｅｎｋ均明显升高；重度组与轻度组比较，前者下丘脑的Ｌ—Ｅｎｋ高于后者，额叶及丘脑也有升高趋势，但无统计学差异；海马的Ｌ—Ｅｎｋ无明显变化。提示Ｌ—Ｅｎｋ参与了ＰＴＺ诱发的癫痫过程。     

己酮可可碱预处理对癫痫发作大鼠海马损伤的影响

目的观察己酮可可碱(Ptx)预处理对癫痫发作大鼠海马损伤的影响。方法健康、成年雄性Wistar大鼠分为3组:对照组、癫痫组和Ptx预处理组。对照组腹腔注射生理盐水(127mg·kg~(-1));癫痫组和Ptx组大鼠用氯化锂-匹罗卡品(Li-Pc)诱发癫痫发作,先腹腔注射氯化锂(127mg·kg~(-1)),20h后背部皮下注射匹罗卡品(15mg·kg~(-1));Ptx组大鼠在匹罗卡品注射前30min通过腹腔给予Ptx(60mg·kg~(-1))。观察大鼠癫痫发作情况,利用Timm和Thionin染色分别观察海马苔藓纤维发芽(MSF)和神经元损伤情况。结果癫痫组大鼠在海马苔藓纤维发芽明显增多,并伴有海马神经元的损伤和脱失,Ptx预处理降低了Li-Pc诱发大鼠的癫痫发作率和癫痫发作程度,延长了其癫痫发作潜伏期,减轻了Li-Pc诱发大鼠海马的苔藓纤维出芽及神经元的损伤。结论 Ptx预处理缓解了Li-Pc诱发大鼠的癫痫发作和海马损伤,可能成为治疗癫痫的一种方法。     

丹参对癫痫大鼠脑内热休克蛋白70表达的影响

目的 探讨丹参对癫痫发作所造成神经元损伤的作用及其机制。方法 采用戊四氮致痫模型,运用常规病理及电镜检查方法,对比丹参组与对照组神经元受损的情况;运用免疫组织化学方法,对比观察丹参组与对照组热休克蛋白（ＨＳＰ）７０表达的变化。结果 丹参组与对照组动物相比,大脑皮质及海马区异常神经元的数目明显减少（Ｐ〈０．０１）,超微结构的异常改变也明显减轻,同时丹参组动物脑内ＨＳＰ７０免疫反应阳性神经元的数目明显     

氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠海马结构损伤的形态学及苔藓纤维发芽研究

目的 观察幼鼠致痫后海马的组织病理学改变。方法 采用氯化锂－匹罗卡品腹腔注射制成幼鼠癫痫持续状态模型，应用常规病理及电镜观察海马结构的形态学改变，同时应用Timm组织化学染色方法进行苔藓纤维发芽的研究。结果 海马区神经元可见变性、坏死改变，以CA1区、CA3区为重。Timm染色见齿状回内分子层和CA3区下锥体层苔藓纤维发芽增加。结论 （1）氯化锂－匹罗卡品诱导的幼鼠癫痫持续状态可造成海马区神经元损伤；（2）幼鼠癫痫持续状态后海马CA1、CA3区神经元损伤较重；（3）幼鼠癫痫持续状态后可致苔藓纤维发增加。     

海马硬化与癫痫的因果关系探讨

为了探讨海马硬化与癫痫的因果关系，选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠以马桑内酯肌肉注射，制成全身强直－阵挛性发作的癫痫动物模型，并于点燃后连续用药，分别引起Ⅳ级以上抽搐发作２０和４０次。同时建立生理盐水和安定对照组，后者于注射马桑内酯前注射安定，以避免抽搐。并对海马ＣＡ１区进行病理形态学观察。结果显示，马桑内酯注射组与安定组大鼠海马ＣＡ１区有明显的病理改变，锥体细胞变性坏死，神经胶质细胞水肿变性，突触结构异常。抽搐４０次组病理变化重于抽搐２０次组，后者又重于安定组。生理盐水组未见上述改变。结果提示，马桑内酯可引起大鼠海马ＣＡ１区神经元损伤，既使无抽搐发作时也可造成这种损伤。反复严重的抽搐发作又可进一步加重海马ＣＡ１区的病损，抽搐次数越多，损伤越重。海马硬化可能是抽搐反复发作造成的结果。     

实验性癫痫大鼠不同脑区亮－脑啡肽含量变化的动态观察

本文采用戊四氮（ＰＴＺ）诱发大鼠癫痫模型，动态观察了脑组织中额叶、海马、丘脑、下丘脑、中脑及纹状体中亮－脑啡肽（Ｌ－Ｅｎｋ）含量的变化。结果发现，应用ＰＴＺ后，癫痫大发作大鼠及未出现大发作的大鼠额叶、丘脑、中脑及纹状体中Ｌ－Ｅｎｋ含量均明显升高，两组间无明显差异；但大发作大鼠下丘脑的Ｌ－Ｅｎｋ含量显著高于对照组及无大发作组。大发作后６小时内，额叶、中脑、丘脑及下丘脑的Ｌ－Ｅｎｋ恢复至正常，而纹状体中Ｌ－Ｅｎｋ于２４小时内恢复至正常；海马的Ｌ－Ｅｎｋ含量各组间无明显变化。提示Ｌ－Ｅｎｋ可能参与了癫痫的发生过程     

癫痫状态大鼠海马HSP70 mRNA及GAD67 mRNA表达水平的研究

目的研究癫痫演变过程中特定脑区选择性神经元损伤与修复机制。方法采用分子杂交方法动态观察了马桑内酯(coriariaLactone,CL)诱导的癫痫状态大鼠海马区早期神经元损伤标志物热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70mRNA及谷氨酸脱羧酶(glutaminaciddecarboxylase,GAD)67mRNA表达水平的变化,同时也观察了大鼠行为学及脑电图改变。结果侧脑室注射CL后20分钟,大鼠出现连续发作的四肢抽搐伴有EEG持续性的棘慢波及尖波发放。注射CL后2小时组大鼠海马GAD67mRNA表达水平有所降低,但HSP70mRNA表达变化不明显,注射CL后8小时组大鼠海马GAD67mRNA表达水平明显低于对照组(P＜0.01),HSP70mRNA表达水平较对照组明显增高(P＜0.01)。结论癫痫状态期间大鼠海马区可能存在神经元损伤与修复过程,而且GABA能神经元受到不同程度的损伤。     

癫痫患者血清和脑脊液神经元特异性烯醇化酶的测定

目的 探讨癫痫发作对脑神经元的损伤。方法 应用酶联免疫反应法动态测定癫痫发作后患者血清和脑脊液（CSF）中神经元特异性烯醇化酶（NSE）的含量。结果 癫痫组血清和CSF中NSE含量在发作后明显升高，血清NSE水平在发作后第1天最高，1周左右开始下降，2周左右降至正常；抽搐发作及频繁发作时，血清和CSF中NSE升高更明显。结论 癫痫发作引起血清和CSF中NSE水平的升高；癫痫发作导致神经元损伤，抽搐发作及频繁发作时神经元损伤更严重。     

强直电刺激大鼠海马,中部颞叶新皮质诱发癫痫模型中电振？…

在急性,慢性在体大鼠及体脑片癫痫模型上观察ＥＥＧ、深部电图、神经元网络及单个神经元的电活动,研究中枢同步电振荡行为为在癫痫发生中的重要作用。实验结果表明：离体脑片上强直电刺激海马Ｓｃｈａｅｆｆｅｒ侧枝,３２．５％ＣＡ１神经元全细胞记录呈现３－１００Ｈｚ膜电位振荡,这种电振荡能促进细胞外场电位癫痫活动形式的转化。急性癫痫模型上（ｎ＝１０,ｉｎ ｖｉｖｏ）反复强直电刺激海马或中部颞叶新皮质可诱发海马区