复方六月青对鸭乙型肝炎病毒诱导肝损伤的保护作用研究

目的研究复方六月青(CLYQ)对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)诱导麻鸭肝损伤的保护作用。方法采用DHBV诱导广西麻鸭乙型肝炎病毒肝损伤模型。于用药前(T0)、用药7d(T7),14d(T14)及停药后3 d(P3)分别检测鸭血清的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织病理变化。结果用药后CLYQ中、高剂量组鸭血清ALT和AST的含量显著降低(P<0.01),并且有量效和时效关系。鸭肝脏病理学检查表明CLYQ对DHBV引起肝损伤有显著的保护作用。结论 CLYQ可有效地保护DHBV诱导麻鸭肝损伤。     

复方玉郎伞多糖对鸭乙型肝炎病毒诱导的肝损伤的影响

目的：研究复方玉郎伞多糖（CYLSP）在鸭乙型肝炎病毒（DHBV）持续性感染模型中对DHBV所致的肝损伤的保护作用。方法：采用1 d龄雏鸭接种广西麻鸭乙型肝炎病毒（DHBV）强阳性血清,接种1周后用聚合酶链式反应（PCR）法筛选出DHBV强阳性鸭50只,随机分为5组,每组10只,CYLSP高、中、低剂量组（10,5,2.5 g·kg^-1）、拉米夫定（0.05 g·kg^-1）组和模型组,每日上午ig给药1次,连续14 d。于用药前（T₀）、用药7 d（T₇）和14 d（T₁₄）及停药后3 d（P₃）分别采血,同时检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）的活性;在停药3 d后,取肝脏匀浆并除蛋白,检测肝匀浆液中总超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性以及谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量;HE染色处理肝脏组织切片,光镜观察病理学改变。结果：与同组T₀及模型组比较,各给药组鸭血清高、中剂量治疗组给药7 d （T₇）和14 d （T₁₄）即能明显降低血清ALT,AST的活性,停药3（P₃）天后,CYLSP高剂量组仍能显示出持续有效,没有出现反跳现象（P<0.05或P<0.01）;检测肝匀浆液中SOD,GSH-Px活性以及GSH,MDA的含量,CYLSP高、中剂量组和拉米夫定组仍能显示出持续有效,没有出现反跳现象（P<0.05或P<0.01）;HE染色显示CYLSP可显著减轻鸭肝组织病理损伤程度。结论：CYLSP对DHBV所致的肝损伤具有保护作用。     

六月青总皂苷抗鸭乙型肝炎病毒作用研究

目的:观察六月青总皂苷(the terpenoids of Liuyueqing,TLYQ)体内抗鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,DHBV)的作用。方法:将DHBV DNA阳性麻鸭随机分为六月青总皂苷大、中、小剂量治疗组、拉米夫定组和模型组,分别给予相应药物进行干预。用药前、用药第7、14d及停药第7d,取静脉血用实时荧光定量PCR法检测血清DHBV DNA含量。治疗后取肝脏组织作病理学检查。结果:拉米夫定组用药后血清DHBV DNA水平迅速降低,停药后立即反跳。六月青总皂苷大剂量组第7d、14d即能明显抑制DHBV DNA,停药后仍有一定的抑制作用。中、小剂量组与模型组比较有一定的病毒抑制作用。病理改变各组在统计学上无明显差异。结论:六月青总皂苷可有效地抑制DHBV DNA,其作用有明显的量效和时效反应关系。     

六月青总皂苷对鸭HBV病毒复制的抑制作用

采用鸭乙型肝炎动物模型观察六月青总皂苷抗鸭乙型肝炎病毒与保护肝细胞的作用,实验结果表明,六月青总皂苷(1.0,2.0 g·kg-1.d-1)和3TC(50 mg·kg-1.d-1)能明显抑制DHBV-DNA复制,抑制ALT,AST和DHBsAg水平,改善肝组织病理学损伤。不同于3TC的是六月青总皂苷在停药后仍能显示有抑制病毒的作用,没有出现反跳现象,提示,六月青总皂苷抗病毒的作用机制有别于3TC。实验结果表明六月青总皂苷具有有效抑制DHBV-DNA和保护肝细胞的作用。     

六月青多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响

目的:研究六月青多糖(LYQP)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)所致大鼠肝纤维化的干预作用及机制.方法:SD大鼠随机分成两组,模型组大鼠采用50％ CCl4花生油溶液1 mL·kg-1ig造模,每周2次,连续7周,正常组用生理盐水代替.将病理检查确认肝纤维化已形成的SD大鼠60只随机分为LYQP(600,300,150 mg·kg-1)组,秋水仙碱(0.2 mg·kg-1)组,CCl4模型对照组,每组12只.于造模的第8周开始给药.正常组和CCl4模型对照组ig生理盐水,药物组ig LYQP和秋水仙碱,每日1次,连续ig给药4周.检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)活性以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,采用Masson染色观察肝组织纤维化程度.结果:LYQP(600,300,150 mg·kg-1)组ALT和AST活性为(13.53±2.30),(19.89±2.13),(26.31±2.87) U·mL-1,(17.14±2.96),(24.85±3.14),(33.63±3.91) U·mL-1,与模型对照组比较,LYQP可明显降低CCl4致大鼠纤维化血清ALT和AST活性;GSH-Px活性为(710.4±35.98),(653.8±25.36),(612.0±27.96) U·mg-1,Hyp含量为(0.382±0.017),(0.446±0.022),(0.517±0.024)mg·g-1与模型对照组比较,LYQP可明显增高GSH-Px活性和降低Hyp含量;Masson染色显示各药物组干预的大鼠肝脏胶原纤维均有所减少.结论:六月青多糖可减轻CCl4诱导的肝纤维化.     

六月青多糖抗肿瘤活性研究

目的 研究六月青多糖的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法 以S180荷瘤小鼠为模型,六月青多糖灌胃后观察小鼠移植瘤抑制率,采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测S18o荷瘤小鼠血清中IL-2和TNF-α水平.结果 六月青多糖可抑制小鼠S180移植瘤的生长,其中高剂量组(1.2g·kg-1·d-1)抑瘤率为37.81％;六月青多糖能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和TNF-α含量.结论 六月青多糖体内抗肿瘤活性较强,其机制可能与增强机体的免疫功能有关.     

六月青皂苷对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的: 观察六月青皂苷对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。 方法: 将72只小鼠随机分为空白组、模型组、日达仙阳性药组(4.2×10^-3 g ·kg^-1 ·d^-1)以及六月青皂苷低、中、高剂量组(0.5,1,2 g ·kg^-1 ·d^-1),第1天,除空白组外,其余各组均尾iv 卡介苗(BCG),次日起给予相应药物干预,第10天末次给药2 h后,除空白组外,其余各组均经尾iv 脂多糖(LPS),10 h后取小鼠称重,于眼球取血,处死,取肝脏,检测并比较各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)和T细胞亚群(CD3⁺,CD4⁺,CD8⁺,CD4⁺/CD8⁺)之间的差异,HE染色,光镜下观察肝组织损伤程度。 结果: 与模型组比较,高、中剂量六月青皂苷能明显提高CD3⁺,CD4⁺,CD4⁺/CD8⁺值,显著降低CD⁺8值和ALT,AST水平;能明显减轻肝细胞气球样变性,点状、片状坏死及炎性细胞浸润。 结论: 六月青皂苷对免疫性肝损伤具有明显的保护作用。     

六月青皂苷对四氯化碳诱导大鼠肝损伤的影响

目的:研究六月青皂苷(LYQS)对四氯化碳诱导大鼠肝损伤的保护作用。方法:66只SD大鼠,分为两组,正常组(10只)和造模组(56只),造模组大鼠,采用50%CCl4花生油溶液1 mL·kg-1,ig造模,每周2次,连续6周,正常组用生理盐水代替。随机抽取造模组6只大鼠进行肝脏病理检查,确认肝损伤形成后,将50只SD大鼠随机分为:模型组、秋水仙碱组、LYQS低、中、高剂量组。ig六月青皂苷20,40,80 mg·kg-1,秋水仙碱0.2 mg·kg-1,正常组及模型组给予等量生理盐水,每天ig给药1次,连续ig 30 d。末次给药24 h后取材,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的含量。同时Western blot法测定肝组织中环加氧酶2(COX-2)的表达,并观察肝组织病理学变化。结果:与模型组ALT,AST,TNF-α,IL-6依次为(91.62±4.84)U.L-1,(98.56±9.37)U.L-1,(135.64±5.38)ng·L-1,(147.38±6.34)ng·L-1比较,六月青皂苷低、中、高给药组均有效降低模型大鼠血清中ALT(80.94±4.68),(69.51±4.07),(65.89±3.85)U.L-1,AST(90.87±8.76),(81.53±6.62),(73.64±5.71)U.L-1,TNF-α(98.57±3.09),(81.74±4.33),(65.93±3.20)ng·L-1,IL-6(115.78±4.81),(95.83±5.34),(74.29±4.76)ng·L-1水平(P<0.05);治疗后,与模型组(1.18±0.17)比较,六月青皂苷低、中、高给药组的肝组织中COX-2蛋白水平(0.91±0.03),(0.79±0.06),(0.67±0.04)均有所降低(P<0.05),并缓解肝损伤病情。结论:六月青皂苷对CCl4诱导的大鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与其抗炎作用有关。     

鸡矢藤挥发油体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的 对鸡矢藤挥发油抗HBV作用进行体外抗病毒实验研究.方法 采用水蒸气蒸馏法提取鸡矢藤挥发油,以HepG 2.2.15细胞为实验对象,检测鸡矢藤挥发油对HepG 2.2.15肝癌细胞株的细胞毒性.并在最大无毒浓度下观察鸡矢藤挥发油对HepG 2.2.15细胞表达HBsAg,HBeAg的影响.结果 鸡矢藤挥发油在31～2 000 mg/L的浓度范围内,对HepG 2.2.15细胞有明显抑制作用,TC50为1 550 mg/L, TC0为500 mg/L.在最大无毒浓度下,鸡矢藤挥发油对HBsAg最大抑制率为72.49%,治疗指数为6.74,对HBeAg最大抑制率为23.64%.结论 鸡矢藤挥发油对HepG2.2.15细胞HBsAg,HBeAg分泌有较好抑制作用.     

六月青乙醇提取物对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用

六月青系爵床科(Acanthaceae)肖鸡笼属植物肖鸡笼(顶花马兰)Taraphochlamys offinis(Ciff)Bremekhu的干燥地上部分[1],为广西民间草药.在<本草拾遗>中记载,其能活血、凉血、舒肝泻湿、消肿止痛,主要用于急慢性肝炎、黄疸等[1].本文采用荧光定量PCR法,研究六月青乙醇提取物对鸭乙型肝炎病毒DNA的抑制作用,为开发六月青用于乙型肝炎治疗提供实验依据.     

玉郎伞多糖抗鸭乙型肝炎病毒作用

目的：研究玉郎伞多糖（YLSP）抗鸭乙型肝炎病毒（duck hepatitis B virus,DHBV）的作用。方法：取1日龄广西麻 鸭60只,在麻鸭颈静脉注射0.2 mL强阳性DHBV DNA鸭血清,13 d后分别从其颈静脉采血0.5 mL,分离血清,用普通PCR法筛选出DHBV感染强阳性鸭。然后,将50只DHBV DNA阳性麻鸭随机分为5组：YLSP高、中、低剂量组（5,2.5,1.25 g·kg^-1）;阿昔洛韦阳性对照组（0.1 mg·kg^-1）和模型组。所有给药组均与模型组比较,以明确玉郞伞多糖对DHBV DNA的作用,所以未设置正常组。于给药前（T₀）,给药7 d（T₇）,14 d（T₁₄）及停药后3 d（P₃）采血,用实时荧光定量PCR法检测鸭血清中DHBV DNA的含量。HE染色观察肝损伤程度。结果：与模型组相比,YLSP各剂量组及阳性对照组在用药后血清中DHBV DNA的含量显著降低,停药后,阳性对照组及YLSP中、低剂量组DHBV DNA含量均有反跳现象。HE染色结果显示YLSP能减轻鸭肝组织的病理损伤程度。结论：YLSP对DHBV 具有抑制作用同时对肝损伤具有保护作用。     

狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的 观察狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的影响.方法 建立D-半乳糖胺(D-GalN)诱发的大鼠急性肝损伤模型,不同浓度狗肝菜多糖干预后,测定动物血清ALT、AST.肝组织常规制片及HE染色观察组织病理学改变.结果 狗肝菜多糖能使肝损伤动物血清ALT、AST水平显著降低.组织病理学检测发现狗肝菜多糖处理后肝组织损害程度降低 .结论 狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤具有保护作用.     

强肝糖浆对大鼠四氯化碳慢性肝损伤的保护作用

目的 :观察强肝糖浆对大鼠四氯化碳慢性肝损伤的保护作用。方法 :皮下注射 10 % CCl4油溶液0 .1m l/ 10 0 g诱发大鼠肝损伤病理模型 ,赖氏法测定血清 AL T活性 ,比色法测定 AST活性 ,双缩脲法测定总蛋白 ,溴甲酚绿法测定白蛋白含量 ,光镜下观察肝组织病理学改变。结果 :强肝糖浆显著降低血清 AL T、AST,升高白蛋白、白蛋白 /球蛋白比值 (P<0 .0 5 ) ,减轻 CCl4引起大鼠肝细胞变性、坏死及炎细胞浸润。结论 :强肝糖浆对四氯化碳致大鼠的慢性肝损伤有一定的改善作用     

正交设计法优选六月青多糖胶囊提取及醇沉工艺

目的:优选六月青多糖胶囊提取、醇沉工艺条件。方法:以多糖含量为指标,采用正交试验考察料液比、煎煮次数及煎煮时间对六月青多糖胶囊提取工艺的影响;以多糖含量及多糖收率为综合评价指标,选取醇沉时间、醇沉次数、加醇量及醇沉浓度为考察因素,通过正交试验优选醇沉工艺;采用苯酚-浓硫酸法测定总多糖含量。结果:六月青多糖胶囊最佳提取工艺为加10倍量水煎煮3次,每次煎煮2 h。最佳醇沉条件为水提液过滤后浓缩至0.5 g.mL-1,加7倍量95%乙醇沉淀12h,沉淀1次。醇沉后多糖纯度达71.05%,收率6.83%。结论:优选的提取及醇沉工艺条件稳定合理,可为六月青多糖胶囊的生产提供实验依据。     

扶正利湿活血复方对鸭胚肝细胞中鸭乙型肝炎病毒的抑制作用

目的 探讨扶正利湿活血中药复方水提物和醇提物对先天感染乙肝病毒(HBV)的鸭胚肝细胞乙型肝炎病毒(DHBV)的抑制作用.方法 荧光定量PCR技术对鸭胚尿囊液DHBV DNA分析筛选先天感染DHBV的阳性鸭胚,对DHBV阳性的鸭胚肝细胞原代培养;细胞接种后第3天分组加入不同剂量扶正利湿活血复方水提物和醇提物,共6 d,分别于药物干预前、药物干预第3天、第6天、停药第2天收集培养上清;辛酸钠法提取上清DHBV DNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测分析血清DHBV DNA的含量.结果 水提物各剂量组组内不同时间点DHBV DNA载量相比无显著性差异(P﹥0.05),仅水提物低剂量组DHBV DNA载量显著低于相同时间点病毒对照组(P<0.05);醇提物中、低剂量组在给药后和停药后培养上清DHBV均明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),扶正利湿活血复方醇提物高剂量组在给药后第3天时DHBV明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),第6天时组内比较无明显下降(P>0.05),而在停药后第3天时组内与组间比较又均有显著性差异(均为P<0.01).结论 扶正利湿活血复方醇提物对鸭胚肝细胞中的DHBV有直接抑制作用,水提物在鸭体内可能不是通过直接抑制DHBV而起作用.