P53和MDM2基因表达及与膀胱癌生物学行为的关系

目的：研究P53基因和MDM2基因表达及与膀胱癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测49例膀胱移行细胞癌中P53基因和MDM2基因的表达。结果：P53基因的阳性表达率为51．0％（25／49）,其表达率随膀胱癌的分期、分级升高而升高。MDM2基因的阳性表达率为32．7％（14／49）,其表达率随膀胱癌的分期、分级降低而升高。单有P53基因阳性表达的膀胱癌几乎均为浸润性和中、低分化癌;而当P53基因并MDM2基因表达时,膀胱癌的侵袭性和恶性度明显降低。2年复发组和未复发组的P53基因和MDM2基因的阳性表达率差异均无显著性意义。结论：联合检测P53和MDM2基因表达可更准确地解释和描述膀胱癌的生物学行为。这两种基因表达与膀胱癌预关系值得进一步研究。     

c—myc癌基因产物P62的表达与膀胱癌生物学行为关系

应用胶体金免疫电镜技术，检测９例膀胱癌标本中Ｐ６２的定位，发现Ｐ６２定位于细胞核。采用ＡＢＣ法免疫组化技术，检测１３例正常膀胱组织、１４例膀胱慢性炎性增生组织和５１例膀胱移行细胞癌标本中Ｐ６２的表达，并用显微分光光度计测得每例膀胱癌标本Ｐ６２的表达强度，与临床资料对比，结果发现正常膀胱组织和膀胱慢性炎性增生组织标本Ｐ６２染色阴性５１例膀胱移支细胞癌标本中３４例Ｐ６２染色阳性Ｐ６２表达的强度与膀胱癌     

c－myc癌基因产物P62的表达与膀胱癌生物学行为关系

应用胶体金免疫电镜技术，检测９例膀胱癌标本中Ｐ６２的定位，发现Ｐ６２定位于细胞核。采用ＡＢＣ法免疫组化技术，检测１３例正常膀胱组织、１４例膀胱慢性炎性增生组织和５１例膀胱移行细胞癌标本中Ｐ６２的表达，并用显微分光光度计测得每例膀胱癌标本Ｐ６２的表达强度，与临床资料对比，结果发现正常膀胱组织和膀胱慢性炎性增生组织标本Ｐ６２染色阴性，５１例膀胱移行细胞癌标本中３４例Ｐ６２染色阳性，Ｐ６２表达的强度与膀胱癌的病理分级、临床分期呈正相关，与预后呈负相关。     

膀胱移行细胞癌nm23—H1和nm23—H2基因表达的检测及临床意义

目的 探讨ｎｍ２３基因与膀胱移行细胞癌转移之间的关系。方法 应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ技术分析１２例膀胱移行细胞癌和６例膀胱粘膜ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２的基因表达。结果 膀胱癌标本ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平较膀胱粘膜显著升高，有盆腔淋巴结转移膀胱癌标本的ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ表达显著高于无转移组（Ｐ〈０．０５），而ｎｍ２３－Ｈ２ ｍＲＮＡ在各组间的表达无显著性差异。结论 ｎｍ２３     

膀胱癌转化生长因子α和P53基因表达及生物学意义

通过现代分子生物学方法，对膀胱癌实体肿瘤的ＴＧＦα和Ｐ５３表达及生物学意义进行了探讨。３４例膀胱癌中２９例ＴＧＦαｍＲＮＡ表达，表达率为８５．３％（２９／３４）；１３例癌旁对照组织中，６例无表达，６例低表达，１例高于自身肿瘤表达。肿瘤的表达量是癌旁正常对照的２～５倍，统计学分析，Ｐ＜０．０１。１４例膀胱癌４例（２８．５％）Ｐ５３高表达，２例低表达，２例正常和８例癌组织未见表达。膀胱癌ＴＧＦα基因的高表达可能是膀胱癌发生发展的早期信号，Ｐ５３基因的变异表达可能主要参与癌细胞的分化，它可能与膀胱癌恶性表行相关。     

复发性膀胱癌生物学行为的临床分析

对１７８例复发性膀胱癌进行回顾分析。结果显示：复发高峰时间为术后第二年（３２．６％），肿瘤复发次数以单次者居多（５９．０％），肿瘤期级是影响肿瘤复发、转移、死亡的最主要因素，多发性肿瘤易出现多次复发，肿瘤多次复发者死亡率高于单次复发者。通过预后不同的两组病例分析对比，探讨复发性膀胱癌的生物学行为及治疗对策。     

癌基因c—erbB—2的表达与膀胱肿瘤生物学行为之间的关系

采用免疫组织化学方法对56例膀胱肿瘤和６例正常膀胱粘膜组织的癌基因c-erbB-2表达产物进行检测，１９例膀胱肿瘤显示c-erbB-2表达产物阳性，６例正常膀胱粘膜组织均显著阴性。随着膀胱肿瘤病理分级的上升。c-erb-2 B-2的表达也提高；浸润性肿瘤的c-erb B-2的表达明显高于浅表性肿瘤的表达。还发现c-erb B-2的表达与否和肿瘤患者的预后密切相关。提示c-erbB-2基因表达产物可以作为膀胱肿瘤恶性程度、浸润深度以及患者预后的估价指标。     

ras癌基因点突变与膀胱癌关系的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），结合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析的方法，检测２４例石蜡包埋的膀胱癌组织中１５例Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的点突变呈阳性（６２．５％），提示Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的点突变随膀胱癌的级别、期别升高，可作为判断肿瘤恶性程度、进展和预后的监测指标。     

wt-p53对小鼠膀胱移行细胞癌生物学影响的研究

目的　探讨膀胱肿瘤的基因治疗途径。　方法　利用Lipofectamine将外源性野生型p5 3基因导入小鼠膀胱移行细胞癌MBST739细胞中 ,并得到表达 ,检测多项生物学指标。　结果　被转染的细胞在体外标准条件下 ,生长增殖率降低。细胞周期分析显示G0 和G1细胞比例明显增高 ,凋亡指数升高 ,细胞生长速度减低 ,代表细胞增殖能力的AgNORs计数下降 ,体内接种致瘤性下降 ,对丝裂霉素和阿霉素的敏感性提高。　结论　增加肿瘤细胞内野生型 p5 3基因表达能抑制恶性肿瘤细胞生长 ,提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性     

单核细胞趋化蛋白-1转基因对膀胱肿瘤生物学行为的影响

目的　观察单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )局部表达对膀胱肿瘤生物学行为的影响。　方法　通过脂质体介导 ,利用逆转录病毒载体将MCP 1基因导入膀胱肿瘤皮下模型的瘤细胞中。观察肿瘤生长情况 ,测瘤重及病理学检查。　结果　转基因组肿瘤生长受抑制 ,第 1 5天后生长曲线明显下降 ,瘤体湿重 (2 .6 8± 0 .6 1 ) g ,较对照组 (3.87± 0 .78)g和空白组 (3.98± 0 .70 ) g显著减轻。转基因组肿瘤向周围组织的侵袭力减弱 ,瘤内呈弥漫分布的点状或小片状坏死 ,并以单核细胞和淋巴细胞浸润为主。　结论　MCP 1对免疫细胞的趋化与活化在抗膀胱肿瘤的免疫效应中有重要作用。     

D-柠檬烯对人膀胱癌细胞生长和ras p21表达的影响

目的 探讨D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞生长和ras p21表达的影响.方法 采用还原四氮唑复合物(XTT)、实时定量PCR、蛋白质印迹法,对D-柠檬烯处理后的人膀胱癌EJ细胞增殖、ras基因mRNA表达以及ras p21蛋白表达进行检测,比较用药前后EJ细胞生长和ras p21表达变化.结果 经2、4 mmol/L D-柠檬烯处理后的EJ细胞增殖活性吸光度(A)值分别为0.8014-0.016和0.148±0.008,与未给药组1.218±0.031比较,差异有统计学意义(P<0.05).1 mmol/LD-柠檬烯作用48h,EJ细胞ras p21 mRNA表达数638±9,与未给药组11170±25比较明显下调;rasp21蛋白表达相对值为0.792,与未给药组4.459比较明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 D-柠檬烯对EJ细胞生长具有明显的细胞毒作用,并呈一定的剂量效应关系,在无毒剂量下可促使ras基因mRNA表达F调和ras p21蛋白表达下降.抑制ras p21活性可能是D-柠檬烯抗肿瘤作用的重要机制之一.     

癌相关蛋白bcl-2和P53在膀胱上皮异生和移行细胞癌的逆反性表达

应用免疫组化ＡＢＣ法研究了５４例膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）全切标本中ｂｃｌ２和Ｐ５３在正常、异生上皮和癌组织中的表达。结果显示：ｂｃｌ２表达在正常和轻度异生上皮仅限于基底层，在中度和重度异生则可见于中上层，２７例癌标本ｂｃｌ２阳性，并与癌分级显著相关；随着异生恶性度的增加，Ｐ５３阳性病例也逐渐增多（Ｐ＜０．０１），３８例癌组织Ｐ５３呈阳性，并与肿瘤分期分级和生存率明显相关；低分级或浅表型肿瘤的“ｂｃｌ２丢失”现象明显增多，“Ｐ５３逞现”现象则在高分级或浸润型肿瘤更显著；双抗体免疫组化显示，ｂｃｌ２和Ｐ５３通常表达于不同的异生或癌细胞；癌组织中ｂｃｌ２和Ｐ５３均阴性的患者其生存率显著高于两者均阳性者（Ｐ＜０．０５）。结果提示ｂｃｌ２在ＴＣＣ的发生发展过程中可能起重要作用     

尿脱落细胞CD44基因变异表达产物对膀胱癌诊断价值的研究

应用逆转录－聚合酶链反应和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对３０例尿液标本（１０例为膀胱癌，其中２例为复发性，２０例为非癌对照组）脱落细胞ＣＤ_（４４）基因含Ｖ_６外显于的变异表达产物进行检测，并与尿细胞学检查结果进行比较。结果显示：９０％（９／１０）的膀胱癌尿脱落细胞均检测到ＣＤ_（４４）基因含Ｖ_６外显子的拼接变异转录物的过量表达，而２０例非癌对照标本均未检测到这种变异表达产物。本技术诊断膀胱癌的敏感性为９０％（９／１０），较尿脱落细胞学检查的６０％（６／１０）明显提高，且无创伤，无痛苦。提示尿脱落细胞ＣＤ_（４４）基因变异表达产物检测是一种很有潜力的对膀胱癌早期诊断、监测复发和常规普查的简便实用的新方法。     

抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因的定向克隆及序列分析

利用ＰＣＲ技术，从一株分泌鼠抗人膀胱癌单抗杂交癌细胞中扩增出重链可变区基因，并经序列分析得以证实，为一步表达和制备抗人膀胱癌单链抗体及其免疫毒素提供了重要手段。     

rasP21的表达与腺性膀胱炎的生物学转归

为了探讨腺性膀胱炎的生物学转归，自１９８１～１９９４年，对４４例腺性膀胱炎患者进行了系统追踪治疗，并对其病变不同阶段的ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１进行检测。结果发现３１例Ｐ２１呈阳性表达，其中１４例分别在５～１７个月后恶变为膀胱癌（癌变率４５％）；而阴性病例无１例恶变。提示ｒａｓＰ２１高表达是腺性膀胱炎发生恶变的标记之一。     

野生型MTS1基因导入对人膀胱癌细胞系生长抑制作用的研究

通过逆转录病毒载体将外源野生型ＭＴＳ１基因导入该基因功能丧失的人膀胱癌细胞系Ｔ２４中，结果发现，转染ＭＴＳ１基因的膀胱癌细胞的生长速率减低，流式细胞仪检测显示Ｓ期指数及增殖指数明显降低，电镜观察显示超微结构出现生长抑制特征，接种裸鼠无致瘤性。     

人膀胱癌基因表达变化的基因芯片研究

目的 研究膀胱移行上皮细胞癌（TCC）和正常组织差异表达基因。方法 应用基因芯片技术对5例TCC癌组织和正常组织的mRNA进行检测。结果 在12800条目的基因中共发现差异表达基因384条。在癌组织中87条表达增加，297条表达降低；259条能在GeneBank中登录。结论 TCC的发生、发展涉及多基因改变，基因芯片技术可同时定量研究大量基因表达水平，是一种稳定、高效的方法。