转化生长因子和表皮生长因子受体在人膀胱癌中的表达

通过分子杂交方法，对膀胱癌产体肿瘤（人）进行ＴＧＦα，ＴＧＦβ和ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ表达的研究。结果显示：９例膀胱癌均有ＴＧＦαｍＲＮＡ不同程度的表达，１例癌０旁正常对照未见表达。５对样品（肿瘤和癌旁正常组织自身对照）ＴＧＦββｍＲＮＡ均有表达，其中４例肿瘤样品比自身癌旁正常组织对照量更高。９例肿瘤样品中４例ＥＧＦＲ高表达，均为恶性程度高的肿瘤。由此推测：ＴＧＦαｍＲＮＡ高表达是肿瘤发生发展的早期表     

P53和MDM2基因表达及与膀胱癌生物学行为的关系

目的：研究P53基因和MDM2基因表达及与膀胱癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测49例膀胱移行细胞癌中P53基因和MDM2基因的表达。结果：P53基因的阳性表达率为51．0％（25／49）,其表达率随膀胱癌的分期、分级升高而升高。MDM2基因的阳性表达率为32．7％（14／49）,其表达率随膀胱癌的分期、分级降低而升高。单有P53基因阳性表达的膀胱癌几乎均为浸润性和中、低分化癌;而当P53基因并MDM2基因表达时,膀胱癌的侵袭性和恶性度明显降低。2年复发组和未复发组的P53基因和MDM2基因的阳性表达率差异均无显著性意义。结论：联合检测P53和MDM2基因表达可更准确地解释和描述膀胱癌的生物学行为。这两种基因表达与膀胱癌预关系值得进一步研究。     

转化生长因子β1的表达与膀胱癌分期分级的关系

转化生长因子β１的表达与膀胱癌分期分级的关系徐勇乔宝民张祖诏马腾骧我们检测了３１例膀胱移行细胞癌组织转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）ｍＲＮＡ的表达，并就其与膀胱癌分期分级的关系作进一步探讨。材料和方法３１例膀胱癌病人，男性３０例，女性１例。年龄３６～...     

nm23基因表达与膀胱癌生物学行为的关系

为了揭示ｎｍ２３基因表达与膀胱癌生物学行为的关系，应用免疫组化方法检测了３９例膀胱癌组织ｎｍ２３表达。发现膀胱癌组织ｎｍ２３表达较正常有不同程度减弱，膀胱癌分化越差，肿瘤直径越大，ｎｍ２３表达缺失越严重。浸润性膀胱癌ｎｍ２３表达显著弱于表浅膀胱癌（Ｐ＜０．０５），但Ｔ２～３与分期大于Ｔ４膀胱癌ｎｍ２３表达无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。随访研究发现，Ｔ２～３患者ｎｍ２３表达阴性发生转移的机会显著高于ｎｍ２３表达阳性者（Ｐ＜０．０５）。结论：ｎｍ２３基因表达与膀胱癌分级、分期、大小密切相关，ｎｍ２３的检测有助于评价膀胱肿瘤切除患者肿瘤的转移潜力     

膀胱癌转化生长因子β1过表达的临床意义

目的　探讨膀胱移行细胞癌TGFβ1蛋白及mRNA异常表达的临床意义。 　方法　采用SP法检测 74例膀胱癌组织中TGFβ1蛋白的表达 ;QRT PCR方法检测 43例膀胱癌TGFβ1mRNA转录水平。　结果　膀胱癌TGFβ1蛋白表达阳性率为 89.2 % ,T2 ～T4 浸润性膀胱癌TGFβ1过表达率为 83.8% ,明显高于Ta～T1表浅性膀胱癌 (33.3% ) ,P <0 .0 5 ;复发转移组 30例中TGFβ1过表达 2 9例 ,而无瘤存活组 44例中过表达 30例 ,P <0 .0 0 5 ;膀胱癌组织TGFβ1mRNA含量明显高于正常膀胱组织。　结论　TGFβ1过表达与膀胱癌浸润生长方式和预后等有密切关系 ,可能成为评价膀胱癌预后的有效指标之一。     

野生型P53和C-Ha-ras基因在顺铂诱导膀胱癌细胞凋亡中的表达及意义

应用荧光原位杂交技术观察顺铂诱导膀胱癌细胞株ＢＩＵ８７体外细胞凋亡过程中野生型Ｐ５３和ＣＨａｒａｓ基因的表达，探讨抗癌药物诱导膀胱癌细胞凋亡过程中抗癌基因和癌基因的作用。结果显示：顺铂能够明显地诱导膀胱癌细胞凋亡，具有一定范围内的作用时间和药物浓度的依赖性。随凋亡细胞数上升，野生型Ｐ５３表达增强，而ＣＨａｒａｓ基因表达下降，提示膀胱癌细胞凋亡可能是顺铂的杀瘤效应途径之一。Ｐ５３和ＣＨａｒａｓ基因均参与了细胞凋亡的调控过程，野生型Ｐ５３基因可能是通过下调ＣＨａｒａｓ基因的表达而发挥其抑制细胞增殖活性，促进凋亡的发生。     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

P21WAF1／CIP1和P53基因表达及膀胱癌生物学行为的关系

目的：探讨膀胱癌P21WAF1／CIP1、P53基因的表达、相互间的调控及其与生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学ABC方法检测122例有随访结果的膀胱癌患者的P21WAF1／CIP1、P53基因表达,并采用双变量相关分析、Logistic回归分析和Kaplan-Meier法分析。结果：P53野生型肿瘤中P21WAF1／CIP1阳性表达率明显高于P53突变型肿瘤,P53突变型肿瘤中保持P21WAF1／CIP1阳性表达者具有与P53野生型肿瘤同样低的复发率和较长的生存期。结论：维持P21WAF1／CIP1的表达可清除P53突变蛋白的有害作用;根据P21WAF1／CIP1表达状况,结合临床分期可对膀胱癌的恶性程度及预后作出更准确的评估,对拟定治疗方案有 重要的指导意义。     

膀胱癌P53基因点突变的观察

为了解Ｐ５３基因突变与膀胱癌的关系，采用扩增突变阻抑系统方法的原理，设计４对分别针对Ｐ５３基因外显子５～８的４个进化保守区内１４６、２４８、２８０、２８５位点的突变引物，测定４６例膀胱癌标本。结果发现：４例标本出现Ｐ５３点突变，其中２４８位点Ｇ→Ａ突变１例、２８０位点Ｇ→Ｃ突变２例、２８５位点Ｇ→Ａ突变１例。４例均为表浅性Ｇ２癌，表明Ｐ５３基因突变在膀胱癌早期即可发生。因膀胱癌Ｐ５３基因的突变点散在，本研究检测范围内未发现突变热点。     

P53,Ras基因突变及HPV感染与膀胱癌的关系

应用分子生物学方法检测３２例膀胱移行上皮癌中Ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ、ＨＰＶ基因，发现有３４．４％的膀胱癌Ｐ５３基因突变，２１．９％膀胱癌Ｋ－ｒａｓ基因突变，６．３％膀胱癌ＨＰＶ阳性。说明膀胱移行上皮癌的发生与Ｐ５３、Ｒａｓ基因突变及ＨＰＶ感染有关。膀胱癌的发生是多种基因的变化通过多种途径引起的。     

P21WAF1/CIP1和P53基因表达与膀胱癌生物学行为的关系

目的 :探讨膀胱癌 P2 1WAF1 / CIP1 、P5 3基因的表达、相互间的调控及其与生物学行为的关系。方法 :采用免疫组织化学 ABC方法检测 12 2例有随访结果的膀胱癌患者的 P2 1WAF1 / CIP1 、P5 3基因表达 ,并采用双变量相关分析、L ogistic回归分析和 Kaplan- Meier法分析。结果 :P5 3野生型肿瘤中 P2 1WA F1 / CIP1 阳性表达率明显高于 P5 3突变型肿瘤 ;P5 3突变型肿瘤中保持 P2 1WAF1 / CIP1 阳性表达者具有与 P5 3野生型肿瘤同样低的复发率和较长的生存期。结论 :维持 P2 1WAF1 / CIP1 的表达可清除 P5 3突变蛋白的有害作用 ;根据 P2 1WAF1 /CIP1 表达状况 ,结合临床分期可对膀胱癌的恶性程度及预后作出更准确的评估 ,对拟定治疗方案有重要的指导意义     

野生型P53基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H—ras基因表达调控

通过逆转录病毒载体的将外源野生型Ｐ５３基因导入膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７和ＥＪ，使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低，丧失裸鼠致瘤性。细胞周期分析显示Ｇ０＋Ｇ１细胞比率明显增高，已证明，ＢＩＵ－８７和ＥＪ细胞都有ｒａｓ基因突变和表达扩增。     

内源性转化生长因子β1对膀胱癌细胞体外生长的影响

目的：研究内源性转化生长因子β1（TGFβ1）对膀胱癌细胞增殖的影响及机制。方法：构建携TGFβ1反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体pRevTβ-AS，转染膀胱癌EJ细胞株，观察抑制内源性TGFβ1表达对EJ细胞体外增殖的影响；流式细胞仪分析转染后细胞周期时相分布的改变。结果：将TGFβ1反义RNA导入EJ细胞并有效表达；抑制TGFβ1表达可以降低靶细胞的生长速度和克隆形成率，使细胞增殖指数下降12％；反义RNA转染的EJ细胞G0和G1期细胞占65．7％，高于对照组细胞，S期细胞占20．5％，低于对照组细胞。结论：内源性TGFβ1通过诱导膀胱癌细胞G1→S期转换，促进肿瘤细胞体外增殖。     

c—myc癌基因产物P62的表达与膀胱癌生物学行为关系

应用胶体金免疫电镜技术，检测９例膀胱癌标本中Ｐ６２的定位，发现Ｐ６２定位于细胞核。采用ＡＢＣ法免疫组化技术，检测１３例正常膀胱组织、１４例膀胱慢性炎性增生组织和５１例膀胱移行细胞癌标本中Ｐ６２的表达，并用显微分光光度计测得每例膀胱癌标本Ｐ６２的表达强度，与临床资料对比，结果发现正常膀胱组织和膀胱慢性炎性增生组织标本Ｐ６２染色阴性５１例膀胱移支细胞癌标本中３４例Ｐ６２染色阳性Ｐ６２表达的强度与膀胱癌     

转化生长因子β1及β3在前列腺癌中的表达及其意义

目的研究前列腺癌（ＰＣａ）组织中转化生长因子（ＴＧＦ）β１与β３的表达及与ＰＣａ的病理分级、临床分期和远处转移的关系。方法采用免疫组织化学（ＩＨＣ）方法对４６例ＰＣａ标本进行染色。结果３９例表现广泛的肿瘤细胞外基质（ＥＣＭ）和胞浆ＴＧＦβ１染色,余７例只ＥＣＭＴＧＦβ１染色。ＴＧＦβ１ＥＣＭ／胞浆染色指数与ＰＣａＧｌｅａｓｏｎ评分、临床分期及有远处转移的ＰＣａ（Ｄ２期）呈正相关（ｒ分别为０．４２／０．３１,０．８１／０．６４,０．６８／０．４４,Ｐ均＜０．０５）。４６例ＰＣａ标本中,４５例有明显的肿瘤细胞胞浆ＴＧＦβ３染色,２５例示较弱的ＥＣＭＴＧＦβ３染色;ＴＧＦβ３染色指数与ＰＣａ临床分期、Ｇｌｅａｓｏｎ评分及远处转移无显著性相关（Ｐ均＞０．０５）。结论ＴＧＦβ１在ＰＣａ中有高表达,可能通过自分泌和旁分泌机制对ＰＣａ生长起促进而非抑制的作用,并可作为监测ＰＣａ病程进展的瘤标。ＴＧＦβ３在ＰＣａ中虽有表达,但其作用尚待阐明     

抑癌基因P53及其蛋白产物表达与膀胱癌发生及病理关系

以光敏生物素－金标链亲和素核酸原位杂交及免疫组化方法检测膀胱癌病理标本中Ｐ５３基因片段及其蛋白表达。１３例原位杂交阳性膀胱癌中，Ｐ５３蛋白表达阳性率５３．９％，提示约半数膀胱癌的发生可能与Ｐ５３基因突变有关；Ｐ５３蛋白表达与病理分级、临床分期无明显关系。     

c－myc癌基因产物P62的表达与膀胱癌生物学行为关系

应用胶体金免疫电镜技术，检测９例膀胱癌标本中Ｐ６２的定位，发现Ｐ６２定位于细胞核。采用ＡＢＣ法免疫组化技术，检测１３例正常膀胱组织、１４例膀胱慢性炎性增生组织和５１例膀胱移行细胞癌标本中Ｐ６２的表达，并用显微分光光度计测得每例膀胱癌标本Ｐ６２的表达强度，与临床资料对比，结果发现正常膀胱组织和膀胱慢性炎性增生组织标本Ｐ６２染色阴性，５１例膀胱移行细胞癌标本中３４例Ｐ６２染色阳性，Ｐ６２表达的强度与膀胱癌的病理分级、临床分期呈正相关，与预后呈负相关。     

TGF-β1和TGF-α在膀胱癌侵袭和转移中的作用

目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β1）和转化生长因子－α（TGF-α）对膀胱癌细胞株（EJ）生长的影响以及促进膀胱癌侵袭和转移的可能途径。方法 采用MTT、Western Blot和RT－PCR方法,观察TGF－β1和TGF－α对DJ细胞株生长以及在mRNA和蛋白水平上对金属基质蛋白酶（MMPs)和组织特异性金属蛋白酶抑制剂－2（TIMP－2）表达的影响。结果 （1）TGF-β1和TGF－α对EJ细胞生长存在抑制趋势,但差别无显著性意义。（2）TGF－β1和TGF－α作用于EJ细胞48h时 ,MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP mRNA表达降低;TGF－β1组MMP-9 mRNA表达增加,而对照组和TGF－α组无MP－9mRNA表达。（3）当TGF－β1浓度为0．1、1．0ng/ml时,增加细胞培养上清液中MMP－2蛋白含量对TIMP－2蛋白水平无影响。当浓度为5．0、10．0ng/ml时对MMP－2无影响而降低TIMP－2表达;TGF－α在浓度为1.0、5.0、10.0ng/ml时,对MMP－2蛋白表达无影响而降低TIMP－2表达;在100．0ng/ml时增加MMP－2蛋白表达而对TIMP－2表达无影响;无论在对照组和实验组均未检测到MMP－9。结论 TGF-β1、TGF-α不能抑制EJ细胞生长,参与肿瘤侵袭和转移作用可能与调节MMPs、TIMP－2表达途径有关。     

rasP21和P53在膀胱癌表达的临床意义

采用免疫组化方法（ＬＳＡＢ法）对５８例膀胱癌和６例非癌膀胱粘膜标本进行ｒａｓＰ２１及ｐ５３蛋白产物检测。结果：５８例膀胱癌标本中３７例Ｐ２１检测阳性（６３．８％），３３例Ｐ５３检测阳性（５６．９％），对照组６例膀胱粘膜均未见阳性着色。Ｐ２１阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为２８．６％、４６．７％和７７．８％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为４５．０％和７３．７％。Ｐ５３阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为１４．３％、４０．０％和７２．２％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为３０．０％和７１．１％，显示Ｐ２１和Ｐ５３表达阳性率均随着膀胱癌病理分级、临床分期上升而升高，表达强度也随之增强。Ｐ２１和Ｐ５３阳性者的复发率和死亡率均明显高于阴性表达者。认为Ｐ２１和Ｐ５３可作为膀胱癌的生物学瘤标。