应用蛋白质指纹图谱技术对胰腺癌标志物的筛选分析研究

目的：应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（surfaceenhancedlaserdesorption／ionization—timeofflight—massspectrometry，SELDI—TOF—MS）筛选胰腺癌患者血清蛋白标志物。方法：应用强阴离子交换芯片（stronganionicexchangechromatography，SAX），选择最佳结合、洗脱缓冲液对18例胰腺癌患者及18例正常人血清标本进行蛋白质质谱分析。结果：应用SAX，经SELDI—TOF—MS分析，在胰腺癌患者血清筛选出与正常人血清有统计学意义差异蛋白8个（P〈0.05），其中3个为高表达，相对分子量为4136．60、4465．92、4359．53Da，5个为低表达，相对分子量分别为15856．8、7564．52、15116．1、2042．78、2016．44Da。在18例胰腺癌患者中包括11例导管腺癌和7例其他类型癌，两者之间有统计学意义的差异蛋白1个，相对分子量4136．60Da。应用ROC曲线分析，确定6个差异蛋白对胰腺癌有中等诊断价值，敏感度为83％～94％，特异度为56％～67％。结论：经SELDI—TOF—MS技术在胰腺癌患者血清中筛选出灵敏度和特异度较好的差异表达蛋白，有助于胰腺癌的诊断。     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肺腺癌患者血清诊断标志物

目的 探讨肺腺癌患者及正常人血清中蛋白质质谱的不同,筛选出肺腺癌血清诊断标志物.方法 用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,检测24例肺腺癌和10例正常人血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质.结果 本实验共检测到86个有效的蛋白质波峰,其中m/z位于分子质量2000～10 000的波峰有78个.筛选出m/z分子质量为8129.55,2022.18,3271.91,3933.44,3504.49,3811.71的6个血清肿瘤标志物.结论 SELDI-TOF-MS技术是寻找肺腺癌血清诊断标志物的有效工具.利用蛋白组学和生物信息学及相关技术,将有利于建立新的疾病诊断模式--蛋白质指纹图谱.     

应用ＳＥＬＤＩ-ＴＯＦ-ＭＳ建立淋巴瘤诊断模型的研究

目的　探讨应用蛋白质组学技术研究淋巴瘤血清蛋白标志物并建立淋巴瘤人工神经网络诊断模型。方法　利用表面激光解析电离飞行时间质谱技术（ＳＥＬＤＩ-ＴＯＦ-ＭＳ）及弱阳离子交换表面（ＣＭ１０）蛋白芯片检测４７例初诊淋巴瘤患者和２１例正常对照血清蛋白质谱,采用ＣｉｐｈｅｒｇｅｎＰｒｏｔｅｉｎｃｈｉｐ软件对蛋白质谱进行差异蛋白分析,再优选４种蛋白质建立淋巴瘤诊断模型。结果　（１）淋巴瘤与正常对照的血清蛋白质谱之间有７７个差异表达的蛋白质荷比峰（Ｐ＜０.０５）,其中３５个蛋白有明显差异（Ｐ＜０.００１）,有８个蛋白质峰在淋巴瘤血清中高表达,２７个蛋白质峰低表达。（２）霍奇金淋巴瘤（ＨＬ）与非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患者的血清蛋白质指纹图谱之间有２个差异表达的蛋白质荷比峰（Ｐ＜０.０５）,均在ＮＨＬ中高表达。（３）淋巴瘤诊断模型的灵敏度为８２.９８％,特异度９０.４８％,诊断指数（ＤＩ）１７３.４６％,Ｙｏｕｄｅｎ指数７３.４６％,阳性预测值９５.１２％,阴性预测值７０.３７％,ＲＯＣ曲线下面积ＡＺ为０.９４１。结论　淋巴瘤患者和正常对照血清之间存在特征性差异蛋白,可能对淋巴瘤的诊断和鉴别有重要意义。     

康莱特注射液联合化疗对晚期非小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物的影响

目的 探讨康莱特注射液联合化疗对晚期非小细胞肺癌患者血清肿瘤标志物的影响。方法 将200例晚期非小细胞肺癌患者按照治疗方式的不同分为单独化疗组和联合用药组,每组100例,单独化疗组采用常规化疗方案,联合用药组加用康莱特注射液治疗,两组均治疗2个疗程。比较 两组患者的治疗总有效率、免疫功能指标、血清肿瘤标志物、生活质量以及不良反应发生率。结果联合用药组患者的总有效率明显高于单独化疗组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。治疗后,联合用药组患者CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺及生命质量测定量表各维度评分均明显高于单独化疗组,血清癌胚抗原、糖类抗原125、糖类抗原19-9水平均明显低于单独化疗组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。联合用药组患者不良反应总发生率低于单独化疗组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论 康莱特注射液联合化疗可有效改善晚期非小细胞肺癌患者的免疫功能,降低血清肿瘤标志物水平和不良反应发生率,提高生活质量,疗效确切。     

121例非小细胞肺癌患者新辅助化疗前后肿瘤标志物及免疫指标的研究

背景与目的:肺癌的发病率和死亡率正逐年增加,新辅助化疗已成为治疗局部晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的重要手段,本研究旨在比较NSCLC患者新辅助化疗前后肿瘤标志物及免疫指标的变化情况,评价其疗效及相关性。方法:研究对象为广西医科大学附属肿瘤医院胸外科1995年—2010年间收治的121例NSCLC患者,分为新辅助化疗组(Ⅰ组)58例和对照组(Ⅱ组)63例。Ⅰ组确诊后先给予2个疗程的全身化疗,3周后手术治疗,化疗方案为GP或PP;Ⅱ组确诊后直接手术。结果:Ⅰ组在术中失血量、术后24 h引流量及术后心率失常发生率均高于Ⅱ组(P<0.05);其余术后并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。术后Ⅰ组CD4+、CD8+、CD16CD56细胞水平低于Ⅱ组(P<0.05),其余各免疫指标差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅰ组术后肿瘤标志物低于Ⅱ组(P<0.05)。结论:新辅助化疗在一定程度上增加了肺癌手术的难度和术后风险,但能明显降低NSCLC患者术后血清肿瘤标志物水平。     

肺癌血清蛋白标志物研究及进展

肺癌是世界范围内最常见也是导致死亡人数最多的恶性肿瘤，临床上肺癌分为小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）和非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）。其中非小细胞肺癌约占肺癌总数的80％。目前肺癌总的5年生存率只有15％左右，但早期诊断的肺癌患者其5年生存率可达85％。因此，早期筛查是肺癌防治的关键。因无早期筛查方法，肺癌患者在就诊时大多数已处于晚期，80％病例已丧失手术机会。血清蛋白标志物检测（如ELISA）具有高效、高灵敏性、性价比高、方便简捷、快速、标本易获取及创伤小的特点，因此检测、筛选及鉴定血清蛋白标志物一直是肺癌早期诊断研究的重点。     

蛋白质组学及其研究技术在肺癌分子生物标志物研究中的应用

肺癌是全球发病率和死亡率较高的恶性肿瘤。细胞从正常状态转变为肿瘤的过程中，细胞内蛋白质表达谱必然会发生一系列变化，肿瘤分子标记物就是细胞在非正常状态下产生的分子．以高通量结合生物信息学为特点的蛋白质组学分析技术可以从细胞整体水平上检测到这种变化近年来，为了降低肺癌的死亡率并提高其治疗效果，研究人员利用这一新的手段如利用激光捕获显微切割技术和双相凝胶电泳结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和表面增强激光解析电离色行时间质谱（SELDI—TOF MS）寻找有效的肺癌标记物。本文对蛋白质组学技术在肺癌生物标志物研究中的应用作了综述。     

肿瘤标志物的跟踪检测在肺癌化疗中的应用价值

目的测定肺癌中腺癌、鳞癌及小细胞肺癌患者化疗前后癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的变化, 评价血清中3项肿瘤标志物水平在肺癌不同病理类型及治疗前后的表达意义。方法 用电化学发光法分别测定198例肺癌, 其中腺癌86例、鳞癌56例以及56例小细胞未分化肺癌患者化疗前后血清CEA、CYFRA21-1、NSE的水平, 再分别作对比分析。结果 3项肿瘤标志物在肺癌不同病理类型中CEA、CYFRA21-1、NSE总体比较均有差异, 其中腺癌CEA水平均高于其他类型(P＜0.01), 鳞癌CYFRA21-1水平高于其他类型(P＜0.01), 小细胞肺癌NSE水平高于其他类型(P＜0.01);治疗有效的肺癌患者治疗后3项标志物水平均明显下降, 而治疗无效者治疗前后均无明显变化或升高。结论 3项肿瘤标志物水平分别在腺癌、鳞癌及小细胞肺癌检测中明显升高, 在治疗有效组化疗后显著下降, 在治疗无效组无明显变化, 提示三种指标的测定有助于肺癌的病理分型, 预后评估, 疗效判定, 为临床医师选择和改进治疗方案提供依据。     

非小细胞肺癌吉西他滨方案化疗相关耐药标志物RRM1的研究进展

化疗是治疗非小细胞肺癌的主要手段,但是由于耐药的存在,使化疗疗效大大降低.研究表明一些基因表达水平是影响某些化疗药物疗效的重要因素.现对非小细胞肺癌常用化疗药物吉西他滨相关耐药标志物RRM1近年来国内外的研究进展做一综述.     

应用SELDI蛋白质芯片技术筛选肺腺癌血清标志物的研究

目的 通过SELDI蛋白质芯片技术筛选肺腺癌特异血清标志物。方法 采用表面增强激光解析离子化一飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS），选用弱阳离子加疏水膜芯片对15例肺腺癌患者，30例健康人血清进行检测，筛选在肺腺癌患者血清中差异表达的蛋白质。结果 在质荷比0—20000范围内，共检测到180个蛋白峰，建立了由8个差异表达蛋白质组成的肺腺癌诊断模型。这8个蛋白质中有6个在肺腺癌中表达上调，2个表达下调。软件分析结果显示在预测组中诊断肺腺癌的敏感性为93．33％（14／15）、特异性为100．00％（30／30）；对检测组进行双盲检测，敏感性为73．33％（11／15）、特异性为86．67％（26／30）。结论 由8个差异表达蛋白及其特定组合构成的诊断模型可以区分肺腺癌和健康人。SELDI蛋白质芯片技术能直接筛选出肺腺癌患者血清中相对特异的潜在标志物，具有较好的临床应用价值。     

SELDI-TOF-MS技术在非小细胞肺癌中的应用

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术是一种使用特殊的增强表面直接捕获待测样本中的蛋白质分子,然后经激光解析离子化．飞行时间质谱测定被捕获的蛋白质的相对分子量、丰度的新兴技术。目前该项技术已经成功应用于前列腺癌的诊断、子宫良恶性肿瘤的鉴别等方面。SELDI-TOF-MS技术通过寻找肿瘤病人相关的特异性蛋白用于对非小细胞肺癌的早期诊断,指导治疗及预测预后等方面具有很好的应用前景。     

蛋白芯片表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术在肿瘤早期诊断中的

 蛋白质芯片表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱（surface enhanced laser desorp-tion/ionization time of flight mass spectrometry, SELDI-TOF-MS）技术是近年发展起来的蛋白质组学研究的新技术，在各种肿瘤的早期诊断和研究中，具有广阔的发展前景及临床意义。就其技术原理、组成、在肿瘤早期诊断中的运用及发展前景作一综述。     

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术筛选肺腺癌血清肿瘤标记物

背景与目的:肺癌是目前世界上最常见的恶性肿瘤,由于大多数患者确诊时疾病已属进展期,总体5年生存率较低,所以改善预后的关键在于早期诊断。表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELD I-TOF-MS)是一种检测肿瘤标志物的新兴技术。本研究使用该技术筛选了肺腺癌患者血清相对特异标记物。方法:肺腺癌患者71例,均经手术病理证实;正常人71名,按照性别,年龄,吸烟史与71例肺腺癌患者配对。用WCX2芯片检测各血清标本,筛选肺腺癌相对特异性蛋白质峰。结果:与正常人比较发现肺腺癌显著高表达的潜在标记物5个,相对分子量分别为4047.79±1.60、4203.99±1.91、4959.81±2.13、5329.30±2.55和7760.12±4.11,以峰值比1.5为界值时,其诊断肺腺癌的敏感性分别为90.14%、78.87%、50.70%、57.75%、73.24%,特异性分别为97.18%、92.96%、70.42%、76.06%、94.37%。结论:SELD I-TOF-MS蛋白质质谱技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,不仅能直接筛选出肺腺癌患者血清中相对特异的潜在标记物,而且可能具有较好的临床应用前景。     

SELDI蛋白芯片技术在肿瘤早期诊断中研究进展

SELDI蛋白芯片技术全称为表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF—MS）是近年用来研究蛋白质组学的一项新的技术平台，具有高通量、高效率、高灵敏度等特点，可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成，在基础医学研究、临床疾病诊断以及药物研发方面显示出广阔的应用前景及临床意义。文章就其技术组成、原理、特点和在肿瘤早期诊断中的应用及发展前景作一综述。     

Application of SELDI-TOF-MS to identify serum biomarkers for renal cell carcinoma

Purpose

Early diagnosis is critical for improving the outcome of patients with renal cell carcinoma (RCC). In this study, we applied a proteomic approach to identify serum biomarkers associated with different stages of renal tumor development.

Materials and methods

The protein expression profiles in patient serum samples were analyzed using surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectroscopy (SELDI-TOF-MS). The subjects included 65 patients with renal cell carcinomas, 34 with benign renal tumors, and 69 normal controls. A diagnostic decision tree was developed and validated based on the differentially expressed proteins between the serum of patients with small (?3 cm) RCC tumors and normal controls.

Results

The numbers of proteins differentially expressed in the serum samples were 29 between the patients with RCC and normal controls, 18 between patients with RCC and benign renal tumors, and 35 between patients with small RCC tumors and normal controls, respectively. The diagnostic decision tree generated from the differentially expressed proteins between patients with small RCC tumors and normal controls proved efficient in the early diagnosis of renal cell carcinoma, with a sensitivity of 81.8% and specificity of 100%. The eukaryotic initiation factor 2B delta subunit (eIF2B-delta) was identified as the most highly up-regulated protein in the serum of patients with RCC.

Conclusions

SELDI-TOF-MS is a simple, sensitive and highly reproducible technique that can be used to identify serum biomarkers. The serum biomarkers identified by this study may facilitate early diagnosis of RCC and offer new targets for mechanistic understanding and clinical therapy of this disease.     

WCX2蛋白芯片筛选食管鳞癌血清标志蛋白的研究

背景与目的:蛋白质组学研究有助于筛选食管上皮癌变相关的分子变化。本研究通过比较食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者和正常对照血清蛋白表达谱的差异,来筛选食管鳞癌相关血清蛋白标志物,为筛选和建立食管鳞癌早期诊断的血清学指标提供依据。方法:应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,采用弱阳离子交换芯片(WCX2)首先对训练组44对食管鳞癌患者和性别年龄匹配的正常对照血清蛋白表达谱的差异进行了分析,建立决策树分类模型后,对测试组进行盲法验证。结果:在质荷比(M/Z)2000～20000范围内,共检测到84个有效蛋白峰,其中28个峰差异有显著性(P<0.05)。自动选用M/Z为2545、3371、3746、5009、5021和15886的6个差异蛋白峰,建立食管鳞癌决策树分类模型,其灵敏度为93.18%(41/44),特异度为97.73%(43/44)。对测试组进行双盲检测,结果显示灵敏度和特异度分别为77.27%(34/44)和75.00%(33/44)。结论:应用SELDI-TOF-MS技术可以筛选出食管鳞癌相关的血清蛋白标志,建立的决策树模型可能对食管鳞癌的诊断具有重要的临床价值。     

血清蛋白质指纹图谱在胰腺癌诊断预后和疗效评估中的应用

目的 建立胰腺癌血清学诊断模型,探讨评估胰腺癌分期和治疗疗效的生物学标志物.方法 采用强阴离子交换(SAX2)芯片和表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)技术,测定58例胰腺癌患者和51例正常对照者的血清蛋白质指纹图谱;应用Biomarker Wizard统计软件以及决策树算法、Logistic回归和ROC曲线,建立决策树和二分类回归诊断模型.结果 在质荷比(M/Z)值为2000～30 000范围内,建立10个决策树诊断模型,其预测胰腺癌的正确率为92.9%(13/14),诊断胰腺癌的敏感性为83.3%,特异性为100%.应用Logistic回归联合多种差异蛋白峰诊断胰腺癌的曲线下面积(AUC)为0.976±0.011(P<0.001),敏感性为77.6%～91.4%,特异性为92.2%～100%.联合6个差异蛋白峰诊断胰腺癌Ⅰ与Ⅱ期、Ⅱ与Ⅲ期以及Ⅲ与Ⅳ期的AUC值分别为0.897±0.054、0.978±0.021和0.792±0.107(P<0.05).胰腺癌组中高表达的差异蛋白峰(M/Z 4016)在手术前后有下调趋势(P<0.05).结论 应用SELDI-TOF-MS技术进行胰腺癌血清蛋白质指纹图谱分析,采用统计学方法建立胰腺癌决策树和二分类回归诊断模型,对胰腺癌的诊断和鉴别诊断有一定的价值;筛选出的差异蛋白峰对胰腺癌的预后和疗效评估有一定的应用价值.     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肾细胞癌患者血清标志物

背景与目的:表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术有助于筛选肾细胞癌相关的分子变化.本研究探讨人肾细胞癌患者血清和正常人血清之间蛋白质表达的差异,筛选特异性生物标志物.方法:采用SELDI-TOF-MS技术,选用WCX2蛋白质芯片对28例肾透明细胞癌及28例正常对照组血清标本进行检测以筛选肾癌患者血清中差异表达蛋白质.结果:在分子量1.5×103～30×103(1.5～30 kD)范围内,检测出170个差异蛋白峰.肾透明细胞癌差异表达明显的蛋白峰7个(P＜0.01),其中低表达的3个,相对分子量分别为4.098×103、5.917×103、6.643X 103,高表达的4个,相对分子质量为5.572×103、6.344×103、6.529×103、8.518×103.结论:人肾肿瘤血清中特异性蛋白质的发现,对肿瘤临床特异性生物标志物的检测及进一步研究肿瘤发生机制等具有重要意义.     

应用SELDI-TOF-MS技术于肺癌中医辩证的初步研究

目的 探讨不同证型肺癌患者血清中蛋白质质谱的差异.方法 用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,分别检测12例气阴两虚肺癌和12例气滞血淤肺癌的血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质.结果 共检测到113个有效的蛋白质波蜂,其中m/z位于2 000-10 000的波峰有104个,筛选出m/z为3 952.05、3 772.35、4 170.07、3 679.34、3 156.38、4 293.14的6个血清蛋白质.结论 利用SELDI-TOF-MS技术将有可能建立新的中医肺癌辩证模式--蛋白质指纹图谱.     

血清肿瘤异常蛋白与肺腺癌患者化疗效果的关系

目的 探讨血清肿瘤异常蛋白(TAP)与肺腺癌患者化疗效果的关系.方法 选取100例行术后辅助治疗或姑息治疗的肺腺癌患者(肺腺癌组)和50例健康体检者(对照组),比较治疗前两组的TAP水平以及不同病理分期肺腺癌患者的TAP水平.根据化疗效果将胰腺癌患者进行分组,分析不同组别患者治疗前后TAP水平的差异.结果 肺腺癌组的TAP水平和阳性率明显高于对照组(P﹤0.01);不同病理分期肺腺癌患者的TAP水平比较,差异有统计学意义(P﹤0.05),且病理分期越晚,TAP水平越高;完全缓解、部分缓解组患者治疗后TAP水平较本组治疗前下降,进展组患者治疗后TAP水平较本组治疗前升高,差异均有统计学意义(P﹤0.05);且患者的疗效越差,TAP水平越高.结论 肺腺癌患者的血清TAP水平明显升高,病情越重、预后越差的患者TAP水平越高,TAP可作为肺腺癌预后预测的重要指标.