BIRC6在肝细胞癌中的表达及其对肝癌细胞凋亡的影响

目的：检测baculoviral IAP repeat-containing 6（BIRC6）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织及癌旁组织中的表达情况并探讨其在HCC中的功能。方法：收集40例HCC及对应癌旁组织,运用qRT-PCR及免疫组化染色技术检测BIRC6在HCC及对应癌旁组织中的表达情况;qRT-PCR技术检测人正常肝细胞株LO2、HCC细胞株HepG2和SMMC-7721中BIRC6 mRNA表达;应用BIRC6 siRNA转染人HCC细胞SMMC-7721,通过MTT和流式细胞仪检测转染后细胞活力和细胞凋亡变化。结果：BIRC6在HCC组织中的表达高于对应的癌旁组织（P=0.004）,HCC组织中BIRC6蛋白高表达与较大肿瘤体积（＞5 cm）和高TNM分期相关（P=0.029;P=0.002）;正常肝细胞株LO2中BIRC6 mRNA表达水平明显低于HCC细胞株HepG2和SMMC-7721（P=0.000）,下调BIRC6表达导致SMMC-7721细胞活力降低和细胞凋亡增加（P=0.000）。结论：BIRC6高表达与HCC的恶性临床病理特征相关,BIRC6在HCC中可能作为凋亡抑制因子发挥功能。     

β-catenin在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）B—catenin的表达与HCC临床病理特征的关系。方法应用Envsion法检测333例HCC,168例癌旁肝组织及89例正常肝组织的β-catenin表达;RT—PCR检测37例HCC及癌旁组织,肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞株L02的β-cateninmRNA表达。结果β-catenin在HCC胞质、胞核的阳性表达率为79％／37％;在癌旁和正常肝组织中的表达率为72％／0％、70％／0％。差异均有统计学意义（P均〈0．05）。且分化好的癌细胞表达低,分化差的细胞表达高。同时,HCC和HepG2的β-cateninmRNA表达高于癌旁组织及LO2的表达。结论肝细胞癌的β-catenin过表达提示其在癌的发生过程中可能起着促癌的作用。     

肝癌组织GP73过表达及血GP73异常对肝癌的诊断价值

目的：分析肝癌（HCC）组织及外周血高尔基体糖蛋白-73（GP73）表达对肝癌的诊断价值。方法：以Western Blot法检测肝癌组织GP73表达;收集肝病患者外周血标本,以酶联免疫吸附法检测GP73水平。结果：肝癌、癌旁组织GP73均有表达,但癌组织GP73蛋白条带灰度均值为480.7,明显高于癌旁（209.0,t=6.453,P〈0.001）。外周血GP73水平,正常对照组（28.83±21.00）ng/mL,慢性肝炎组（49.86±40.46）ng/mL,肝硬化组（62.30±56.30）ng/mL和肝癌组（87.25±78.41）ng/mL,肝癌组明显高于对照组和良性肝病各组（P〈0.05）;肝癌患者血GP73表达与HBV感染、伴肝外转移密切相关（P〈0.05）,与血AFP呈显著正相关（r=0.961,P〈0.05）;经临床综合评价,受试者工作特征曲线下面积AFP为0.877,GP73为0.931,且两者对肝癌具有互补诊断价值。结论：GP73过表达与肝癌发展密切相关,它的定量检测有助于肝癌的诊断与鉴别。     

免疫组织化学二步法检测原发性肝癌组织GP 73蛋白表达的结果分析

目的：分析原发性肝癌组织GP73蛋白表达的结果。方法选取手术切除原发性肝癌组织的患者35例,采用免疫组织化学二步法检测31例原发性肝癌组织、28例癌旁组织、10例肝硬化肝组织和11例正常肝组织的GP 73蛋白的表达。结果 GP 73蛋白表达主要位于肝癌组织、癌旁组织、肝硬化肝组织的细胞中,其细胞质会出现黄色、棕黄色、黄褐色的着色颗粒。在肝癌组织中,GP 73阳性率为93.5%(29/31);在癌旁组织中,GP 73阳性率为92.9%(26/28);在肝硬化肝组织中,GP 73阳性率为40.0%(4/10);在正常肝组织中,GP 73阳性率为27.2%(3/11)。在GP 73蛋白阳性表达率方面,肝硬化肝组织与正常肝组织差异无统计学意义;肝癌组织相比与癌旁组织差异无统计学意义;与肝硬化肝组织和正常肝组织相比,肝癌组织和癌旁组织的GP 73蛋白的阳性表达率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GP 73蛋白是肝癌组织病理标志物,可以作为肝癌诊断的标记蛋白。     

肝细胞癌中ZHX2 mRNA的表达及其临床意义的研究

[目的探讨转录抑制因子ZHX2（zinc-fingers and homeoboxes2,ZHX2）在肝细胞癌（hepatoceUu1ar carcinoma,HCC）中的表达及其与转移的关系。方法通过RT-PCR方法,检测35例HCC癌组织及相应癌旁组织和8例正常肝组织中ZHX2 mRNA的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果HCC癌组织中ZHX2 mRNA的表达率明显低于癌旁组织与正常肝组织（P〈0．05）。术中发现伴随转移的HCC癌组织中ZHX2 mRNA的阳性表达率明显低于无转移的HCC（P〈0．05）。ZHX2 mRNA的表达与血清甲胎蛋白（alphafetoprotein,AFP）水平呈负相关（P〈0．05）,而与年龄、性别、HBsAg感染、肿瘤直径、分化程度、是否伴随肝硬化无明显关系。结论ZHX2低表达与HCC转移密切相关,并与AFP的高表达有关。     

EZH2在肝癌中的表达及其临床意义

目的：分析果蝇zeste基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2, EZH2） 在原发性肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化非生物素两步法检测HCC42例、癌旁组织42例、正常肝组织19例EZH2蛋白的表达。结果：HCC、癌旁组织和正常肝组织的EZH2蛋白阳性表达率分别是57．71％（24／42）、16．67％（7／42）、10％（1／10）,三者之间的差异有统计学意义（χ^2=8．13,P〈0．01）,且EZH2蛋自在HCC中的表达明显高于癌旁组织以及正常肝组织中的表达（χ^2=14．78,χ^2=7．19,P〈0．01）。EZH2表达与临床病理因素无关（P〉0．05）。结论：EZH2异常表达与HCC的发生密切相关。     

肝癌组织中FN和PTEN的表达及其临床意义

目的：探讨抑癌基因纤黏连蛋白（fibronectin,FN）、张力蛋白同源基因蛋白（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN）在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其临床意义。方法：收集215例HCC、癌旁组织和19例正常肝组织,用RT-PCR、Western blot、免疫组化SP法检测FN、PTEN mRNA和蛋白表达,分析FN和PTEN表达与HCC临床病理特征的关系。结果：肝癌组织中FN mRNA和蛋白表达均明显高于癌旁组织及正常肝组织（F=142.334,P=0.000）;而PTEN低于癌旁组织及正常肝组织,且在癌旁组织中的表达亦明显低于正常肝组织（F=80.861,P=0.000）。FN表达阳性患者组较阴性患者组生存时间短;而PTEN表达阳性患者较阴性患者生存时间长,且在1年以后两者生存期有统计学意义（P<0.05）。结论：HCC癌组织中 FN、PTEN在肝癌组织中存在异常表达,两者异常表达可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用。     

肝细胞癌中RhoC mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨RhoC mRNA在人肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）组织中的表达及其与HCC复发转移的关系。方法：用荧光定量PCR技术检测82例HCC及其癌旁肝组织,16例正常肝组织中RhoC mRNA的表达情况。分析mRNA表达量与临床资料之间的关系。结果：RhoC mRNA在HCC、癌旁组织和正常组织中均可检测到表达,表达量分别为1.18±0.77、0.67±0.29和0.38±0.18,组间表达量比较差异有统计学意义（P〈0.05）,RhoC mRNA在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁肝组织中的表达水平,两者差异有统计学意义（P〈0.05）;RhoC mRNA在HCC中的表达量与结节数目多,门静脉癌栓,术后复发转移相关（P〈0.05）,RhoC mRNA高表达的患者术后5年生存率明显低于RhoCmRNA低表达的患者（P〈0.05）。结论：RhoC mRNA的过表达可能与HCC的发生及复发转移有关,有可能做为HCC患者术后复发转移的预测指标。     

miR-204在原发性肝细胞癌中的表达及评价

目的探讨mi R-204在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法采用对照研究,收集2010年5月-2014年5月深圳市宝安区人民医院HCC患者的HCC肝组织36例,切除癌组织后离切缘3~5 cm位置处肝组织作为癌旁组织36例,正常肝组织15例。采用免疫组化法检测mi R-204、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、甲胎蛋白(AFP)、高尔基蛋白73(GP73)、E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)、血管内皮生长因子-D(VEGF-D)的表达情况,收集患者临床资料并进行3年随访,分析mi R-204表达情况与患者病理特征、3年生存率的关系,对比检测结果,并使用ROC曲线对检测结果进行评价。结果 36例HCC患者肝癌组织中mi R-204阳性表达12例,阳性表达率33.33%,癌旁组织中mi R-204阳性表达30例,阳性表达率83.33%,正常肝脏组织中mi R-204阳性表达14例,阳性表达率93.33%,肝癌组织mi R-204阳性表达率明显低于癌旁组织及正常组织(P0.05);肝癌组织的Bcl-2、AFP、GP73、ZEB2、VEGF-D表达阳性率明显高于癌旁组织及正常组织(P0.05)。HCC患者中的mi R-204表达与Bcl-2、AFP、GP73、ZEB2、VEGF-D呈负相关(r分别为-0.853、-0.769、-0.824、-0.617、-0.732,P=0.000),与HCC病理分期呈负相关(r=-0.794,P=0.000),与HCC患者3年生存率呈正相关(r=0.608,P=0.000)。mi R-204检测的ROC曲线下面积分别为0.945,大于0.6(P0.05)。结论 HCC患者mi R-204表达降低,对其进行监测,能为其诊断及病情评估提供参考。     

应用组织芯片技术检测GPC3蛋白在肝细胞癌及其它肿瘤中的表达

目的 研究GPC3蛋白在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及其他人类常见肿瘤组织中的表达。方法 应用组织芯片及免疫组化技术检测36例HCC组织、33例HCC癌旁组织以及其他人类常见肿瘤组织及其癌旁组织中GPC3蛋白的表达。结果 ①GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌、癌旁慢性浅表性胃炎组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌组织中无表达;②36例HCC组织及33例HCC癌旁组织中GPC3蛋白的表达率分别为66.7% (24/36),3.0%（1/33）,二者之间差异有显著性（P＜0.001）;③HCC组织中GPC3蛋白表达与患者年龄、性别、病理分级无相关性（P＞0.05）。结论 GPC3蛋白在HCC、肺鳞癌组织中表达,而在胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、宫颈癌中表达沉默,GPC3是一个值得期待的多种肿瘤特异性标志物。     

血清GP73作为原发性肝癌肿瘤标志物的来源探究

目的探究血清GP73作为原发性肝癌的肿瘤标志物的可行性。方法采用SYBR Green qPCR法对103例原发性肝癌（PHC）、13例肝硬化、49例肝炎和50例健康人群外周血单核细胞GP73 mRNA的相对表达量进行检测,同时检测分析8份正常肝组织和8份肝癌组织的GP73 mRNA相对表达水平。对7例病理确诊为PHC的肝组织和1例正常肝组织、1例肝硬化肝组织中GP73的表达进行免疫组化分析。采用ELISA法检测血清GP73水平和利用电化学发光法血清中AFP水平。结果外周血有核细胞GP73 mRNA含量四组间差异无统计学意义（F=3.013,P=0.055）。肝癌组织GP73mRNA表达量（12.64）显著高于正常肝组织（1.00）。GP73免疫组化结果显示,正常肝组织中GP73少量在肝实质细胞胆小管处表达。肝硬化组织中GP73在肝细胞胞浆中弱阳性表达,但在肝细胞胞浆的两侧靠近胆小管位置呈颗粒状浓集;胆管柱状上皮也呈强阳性着色。PHC患者肝组织GP73在肿瘤细胞胞浆呈强阳性着色,且在胆管上皮细胞靠近腔缘一侧呈深棕色颗粒状分布。肝癌组中血清GP73水平显著高于肝炎组及健康对照组（χ^2=62.541,P=0.000）。通过ROC曲线确定诊断肝癌的GP73临界值为113.2μg/L,和AFP的临界值为13.3μg/L时,GP73和AFP单项检测的敏感度分别为68.0%和56.3%,特异度分别为94.8%和91.8%。结论 PHC患者血清高表达的GP73可能是在癌变的肝细胞胞浆中合成随后分泌入血。血清GP73在诊断PHC时阳性检出率显著高于AFP,且ROC曲线提示灵敏度和特异度均优于AFP。     

高尔基体糖蛋白73在肝癌中的表达及其影响因素分析

目的观察高尔基体糖蛋白73（Golgi protein 73,GP73）在肝细胞癌中的表达水平,分析影响其表达的相关因素。方法选取肝细胞癌、肝硬化、乙型肝炎患者及正常体检人群为研究对象,分别纳入肝细胞癌组（n=67）、肝硬化组（n=20）、乙型肝炎组（n=20）和正常对照组（n=20）。收集各组血清标本并用ELISA法检测GP73的表达水平,比较肝细胞癌组GP73表达水平与其他三组的差异。以GP73表达中位数将肝细胞癌组分为高表达和低表达亚组,分析影响GP73表达水平的相关因素。结果肝细胞癌组GP73表达最低13.8 ng/ml,最高1 128.2 ng/ml,中位表达173.1 ng/ml。将肝细胞癌组GP73表达水平分别与另外三组进行比较,肝细胞癌组GP73表达高于肝硬化组、HBV肝炎组或正常对照组（P〈0.05）。根据GP73表达中位数将肝细胞癌患者分为低于173.1 ng/ml（n=33）、超过173.1 ng/ml（n=34）两个亚组,两组患者在是否合并肝硬化、肿瘤分化程度方面差异具有统计学意义（P〈0.01）,而在年龄、TNM分期、肿瘤大小、AFP表达水平、远处转移方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肝细胞癌患者血清GP73水平显著高于正常人群以及乙型肝炎、肝硬化患者;GP73表达水平与肿瘤分化程度、肝硬化有关。     

肝细胞癌中Thr157磷酸化p27^kip1的表达和意义

目的研究肝细胞肝癌（HCC）组织中157号位苏氨酸磷酸化的p27kip1（p-27kip1Thr157）和增殖细胞核抗原（PCNA、Ki67）的表达,探讨其间相互关系及与临床病理的关系,并分析其与临床预后的关系。方法免疫组化方法检测51例HCC及其癌旁组织、10例肝血管瘤旁肝组织中P-p27^kip1Thr157和Ki67蛋白的表达。免疫印迹技术检测8例HCC及其癌旁肝新鲜组织中P-p27^kip1Thr157和PCNA的表达情况。结果 （1）P-p27^kip1Thr157在HCC组织对应的癌旁组织和血管瘤旁肝组织低或缺失表达,PCNA在HCC中显著高表达（P〈0.001）。（2）在HCC中,P-p27^kip1Thr157的表达强度与肿瘤病理分级明显相关（P〈0.05）,Ki67的表达强度与HCC的分化程度、有无坏死和AFP值均明显相关（均P〈0.05）;HCC中P-p27^kip1Thr157与Ki67表达成显著正相关（r=0.604,P〈0.001）。（3）Kaplan-Meier和多因素COX回归分析,显示P-p27^kip1Thr157可作为HCC患者显著的一个独立的预后指标（P〈0.05）。结论 P-p27^kip1Thr157可能在HCC的发生发展中发挥重要的作用并有一定的预后评估价值。     

血清GP73和AFP等十项肿瘤标志物联合诊断HBsAg阳性肝癌的研究

目的探讨血清高尔基体蛋白73（GP73）及甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、铁蛋白（SF）、糖基抗原（CA19-9、CA15-3、CA125）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰基转肽酶（GGT）、亮氨酸氨基转肽酶（LAP）等肿瘤标志物单项和联合检测对乙型肝炎（乙肝）病毒表面抗原（HBsAg）阳性肝癌的诊断价值。方法收集85例慢性乙肝、74例乙肝肝硬化、133例HBsAg阳性肝癌患者及46例健康体检者的血清,对GP73及AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP等肿瘤标志物进行检测,并对检测结果进行统计学分析。结果 Spearman相关分析表明血清GP73与AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP均有一定的相关性（均P＜0.05）,除CA125外,肝癌组的相关系数均比非肝癌组小;但只有GP73与AFP、GGT及LAP的相关性在两组间的差异有统计学意义（均P＜0.05）。GP73、AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP在慢性乙肝组、乙肝肝硬化组、肝癌组和正常对照组中的差异均有统计学意义（均P＜0.05）,肝癌组的GP73、AFP、LAP的血清水平均显著高于其他组（均P＜0.05）。ROC曲线分析表明,单项指标中以GP73的ROC曲线下面积最大（AUC=0.792）,但与AFP和ALP的差异不大（Z=0.127、1.908,P=0.899、0.056）。通过logistic回归对上述指标构建新的预测模型,联合预测因子（PRE）的AUC显著高于其它单项指标（均P＜0.05）。结论 GP73单项检测有较好的诊断作用,GP73联合AFP、CEA、SF、CA19-9、CA15-3、CA125、ALP、GGT、LAP检测可提高对HBsAg阳性肝癌的诊断效能。     

肝细胞肝癌Cathepsin B、uPA和uPAR蛋白高表达的意义

目的 探讨肝细胞肝癌组织中组织蛋白酶B（cathepsin B,CB）、尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plas-minogen activator,uPA）及其受体（wrodinase-type plasminogen activator receptor,uPAR）的蛋白表达量.在肿瘤侵袭转移中的作用及机制.方法 应用免疫组化法测定71例肝组织标本,包括对照组（NC组）12例、肝细胞肝癌组（HCC组）34例和癌旁组织组（PTT-组）25例的CB、uPA和uPAR蛋白表达量,分析蛋白表达量之间的相关性以及与临床病理因素的关系.结果 （1）HCC组CB、uPA和uPAR蛋白表达量均明显高于NC组和PTT组,差异有统计学意义（均P〈0.01）,PTT组与NC组间差异无统计学意义（P〉0.05）.（2）CB与uPA（r=0.793）,CB与uPAR（r=0.766）,uPA与uPAR（r=0.892）之间均存在正相关关系（均P〈0.01）.（3）CB、uPA、uPAR在包膜不完整、有肝内或肝外转移者肝癌标本中的表达量明显高于包膜完整、无肝内或肝外转移者肝癌标本中的表达（均P〈0.05）;与肿瘤的大小无关（P〉0.05）;随肝癌分化程度降低,3项指标均有增高的趋势,但无统计学意义（P〉0.05）.结论 肝癌组织CB、uPA和uPAR蛋白均呈现高表达,它们之间可能相互诱导,协同促使肝癌的侵袭和转移.     

GP73与AFP-L3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床价值

目的：探讨高尔基体蛋白73（GP73）和甲胎蛋白异质体3（AFP-L3）联合检测在原发性肝癌诊断中的临床价值。方法：采用免疫组化法和酶联免疫法检测原发性肝癌组（PHC组,n=45例）、肝硬化组（LC组,n=35例）和病毒性肝炎组（VH组,n=36例）患者肝组织和血清GP73、AFP-L3和AFP的表达水平,选择同期40例门诊正常体检者作为对照组。观察各组肝组织和血清GP73、AFP-L3和AFP的表达水平,并比较GP73、AFP-L3、AFP单一检测和GP73联合AFP-L3检测原发性肝癌的阳性率。结果：PHC组肝组织和血清GP73、AFP-L3和AFP表达水平明显高于LC组和VH组（P〈0.05）;PHC组AFP-L3和GP73单项检测阳性率（分别为68.9%、77.8%）均明显高于AFP检测阳性率（62.2%）（P〈0.05）,两指标联合血清检测可提高阳性率（86.7%）（P〈0.05）。结论：GP73和AFP-L3联合血清检测可提高原发性肝癌诊断阳性率,对原发性肝癌的早期诊断具有重要的临床意义。     

GP73在PHC中的表达及临床意义

目的:探讨GP73在PHC癌组织中的表达及其对PHC可能存在的临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应和免疫组化检测20例PHC癌组织(PHC组)和18例正常肝组织(正常对照组)中GP73蛋白以及GP73 mRNA的表达情况。结果:PHC组GP73mRNA的相对表达水平为(1.37±0.18),明显高于对照组的(0.53±0.04)(P0.05);PHC组GP73阳性表达率为80.0%(16/20),正常对照组为5.6%(1/18),两组比较差异有统计学意义(P0.01);PHC组中GP73蛋白表达量与GP73 mRNA相对表达量存在明显正相关性(r=0.76,P0.05)。结论:GP73在PHC癌组织中呈高表达,GP73能作为一种有临床意义的肝癌标志物,为PHC的诊断提供可靠的标记。     

KAI-1基因在肝细胞癌中的表达与临床病理特征的关系

目的探讨KAI-1基因在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与临床病理特征的关系。方法对48例HCC手术切除的新鲜标本和10例正常肝组织经常规方法应用SABC免疫组织化学法,以KAI-1单克隆抗体对切片进行染色。检测KAI-1在HCC中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果KAI-1在HCC癌组织中的阳性率为58.33%,明显低于癌旁及正常肝组织（P〈0.05）,KAI-1在有转移与无转移HCC中的评分分别是1.76±1.51和2.90±1.82（P〈0.05）,而与其它临床病理特征无显著关系。结论KAI-1在HCC中的表达明显降低,且转移者明显低于不伴转移者,这表明KAI-1可能抑制了HCC的发生发展和转移。     

GP73及AFP在诊断HBV相关性肝病患者的临床分析

目的分析GP73及AFP在诊断HBV相关性肝病患者中的临床意义.方法选择慢性乙型肝炎患者83例（A组）,乙肝肝硬化患者57例（B组）,HCC患者41例（C组）,分别检测GP73、AFP及肝功能相关指标.结果 B组GP73较A组增高,差异有统计学意义（P〈0.05）,C组AFP及GP73较A、B组均有升高,差异有统计学意义（P〈0.05）.B组较A组ALT、AST、CHE、ALB、TBIL均有差异,差异有统计学意义（P〈0.05）,C组ALP、ALT、AST、CHE、ALB、TBIL较A、B组均有差异,差异有统计学意义（P〈0.05）.AFP与AST、CHE呈相关（P〈0.05）,GP73与ALT、AST、CHE、ALB呈相关（P〈0.05）,与ALP、TBIL无相关性（P〉0.05）.结论 GP73相对于AFP是反映HBV相关性肝病患者进展重要指标,并与肝损害程度显著相关.