产KPC酶肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的分子机制研究

摘要：目的 研究临床分离肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的分子耐药机制,为临床合理用药提供理论及实验依据。方 法 收集2020年1月-2020年12月皖南医学院弋矶山医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌株923株,利用全自动微生物分析系统进 行菌种鉴定及药敏分析,并用16S rRNA PCR扩增产物测序验证菌种,K-B法复核碳青霉烯类药物耐药情况;胶体金法对耐碳青 霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia, CRKP)菌株进行碳青霉烯酶的表型检测,并用碳青霉烯酶PCR扩 增结果进行验证;同时利用全自动微生物分析系统对产KPC酶CRKP产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs) 进行检测,并用ESBLs耐药相关基因PCR扩增结果进行验证;多位点序列分型技术(MLST)对产KPC酶CRKP进行序列分型 (ST)。 结果 923株肺炎克雷伯菌中256株(27.74%)为CRKP,其中183株携带blaKPC,ST分型为ST11型和ST12型,产KPC酶CRKP 携带3种ESBLs基因blaTEM-1、blaSHV-11和blaCTX-M-1。结论 CRKP产碳青霉烯酶以KPC酶型为主,blaKPC可合并3种ESBLs的产生。     

产碳青霉烯酶与非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药性临床分析

目的 探讨产碳青霉烯酶与非产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药情况.方法 选取2019年1—12月北京中医药大学东直门医院临床送检的标本中分离出的肺炎克雷伯菌365株,根据改良Hodge试验结果分为产碳青霉烯酶组(199株)和非产碳青霉烯酶组(166株).分析365株肺炎克雷伯菌的标本来源和检出科室分布情况,比较产碳青霉烯酶...     

改良碳青霉烯灭活试验在检测肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶中的应用评价

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)在中国产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CPKP)中的应用价值。方法分别用mCIM和eCIM筛查中国271株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)中产酶阳性菌株,并以碳青霉烯酶基因聚合酶链反应(PCR)及测序结果为标准计算灵敏度和特异度。结果 271株非重复CRKP菌株中碳青霉烯酶基因阳性菌有209株,未检测出耐药基因的菌株有62株。mCIM检测到209株基因阳性菌株中208株为阳性菌株,62株基因阴性菌均为阴性; eCIM检测出的阳性菌株有58株,阴性菌株有150株。mCIM检测敏感度为99. 5%,特异度为100. 0%; eCIM检测敏感度为100. 0%,特异度为99. 3%。其中有1株产IMP-4型碳青霉烯酶菌株的mCIM结果为阴性,1株产KPC-2型碳青霉烯酶菌株的mCIM和eCIM都为阳性。结论 mCIM和eCIM在肺炎克雷伯菌中检测碳青霉烯酶有很好的敏感度和特异度,值得推广使用。     

关于肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶特性及耐药趋势分析

目的:分析肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶特性与耐药趋势。方法:选取2016年1月~2016年4月期间,某院分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌183株,分别采用VITEK-2Compact全自动细菌分析仪与K-B纸片法,对菌株对于药物的敏感性进行检测,通过改良Hodge试验,检测其是否产生碳青霉烯酶,采用EDTA抑制试验方法,检测其是否产出金属酶。结果:临床分离出的肺炎克雷伯菌中CRKP的比例为2015年0.2%,2016年3.7%,耐药性呈显著上升趋势(P0.05),且药敏结果显示,肺炎克雷伯菌除了对碳青霉烯类药物有较高的耐药性之外,对氨曲南、头孢曲松以及环丙沙星等抗菌类药物均有多重耐药性;改良Hodge试验结果显示,183株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中有180株呈阳性。结论:2015年~2016年间,分离的CRKP比例呈逐年上升趋势,且对多种抗菌药物均有耐药性,而产出的KPC-2型碳青霉烯酶,是导致分离菌株对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的主要原因。     

肺炎克雷伯碳青霉烯酶的研究进展

肺炎克雷伯碳青霉烯酶型β-内酰胺酶（KPC）是近年来发现的肠杆菌科细菌对碳青霉烯酶抗生素耐药的主要机制,可水解除头霉素以外的所有β-内酰胺类抗生素。然而由于实验室检测KPC的及时性与准确性仍不能达到临床要求,这必将给一线的抗感染治疗和管理院内感染带来困难,因此,临床医师和实验室更应该重视,相互加强联系与沟通。     

南宁地区某院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶表型与基因型检测

目的 了解南宁地区某院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及碳青霉烯酶产生情况,为CRKP感染防控提供依据。方法 收集2021年1月至2022年2月临床分离的CRKP共46株,用Phoenix M50全自动微生物鉴定药敏分析仪进行药敏试验,采用碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行碳青霉烯酶表型筛选,用PCR扩增碳青霉烯酶耐药基因。结果 46株CRKP对厄他培南100%耐药,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为76.1%和78.3%,对除氨曲南外的其他β-内酰胺类药物的耐药率均为100%,对替加环素耐药率为0,对多黏菌素B(4.3%)及阿米卡星(32.6%)耐药率较低;碳青霉烯酶表型筛选试验检出单产A类碳青霉烯酶菌株33株(71.7%),单产B类金属β-内酰胺酶9株(19.6%),单产D类OXA-48型碳青霉烯酶2株(4.3%),同时产A类和B类碳青霉烯酶2株(4.3%);46株CRKP均检出碳青霉烯酶耐药基因,其中,33株(71.7%)仅携带KPC-2基因,7株(15.2%)仅携带NDM-1基因,2株(4.3%)仅携带VIM-1基因,2株(4.3%)仅携带OXA-48基因,2株(4.3...     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药基因分析

目的 了解铜陵市人民医院分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药基因型。方法 收集2011年5月至2016年8月铜陵市人民医院临床标本中分离的CRKP,采用VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,聚合酶链反应（PCR）检测碳青霉烯酶基因（bla_KPC、bla_IMP、bla_VIM、bla_NDM和bla_OXA-48）,并对各碳青霉烯酶基因阳性扩增产物进行基因测序。结果 共收集CRKP 90株,其中改良Hodge试验阳性84株（93.3%）,51株（56.7%）携带bla_KPC-2基因,2株（2.2%）携带bla_IMP-4基因,1株（1.1%）携带bla_VIM-1基因。结论 该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药机制是产KPC-2型碳青霉烯酶。     

肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药的研究进展

肺炎克雷伯菌是一种常见的机会性致病菌,为医院内感染的重要病原菌之一。近年来,肺炎克雷伯菌的感染率及耐药率呈上升趋势,碳青霉烯类抗菌药是治疗该菌最有效的抗菌药物,但随着使用的增加,其耐药性也不断增加。本文就肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制：产生碳青霉烯酶、青霉素结合蛋白对碳青霉烯类亲和力的下降、高产AmpC酶或ESBLs合并外膜蛋白缺失、生物被膜、主动外排系统等方面的研究进展作一综述。     

中国肺炎克雷伯菌碳青霉烯类抗生素耐药现状和流行病学分析

目的研究中国肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及碳青霉烯酶在肺炎克雷伯菌中的分布。方法采用琼脂稀释法进行药敏实验;用PCR扩增和测序检测携带碳青霉烯酶基因的菌株;通过改良霍奇试验(MHT)和亚胺培南/EDTA双纸片协同试验(DDST)进行产碳青霉烯酶表型检测;利用PFGE及MLST对产酶菌株做流行病学分析。结果与结论产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的亚胺培南MIC处于较低水平;KPC-2和IMP-4为本研究发现的主要酶型;肺炎克雷伯菌IMP的遗传背景较为复杂。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学及耐药机制

目的 研究碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌分子流行病学及对碳青霉烯类耐药机制。方法 KB法筛选对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌临床分离株24株,同时采用微量肉汤稀释法测定这些细菌的最低抑菌浓度,改良Hodge实验检测碳青霉烯酶;PCR检测碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaIMP、blaNDM、blaVIM、blaIMI、blaSPM、blaNDMOXA-23、blaNDMOXA-24、blaNDMOXA-48和blaNDMOXA-58)。结果 药敏试验显示碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌具有多重耐药性。PCR扩增碳青霉烯酶基因,blaIMP阳性率为58.3%,经测序为IMP-4,其余均为阴性。结论 肺炎克雷伯菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制主要与产IMP-4金属酶有关。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的表型分析

目的分析昆山市中医医院临床分离肺炎克雷伯菌病原株的分布及耐药情况,并对分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的主要耐药机制进行初步分析,为临床抗菌治疗及院内感染控制提供依据。方法采用VITEK-2 compact微生物鉴定及药敏系统对临床分离菌株进行鉴定和药敏测定,对其分布及耐药情况进行统计分析。对临床初筛的CRKP菌株进行K-B药敏试验、表型确证试验(改良Hodge试验)、产超广谱-内酰胺酶(ESBLs)确证试验以及检测AmpC酶的三维试验。结果临床分离的295株克雷伯菌中有CRKP 23株,主要来源于痰标本,送检科室以ICU为主;其中AmpC阳性12株,ESBLs阳性6株,2种酶均为阳性2株;CRKP大部分来自重症老年患者;CRKP的多重耐药性明显高于非耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌(CSKP)(P<0.05),对环丙沙星、左氧氟沙星、妥布霉素和丁胺卡那霉素的耐药率低于50.00%,而既产AmpC酶又产ESBLs的菌株对上述4种抗生素敏感。结论CRKP的多重耐药性明显高于CSKP,其中产AmpC酶CRKP的检出率比产ESBLs更高,治疗由CRKP所致感染时,应根据其药敏检测结果,选用耐药性较低的抗生素治疗,如环丙沙星、左氧氟沙星、妥布霉素和丁胺卡那霉素等。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药研究

目的 探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)对抗菌药物的敏感性及耐药方式.方法 选取医院2017年1月至2020年12月收治的非重复性CRKP感染患者的耐药菌株97株,参考美国临床和实验室标准协会发布的《抗菌药物敏感试验执行标准第27版信息增刊》,采用VITEK2-Compact型全自动微生物分析仪和Kirby-Ba...     

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌感染的危险因素分析

目的 调查肺炎克雷伯菌在不同感染类型中的临床分布特点,分析碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）感染的危险因素。方法 对1 651例肺炎克雷伯菌病例中检出的307例CRKP进行回顾性分析,采用单因素及多因素Logistic回归分析CRKP感染的危险因素。结果 肺炎克雷伯菌主要分布科室为神经外科、重症医学科、新生儿/儿科以及呼吸内科,主要感染部位为呼吸道、泌尿系统以及血流。CRKP感染的危险因素有高血压、慢性阻塞性肺疾病、有创操作、使用免疫抑制剂、抗菌药物暴露史、感染前90 d内入住重症监护室、使用质子泵抑制剂。多因素Logistic回归分析结果表明,高血压、侵入性操作、使用免疫抑制剂、抗菌药物暴露史、感染前90 d内入住重症监护室是CRKP感染的危险因素。结论 应对有CRKP感染危险因素的患者进行主动监测,对携带CRKP患者及时隔离,加强环境清洁消毒,规范抗菌药物以及免疫抑制剂的临床应用,尽量取消不必要的侵入性操作,减少CRKP院内感染的发生。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌新生儿肺炎53例临床分析

目的：分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌新生儿肺炎的临床特点。方法：回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院新生儿科2010年1月至2014年12月痰培养确诊为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌新生儿肺炎的临床资料。结果：53例耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌新生儿肺炎的临床表现及体征无特异性,其对青霉素类、β-内酰胺类加酶抑制剂、头孢菌素类及碳青霉烯类100%耐药,但对阿米卡星、喹诺酮类高度敏感（90.6%～98.1%）。结论：耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染已是临床抗感染治疗的难题之一,其临床表现与体征无特异性,治疗上可结合药敏结果选用喹诺酮类药物,但其安全性仍需深层次研究。     

耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶的表达情况

目的 检测临床分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌临床分布、耐药情况及碳青霉烯酶的表达情况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法 收集徐州3家三级医院微生物室培养出的非重复肺炎克雷伯菌,并根据药敏结果筛选对亚胺培南耐药的菌株,对耐药菌株采用改良Hodge实验检测碳青霉烯酶、IPM/EDTA组合纸片法检测金属酶表现型,采用PCR实验检测耐药菌株中blaKPC-2,blaCTX-M-15,blaVIM-1,blaIMP-4,blaNDM-1和blaOXA-48的表达情况。结果 共收集107株非重复肺炎克雷伯菌,其中26株耐亚胺培南,耐亚胺培南菌株均为多重耐药菌株,对常见抗菌药物均为耐药;表现型结果26株耐亚胺培南菌株有23株改良Hodge实验阳性,阳性率为88.5%;6株组合纸片法阳性,阳性率为23.1%;PCR扩增具有碳青霉烯酶活性的相关基因：26株均检测到KPC-2酶基因,25株检测到CTX-M-15酶基因,8株检测到IMP-4酶基因,1株检测到NDM-1酶基因,1株检测到VIM-1酶基因,暂未扩增出OXA-48酶基因。结论 本地区肺炎克雷伯菌耐亚胺培南形势严峻,产生β-内酰胺酶为其主要的耐药机制,KPC-2、CTX-M-15产生率较高,占主导地位,已经存在产NDM-1菌株,相关部门应注意预防其流行和传播。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌血流感染的预后分析

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌血流感染的情况及预后分析。方法选取中国人民解放军第202医院发生血流感染并检出肺炎克雷伯菌的患者127例,进行血液细菌培养及药物敏感试验,对碳青霉烯类抗生素敏感患者和耐碳青霉烯类抗生素患者进行调查分析。结果耐碳青霉烯类抗生素患者的院内死亡率、感染相关死亡率、感染后住院天数和总住院天数显著高于碳青霉烯类抗生素敏感患者(P<0.01),耐碳青霉烯类抗生素的血流感染患者生存率显著低于碳青霉烯类抗生素敏感患者(P<0.01)。结论耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌血流感染患者预后较差,是血流感染患者院内死亡的独立危险因素之一。     

成人耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌脑膜炎抗感染治疗的相关文献分析

目的 研究成人耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)脑膜炎的抗感染治疗方案.方法 检索中英文数据库中有关CRKP脑膜炎治疗的报道,汇总分析患者基本情况、病原学和药物敏感性测试、药物治疗方案及预后情况.结果 从1990年1月至2020年3月,共检出有效文献10篇,有效病例47例,其中个案报道8篇,回顾性分析2篇.患者均经历...     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱用于产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌ST11分型的研究

目的：探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（ MALDI?TOF MS）用于产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌ST11分型。方法收集2012年10月－2014年10月5所医院的80株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌菌株。经多位点序列分析（ MLST）,28株为ST11型,52株为其他分型（ other sequence type, OST）。通过MSP dendrogram聚类分析、MALDI Biotyper建立数据库、ClinPro Tools建立模型3种方法研究ST11分型的可能性。结果 MSP dendrogram聚类分析在距离水平线1000处可将80株菌聚类分析为两类,敏感性为65．78％,特异性为92．85％。 MALDI Biotyper数据库验证结果：18株ST11有1株菌分为OST,32株OST有2株菌被分为ST11,敏感性为89．47％,特异性为96．77％。 ClinPro Tools用其余菌株验证模型全部正确,敏感性和特异性均为100％。结论 MALDI?TOF MS可通过3种方法区别ST11与OST,以ClinPro Tools软件建立模型的方法最可靠。