抗体-药物偶联药物的研究进展

抗体-药物偶联物（ADC）也称为免疫偶联物,属于靶向抗肿瘤药物,由药物、抗体以及偶联抗体和药物的连接物所组成。当抗体和肿瘤细胞表面的抗原特异性结合时,抗体-药物偶联物可将药物成功释放到肿瘤细胞特定部位。本文主要概述抗体-药物偶联物的作用机理、分类以及相关药物的临床进展并重点介绍最新上市的药物曲妥珠单抗-美登木素I（T-DM1,Kadcyla）。     

肿瘤靶向药物抗体-药物偶联物的研究进展

抗体-药物偶联物(Antibody-drug conjugates,ADC)具有单克隆抗体的靶向特异性和细胞毒素的抗肿瘤能力,其利用化学接头将细胞毒性药物与单克隆抗体偶联,与肿瘤部位的靶抗原结合后释放毒素.尽管概念简单,但是结构设计复杂、药物副作用明显和疗效欠佳等问题为其进一步研究应用带来了挑战.随着新技术的出现,AD...     

治疗性单克隆抗体的研究进展及其免疫偶联物的抗肿瘤应用

目前正在研究的生物技术药物有1/4是单克隆抗体类药物,治疗性抗体已成为生物制药业发展最快的领域之一,它们用于治疗如肿瘤、移植排斥、自身免疫病、心血管疾病、病毒感染等.在发展初期,鼠源单克隆抗体为人类疾病的研究起到了重大的推动作用,但其存在着严重的不足,单克隆抗体人源化已逐渐成为当前研究的热点.另外,将放射性物质、化疗药物以及生物毒素等与单克隆抗体偶联得到免疫偶联物,这些偶联物被单克隆抗体特异性地导向表达相应抗原细胞的表面,并发挥抗肿瘤效应,同时也降低了药物对正常组织的损伤.文中就有关单克隆抗体人源化的研究进展和抗肿瘤应用进行综述.     

抗肿瘤抗体药物研究进展

自1997年以来,抗体药物用于肿瘤治疗取得突破性的进展。据统计,国内外已有约17种抗体药物被批准用于临床肿瘤治疗。除了一直比较成功的裸抗体,抗体药物偶联物(ADC)成为抗肿瘤抗体药物研发的新热点。抗原靶标及作用机制特点决定了抗肿瘤抗体药物在临床的安全性和疗效。本文主要从肿瘤细胞杀伤机制、作为抗体靶标的肿瘤抗原、在临床的应用情况及ADC纳米粒研究方面对抗肿瘤抗体药物进行了综述。     

抗体偶联药物的有关进展

化疗肿瘤治疗的常规手段之一,但由于细胞毒药物没有明显的靶向性,导致其副作用十分显著。因此免疫偶联药物由于其良好的靶向性及抗癌活性就成为了研究的热点。文章综述了细胞毒药物与单克隆抗体偶联的各种常用方法,包括使用偶联剂进行偶联、利用肽链进行偶联、利用二硫键进行偶联和利用大分子技术进行偶联,以及抗体偶联药物的研究现状。抗体偶联药物有细胞毒药物、抗体和偶联剂组成,利用各种偶联手段将单克隆抗体与细胞毒药物偶联,不仅可以将细胞毒药物特异性地靶向于肿瘤细胞,而且可以降低细胞毒药物对于正常细胞的杀伤,同时还可以具备缓释、提高药物抗肿瘤活性等效果,是未来肿瘤靶向治疗的发展方向之一。同时文章还结合作者的自身工作,对抗体偶联药物的未来发展方向提出了建议。     

抗体偶联药物研究进展

抗体偶联药物(antibody drug conjugates,ADCs)是通过化学键将毒性小分子与单克隆抗体偶联的靶向抗肿瘤药物,其充分利用了抗体的特异性和毒性小分子的高抗肿瘤活性,达到了高效低毒的目的。抗体、连接物以及毒性小分子是ADCs的3个重要组成部分,文章介绍了ADCs制备中靶点选择,抗体小型化和人源化改造,高活性毒性小分子使用,可断开和不可断开连接物的特点以及越来越受关注的定点偶联策略,为ADCs临床前研发提供依据。     

烯二炔类抗肿瘤抗生素单克隆抗体导向药物研究进展

单克隆抗体对相应的抗原有高度特异性。因此,利用单抗作为特异性载体制成导向药物(免疫偶联物),对于治疗肿瘤有巨大潜力和引人瞩目的前景。文章对烯二炔类抗肿瘤抗生素.特别对新制癌菌素、力达霉素和calicheamicins及其单克隆抗体免疫偶联物的研究进展作了概述。     

抗肿瘤抗体偶联药物靶向递送的研究进展

抗体与抗原结合的靶向递送是一种精准的递药方式,由于其高特异性和亲和力被视为理想的靶向递药方式之一,这为成功解决抗肿瘤治疗中化疗药物选择性差的问题开辟了新的道路。当前,利用单克隆抗体与靶抗原结合的抗体偶联药物(antibody drug conjugates,ADCs)研究成为分子靶向治疗的研究热点,本文就ADCs靶向递送的作用机制、靶向策略和靶向递送进展进行综述,以期为临床开发新的ADCs提供参考。     

抗肿瘤微生物药物的研究进展

从丰富的微生物代谢产物中寻找具有抗肿瘤作用的生物活性物质工作已有50年的历史,传统的抗肿瘤抗生素的发现正是这一思路下的产物,这类约物的独特之处在于它们具有极其多样性的化学结构(如埃波霉素D、格尔德霉素衍生物17-AAG、CC-1065 rachelmycin等).对这类药物的抗肿瘤活性的评价,将有助于进一步设计出更好的抗癌药物.传统的抗肿瘤抗生素对肿瘤的治疗常因缺乏特异性而导致治疗效果不佳或毒副作用大.肿瘤相关抗原导向的单克隆抗体已通过不同的机理,以化学方法连接了抗肿瘤抗生素形成免疫偶联物,俗称"单抗导弹药物".由于单抗作用的高度特异性,使免疫偶联物的毒性大大降低,进而提高了抗肿瘤疗效.一些导弹药物已经显示出在临床前研究模型中特异性的抗肿瘤活性.随着人们对作用于肿瘤的免疫机制和抗原抗体之间特异性反应的深入研究,旨在提高肿瘤病人存活率和降低治疗毒副作用的单抗导弹药物的研制,将在抗肿瘤治疗中发挥更大的作用.近年来单抗治疗肿瘤课题受到更大关注,再度成为医药生物技术领域的热点.本文着重报道了结构新颖的苯并二吡咯类、烯二炔类抗肿瘤抗生素,包括对新制癌菌素、lidamycin和卡利奇霉素及其单克隆抗体免疫偶联物的研究进展作了概述.     

急性髓样白血病治疗新药——gemtuzumab ozogamicin

药物介绍2000年上市用于急性髓样白血病 (AML)复发治疗的单抗药物 gemtuzumab ozogamicin (Mylotarg)由细胞毒抗肿瘤抗生素calicheamicin与人重组单克隆抗体偶联而成，其中单克隆抗体约含98%的人源氨基酸序列，余源自鼠科动物。棘孢小单孢菌 (Micromonospora echinospora)培养液中提取的一组化合物calicheamicin，平均分子量为1500与抗体连接的是calicheamicinγ，所形成的偶联物分子量为150000。其对紫外线和热敏感。本品适用于60岁以上CD33抗原阳性的急性髓细胞性白血病首次复发且不适宜用细胞毒药物治疗的患者。本品制剂规格为浅棕色…     

Treatment of acute leukaemias with monoclonal antibodies: current status and future prospects

Monoclonal antibodies are a new class of agents targeted at specific receptors on cancer cells. In addition to direct cellular effects, antibodies can carry substances to the targeted cells, such as radioactive isotopes, toxins, and antineoplastic agents. At present monoclonal antibodies, directed against both lymphoid antigens (CD 20 and CD 52) and a myeloid antigen (CD33) are available for clinical use. In ALL, rituximab, a humanized anti CD20 antibody, has been combined to chemotherapy mainly in mature B-ALL and Burkitt's lymphoma and preliminary results are promising. Alemtuzumab is an anti-CD52 humanized antibody, which showed anti-tumour activity in CLL; clinical effects were observed in some patients with relapsed adult ALL. Monoclonal antibodies against myeloid antigens have been prevalently used in acute myeloid leukaemias (AML), where the most utilised immunological target is CD33. The CD33 molecule is expressed by approximately 90% of AMLs but not on CD34(+) bone marrow-resident hematopoietic stem cells. The humanized anti-CD33 monoclonal antibody HuM195 has only modest activity against overt AML, but it can eliminate minimal residual disease. Radioimmunotherapy with beta-particle-emitting isotopes targeting CD33 shows a major efficacy. Targeted chemotherapy with the anti-CD33-calicheamicin construct gemtuzumab ozogamicin (GO) has produced remissions as a single agent in patients with relapsed AML and appears promising when used in combination with standard chemotherapy. GO is composed of a humanized immunoglobulin G(4) (IgG(4)) monoclonal antibody (mAb), targeting the CD33 antigen and linked to a calicheamicin derivative, a cytotoxic anthracycline antibiotic. GO has been approved by FDA as second-line therapy in older patients with AML. The most common adverse effects of monoclonal antibodies are myelosuppression, infusion-related reactions, and hypersensitivity reactions. Rituximab may cause tumour lysis syndrome. Alemtuzumab causes immunosuppression, increasing the risk of infection. GO may cause hepatotoxicity.     

肿瘤抑制蛋白质P53单克隆抗体的制备及其免疫活性分析

目的制备可特异性地识别肿瘤抑制蛋白质P53的单克隆抗体。方法应用重组人野生型P53蛋白为免疫抗原,采用经典的细胞融合技术制备单克隆抗体。亲和层析纯化抗体蛋白;ELISA测定抗体滴度。纯化的抗体作用于含有不同p53基因型的MDA-MB-231〔p53(mutant)〕和〔H1299,p53(null)〕肿瘤细胞系,Western印迹、免疫组化和免疫荧光染色法检测抗体与内源性P53蛋白的结合特异性。结果对筛选到的3株单克隆抗体1P15,2P37和3P40,进行了亲和层析技术纯化。SDS-PAGE结果显示,纯化后的3株抗体纯度均在90%以上;ELISA滴度测定结果显示,3株单抗的滴度均在1∶6000以上。免疫印迹结果表明,3株抗体在p53检测中具有较高的灵敏度,其中3P40的灵敏度最高,可以达到5 ng。Western印迹、免疫组化以及免疫荧光染色结果显示,抗体与细胞内源性P53蛋白的结合特异性,说明3P40可以特异性地结合细胞总蛋白提取物以及细胞中内源性P53蛋白,而在检测不表达P53蛋白的细胞系样品时,没有非特异性结合。结论成功制备3株对P53具有高亲和力的单克隆抗体,其中3P40的抗体滴度和灵敏度最佳。     

单克隆抗体在疾病治疗中的应用

单克隆抗体(单抗)技术与分子生物学技术的结合使重组嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体的技术得到迅速发展.由于这些单抗带有人抗体的Fc片段,因此,这些抗体不仅能中和抗原,更重要的是能介导细胞毒作用和激活补体系统.这些抗体已被用于治疗某些疾病,如癌症、免疫性疾病、感染性疾病和器官移植排斥.随着大规模CHO细胞生产工艺的发展,越来越多的单抗将应用于临床.     

单克隆抗体在疾病治疗中的应用

单克隆抗体(单抗)技术与分子生物学技术的结合使重组嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体的技术得到迅速发展.由于这些单抗带有人抗体的Fc片段,因此,这些抗体不仅能中和抗原,更重要的是能介导细胞毒作用和激活补体系统.这些抗体已被用于治疗某些疾病,如癌症、免疫性疾病、感染性疾病和器官移植排斥.随着大规模CHO细胞生产工艺的发展,越来越多的单抗将应用于临床.     

Biodistribution Mechanisms of Therapeutic Monoclonal Antibodies in Health and Disease

The monoclonal antibody market continues to witness an impressive rate of growth and has become the leading source of expansion in the biologic segment within the pharmaceutical industry. Currently marketed monoclonal antibodies target a diverse array of antigens. These antigens are distributed in a variety of tissues such as tumors, lungs, synovial fluid, psoriatic plaques, and lymph nodes. As the concentration of drug at the proximity of the biological receptor determines the magnitude of the observed pharmacological responses, a significant consideration in effective therapeutic application of monoclonal antibodies is a thorough understanding of the processes that regulate antibody biodistribution. Monoclonal antibody distribution is affected by factors such as molecular weight, blood flow, tissue and tumor heterogeneity, structure and porosity, target antigen density, turnover rate, and the target antigen expression profile.     

柯萨奇病毒A组10型抗原双抗体夹心ELISA定量方法的建立及应用

目的 建立柯萨奇病毒A组10型（coxsackievirus A10,CV-A10）抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于CV-A10生产过程样品和四价手足口病疫苗的质量控制。方法  以纯化的CV-A10抗原分别免疫绵羊和小鼠获得羊免疫血清和杂交瘤单克隆抗体(单抗)细胞株,以杂交瘤细胞株免疫小鼠制备腹水,羊血清和小鼠腹水分别经亲和层析后获得纯化羊抗CV-A10多克隆抗体（多抗）和小鼠抗CV-A10单抗。采用微量细胞病变法测定纯化多抗和单抗中和抗体效价。分别以纯化羊多抗作为包被抗体、小鼠单抗作为检测抗体,进行配对筛选研究,建立CV-A10抗原定量双抗体夹心ELISA;对方法的线性、专属性、准确度、精密度、范围进行验证,并对CV-A10抗原生产过程中的样品和成品进行检测。结果 纯化抗CV-A10单抗和多抗均具有中和抗体活性。以多抗作为包被抗体、7株单抗作为检测抗体进行配对,其中5株单抗配对成功,选择CY166-14R作为检测抗体用于CV-A10抗原定量检测ELISA的建立;对检测方法进行优化,确定以羊多抗作为包被抗体的使用稀释比例为1：5 000〜1：10 000、小鼠单抗检测抗体稀释比例1 ：2 000〜1：4 000。建立的CV-A10抗原定量检测方法范围为0.42〜10. 00 U/ml,线性决定系数≥0. 99;该方法仅能特异性检测CV-A10抗原,与其他抗原或物质（肠道病毒71型、CV-A6、CV-A16、M199、DMEM、Vero细胞蛋白、牛血清）无交叉反应;对高、中、低浓度样品进行测定,测定值/理论值在95%〜110%之间,相对标准偏差在15%以内。结论 建立了 CV-A10抗原定量双抗体夹心ELISA,该方法在一定范围内的线性、专属性、准确度、精密度均较好,可用于CV-A10抗原生产过程样品和成品的质量控制,为CV-A10抗原的体外效力评价提供方法学基础。     

一种高通量免疫检测抗生素残留方法的建立

目的将表面具有羧基的聚苯乙烯微球运用于悬液芯片系统中,建立一种高通量检测牛奶中卡那霉素和氯霉素残留的方法。方法将合成的卡那霉素和氯霉素全抗原包被在聚苯乙烯微球表面构成捕获抗原,并对整个包被过程进行优化。利用捕获抗原、单克隆抗体及检测物构建间接竞争免疫检测体系,并用荧光标记的二抗作为荧光探针标记与捕获抗原结合的单克隆抗体得到悬液芯片系统的检测物。由于不同型号的微球被悬液芯片系统的激光激发后所呈现的侧向散射荧光(side scatter,SSC)和前向散射荧光(forward scatter,FSC)不同,所以悬液芯片系统能够将不同的微球进行区分以达到分辨不同检测物的目的,悬液芯片系统上的另外一套检测系统能够对每个微球表面荧光探针的荧光强度进行检测以实现定量分析,双检测系统同时工作实现了高通量检测的目的。结果微球的包被优化实验结果表明,包被100μL微球需要卡那霉素和氯霉素全抗原的最佳量分别是12μg和17μg。单克隆抗体的最佳稀释倍数分别是800倍和1600倍;在牛奶基质中,该方法对卡那霉素和氯霉素的检测限分别是0.79ng/mL和52.01ng/mL,半数抑制浓度(IC50)分别为36.65ng/mL和626.03ng/mL,检测范围分别为9~900ng/mL和90~900ng/mL;抗体特异性实验表明两种单克隆抗体的特异性良好。该方法在牛奶基质中的标准添加回收率为80%~110%,满足检测方法建立的要求。结论利用基于微球技术的悬液芯片系统建立了一种高通量检测牛奶中抗生素残留的方法,该研究为下一步更多种抗生素残留的同步检测提供了数据依据。     

治疗性单克隆抗体类药物分析技术及其应用

治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用。单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高。单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域。根据生产技术和工艺的不同,单抗类药物发展已经经历了4代。我国最近批准上市的信迪利单抗注射液、特瑞普利单抗注射液、注射用卡瑞利珠单抗和替雷利珠单抗注射液等均属于第3代人源化单克隆抗体药物。单抗类药物分子结构复杂,容易发生二聚体、多聚体、末端氨基酸突变等不均一性变化,严重影响临床用药的安全性和有效性。对单抗类药物的原液和成品进行有效的质量控制是确保该类产品安全性和有效性的重要措施。目前,单抗类产品质量控制与分析的主要方法包括高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、毛细管区带电泳(CZE)法、毛细管等电聚焦电泳(cIEF)法、成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法和十二烷基硫酸钠-毛细管电泳(CE-SDS)法等。本文就单抗类药物质量控制分析方法及应用进行综述,为相关研究及产品质量控制提供参考。     

Monoclonal antibodies as a strategy for pulmonary diseases.

Monoclonal antibodies have been used successfully to elucidate the roles of putative mediators of pulmonary disease. In particular, clinical trials with monoclonal antibodies directed against interleukin-5, IgE or CD4 yielded results that were critical in dissecting the pathophysiology of asthma; but, more importantly, fundamental changes in the discovery, manufacture and safety of monoclonal antibodies have reinforced the enormous potential of these agents in treating pulmonary diseases. An unprecedented number of monoclonal antibodies are in development for a variety of acute and chronic conditions. Moreover, whereas only two monoclonal antibodies had received regulatory approval from the United States Food and Drug Administration between 1986 and 1997, seven more have received approval since then. Indeed, monoclonal antibody therapy has come of age.