酶联免疫斑点试验和结核菌素试验在肺外结核诊断中的价值

【目的】比较酶联免疫斑点试验（ELISPOT）和结核菌素试验（TST）在肺外结核诊断中的价值。【方法】比较75例肺外结核患者（结核组）,50例非结核病患者（对照组）中ELISPOT和TST检测情况和其诊断肺外结核的效能。【结果】结核组ELISPOT和TST检测阳性率明显高于对照组,且差异具有显著性（P〈0．05）;结核组ESAT6、CFP10、C／E融合的释放细胞因子功能细胞（SCF）数量及ESAT6、CFP10、C／E融合的阳性率（82．67％、90．67％、96．0％）均明显高于对照组（6．0％、10．0％、16．0％）,且差异具有显著性（P〈0．05）;ELISPOT和TST诊断肺外结核的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率分别为90．67％、82．0％、88．31％、85．42％、87．20％和76．0％、78．0％、83．82％、68．42％、66．08％;ELISPOT的灵敏度、阴性预测值、准确率均高于TST,且差异均有显著性（P〈0．05）。【结论】ELISPOT诊断肺外结核的灵敏度和准确率高于TST,其可作为诊断肺外结核的重要辅助检测。     

酶联免疫斑点技术在老年脊柱结核感染辅助诊断中的应用价值

【目的】评价酶联免疫斑点技术（ELISPOT ）在老年脊柱结核感染辅助诊断中的应用价值。【方法】选取2013年1月至2015年1月本院脊柱外科收治的疑似脊柱结核的老年患者56例,比较 ELISPOT试验、结核菌素（PPD）皮肤试验、血清抗结核抗体检测方法在老年脊柱结核感染辅助诊断中的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。【结果】ELISPOT 试验在脊柱结核诊断中的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为77．14％,85．71％,90．00％,69．23％;PPD 皮肤试验的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为37．14％,71．43％,68．42％,40．54％;血清抗结核抗体试验的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为48．57％,61．90％,68．00％,61．90％。在老年脊柱结核患者中,ELISPOT 试验的敏感性、特异性、阳性预测值均显著高于 PPD 皮肤试验和血清抗结核抗体试验。【结论】ELISPOT 法应用于老年脊柱结核诊断有良好的敏感性和特异性,可作为脊柱结核感染辅助诊断的有效方法。     

结核T细胞酶联免疫斑点试验快速诊断肺外结核感染的应用价值

目的 探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）诊断肺外结核分枝杆菌（MTB）感染的临床应用价值.方法 选择肺外MTB感染者37例（肺外MTB感染组）及非结核病对照者30例（非结核病对照组）,应用T-SPOT.TB法检测外周血单个核细胞（PMBCs）经结核特异蛋白6KD早期分泌靶向抗原（ESAT-6）和培养滤液蛋白10（CFP-10）刺激产生γ干扰素（IFN-γ）的T淋巴细胞数,并与结核菌素皮肤试验（TB-PPD）法比较.结果 （1）T-SPOT.TB法在肺外MTB感染组的阳性率91.89％ （34/37）,显著高于非结核病对照组6.67％（2/30）,差异有统计学意义（x^2=48.403,P＜0.001）.（2） T-SPOT.TB诊断肺外MTB感染的敏感性为91.89％,特异性为93.33％,阳性预则值为94.44％,阴性预测值为90.32％,优于TB-PPD法（67.57％、56.67％、65.79％、58.62％）,差异有统计学意义（x^2=6.773、10.756、9.392、8.031,P=0.009、0.001、0.002、0.005）;两方法间一致性较弱（Kappa=0.311,x^2=6.801,P=0.009）.结论 T-SPOT.TB技术快速辅助诊断肺外MTB感染作用明显,其较高的阴性预测值在排除感染方面意义重大.     

酶联免疫斑点试验在骨关节结核诊断中的价值

目的研究酶联免疫斑点试验（ELISPOT）在骨关节结核临床诊断中的应用价值。方法对54例骨关节病患者进行ELISPOT试验,并进行斑点阅读与统计,判定骨关节结核阳性结果。结果54例患者中20例经手术病理诊断明确为骨关节结核,ELISPOT A抗原试验灵敏度80.00%,特异度91.18%,正确率87.04%,Kappa值0.72。 ELISPOT B抗原试验灵敏度80.00%,特异度97.06%,正确率90.74%,Kappa值0.80。A抗原ROC曲线下面积0.99,B抗原曲线下面积0.87,最佳临界值均为4.5。结论 ELISPOT是一种具有较高敏感性和特异性的检测结核感染的技术,可用于骨结核的辅助诊断。     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验对结核诊断价值的Meta分析

目的系统评价结核感染T细胞酶联免疫斑点试验（T-SPOT.TB）在结核诊断中的价值。方法通过计算机检索CNKI、万方、维普、生物医学文献数据库、PubMed等数据库,获得关于T-SPOT.TB诊断结核的诊断性试验的文献,提取四格表等信息,采用MetaDisc1.4和Stata12.0软件进行统计学分析。结果共9篇文献纳入,各研究间存在明显阈值效应引起的异质性,拟合SROC曲线,计算AUC=0.95,Q指数为0.89。试剂盒来源是引起阈值效应的可能原因,以Oxford（UK）提供的试剂盒为亚组进行分析,汇总灵敏度和特异度分别为0.91[95%CI（0.87-0.94）],0.91[95%CI（0.87-0.94）],阳性似然比和阴性似然比分别为11.09[95%CI（7.12-17.28）]和0.10[95%CI（0.07-0.15）],诊断比值比（OR）为110.97[95%CI（57.67-213.52）];合并均无显著异质性（I2均〈50%,P均〉0.05）。Begg’s检验发现不存在发表偏倚。结论T-SPOT.TB对诊断结核有较高的诊断效能,可以帮助临床实践。     

应用酶联免疫斑点试验检测综合医院护理人员结核潜伏感染的调查研究

目的应用酶联免疫斑点试验(ELISPOT,即T-SPOT.TB)检测并了解医院护理人员结核分枝杆菌潜伏感染情况。方法收集我院182名护理人员(其中内科病区75人,外科病区78人,辅助科室29人)的外周血进行TSPOT.TB试验,分析结核潜伏感染情况。结果 182名护理人员中,T-SPOT.TB阳性者47人,总潜伏感染率25.82%;内科、外科及辅助科室的T-SPOT.TB阳性率分别为22.67%(17/75)、26.92%(21/78)、31.03%(9/29),差异无统计学意义(χ~2=0.85,P=0.65)。工作年限≥3年的护士T-SPOT.TB的阳性率31.9%(37/116),明显高于工作年限3年的护士T-SPOT.TB阳性率15.2%(10/66),差异有统计学意义(χ~2=6.16,P=0.01),其RR值为2.62(95%CI:1.21~5.71)。结论综合性医院的护理人员结核潜伏感染率可受工作年限的影响,且与工作年限呈正相关,而受所在科室类别的影响较小。     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值

目的 探讨与分析结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与结核抗体试验在诊断骨关节结核中的临床应用价值。方法 选取2012年1月～2014年12月在无锡锡山人民医院接受诊治的324例疑似骨关节结核病患者为研究对象,采取随机方法将入选者分为T-SPOT.TB试验组和结核抗体试验组,每组162人,T-SPOT.TB试验组患者采取结核感染T细胞酶联免疫斑点试验,结核抗体试验组则采取结核抗体试验,对比分析两组诊断方式的灵敏度与特异度。结果 T-SPOT.TB试验组的灵敏度和特异度分别为93.43%和84.00%,结核抗体试验组的灵敏度和特异度分别为40.44%和53.85%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=184.62,P＜0.05; χ²=7.86,P＜0.05)。T-SPOT.TB试验组的假阳性率、假阴性率分别为16.00%和6.57%,结核抗体试验组的假阳性率、假阴性率分别为26.92%和59.56%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=7.86,156.18,均P＜0.05)。此外, T-SPOT.TB试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为96.97%和70.00%,结核抗体试验组的阳性预测值和阴性预测值分别为88.71%和14.74%,组间相比差异有统计学显著性意义(χ²=20.27,73.06,均P＜0.01)。结论 与结核抗体试验相比,结核感染T细胞酶联免疫斑点试验在诊断骨关节结核时具有灵敏度高、特异度高等特点,值得推广使用。     

酶联免疫斑点技术和分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核辅助诊断中的价值

目的评价酶联免疫斑点技术(ELISPOT)和分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核辅助诊断中的应用价值。方法收集临床疑似肺结核的214例患者的血液和痰液,用ELISPOT技术(T-SPOT.TB试剂)分析血液标本中结核分枝杆菌特异性致敏T细胞的γ-干扰素释放情况;用酸性改良罗氏培养基进行痰液的分枝杆菌分离培养;用PNB固体培养法进行菌种初步鉴定,确定为结核复合群。比较两种方法在肺结核辅助诊断中的符合率和诊断效能。结果两种方法的阳性检出率差异无统计学意义(χ2=1.58,P=0.21),两法符合率为85.5%(183/214)。以临床确诊肺结核为金标准,固体培养法的敏感性为98.2%,特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为98.1%,约登指数为0.98;T-SPOT.TB法敏感性为89.2%,特异性为83.5%,阳性预测值为85.3%,阴性预测值为87.8%,约登指数为0.73。结论 ELISPOT检测(T-SPOT.TB)对肺结核的诊断效能较好,检测周期较分枝杆菌固体培养方法短,在肺结核感染快速诊断和早期筛查中具有广泛应用前景。     

PCR-ELISA测定结核分枝杆菌DNA临床应用评价

目的评价聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR-ELISA)测定结核分枝杆菌DNA临床应用价值.方法用PCR-ELISA测定436例肺结核、172例非结核病人痰标本中的结核分枝杆菌DNA,并结合临床诊断和痰菌检查对实验结果进行分析.结果 436例活动性肺结核病人本法最终阳性341例,阳性率78.21%,其中痰菌阳性病人本法阳性率为97.07%,痰菌阴性病人阳性率为55.33%(109/197);而172例对照患者只有3例假阳性,假阳性率1.74%.结论本法测定痰液结核分枝杆菌DNA对肺结核的诊断具有很高的敏感性和特异性,尤其对痰菌阴性的活动性肺结核病人具有重要辅助诊断价值.     

酶联免疫斑点检测（TSPOT-TB）结核分枝杆菌与结核病的相关性分析

目的研究酶联免疫斑点（T SPOT-TB）检测结核分枝杆菌特异性T细胞与结核病的相关性分析。方法用酶联免疫宽点技术测定早期分泌性抗原靶ESAT-6和ESAT-10特异性T细胞,由传染病研究所证实或可疑的72例病人作为实验对象,并将TSPOT—TB的测定结果和传统的诊断方法相比较。结果64例肺结核或肺外结核病人中,TSPOT—TB方法检测到63例,表明其灵敏度为98．4％。其中的45例病人同时做结素实验,仅有40例呈阳性（89％）,而TSPOT—TB测定100％为阳性（P=0．056）。72例病人中,有6人被排除活动性结核,其中5（83．3％）人TSPOT-TB实验阴性,因此可以在可疑活动性结核病人快速排除非结核病人。结论TSPOT-TB实验对检测结核是一种灵敏的方法,对现在低发病率背景下检测结核的诊断程序及治疗监测是一种有用的补充。     

探讨ELISA法检测血清结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值

目的探讨检测结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验检测血清中的结核杆菌分泌蛋白desA抗原。结果 139例活动性肺结核患者血清结核抗原的阳性检出率为84.1%;64例非结核性肺部疾病组结核抗原阳性率7.81%,29例健康对照者均为阴性。特异性为92.19%。结论检测血清中结核杆菌分泌蛋白desA抗原对诊断肺结核病有较高的应用价值。     

酶联免疫斑点法诊断结核感染的阈值

目的：分析确定本实验室条件下酶联免疫斑点法（enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT）诊断结核感染的阈值以及活动性结核与非活动性结核外周血 ELISPOT 分界阈值。方法对确诊为活动性结核病患者、经有效抗结核治疗后非活动性结核患者和健康者进行 ELISPOT 检测。结果以早期分泌抗原靶6000蛋白（early secretary antigenic target 6000 protein,ESAT-6）作为刺激源时,外周血 ELISPOT 诊断结核感染的阈值为26斑点形成细胞（SFCs）／106,敏感度90．3％,特异度88．7％,阳性预测值82．3％,阴性预测值94．0％;以培养滤液10000蛋白（culture filtrate protein,CFP-10）作为刺激源时诊断阈值为18 SFCs／106,敏感度80．6％,特异度86．8％,阳性预测值78．1％,阴性预测值88．4％,两种抗原 ELISPOT 斑点形成细胞之和为441 SFCs／106时,其诊断活动性结核感染敏感度为87．1％,特异度为80．6％。结论在本实验室条件下 ESAT-6-ELISPOT 诊断结核感染的阈值为26 SFCs／106, CFP-10-ELISPOT 诊断结核感染的阈值为18 SFCs／106,该阈值诊断结核感染的敏感度较高,但特异度较结核低流行国家偏低;以 ESAT-6和 CFP-10两种抗原 ELISPOT 斑点形成细胞之和441 SFCs／106作为鉴别活动性结核与非活动性结核的阈值,可以为临床工作提供参考。     

对比研究ELISPOT与QFT—GIT对于结核病诊断的应用价值

目的比较ELISPOT和Quanti—FERON—TBGoldIn-Tube（QFT-GIT）试剂盒,探讨ELISPOT方法在活动性肺结核诊断中的意义。方法应用ELISPOT和Quanti-FERON—TBGoldIn-Tube（QFT-GIT）对105份活动性结核患者（A组）和60份非结核呼吸系统疾病对照组（B组）进行检测。结果ELISPOT与QFT—GIT方法的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为85．71％、86．67％、91．84％及77．61％和83．81％、76．67％、86．27％及73．02％,且两种方法差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论应于ESAT-6／CFP-10融合蛋白技术的ELISPOT检测方法能够诊断活动性肺结核,并对结核感染诊断提供一定的依据。     

抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖ELISA的建立及其临床应用

目的提取纯化结核分枝杆菌（MTB）脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）,建立抗LAM抗体（LAM-[gG）检测的酶联免疫吸附试验（ELISA）。方法MTB菌体彻底破碎后,去除蛋白、脂质、核酸,得到粗制的脂多糖。经Sephacyl-100凝胶过滤层析分离纯化,得到LAM。以该LAM作为间接ELISA的包被抗原来检测血清中的LAM抗体。,结果所得LAM经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）银染,与对照标准品大小一致,为37000。115例肺结核患者LAM抗体阳性率71．3％;92例非结核肺部疾病患者假阳性率11．9％;188名健康体检者假阳性率3．2％。敏感性71．3％,特异性93．9％。结论本研究成功提取到LAM抗原,此抗原可作为间接ELISA的包被抗原用于结核抗体的检测。     

寡核苷酸法检测结核病患者血清IgG抗体的临床应用评价

目的评价结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法在结核病血清学诊断中的临床应用价值。方法对285例结核病[菌阳肺结核（涂片阳性/培养阳性）124例,菌阴肺结核（涂片、培养均为阴性）161例]、38例非结核病的其他呼吸系统疾病患者及49名健康志愿者同步进行抗酸杆菌涂片、培养及结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法检测。结果结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法诊断菌阳肺结核的敏感性为67.7%（84/124）,诊断菌阴肺结核的敏感性为33.5%（54/161）,诊断结核病的总体敏感性为48.4%（138/285）,总体特异性为92.0%（80/87）,其中在非结核病的其他呼吸系统疾病患者中的特异性为86.8%（33/38）,在健康志愿者中的特异性为95.9%（47/49）。结论结核分枝杆菌IgG抗体寡核苷酸酶联免疫法有极高的特异性和一定的敏感性,可用于结核分枝杆菌IgG抗体的血清学检测,能为临床诊断提供可靠的参考依据。     

结核分枝杆菌噬菌体快速检测方法的临床应用评价

目的评价噬菌体生物扩增法直接检测痰样本中结核分枝杆菌的临床效果。方法应用噬菌体生物扩增法、金胺O染色涂片镜检和快速培养法对530例临床痰样本进行检测。结果以快速培养法培养结果为参考标准进行评价。结果 530例痰样本中有270例快速培养法阳性,其中噬菌体生物扩增法有220例阳性,而260例快速培养法阴性的样本中有20例噬菌体生物扩增法阳性;噬菌体生物扩增法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为81.6%、92.3%、91.6%、82.8%。涂片联合噬菌体生物扩增法的检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88.9%、80.8%、82.8%和87.5%。结论噬菌体生物扩增法具有较高的敏感性和特异性,以及快速、安全等优点,特别是对于痰涂片阴性的结核病患者具有较高的临床应用价值。     

一种新型结核分枝杆菌感染快速检测方法的应用

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）快速诊断结核病的价值。方法选取15例确诊为活动性肺结核的患者和100例入境人员的外周抗凝全血标本,采用ELISPOT检测试剂盒（TSPOT-TB）测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量。结果TSPOT-TB检测结核病的敏感性为93．3％,特异性为100．0％,阳性预测值为100．0％,阴性预测值为81．8％。采用该方法检测的结核潜伏感染率与病例来源呈密切相关,而与年龄和性别无相关性。结论TSPOT-TB的敏感性和特异性均较高,可用于结核感染的快速检测,但无法判断结核的活动性或潜伏感染。     

一种新型结核分枝杆菌感染快速检测方法的应用

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)快速诊断结核病的价值。方法选取15例确诊为活动性肺结核的患者和100例入境人员的外周抗凝全血标本,采用ELISPOT检测试剂盒(T SPOT-TB)测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量。结果TSPOT-TB检测结核病的敏感性为93.3%,特异性为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为81.8%。采用该方法检测的结核潜伏感染率与病例来源呈密切相关,而与年龄和性别无相关性。结论TSPOT-TB的敏感性和特异性均较高,可用于结核感染的快速检测,但无法判断结核的活动性或潜伏感染。