紫花牡荆素通过抑制7次跨膜超蛋白家族成员4的表达抑制膀胱癌细胞增殖迁移和侵袭

目的探讨紫花牡荆素(CAS)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法体外培养T24细胞, 分为对照组、5、10、20 μmol/L CAS组、si-NC组、si-TM7SF4组、CAS+pcDNA组和CAS+pcDNA-TM7SF4组, 采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞的增殖抑制情况, Transwell法检测细胞迁移和侵袭的能力, Western blot法检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和7次跨膜超蛋白家族成员4(TM7SF4)蛋白的表达水平, 实时荧光定量PCR检测TM7SF4 mRNA的表达水平。结果 5、10、20 μmol/L CAS组T24细胞增殖抑制率分别为(17.68±1.41)%、(33.54±3.16)%和(61.44±5.50)%, 均高于对照组[(0.00±0.00)%, 均P<0.001]。5、10、20 μmol/L CAS组细胞迁移数分别为(72.83±5.66)个、(59.13±4.27)个和(41.25±3.22)个, 细胞侵袭数分别为(55.8...     

siRNA干扰Id-1表达对人结肠癌SW480细胞株生长与侵袭能力影响研究

目的 DNA结合分化抑制因子-1(inhibitor-1 0f DNA binding/differentiation-1,Id-1)对结肠肿瘤细胞侵袭行为影响的研究较少,本研究探讨siRNA转染下调Id-1表达对人结肠癌SW480细胞侵袭和转移行为的影响.方法 将合成Id-1干扰序列(siRNA)转染至SW480细胞作为实验组(抑制组),并以Id 1表达干扰空白组、空载体组作为对照,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中Id-1和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein,MMP-9)的表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖能力;划痕损伤实验、Transwell小室和Matrigel侵袭模型评价Id-1对细胞侵袭和转移能力的影响.结果 抑制组Id-1 mRNA表达水平为(0.14±0.02),与空白组(1.27±0.03)和空载体组(1.25±0.06)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;抑制组Id-1蛋白表达水平为0.25±0.02,与空白组(1.18±0.03)和空载体组(1.16±0.04)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;抑制组MMP-9 mRNA表达水平为0.19±0.02,与空白组(1.33±0.04)和空载体组(1.38±0.03)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;抑制组MMP-9蛋白表达水平为0.12±0.02,与空白组(0.89±0.04)和空载体组(0.91±0.02)比较明显降低,差异有统计学意义,P＜0.001;生长曲线表明,从第3天起抑制组细胞增殖明显减弱,与空白组和空载体组差异明显;划痕损伤实验结果显示,空白组和空载体组向划痕处的迁移速度明显快于抑制组;迁移试验显示,抑制组迁移细胞数为75±12,明显少于空白组(201±12)和空载体组(206±15);抑制组侵袭细胞数为51±10,明显少于空白组(121±17)和空载体组(126±14),差异均有统计学意义,P＜0.001.结论 Id-1促进SW480细胞的侵袭和转移,其机制可能与诱导MMP-9的表达有关.     

奥曲肽对人胃癌细胞株SGC-7901肝素酶表达的影响

目的:研究生长抑素类似物奥曲肽(OCT)对人胃癌细胞株SGC-7901肝素酶(Hpa)表达的影响并探讨其作用机制。方法:取人胃癌细胞株SGC-7901,体外培养后取处于对数生长的细胞制成单细胞悬液,加入不同浓度的OCT共培养24h和48h,以半定量RT-PCR法及免疫细胞化学法检测OCT对胃癌细胞Hpa表达的影响。结果:1)胃癌细胞与1×10-5mol/L和1×10-6mol/L的OCT共培养24h后,HpamRNA的表达显著低于对照组(P=0.000和0.001);与1×10-5mol/L和1×10-6mol/L的OCT共培养48h后,HpamRNA的表达显著低于对照组(P=0.000和0.000)。1×10-5mol/L和1×10-6mol/L的OCT与胃癌细胞共培养48h对HpamRNA表达的抑制效果优于24h(P=0.002和0.003)。OCT1×10-7mol/L组,OCT1×10-8mol/L组及对照组各组之间HpamRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。2)胃癌细胞经1×10-5mol/L和1×10-6mol/L的OCT作用24h和48h后,Hpa蛋白的表达也相应下降。结论:OCT1×10-5mol/L和OCT1×10-6mol/L两种浓度能够有效抑制SGC-7901胃癌细胞株Hpa的表达,从而可能对肿瘤的侵袭转移起到抑制作用。     

康莱特抑制肝癌细胞侵袭能力及其对相关基因MMP-9表达的影响

目的探讨康莱特（Kanglaite,KLT）对肝癌细胞株BEL-7404侵袭能力的抑制作用及其对相关基因MMP-9mRNA和蛋白表达水平的影响。方法据前期MTT实验结果选用A组（含KLT80μL/mL）、B组（含DDP10 mg/L）和C组（DMEM空白对照）对BEL-7404细胞进行48小时处理,用细胞迁移实验及Transwell小室法检测细胞的侵袭能力的变化,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot法检测各组BEL-7404细胞中MMP-9mRNA及蛋白的表达水平。结果对BEL-7404细胞作用48小时后,A、B两组细胞的迁移速率及侵袭穿膜细胞数、MMP-9 mRNA及蛋白表达水平均较C组明显降低,差异均有统计学意义（P〈0.001）;而A、B两组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 KLT可通过下调MMP-9表达而抑制肝癌BEL-7404细胞株的侵袭能力;同时对BEL-7404细胞侵袭能力的抑制,80μL/mL KLT与10 mg/L DDP显示同样的抑制效果与机制。     

前列腺癌组织PPAR-γ及其配体表达和作用机制的研究

目的:研究人前列腺癌组织及前列腺癌细胞中PPAR-γ的表达及其配体曲格列酮对前列腺癌细胞生长的影响,探讨曲格列酮抑制前列腺癌的机制.方法:免疫组化法检测成人前列腺组织、前列腺增生组织和前列腺癌组织PPAR-γ蛋白表达.不同浓度的曲格列酮处理人前列腺癌PC-3细胞,采用MTT法观察细胞增殖抑制作用;Annexin V/PI法流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫组化法检测前列腺癌细胞PPAR-γ蛋白表达.结果:PPAR-γ在前列腺癌组织中的表达高于成人前列腺组织和前列腺增生组织;PPAR-γ的表达与细胞分化程度、TNM分期有密切关系.PC-3细胞存在PPAR γ表达,曲格列酮作用PC-3细胞后PPAR-γ表达呈剂量依赖性上调趋势:曲格列酮对PC-3细胞增殖有明显的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;曲格列酮呈剂量依赖性加速细胞凋亡.结论:PPAR-γ表达与前列腺癌的临床病理特征密切相关.曲格列酮通过激活PPAR-γ能在体外抑制肿瘤细胞生长并诱导其凋亡,提示PPARγ可能是前列腺癌治疗的一个新的分子靶点.     

阿帕替尼调控WWOX对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨阿帕替尼（Apatinib）是否通过包含氧化还原酶的WW结构域（WWOX）影响子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭。方法:噻唑蓝（MTT）比色法检测4 μmol/L、8 μmol/L、16 μmol/L、32 μmol/L Apatinib作用于子宫内膜癌细胞HEC-1 24 h、48 h、72 h后的细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、WWOX蛋白水平,Transwell小室法检测迁移细胞数、侵袭细胞数。在HEC-1中转染pcDNA3.1-WWOX,或转染si-WWOX并用16 μmol/L Apatinib进行处理,采用上述方法评估细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况。结果:Apatinib明显降低HEC-1细胞活性（P＜0.05）,呈剂量、时间依赖性;Apatinib显著增加HEC-1细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达量（P＜0.05）,呈剂量依赖性;Apatinib明显降低Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量（P＜0.05）,呈剂量依赖性;16 μmol/L Apatinib显著减少HEC-1细胞的迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量（P＜0.05）,明显提高E-cadherin、WWOX蛋白表达量（P＜0.05）。过表达WWOX明显降低HEC-1细胞中Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量、细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数（P＜0.05）,提高p21、Bax、E-cadherin、WWOX蛋白表达量及细胞凋亡率（P＜0.05）。抑制WWOX表达逆转了Apatinib对HEC-1细胞中Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量、细胞活性、迁移、侵袭的抑制作用,以及逆转了其对p21、Bax、E-cadherin、WWOX蛋白表达量、细胞凋亡的促进作用。结论:阿帕替尼通过调控WWOX表达,抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。     

雷公藤红素对人胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭和迁移的抑制作用

背景与目的：雷公藤红素（celastrol）是雷公藤的主要活性成分，现代研究发现其具有广泛的抗癌活性，对胰腺癌细胞凋亡有一定的促进作用。该研究旨在探讨celastrol对胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭和迁移的作用。方法：将PANC-1细胞分为PANC-1组、celastrol（5 μmol/L）组、celastrol（10 μmol/L）组和celastrol（20 μmol/L）组，分别用0、5、10和20 μmol/L的celastrol处理PANC-1细胞，细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）检测细胞增殖倍数，Transwell检测各组PANC-1细胞的侵袭能力，划痕实验检测各组细胞迁移能力。蛋白质印迹法（Western blot）检测Ki-67、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）的蛋白表达水平。结果：与PANC-1组比较，celastrol（5 μmol/L）组、celastrol（10 μmol/L）组和celastrol（20 μmol/L）组细胞增殖倍数明显降低，细胞增殖标记蛋白Ki-67的蛋白表达水平与PANC-1组比较也明显降低；同时，celastrol（5 μmol/L）组、celastrol（10 μmol/L）组和celastrol（20 μmol/L）组侵袭细胞数与PANC-1组相比明显减少；此外，与PANC-1组比较，celastrol（5 μmol/L）组、celastrol（10 μmol/L）组和celastrol（20 μmol/L）组划痕闭合率显著降低，VEGF和MMP-9的蛋白表达水平也显著低于PANC-1组。结论：Celastrol能抑制人胰腺癌细胞PANC-1增殖、侵袭及迁移。     

吡格列酮对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡的影响及分子机制研究

目的 探讨吡格列酮对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法 体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1,分别以吡格列酮（0 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、50 μmol/L）和吉西他滨（50 μmol/L）作用0 h、12 h、24 h、48 h、72 h后,采用CCK-8检测各时间点的细胞增殖情况,流式细胞仪检测72 h细胞周期及凋亡情况,4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）染色检测48 h细胞凋亡形态学变化,Western blot检测48 h细胞凋亡相关蛋白及MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达。结果 与0 μmol/L吡格列酮相比,吉西他滨及各剂量吡格列酮组细胞作用24 h、48 h、72 h的OD值均降低（P＜0.05）;48 h 的G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率、Bax及caspase-3、p-ERK蛋白表达均升高（P＜0.05）,而S期细胞比例、Bcl-2蛋白表达降低（P＜0.05）,且细胞逐渐收缩,细胞核逐渐碎裂。与50 μmol/L吉西他滨组相比,10 μmol/L吡格列酮组细胞作用24 h、48 h、72 h的OD值均升高（P＜0.05）,而50 μmol/L吡格列酮组均降低（P＜0.05）;10 μmol/L吡格列酮组细胞作用48 h 的G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率、Bax及caspase-3、p-ERK蛋白表达均降低（P＜0.05）,而50 μmol/L吡格列酮组均升高（P＜0.05）;10 μmol/L吡格列酮组细胞48 h 的S期细胞比例、Bcl-2蛋白表达均升高（P＜0.05）,而50 μmol/L吡格列酮组均降低（P＜0.05）。结论 吡格列酮能抑制人胰腺癌细胞株PANC-1增殖,诱导其凋亡,可能通过上调MAPK/ERK通路实现。     

利多卡因通过调控lncRNA TTN-AS1/miR-524-5p表达对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:研究利多卡因对骨肉瘤细胞MG-63增殖、迁移和侵袭的影响,并探索其作用机制。方法:使用1 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L浓度利多卡因处理MG-63细胞,MTT法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、p21、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达,qRT-PCR检测长链非编码RNA TTN-AS1（TTN-AS1）和微小RNA-524-5p（miR-524-5p）表达,starBase软件结合双荧光素酶报告实验分析TTN-AS1与miR-524-5p的靶向关系。MG-63细胞中转染si-TTN-AS1、miR-524-5p或pcDNA-TTN-AS1（并进行10 mmol/L利多卡因处理）,观察细胞的增殖、迁移、侵袭。结果:不同浓度利多卡因明显提高细胞增殖抑制率和p21蛋白表达量（P＜0.05）,显著减少迁移细胞数、侵袭细胞数和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量（P＜0.05）,均呈剂量依赖性。TTN-AS1可靶向调控miR-524-5p表达。抑制TTN-AS1表达与miR-524-5p过表达显著增加MG-63细胞的增殖抑制率和p21蛋白表达量（P＜0.05）,明显降低迁移细胞数、侵袭细胞数和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达量（P＜0.05）。TTN-AS1过表达逆转了利多卡因对MG-63细胞增殖、迁移、侵袭和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用,以及对miR-524-5p、p21蛋白表达的促进作用。结论:利多卡因通过调控lncRNA TTN-AS1/miR-524-5p表达抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和侵袭。     

曲格列酮增强乳腺癌细胞对表阿霉素敏感性的研究

背景与目的:过氧化物酶增殖体激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ,PPARγ)在乳腺癌组织中呈高表达,其特异性配体噻唑烷二酮(thiazolidinediones,TZD)类药物作用于肿瘤细胞后可抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡。本研究探讨TZD类药物曲格列酮的使用与雌激素受体(estrogenreceptor,ER)阴性乳腺癌细胞对表阿霉素化疗敏感性的关系。方法:通过MTT法和流式细胞仪检测曲格列酮、表阿霉素单独和联合使用时,对ER阴性人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S和MDA-MB-231增殖、凋亡的影响。Westernblot和划痕实验分别检测不同药物处理下,乳腺癌细胞中Bcl-2蛋白表达水平和细胞迁移能力的变化。结果:在4～24μmol/L浓度范围内,曲格列酮与表阿霉素协同抑制乳腺癌细胞的增殖,IC50是表阿霉素单独使用时的60%。曲格列酮和表阿霉素单独作用于乳腺癌细胞时并无明显的凋亡发生,而两种药物联合作用时,MDA-MB-435S和MDA-MB-231细胞的凋亡率分别为(5.48±0.45)%、(10.08±1.89)%。联合使用曲格列酮下调了Bcl-2蛋白的表达,降低了乳腺癌细胞的迁移能力。结论:曲格列酮不仅促进了表阿霉素对乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,而且明显抑制了乳腺癌细胞的迁移能力,从而增强乳腺癌细胞对表阿霉素的敏感性。     

白藜芦醇对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞增殖和凋亡影响观察

目的：研究白藜芦醇对人皮肤T细胞淋巴瘤（cutaneous T cell lymphomas,CTCL）Hut78细胞株体外增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法：用不同浓度的白藜芦醇（5、10和20μmol／L）作用于人皮肤CTCLHut-78细胞,24和48h后MTT检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;TUNEL末端标记法和Annexin V—FITC双标记流式法检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响。结果：经5、10和20μmol／L浓度的白藜芦醇处理24h后,细胞A值分别为1．202±0．094、0．568±0．019和0．535±0．033,与0μmol／LA值（1．272±1．107）比较,差异有统计学意义,P〈0．01。各浓度作用48h后,细胞A值分别为0．604±0．095、0．314±0．042和0．260±0．055,与0μmol／LA值（0．781±0．020）比较,差异有统计学意义,P〈0．01;与作用24h后同浓度A值比较,差异均有统计学意义,P〈0．01。随着时间和浓度的增加Hut-78细胞生长均受到不同程度的抑制,呈明显的浓度和时间依赖性。经5、lO和20／μmol／L浓度的白藜芦醇处理24h后,HUT-78细胞抑制率分别为（5．28±2．64）％、（53．52±10．86）％和（56．13±10．79）％,与0μmol／L抑制率（0）比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;HUT-78细胞凋亡率分别为92．35％、96．39％和98．56％,与0μmol／L凋亡率（55．7％）比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;各浓度作用48h后,HUT-78细胞抑制率分别为（22．85±10．98）％、（59．T7±5．44）％和（66．52±7．80）％,与0μmol／L细胞抑制率（O）比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;与作用24h后同浓度细胞抑制率比较,差异均有统计学意义,P〈0．01。结论：达到5μmol／L的白藜芦醇对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞产生明显的抑制增殖作用,白藜芦醇主要通过诱导HuT-78细胞凋亡,其中主要是早期凋亡抑制其增殖。     

Wnt／β-catenin信号转导通路与肺腺癌顺铂耐药作用机制研究

目的：探讨Wnt／β-catenin信号转导通路在肺腺癌顺铂耐药中的分子作用机制。方法：体外常规培养人肺腺癌A549细胞和其顺铂耐药A549／DDP细胞,取对数生长期的细胞用于实验。采用MTT法检测A549和A549／DDP细胞对顺铂的IC50;采用AnnexinV／PI法和Hoechst33342染色法检测顺铂处理后2种细胞的凋亡率;采用蛋白质印迹法检测2种细胞中β-catenin和Survivin的表达;采用siRNA干扰沉默pcatenin的表达,检测A549／DDP细胞的Ic5。值、细胞凋亡率及β-catenin和Survivin的表达。结果：顺铂对A549／DDP细胞的IC50值为（28．984±1．404）μmol／L高于A549细胞的（5．888±0．338）umol／L,t=27．696,P〈0．001;20umol／L顺铂诱导A549／DDP细胞凋亡率为（21．75±0．96）％,显著低于A549细胞的（39．38±0．88）％,t=23．474,P〈0．001。A549／DDP细胞中β-catenin蛋白的表达为1．890±0．060,显著高于A549细胞的1．063±0．035,t=20．595,P〈0．001;在A549／DDP细胞中Survivin蛋白表达量为1．107士0．061,明显高于A549细胞的0．503±0．025,t=15．814,P〈0．001。RNAi技术沉默β-catenin蛋白耐药性（14．615±0．939）gmol／L,显著低于未沉默β-cateninA549／DDP细胞的（28．984±1．404）μmol／L,t=14．732,P〈0．001;RNAi技术沉默pcatenin蛋白细胞凋亡率为（37．57±0．64）％,显著高于未沉默β-cateninA549／DDP细胞的（21．75±0．96）％,t=23．699,P〈0．001;RNAi技术沉默伊catenin蛋白下游靶基因Survivin蛋白的表达为0．527±0．065,显著低于A549／DDP组的1．027±0．025和瞬时转染阴性对照siRNA组的1．033±0．040,F=116．944,P〈0．001。结论：抑制Wnt／β-catenin信号转导通路的活性可以降低A549／DDP细胞对顺铂的耐药性。     

金雀异黄素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究

目的 探讨金雀异黄素（genistein,GEN）诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的分子机制.方法 用0、5、10、20 μmol/L GEN处理MDA-MB-231 细胞24 h.采用CCK-8、Hoechst 33342染色和流式细胞仪测定不同浓度GEN对 MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响.采用Western blotting检测不同浓度GEN处理前后MDA-MB-231细胞中Fas相关死亡域蛋白（FADD）、活性半胱天冬酶8（cleaved caspase-8）、Fas、FasL蛋白表达水平.采用实时RT-PCR分析不同浓度GEN处理前后MDA-MB-231细胞中Fas、FasL基因表达水平.多组均数比较采用方差齐性检验后进行单因素方差分析.结果 在GEN作用24 h后,0、5、10和20 μmol/L组对MDA-MB-231细胞增殖的抑制率分别为（3.00±1.41）%、（14.02±1.57）%、（27.5±1.52）%、（48.90±1.44）%.与0 μmol/L组相比,5、10和20 μmol/L组呈浓度依赖性增加（F=528.119,P=0.000）.两两比较显示：各浓度组之间差异均有统计学意义（P〈0.05）.0、5、10和20 μmol/L组诱导MDA-MB-231细胞的早期凋亡率分别为（3.40±0.40）%、（9.34±1.34）%、（19.26±0.93）%、（27.41±1.12）%.与0 μmol/L组相比,5、10和20 μmol/L组呈浓度依赖性增加（F=379.573,P=0.000）.两两比较显示：各浓度组之间差异均有统计学意义（P〈0.05）.Western blotting结果显示,与0 μmol/L组相比,其他浓度组经GEN处理的MDA-MB-231细胞FADD、cleaved caspase-8、FasL蛋白表达升高（F=368.621、456.744、419.129,P均=0.000）,Fas蛋白表达差异无统计学意义（F=0.800,P=0.528）;与10（μmol/L组相比,20 μmol/L组FasL蛋白表达降低有统计学意义（F=92.235,P=0.001）.实时RT-PCR结果显示,与0 μmol/L组相比,其他浓度组经GEN处理的MDA-MB-231细胞FasL mRNA表达升高（F=646.983,P=0.000）,Fas mRNA表达差异无统计学意义（F=1.556,P=0.274）;与10 μmol/L组相比,20 μmol/L组FasL mRNA表达降低有统计学意义（F=52.562,P=0.020）.结论 GEN通过上调Fas/FasL途径中FasL基因表达诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡.     

磁共振扩散加权成像在鉴别鼻咽癌放疗后鼻咽坏死与复发中的价值

目的评价磁共振扩散加权成像（DWI）以及表观扩散系数（ADC）值测量在鼻咽癌放疗后鼻咽坏死与复发鉴别诊断中的应用价值。方法2008年7月至2010年12月,35例经我院治疗并经病理诊断证实的鼻咽癌放疗后鼻咽坏死和同期随机选取的35例鼻咽癌放疗后复发的患者,均接受了常规MRI检查及DWI（扩散敏感系数,即b值采用：0s／mm2及800s／mm2）,分别测量放疗后鼻咽坏死灶及肿瘤复发区的ADC值,计算其平均值。结果鼻咽坏死灶在DWI上表现为不均匀的低信号,而肿瘤复发病灶表现为高信号。鼻咽坏死组及复发组ADC平均值分别为（1.073±0．0383）×10^-3mm2／s和（0．844±0．0309）×10^-3mm2／s;最大值分别为（1．728±0．0527）×10^-3mm2／s和（1．477±0．0675）×10^-3mm2／s。鼻咽坏死组ADC平均值及最大值均大于复发组,差异有统计学意义（t1=4．645,P〈0．001;t2=2．932,P〈0．005）。结论DWI以及ADC值测量在鼻咽癌放疗后鼻咽坏死与复发的鉴别诊断中具有重要价值,可作为常规MR序列的重要补充。     

罗勒多糖对卵巢癌肿瘤转移相关基因SEMA4C表达影响实验研究

目的：观察分析罗勒多糖对卵巢癌SKOV3细胞肿瘤转移相关基因SEMA4C表达的影响,揭示罗勒多糖抗卵巢癌转移的作用机制。方法：体外培养卵巢癌SKOV3细胞,实验分为5组,A组为不加罗勒多糖处理的空白对照组,B组（罗勒多糖100mg／L）、C组（罗勒多糖500mg／L）、D组（罗勒多糖1000mg／L）、E组（紫杉醇0．05μmol／L）为紫杉醇组;荧光实时定量PCR检测不同处理组细胞中SEMA4CmRNA的表达变化;免疫细胞化学分析不同处理组细胞中se—ma4C蛋白的表达差异。结果：SKOV3细胞中SEMA4CmRNA相对表达量,B组为（3．60±0．01）×10-4,C组为（3．04±0．34）×10-4,D组为（1I81±0．42）×10-4,E组为（5．56±0．14）×10-4,与A组（9．02±0．41）×10-4比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;B、C和D组与E组比较,差异有统计学意义,P〈0．01;SKOV3细胞中Sema4C蛋白表达平均光密度B组为9．64±0．21,C组为8．58±0．16,D组为6．15±0．38,E组为12．16±0．20,与A组的15．19±0．22比较,差异有统计学意义,P〈0．01;B、C和D组与E组比较,差异均有统计学意义,P〈O．01;罗勒多糖可以抑制卵巢癌细胞中SEMA4CmRNA及编码蛋白的表达,且随着药物浓度的增大,抑制作用越明显。结论：罗勒多糖可下调肿瘤转移相关基因SEMA4C的表达,可能是罗勒多糖抗卵巢癌淋巴道转移的新机制。     

STC-1蛋白对肾癌细胞生长平衡影响机制探讨

目的：研究斯钙素1（stanniocalcin1,STC-1）与缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）的相互作用,是否借助调节Ca2＋水平参与肾癌细胞生长调控。方法：构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,使用不同浓度STC-1蛋白干预转染后的肾癌细胞（转染组）和单纯肾癌细胞（非转染组）。MTT法检测各组细胞增殖情况;RT-PCR及ELISA法检测细胞内HIF-1α、STC-1基因及蛋白表达;荧光分光光度计检测细胞内Ca2＋水平。结果：非转染组和转染组肾癌细胞HIF-1α蛋白表达分别为8.3±1.2和15.1±0.9,t=24.18,P〈0.001;STC-1蛋白表达分别为7.2±0.9和10.8±1.1,t=8.90,P=0.003;提示转染HIF-1α的肾癌细胞内HIF-1α和STC-1表达显著提高。不同浓度STC-1溶液干预非转染组肾癌细胞24h后,对照组HIF-1α蛋白表达为8.3±0.5,低剂量组为7.8±0.7,中剂量组为5.3±0.4,高剂量组为4.2±0.3,F=171.726,P〈0.001,对照组STC-1蛋白表达为7.1±0.4,低剂量组为6.8±0.3,中剂量组为4.1±0.2,高剂量组为3.3±0.4,F=257.174,P〈0.001;对照组细胞内Ca2＋含量为95.7±8.6,低剂量组为60.3±5.5,中剂量组为48.6±6.3,高剂量组为33.7±4.2,F=198.931,P〈0.001,对照组细胞增殖活性为0.226±0.021,低剂量组为0.343±0.024,中剂量组为0.293±0.018,高剂量组为0.252±0.023,F=23.615,P〈0.001;不同浓度STC-1溶液干预转染组肾癌细胞24h后,对照组HIF-1α蛋白表达为15.3±1.6,低剂量组为14.6±1.1,中剂量组为10.1±0.9,高剂量组为8.6±0.8,F=135.696,P〈0.001,对照组STC-1蛋白表达为11.2±0.4,低剂量组为10.9±0.5,中剂量组为7.4±0.7,高剂量组为5.6±0.8,F=105.101,P〈0.001;对照组细胞内Ca2＋含量为65.5±6.7,低剂量组为40.1±3.4,中剂量组为30.7±4.6,高剂量组为17.7±3.3,F=136.621,P〈0.001;对照组细胞增殖活性为0.295±0.033,低剂量组为0.446±0.025,中剂量组为0.379±0.015,高剂量组为0.313±0.022,F=45.571,P〈0.001。提示STC-1蛋白可促进单纯肾癌细胞和转染后肾癌?     

Wnt3a 对非小细胞肺癌细胞生长的调控作用简

目的：观察重组人Wnt3a对非小细胞肺癌细胞生长的调节作用,为进一步探讨Wnt信号通路在非小细胞肺癌的作用提供实验依据。方法：本实验利用重组人Wnt3a处理H460、A549细胞系,通过自动细胞计数、软琼H酤铿觇溅实验、流式细胞周期分析,观察重组人Wnt3a处理对细胞生长和细胞周期的作用。结果：Wnt3a处理A549、H460细胞24h后,自动细胞计数结果显示细胞数上升显著[A549：（4．26±0．26）×10^5／ml vs（2．42±0．44）×10^5／ml,P〈0．01;H460：（3．98±0．21）×10^5／ml vs（2．07±0．10）×10^5／ml,P〈0．01];软琼脂克隆实验显示克隆形成效率显著提高[A549：（1．57±0．11）％vs（1．03±0．08）％,P〈0．01;H460：（1．53±0．11）％vs（0．79±0．10）％,P〈0．01];流式细胞仪细胞周期分析显示,Wnt3a处理组G0／G1期细胞比例下降,S期细胞比例上升。结论：在A549和H460细胞,重组人Wnt3a处理,可能调节细胞周期,促进细胞生长。     

SAHA对人卵巢癌SKOV3细胞转移潜能影响及其机制探讨

目的：观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸（suberoylan．1idehydroxamicacid,SAHA）体外对人卵巢癌SKOV3细胞转移潜能的影响,并探讨其可能机制。方法：体外应用SAHA作用于人卵巢癌SKOV3细胞,实验分为对照组、4μmol／LSAHA组、8／μmol／LSAHA组和12μmol／LSAHA组,划痕实验检测SKOV3细胞迁移能力,Tran—swell侵袭实验检测SKOV3细胞侵袭能力。蛋白质印迹法检测SKOV3细胞内组蛋白H4乙酰化水平,实时定量PCR方法检测SKOV3细胞uPA和uPAR基因ITIRNA表达。结果：经sAHA作用48h后,对照组以及4、8和12μmol／L组细胞Ac—H4表达量分别为0．10±0．04、0．21±0．05、0．40±0．05和0．72±0．04,Ac—H4表达量随sAHA剂量浓度增加而增加,P〈0．001;各组细胞划痕愈合率分别为（68．27±2．98）0A、（35．19±2．97）％、（18．82±2．96）％和（10．24±2．98）％,划痕愈合率随sAHA剂量浓度增加而降低,P〈0．001;各组细胞穿过Transwell滤膜的细胞数量分别为58．89±4．35、37．66±4．27、21．15±4．32和10．75±4．30,穿过Transwell滤膜的细胞数量随sAHA剂量浓度增加而减少,P〈0．001;各组细胞uPArnRNA表达分别为22．48±1．05、15．40±1．02、8．62±1．05和5．274±1．08,随着sAHA剂量浓度增加而降低,P〈O．001;各组细胞uPAR基因mRNA表达量分别为18．22±12、12．37±1．14、7．64±1．10和3．55±1．12,随SAHA剂量浓度增加而降低,P〈0．001。结论：SAHA可抑制人卵巢癌SKOV3细胞迁移和侵袭能力,提高组蛋白乙酰化水平,降低uPA和uPAR基因表达可能是其作用机制。     

非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯相关血液学因素分析

目的：探讨非霍奇金淋巴瘤患者发生骨髓侵犯与相关血液学因素的关系。方法：对55例初诊的非霍奇金淋巴瘤患者进行骨髓穿刺涂片细胞学检查和骨髓活体组织检查,并检测其血常规及其他外周血相关参数的情况,分析这些参数与骨髓侵犯的相关性。结果：淋巴瘤侵犯骨髓发生率为29.09％。淋巴瘤侵犯骨髓患者的血红蛋白和血小板分别为（10967±20.90）g／L和（148.93±96.79）×10^9／L,均低于无骨髓侵犯的患者[（120.31±15.21）g／L和（293.38±138.91）×10^9／L]（P〈0.05）;前者D-二聚体和β2-MG分别为（2671.73±2443.12）ng／ml和（5.76±3.62）mg／L,均高于后者（1224.29±1063.10）ng／ml和（3.28±1.59）mg／L）]（P〈0.05）。而淋巴瘤细胞白血病患者白细胞为（11.42±9.29）×10^9／L,FIB和LDH分别为（5.90±2.61）g/L和（818.33±1011.36）U／L,均高于淋巴瘤侵犯骨髓患者的水平[（5.73±2.07）×10^9／L,（3.64±1.29）g／L,（307.64±274.08）U／L]（P〈0.05）。结论：初诊的非霍奇金淋巴瘤患者,外周血象的异常、高纤维蛋白原血症以及高水平的血清D-二聚体、LDH、β2-MG,与发生骨髓侵犯相关,及时诊断淋巴瘤侵犯骨髓和淋巴瘤细胞白血病,为NHL诊治及预后判断提供指导。     

支架置入术治疗恶性低位胆道梗阻的临床价值

目的 探讨金属胆道支架置入术治疗恶性低位胆道梗阻的有效性、安全性.方法 32例恶性胆道低位梗阻患者(中位年龄61岁),术前经CT和磁共振胰胆管造影(magnetic resonance cholangiopancreatography,MRCP)证实为恶性胆道低位梗阻.其中,胆管癌12例,胰头癌11例,壶腹癌5例,转移癌2例,胆囊癌2例.32例患者行经皮经肝胆道穿刺,于胆总管中下端置入32枚自膨式金属胆道支架.结果 32例患者手术成功率100.0％,支架位置良好,胆汁引流通畅.术中无胆道出血、胆汁渗漏及胆道破裂等严重并发症.32例患者于术后7天复查肝功能,其血清总胆红素(total bilirubin,TB)由术前的(378.11±134.53) μmol/L下降至(166.10 ±74.37) μmol/L(P＜0.05);血清直接胆红素(direct bilirubin,DB)由术前的(219.14±86.37) μmol/L下降至(98.26 ±53.68) μmol/L(P＜0.05).29例于术后30天复查肝功能,其血清TB由术前的(356.78±118.21) μmol/L下降至(56.10±44.37)μmol/L;血清DB由术前的(219.14 ±86.37) μmol/L下降至(38.26±43.68) μmol/L,均P＜0.05.30例获得随访,随访1-42月(平均25.4月),9例再发支架内梗阻(30.0％),其中4例再行支架治疗,3例行导管引流治疗,2例未治疗死亡.十二指肠梗阻1例,行十二指肠支架治疗后缓解.生存期1-33月,平均生存期(11.56±2.14)月,中位生存期10.0月.结论 金属胆道支架置入术是治疗恶性低位胆道梗阻的安全、有效的方法.