流式细胞术分析106例急性髓细胞白血病免疫表型特点

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)的免疫表型特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门流式细胞术对106例初诊AML患者进行免疫表型分析。结果 106例AML患者中M_2最常见。(1)髓系抗原CD33、CD13和CD117在AML中高表达,阳性率依次为95.3%、92.5%和82.1%。CD64在M_3中阳性率最高为100%。CD14仅在M_4、M_5中表达,阳性率分别为60%和27.3%。(2)造血干/祖细胞分化抗原CD34、HLA-DR和CD38的阳性率分别为56.6%、54.7%和48.1%。M_3患者CD34和HLA-DR呈低表达。(3)淋系抗原CD4、CD56、CD7和CD19在AML患者中阳性率依次为34%、34%、20.8%和14.2%。结论 CD33、CD13和CD117是AML最常见的髓系标志。CD34、HLA-DR在M_3患者中低表达。     

FLT3-ITD阳性急性髓系白血病免疫表型及临床特征分析

目的：探讨FLT3-ITD阳性急性髓系白血病的临床特征及免疫表型特点。方法回顾性分析我科2013年6月—2015年6月收治的FLT3-ITD阳性及FLT3-ITD阴性急性髓系白血病患者的免疫表型及实验室特点,对其进行分析总结,并结合相关文献复习展开讨论。结果 FLT3阳性急性髓系白血病患者CD117表达率显著低于FLT3阴性患者,CD33、CD56、CD7的表达率显著高于FLT3阴性患者;与FLT3阴性患者相比较, FLT3阳性患者外周血白细胞计数及骨髓白血病细胞比例显著增高,而血红蛋白含量及血小板计数差别无统计学意义;FLT3阳性患者治疗反应率（OR）显著低于FLT3阴性患者。结论 FLT3-ITD阳性急性髓系白血病患者白血病细胞抗原表达紊乱,高表达淋系抗原CD56、CD7及髓系抗原CD33,低表达髓系抗原CD117;FLT3阳性急性髓系白血病患者易合并外周血白细胞及骨髓白血病细胞高,完全缓解率低,是急性髓系白血病预后不良因素。     

B细胞慢性淋巴细胞白血病38例免疫表型分析

目的探讨B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)免疫表型特点。方法采用流式细胞术分析38例B-CLL的免疫表型。结果 38例患者CD5、CD23阳性率分别为92.1%、94.7%,CD19、CD20阳性率分别为94.7%和97.4%,CD5及CD19共同阳性者占92.1%。结论对CLL患者进行免疫表型分析,对诊断和鉴别诊断有重要意义,并可为临床治疗和预后评估提供依据。     

急性白血病患者周期素Cyclin D1蛋白的测定及其临床意义

目的 研究急性白血病患者周期素Cyclin D1蛋白的表达情况并结合临床分析其意义。方法 采用免疫组化SP法,对48例急性白血病患者的骨髓进行Cyclin蛋白测定,其中急性非淋巴细胞白血病(ANLL)32例,急性淋巴细胞白血病(ALL)16例,男31例,女17例,年龄12～70岁,平均34．4岁,另有5例正常人骨髓。结果 正常人骨髓未见阳性染色。患者阳性率为31．3％(15/48),其中ANLL和ALL的阳性率分别为25．0％(8／32)和43．8％(7／16),两者差异无统计学意义。初治患者的阳性程度多为轻中度,而复发患者的阳性程度则多数较高。结论 Cyclin D1蛋白在急性白血病患者中存在过度表达的情况,其表达程度与临床病情进展程度有一定的关系,尤其与病情的复发关系较为密切。     

脑瘫患者骨髓间充质干细胞传代过程中细胞表型和所分泌细胞因子变化特点

 目的 分析脑瘫患者骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)的基本生物学特性,观察其在传代培养过程中的表型和所分泌的因子变化,为临床应用提供理论依据.方法 密度梯度离心法提取脑瘫患者的BMSCs,采用人淋巴细胞分离液分离BMSCs,在相同条件下观察各代细胞形态、生长情况,检测各代细胞的表型和分泌的细胞因子.结果 BMSCs在第3至第10代,CD29、CD44、CD106等表型的表达变化无统计学差异,CD54的表达变化最大,在第9代时最高.CD14、CD34、CD45和HLA-DR等细胞表型在各代骨髓间充质干细胞中表达均<5%;NGF、NT3、VCAM、ICAM-1、VEGF、BDNF等细胞因子的浓度变化无统计学差异,PGE2的变化需进一步研究予以确认.结论 在体外培养的条件下,8代以前的细胞生长形状稳定,可作为组织工程等临床应用的良好对象.     

人脂肪来源间充质干细胞的制备及其质量检验方法

 目的 研究人脂肪来源间充质干细胞(human adipose-derived stem cells, hADSCs)的制备及其质量检验方法 , 为临床研究提供安全合格的干细胞。方法 取50例人吸脂术抽取的脂肪, 剪碎, 用胰酶和胶原酶消化、分离、培养, 并按照《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》对其进行细胞形态、数量、活率、无菌、支原体、人源特定病毒及猪源病毒、内毒素、免疫抑制活性、分化能力、免疫表型等检测及染色体核型。结果 50例hADSCs;细菌、内毒素检测阴性, 无内外源致病菌;干细胞免疫表型检测CD90、CD105表达阳性, 阳性率＞95%, CD34 、CD45和HLA-DR表达阴性, 阳性率<2%;具有成骨、成脂分化潜能;能抑制异体淋巴细胞的增殖。间充质干细胞活性冻存前≥92％, 冻存复苏后≥82％。结论 按照本工艺及标准制备的hADSCs符合质量控制标准, 为同类干细胞制备及其检定过程标准化提供了试验依据。
     

急性非淋巴细胞性白血病细胞共刺激分子的表达

目的：检测急性非淋巴细胞白血病患者白血病细胞表面MHC—Ⅱ类分子和共刺激分子的表达情况。方法：采集骨髓中白血病细胞大于70％的27例初诊或复发息者骨髓细胞。荧光抗体标记。应用流式细胞仪进行HLA—DR、CD80(B7-1)和CI)和(B7—2)免疫标记检测。结果：27例病人除M3型表达明显低于其他各型外。HLA—DR抗原的表达均较高。其中M2型最高为90％；CD80阳性率很低，最高为M1型只有5％。其余均在l％～3％之间。CD86的表达高于CD80，最高为M5型为48％，最低为M6型为11％。结论：白血病细胞表面共刺激分子表达以CD80缺乏为主。     

原代白血病细胞IL-6受体α表达的实验研究

目的：分析不同类型原代白血病细胞IL-6R基因及IL-6R蛋白的表达情况。方法：采用RT-PCR方法对取自29例白血病患者的原代白血病细胞和8例健康人外周血单个核细胞的IL-6R基因表达情况进行了分析，并应用原位杂交技术和免疫组织化学方法对细胞表面的IL-6受体蛋白进行了检测。结果：20例急性髓细胞白血病均明显表达IL-6R mRNA；9例急性淋巴细胞白血病中有2例为阳性，其余7例为阴性；8例正常人PBMC中6例阴性。2例有弱表达。免疫组化和原位杂交结果与RT-PCR实验结果相一致。结论：IL-6R可作为急性髓系白血病免疫治疗的候选靶位点。     

iNOS、CD34在喉鳞状细胞癌组织中的表达与血管形成的关系

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和CD34在喉鳞状细胞癌中的表达及其发病过程中的作用。方法采用免疫组化Elivision法检测30例喉鳞状细胞癌、10例声带非典型增生中iNOS和CD34的表达,并检测MVD。结果30例喉鳞状细胞癌中iNOS的阳性表达率为80.33%(25/30),声带非典型增生中iNOS的阳性表达率为10%(1/10)。CD34在喉鳞状细胞癌和声带非典型增生的阳性表达率分别为80%(24/30),30%(3/10)。iNOS、CD34阳性表达两组间差异有统计学意义(P<0.025)。喉鳞状细胞癌和声带非典型增生中微血管密度(MVD)分别为43.45±10.06、21.34±6.31,两组间差异有显著统计学意义(P<0.001)。结论iNOS、CD34在喉鳞状细胞癌中的高表达,提示iNOS、CD34可促进血管形成,可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展及侵袭转移有关。因此,选择性抑制iNOS和CD34可望成为基因治疗喉鳞状细胞癌的新思路。     

CD7在非M3急性髓系白血病中表达及其意义

目的探讨CD7在非M3急性髓系白血病患者中的表达及其对患者预后的意义。方法选取2011—2015年收治的198例原发性非M3急性髓系白血病患者,应用流式细胞术检测骨髓样本中白血病细胞中CD7的表达,根据结果将患者分为CD7~+组与CD7~-组。回顾性分析两组患者的临床与实验室检查特点及生存状况等资料。结果 CD7在非M3急性髓系白血病患者中的表达比例为34.8%;CD7~+组发病年龄(49岁)高于CD7~-组(44岁)、白细胞数(29.5×10~9个/L)高于CD7~-组(11.7×10~9个/L)、遗传学危险度分层差于CD7~-组,差异均有统计学意义(P<0.05);但两组诱导缓解率、3年无复发存活率、5年总存活率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);移植可明显改善两组患者预后。结论 CD7与非M3急性髓系白血病部分高危因素相关,但不能作为独立预后因素。     

HLA-DR/CD14在外周血单核细胞中的表达及其临床意义

目的 探讨外周血单核细胞表面HLA-DR/CD14的表达率及其临床意义.方法 收集2008年4月-2009年4月的住院患者140例,其中ICU急重症疾病组101例,其他疾病组39例,以同期20名健康体检者为正常对照组,应用流式细胞术检测各组外周血单核细胞表面HLA-DR/CD14表达率,并测定急重症疾病组C反应蛋白(C...     

造血干细胞移植治疗飞行人员急性白血病（摘要）

目的采用造血干细胞移植治疗4例空军飞行人员急性白血病,其中3例为急性非淋巴细胞性白血病,1例为急性淋巴细胞性白血病。方法自1993～2003年4例急性白血病飞行员接受造血干细胞移植治疗,3例接受自体外周血干细胞或自体骨髓移植,预处理方案为环磷酰胺（CY）／全身照射（TBI）,1例接受半相合异基因骨髓移植,预处理方案为CY／TBI／阿糖胞苷/噻替哌。     

脓毒症休克患者人类白细胞抗原动态观察

目的动态观察脓毒症休克患者CD14~+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR~+/CD14~+)的表达,评价脓毒症休克患者的免疫状态。方法选择2016年3—12月中国医科大学附属盛京医院重症监护病房收治的脓毒症休克患者40例为研究对象,根据患者最终结局是否病死分为存活组(n=27)与病死组(n=13)。分别抽取两组患者入院1、4、7 d外周静脉血,用流式细胞仪检测HLA-DR~+/CD14~+的表达情况,并进行脓毒症相关性器官衰竭(SOFA)评分。结果动态监测第1天,两组的HLA-DR~+/CD14~+及SOFA评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);但从动态监测第4天开始,存活组HLA-DR~+/CD14~+高于病死组(P<0.05),SOFA评分低于病死组(P<0.05);动态监测第7天,病死组HLA-DR~+/CD14~+较存活组明显下降(P<0.01),SOFA评分明显高于存活组(P<0.01)。两组SOFA评分与HLA-DR~+/CD14~+呈负相关(P<0.01)。结论 HLA-DR~+/CD14~+持续低表达,说明脓毒症休克患者可能处于免疫抑制状态,其可能是脓毒症休克患者病死的危险因素之一,对评价脓毒症休克患者的免疫状态有一定指导意义。     

Skeletal changes in acute lymphoblastic leukemia in children. Incidence and prognostic significance

119 children with acute lymphoblastic leukemia at onset underwent radiography of the whole body in order to determine whether initial radiological bone lesions were correlated with subsequent clinical course. Radiological findings were divided into three groups: 101 children (84.8%) had no bone involvement (group 0); 10 had bone changes compatible with acute lymphoblastic leukemia, such as slight metaphyseal transverse lucent bands with or without diffuse demineralization (group 1); 8 had bone changes, such as periosteal reaction with or without intramedullary osteolytic mottling. Bone involvement was not correlated with prognostic factors. Furthermore there was no significant correlation between bone changes and complete remission or survival.     

非小细胞肺癌中Kiss-1及CD34表达的临床意义

目的测定非小细胞肺癌组织中Kiss－1、CD34的表达,研究其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测60例非小细胞肺癌组织中Kiss－1的表达及CD34的分布情况,分析其与非小细胞肺癌临床病理的关系及其相关性。结果Kiss－1与非小细胞肺癌的临床分期、淋巴结转移呈负相关。CD34与非小细胞肺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移呈正相关。Kiss－1阳性表达组中CD34分布明显低于Kiss－1阴性表达组。结论Kiss－1及CD34在非小细胞肺癌发生、发展中发挥重要作用。联合检测可预测非小细胞肺癌的浸润、转移及判断预后。     

丙泊酚持续小剂量镇静对大面积烧伤患者CD14~+单核细胞HLA-DR表达的影响

目的 探讨大面积烧伤患者CD14+单核细胞HLA-DR抗原的表达规律及丙泊酚持续小剂量镇静对HLA-DR抗原表达的影响.方法 选取2010年3月-2011年11月收治的烧伤而积大于30％ TBSA的严重烧伤患者30例,其中17例给予常规治疗(常规治疗组),13例除常规治疗外还应用丙泊酚持续小剂量镇静治疗(丙泊酚治疗组),分别于镇静治疗前及治疗后第1、3、5、7天抽取外周静脉血,流式细胞仪检测CD14+单核细胞表面HLA-DR抗原表达情况.另取20例健康体检者作为健康对照.结果 大面积烧伤患者入院24h内CD14+单核细胞表面HLA-DR抗原表达率(25.07％±14.83％)显著低于健康对照组(76.45％±7.96％,P＜0.01).常规治疗组治疗后第3、5天CD14+单核细胞表面HLA-DR抗原表达率(分别为27.76％±11.36％、27.11％±14.49％)明显低于丙泊酚治疗组(分别为35.44％±11.55％、37.47％±15.46％),差异有统计学意义(p＜0.05),治疗前及治疗后第1、7天两组比较无统计学差异.结论 丙泊酚可能通过抑制应激激素的过度释放而减轻烧伤患者的过度应激反应,进而改善大面积烧伤患者的免疫功能.     

γ-catenin在白血病细胞中的表达

目的检测白血病骨髓标本及白血病细胞株中γ-catenin的表达情况,探讨γ-catenin在白血病细胞中的作用。方法以RT-PCR检测76例白血病骨髓标本、8例正常骨髓标本和白血病细胞株K562、HL-60、U-937、Jurkat中γ-catenin的mRNA表达情况,以Western blot和免疫细胞化学法检测上述白血病细胞株中γ-catenin蛋白表达及其分布情况。结果正常骨髓标本中γ-catenin表达阳性率为0（0/8）,急性髓细胞白血病（AML）骨髓标本中γ-catenin表达阳性率为40.0%[12/30,其中M2型的阳性率为50.0%（7/14）],慢性髓细胞白血病（CML）骨髓标本中γ-catenin表达阳性率为13.6%（3/22）,急性淋巴细胞白血病（ALL）和慢性淋巴细胞白血病（CLL）骨髓标本中γ-catenin表达阳性率均为25.0%（3/12）。白血病组γ-catenin表达阳性率与正常组相比,AML组有显著性差异（P〈0.05,其中M2型最为显著）,其余各组均无显著性差异（P〉0.05）。RT-PCR及免疫组化检测可见HL-60和K562细胞γ-catenin呈强阳性,U-937和Jurkat细胞呈弱阳性表达,且γ-catenin主要表达于细胞质中。Western blot检测见K562和HL-60细胞γ-catenin呈阳性表达,而U-937和Jurkat细胞未见表达。结论作为细胞内信号传导分子,γ-catenin表达于AML组、HL-60及K562细胞中,可能与急性髓细胞白血病（特别是M2型）的发生有关。