四物汤及其活性单体对血虚证小鼠的补血作用

目的:研究四物汤及其活性单体芍药苷和川芎嗪对辐射致血虚证小鼠的补血作用。方法:采用3.5Gy60Coγ射线全身1次性照射制备小鼠血虚证模型,外周血白细胞计数,骨髓集落细胞培养,计数CFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-mix,测定胸腺指数和脾指数。结果:四物汤10g/kg、芍药苷26.5 mg/kg和川芎嗪11.0 mg/kg均显著升高血虚证小鼠外周血白细胞数量和骨髓集落细胞数量,四物汤显著提高胸腺指数;四物汤和川芎嗪显著提高脾指数。结论:四物汤、芍药苷和川芎嗪均具有补血作用,其中四物汤作用最显著,川芎嗪对脾指数的恢复作用最显著。     

乙酰苯肼致血虚证模型小鼠的证候物质基础初探

目的研究乙酰苯肼引起的血虚证模型小鼠证候可能的物质基础。方法以雄性ICR小鼠为对象,采用乙酰苯肼170 mg/kg皮下注射,第1天和第4天各1次制作血虚证模型,并设立正常对照组。动态观察小鼠体重变化,显微镜下观察血液细胞与股骨骨髓细胞,取肾脏、肾上腺和骨髓分别抽提RNA,以实时荧光定量PCR技术检测相关基因表达、以ELISA方法检测血清皮质酮含量。结果与正常对照组比较,乙酰苯肼小鼠造模3天后体重显著下降(P<0.05),小鼠呈现虚弱征象,小鼠脾脏代偿性增大而胸腺却明显萎缩(P<0.01)。乙酰苯肼组小鼠血液红细胞形态异常、正常红细胞数量减少、白细胞代偿性增多;骨髓成熟的环状核细胞减少。与正常对照组比较,乙酰苯肼组小鼠骨髓IL-5和IL-6基因表达显著升高(P<0.05),而巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、IL-1b和IL-7基因表达显著下降(P<0.05);肾脏促红细胞生成素(Epo)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和M-CSF基因表达也显著升高(P<0.05,P<0.01),而粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因表达则被乙酰苯肼抑制(P<0.05);肾上腺Cyp21a1与Cyp11b1基因表达显著升高(P<0.05);小鼠血清皮质酮含量明显升高(P<0.01)。结论乙酰苯肼所复制的证候以血虚证为主,脾脏肿大、肾脏Epo基因代偿性高表达以及继发肾上腺皮质功能虚性亢奋是该证候物质与功能变化最突出特征。     

化痰、温阳法对慢性应激大鼠IL-1β、IL-2及下丘脑CRHmRNA、垂体ACTHmRNA基因表达的影响

目的:通过观察化痰、温阳方药对慢性心理应激大鼠白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素2(IL-2)及下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRHmRNA)、促肾上腺皮质激素(ACTHmRNA)基因表达的影响,研究中药复方对慢性应激免疫内分泌的调节作用.方法:将大鼠分为5组:正常组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、半夏厚朴汤组、桂枝甘草龙骨牡蛎汤组,观察各组大鼠的胸腺指数、脾指数及肾上腺指数,采用放免法测定各组大鼠血清IL-1β、IL-2的含量,原位杂交法观察下丘脑CRHmRNA、垂体ACTHmRNA的基因表达的变化.结果:与正常组相比,慢性心理应激后胸腺指数、肾上腺指数、脾指数降低(P＜0.01),大鼠血清IL-1β升高(P＜0.05,P＜0.01),IL-2降低(P＜0.05),CRHmRNA、ACTHmRNA表达有增强趋势.两中药组与模型Ⅰ组、模型Ⅱ组相比:半夏厚朴汤组显著性升高胸腺指数、肾上腺指数、脾指数(P＜0.05,P＜0.01),降低IL-1β(P＜0.05),升高IL-2(P＜0.05),使CRHmRNA表达降低的趋势;桂枝甘草龙骨牡蛎汤的脾指数显著升高(P＜0.01),胸腺指数、肾上腺指数无显著变化(P＞0.05),IL-1β的含量水平降低(P＜0.05),CRHmRNA、ACTHmRNA表达有降低趋势.结论:半夏厚朴汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤作用于慢性心理应激大鼠细胞因子及下丘脑-垂体-肾上腺轴的不同环节,调节应激后的内分泌免疫.     

四物汤对放射线致血虚证小鼠骨髓Epo和G-CSF基因表达的影响

目的:考察四物汤对放射线致血虚证小鼠的生血作用及对骨髓Epo,G-CSF基因表达的影响,为阐明四物汤补血作用的分子机制提供依据。方法:采用3.5Gy⁶⁰Coγ射线全身1次性照射,制备小鼠血虚证模型;检测外周血象;骨髓集落培养观察并计数CFU-GM,BFU-E,CFU-E,CFUmix;RTPCR检测骨髓Epo和G-CSF基因表达。结果:四物汤显著升高放射线致血虚证小鼠外周血白细胞数量和骨髓CFUGM,BFUE,CFUE,CFUmix数量,上调骨髓Epo和GCSF基因表达。结论:四物汤促进骨髓细胞Epo和G-CSF基因的表达可能是其生血作用的机制之一。     

盐知母多糖的抗炎作用研究

目的:通过建立小鼠炎症模型,探讨盐知母多糖的抗炎作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,观察盐知母多糖对模型小鼠脾指数和胸腺指数的影响,小鼠耳组织HE切片染色,观察肿胀程度、炎性细胞,以及小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量变化。结果:盐知母多糖中、高剂量均能显著降低小鼠耳肿胀率(P0.05,P0.01)、耳肿胀程度及血清免疫因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量(P0.05,P0.01);盐知母多糖低、中、高剂量能显著降低小鼠脾指数(P0.05,P0.01)。结论:盐知母多糖具有抗炎消肿的作用。     

四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的:探讨四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响及机制。方法:实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、四物汤组和阳性药对照组。除正常对照组外,其余三组小鼠分别于给药后第2天、第5天皮下注射乙酰苯肼每日20 mg/kg、40 mg/kg,从第5天起,每日腹腔注射环磷酰胺40 mg/kg,连续4 d,制备血虚证小鼠模型。利用血细胞计数仪、流式细胞术和蛋白免疫印迹技术分别检测各组小鼠外周血象、骨髓细胞凋亡率及骨髓细胞Bcl-2蛋白表达。结果:与模型对照组相比,四物汤组血红细胞数升高非常显著(P0.01),白细胞数和血红蛋白含量均无显著变化(P 0.05);四物汤组小鼠骨髓细胞凋亡率下降非常显著(P0.01),Bcl-2蛋白表达量显著增加(P0.05)。结论:四物汤能够促进小鼠骨髓细胞中Bcl-2蛋白的表达,抑制骨髓细胞凋亡,提高外周血象,此可能是其发挥补血作用的机制之一。     

补康灵对环磷酰胺模型小鼠造血和免疫功能的影响

目的:观察补康灵对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫功能的影响。方法:建立环磷酰胺致小鼠骨髓抑制模型,通过检测白细胞、红细胞、血小板计数、CD4+/CD8+、IL-2、胸腺指数和脾脏指数,探讨补康灵对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫功能的影响。结果:补康灵可明显升高模型小鼠的白细胞、红细胞、血小板计数、CD4+/CD8+、IL-2、胸腺指数、脾脏指数,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:补康灵对环磷酰胺致小鼠造血功能低下有显著的促进恢复作用,并能增强免疫功能。     

加味止嗽散对过敏性哮喘小鼠抗氧化和免疫调节的作用

目的研究加味止嗽散有效部位群(MZC)的抗氧化和免疫调节作用。方法采用卵蛋白(OA)和氢氧化铝[Al(OH)3]混合液制作过敏性哮喘小鼠模型,观察MZC对动物血清和肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响;并取其脾细胞进行体外培养,以ELISA法测定培养上清液中白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量。取正常小鼠,分别给予MZC和地塞米松,称免疫器官重量,计算小鼠脾体指数和胸腺指数。结果哮喘模型组小鼠体内的SOD和IFN-γ的含量明显低于正常对照组(P<0.01),MDA和IL-4的含量明显高于正常对照组(P<0.01),MZC治疗组剂量依赖性地升高小鼠血清和肺组织中SOD和IFN-γ的含量(P<0.05或P<0.01),降低小鼠血清和肺组织中MDA和IL-4的含量(P<0.05或P<0.01)。与正常组小鼠比较,MZC组小鼠脾体指数和胸腺指数略有增加但无明显差异。结论MZC平喘作用可能与其清除体内氧自由基和调节机体免疫功能的作用有关。     

中药复方双术油抗肿瘤机制的研究

目的:探讨复方双术油(BELY)体内外抗肿瘤作用及其机制.方法:设置空白组、阴性对照组、分别采用CCK-8法检测BELY(1 00,80,60,40,20,10,5 mg·L-1)对肿瘤细胞株K562,乳腺癌细胞系MDA-MB-231,人结直肠腺癌细胞LOVO和人肝癌细胞HepG2的抗增殖作用;建立小鼠S180及H22皮下肿瘤模型,设空白组(NS)、溶媒对照组(1％DMSO)和顺铂组(DDP,1 mg·kg-1)、BELY低、中、高剂量组(100,200,400 mg· kg-1).DDP ip给药,其余ig给药.末次给药24 h后颈椎脱臼处死小鼠,剥取瘤块、胸腺和脾脏并称重,计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数;ELISA法测定移植瘤血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,探讨BELY对荷瘤小鼠免疫功能的影响;流式细胞仪测定BELY对荷瘤小鼠外周血CD4+/CD8+的影响.结果:BELY对HepG2,K562,Lovo,MDA231均有一定的生长抑制作用,并有良好的量效关系.BELY显著抑制S180和H22的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数、脾指数和体重.与空白组比较,BELY可明显升高小鼠血清中IL-2,IL-6,IL-12和TNF-α的水平,外周血CD4+/CD8+明显升高(P＜0.01或P＜0.05).结论:BELY既可以抑制肿瘤细胞生长,又可通过增强免疫从而达到双相抗肿瘤的作用.     

补血益母丸对气血双虚模型小鼠的药效作用研究

目的:探讨补血益母丸对气血双虚模型小鼠的作用。方法:以放血和环磷酰胺并用建立气血双虚小鼠模型,模型建立后,连续给予补血益母丸1.82、7.28 g/kg 10 d进行干预。末次给药后,检测小鼠负重游泳时间和全血乳酸含量;动物处死前,检测小鼠游泳后血尿素氮的含量;采用摘眼球法取血行血常规检测;摘取小鼠胸腺和脾脏并称重,计算脏器指数;部分脾脏在4%多聚甲醛中固定后行HE染色观察脾脏形态;部分脾脏用于Western blot实验检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素2(IL-2)蛋白表达情况;取小鼠右腿骨髓,检测骨髓有核细胞。结果:与正常对照组相比,模型对照组出现活动减少,耳发白,呼吸短促等症状,小鼠负重游泳时间显著缩短(P<0.01),脾指数和胸腺指数均明显降低(P<0.05或P<0.01),且血乳酸和血尿素氮含量明显升高(P<0.05或P<0.01);骨髓有核细胞显著减少(P<0.01),血中红细胞数、白细胞数和血红蛋白含量均显著降低(P<0.01);脾脏结节和淋巴细胞数显著减少(P<0.01),红、白髓界线不明,淋巴结和红髓中有广泛的局灶性纤维化;脾脏中IL-2蛋白表达明显下调(P<0.01),TNF-α蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型对照组相比,乳酸亚铁10 ml/kg组、四物汤12 g/kg组、补血益母丸1.82 g/kg、7.28 g/kg组小鼠负重游泳时间均显著延长(P<0.01),脾指数和胸腺指数均明显升高(P<0.01);血乳酸含量均明显降低(P<0.01),骨髓有核细胞显著增多(P<0.01),血中红细胞数、白细胞数和血红蛋白含量均明显升高(P<0.01);脾脏结节和淋巴细胞数明显增多(P<0.01),红、白髓较清晰;小鼠脾脏中IL-2蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),补血益母丸7.28 g/kg组血尿素氮含量明显降低(P<0.01),小鼠脾脏中TNF-α蛋白表达下调(P<0.05)。结论:补血益母丸能有效地抗气血双虚证候。这可能与其改善骨髓造血功能,提高气血双虚模型小鼠外周血细胞数和提高免疫功能有关。     

中药清热利湿饮对HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA及分泌IL-8、IL-10的影响

目的:揭示中药清热利湿饮对人永生化角质形成细胞HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的作用机制。方法:以HaCaT细胞为研究对象,分别采用RT-PCR技术及ELISA方法观察中药清热利湿饮提取液对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的影响。结果:清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-6mRNA和IL-8mRNA的表达有下调作用,在药物浓度为10g/L和12.5g/L时,HaCaT细胞IL-10mRNA的表达量增强较为明显,与TNF-α诱导活化组相比,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-8的分泌有不同程度的抑制作用,但对IL-10的影响不明显。结论:清热利湿饮可下调IL-6mRNA、IL-8mRNA的表达,上调IL-10mRNA的表达,且此作用随药物浓度的升高而增强;同时可降低细胞IL-8的分泌,但对IL-10的分泌无明显的作用。     

截哮口服液对RSV感染小鼠IL-4,IL-5的影响

目的：观察截哮口服液对RSV感染小鼠血清中IL-4、IL-5的影响。方法：将70只小鼠随机分成截哮口服液高剂量组、中剂量组、低剂量组、病毒唑组、模型组、正常组，用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组小鼠血清中IL-4、IL-5的水平。结果：截哮口服液各剂量组与病毒唑组比较IL-4均有显著差异（P〈0．05）；中剂量组、病毒唑组与模型组比较IL-4有显著差异（P〈0．05）。中剂量组与病毒唑组比较IL-5有显著差异（P〈0．05），中剂量组和病毒唑组与正常组比较IL-5有显著差异（P〈0．05），中剂量组与高剂量组、低剂量组、模型组比较IL-5有显著差异（P〈0．05）；高剂量组和低剂量组比较IL-5无显著差异。结论：截哮口服液对呼吸道合胞病毒感染小鼠血清中IL-4、IL-5有降低作用。     

IL-6、IL-8、TNF与慢性肾小球肾炎中医证型关系探讨

目的 :探讨慢性肾小球肾炎 (CGN)血、尿中化学指标与中医证型的关系。方法 :采用放射免疫法检测了血、尿中IL - 6、IL - 8、TNF浓度。结果显示 :血IL - 6、TNF和尿IL - 8浓度在CGN四证型间有显著性差异。结论 :血IL - 6、TNF、尿IL - 8,可作为CGN中医证型区分的客观指标。     

右归丸对实验性自身免疫性脑脊柱炎小鼠IL-23/IL-17炎性轴的影响

目的:探讨右归丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)IL-23/IL-17炎性轴的影响。方法:建立髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)诱导C57BL/6小鼠EAE模型,随机分为模型组、泼尼松组,右归丸组,并设正常对照组。观察小鼠的发病情况、神经功能评分及体重变化,HE染色观察CNS病理损伤程度,实时荧光定量PCR法检测小鼠脑组织IL-23 p19、IL-17 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组脑组织IL-23 p19、IL-17mRNA表达显著升高,泼尼松及右归丸组小鼠脑组织IL-23 p19、IL-17的mRNA表达比模型组低(P<0.01)。结论:右归丸能够抑制IL-23/IL-17炎性轴而起到抗炎治疗作用。     

大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白细胞介素-1和白细胞介素-2的影响

目的在分子水平上探讨大蓟总黄酮的抗肿瘤机制，主要研究大蓟总黄酮对荷瘤小鼠白介素-1（IL-1）和白介素-2（IL-2）的影响。方法通过RT-PCR方法半定量检测肿瘤小鼠细胞产生IL-1 mRNA和IL-2 mRNA的量来研究大蓟总黄酮能否促进肿瘤小鼠细胞产生IL-1 mRNA和IL-2 mRNA。结果大蓟总黄酮能够极为显著地提高肿瘤小鼠细胞产生IL-1和IL-2的转录水平（P〈0．01）。结论大蓟总黄酮能明显地促进肿瘤小鼠IL-1和IL-2 mRNA的表达。     

黄芪注射液对病毒性心肌炎TNF-α、IL-1和IL-6的影响

目的：探讨病毒性心肌炎（VMC）患者血清肿瘤坏死因（TNF—α）、白细胞介素1（IL—1）、白细胞介素6（IL—6）的变化及黄芪注射液防治作用。方法：治疗组24例用黄芪注射液治疗，对照组24例用辅酶A、ATP甲等治疗。结果：治疗后治疗组血清TNF—α、IL—1和IL—6水平显著下降（P〈0．01），与健康组无显著差异；对照组治疗前后TNF—α、IL—1和IL—6水平无差异，并显著高于健康组（P〈0．01）。结论：黄芪注射液可降低TNF—α、IL—1和IL—6，对病毒性心肌炎有良好的防治作用。     

豆根管食通口服液对食管癌患者近期疗效及血清细胞因子IL-6 IL-10的影响

目的观察豆根管食通口服液治疗食管癌的临床疗效及其对免疫功能的影响,并探讨其分子作用机制.方法采用随机、对照的方法,重点观察了治疗前后患者的一般状况、症状体征、生活质量、细胞因子等的变化情况.结果治疗前后两组比较,其一般状况、症状体征、生活质量、临床疗效经各评分评定均有显著性差异(P＜0.01),细胞因子比较有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05).结论豆根管食通口服液能明显改善食管癌患者的一般状况和症状体征,提高患者的生活质量,减轻患者的临床症状,能明显提高食管癌患者的血清IL-6、IL-10,提高机体的免疫功能等.     

中医药及IL-18与不稳定型心绞痛

胸痹病机特点本虚标实,本虚涉及气血阴阳虚损,标实多为瘀血、痰浊;中药治疗可显著降低冠心病炎性因子血清IL-18浓度。炎症因子IL-18参与了冠状动脉粥样硬化的病理生理过程,水平的变化将会影响心血管事件的发生及发展。目前还缺少有关IL-18炎性因子在UA中动态变化的长期大规模临床观察,但是抗炎性因子治疗在理论上为UA提供了一种新的治疗策略,如能有效抑制IL-18炎性因子表达,可能会减少不良心血管事件发生,改善UA患者的预后。中医药治疗不稳定型心绞痛及血清白介素-18获得的疗效值得肯定,值得进一步研究探讨。     

基于IL-2、IL-8水平变化的湿邪致病机理研究

目的：通过湿邪致病大鼠IL-2、IL-8水平变化探讨湿邪致病与细胞免疫功能的关系。方法：将40只SD大鼠按随机数字表随机分为正常组、内湿组、外湿组、内外湿组及疲劳组5组,分别造模20天后,采用放射免疫（RLA）方法检测其IL-2、IL-8水平。结果：全组比较,IL-2和IL-8水平在各组的差异有非常显著意义（F=3．102,P=0．028;F=2．657,P=0．049）。两两比较,外湿组和内外湿组的IL-2水平都比正常组明显升高（P=0．005,P=0．028）,外湿组的IL-2水平比内湿组明显升高（P=0．015）;外湿组的IL-8水平明显升高,与正常组、内湿组、内外湿组相比较差异有显著性（P=0．036,P=0．004,P=0．034）。结论：外湿组的IL-2和IL-8水平比内湿组和正常组明显升高,提示湿邪致病初期外湿与机体的免疫激活和炎症反应密切有关,此阶段机体可能对外在湿邪较内在湿邪的刺激更为敏感,其机理有待于进一步研究。     

萆菟颗粒对慢性非细菌性前列腺炎患者前列腺液中IL-6和IL-22的影响

目的:研究萆菟颗粒对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)患者前列腺液中细胞因子IL-6、IL-22水平的影响。方法:选择25例慢性非细菌性前列腺炎患者为治疗组和12例健康人为对照组,治疗组采用萆菟颗粒治疗,疗程12周,分别对治疗组治疗前后及对照组取前列腺液(EPS),用ELISA法检测IL-6、IL-22的水平。结果:治疗组治疗前IL-6水平高于对照组(P<0.05),IL-22水平无差异(P>0.05);治疗后IL-6水平较治疗前降低(P<0.05),IL-22水平无差异(P>0.05)。结论:萆菟颗粒能够降低CAP患者前列腺液中IL-6水平,具有调节前列腺局部免疫反应作用。而IL-22与CAP无明显相关性。