应用Ussing Chamber技术评价甘草与海藻的配伍对大鼠肠黏膜P-gp的影响

 目的 评价甘草海藻配伍对大鼠肠黏膜P-糖蛋白（P-gp）的影响。方法 通过对大鼠口服甘草煎液、海藻煎液、甘草海藻合煎液及其合并液、生理盐水1周后,使用Ussing Chamber技术,评价罗丹明123（R123）和荧光素钠（CF）经大鼠空肠黏膜的经时吸收方向和分泌方向的透过量和表观渗透系数。R123和CF在接受室的浓度用荧光分光光度计检测。结果 4种药液均具有增加R123经吸收方向透过性的趋势,但仅海藻使R123吸收方向的透过性显著增加（P<0.05,与生理盐水组比较）。同时,海藻也使R123分泌方向的透过性显著增加（P<0.01,与生理盐水组比较）。但海藻与甘草合用后,合煎组与合并组使R123分泌方向的透过性显著减少（P<0.01,与生理盐水组比较）;另外,海藻与甘草的单煎液、合煎液、合并液对CF经空肠黏膜转运的吸收方向及分泌方向的透过性与生理盐水比较,均无显著性差异。结论 海藻可能不对P-gp起抑制作用。海藻中的某些成分可能改变了细胞膜通透性,从而增加了跨膜转运药物R123吸收分泌双方向的渗透,但对细胞间的药物转运影响不大。海藻和甘草合用后对肠黏膜P-gp起到了一定抑制作用,引起海藻和甘草中P-gp底物的一些毒性成分吸收增加,这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。     

大黄甘草汤及其组成生药对P-糖蛋白的抑制作用

研究表明，人黄甘草汤具有强的ATPase活性抑制作用，本次探讨了大黄甘草汤对P-糖蛋白（P-gp）的抑制作用。     

芍药甘草汤对人P-糖蛋白ATPase活性的抑制作用

为了正确使用汉方药，本次探讨了芍药甘草汤对在药物相互作用方面有重要作用的P-糖蛋白（P-gp）的影响。     

甘草与芫花对P-糖蛋白底物罗丹明123经 空肠黏膜透过性的影响

目的：观察甘草与芫花合用前后对P-糖蛋白(P-gp)的调控作用，探讨甘草、芫花及其合用影响药物经胃肠道渗透的可能作用机制。方法：将25只Wistar大鼠分为5组，分别给大鼠口服甘草液、芫花液、甘草芫花合煎液、合并液以及生理盐水，1周后用体外扩散池法(ussing chamber)评价各种药液对罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经空肠黏膜透过性的影响，用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度，并分析各组表观渗透系数(Papp)差异。结果：4种药液均具有增加R123经吸收方向的透过性，与生理盐水组比较，P<0.05，且芫花液、合煎液以及合并液还可减少分泌方向的透过(P<0.05，与生理盐水组比较)，甘草对分泌方向透过影响无统计学意义。甘草对CF透过无影响，而其他3组药液则可减少CF吸收和分泌方向的透过性。结论：甘草和芫花对P-gp均有抑制作用，但后者作用较强。芫花某些化学成分抑制P-gp，而另一些成分可能使细胞之间紧密连接加强，引起旁细胞途径药物CF渗透的降低。甘草与芫花合用后对P-gp抑制作用增强，可能是甘草对芫花有协同作用，使一些毒性成分吸收增加，这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。     

甘草与芫花对P-糖蛋白底物罗丹明123经空肠黏膜透过性的影响

目的：观察甘草与芫花合用前后对P-糖蛋白（P—gp）的调控作用，探讨甘草、芫花及其合用影响药物经胃肠道渗透的可能作用机制。方法：将25只Wistar大鼠分为5组，分别给大鼠口服甘草液、芫花液、甘草芫花合煎液、合并液以及生理盐水，1周后用体外扩散池法（ussingchamber）评价各种药液对罗丹明123（R123）和荧光素钠（CF）经空肠黏膜透过性的影响，用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度，并分析各组表观渗透系数（Papp）差异。结果：4种药液均具有增加R123经吸收方向的透过性，与生理盐水组比较，P〈0．05，且芫花液、合煎液以及合并液还可减少分泌方向的透过（P〈0．05，与生理盐水组比较），甘草对分泌方向透过影响无统计学意义。甘草对CF透过无影响，而其他3组药液则可减少cF吸收和分泌方向的透过性。结论：甘草和芫花对P—gP均有抑制作用，但后者作用较强。芫花某些化学成分抑制P-gp，而另一些成分可能使细胞之间紧密连接加强，引起旁细胞途径药物cF渗透的降低。甘草与芫花合用后对P—gP抑制作用增强，可能是甘草对芫花有协同作用，使一些毒性成分吸收增加，这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。     

应用Ussing chamber技术建立大鼠肠黏膜P-糖蛋白与药物相互作用实验模型的相关因素考察

目的:建立研究药物与肠道内P-糖蛋白相互作用的Ussing chamber实验验证模型,并对相关影响因素进行总结。方法:应用Ussing chamber技术评价P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对底物地高辛经肠转运吸收方向(M-S)与分泌方向(S-M)累积透过量、表观渗透系数及外排转运率的影响。采用LC-MS液-质联用法测定样品中地高辛含量,比较抑制剂组与对照组计算结果之间的差异。结合文献分析总结实验过程中相关影响因素。结果:对照组,地高辛经大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠外排转运率分别为3.23±0.73、4.78±0.52、5.18±0.81及2.77±0.20。与对照组相比,浓度为100μg/ml的维拉帕米减少了地高辛在各肠段的外排转运率,其中空肠(0.73±0.10)与回肠(1.38±0.38)有统计学差异,结肠段无统计学差异。浓度为200μg/ml的维拉帕米能降低结肠段(1.28±0.30)外排转运率,且有统计学差异。结论:建立了运用Ussing chamber技术研究药物与肠道内P-糖蛋白相互作用的实验验证模型,总结了相关影响因素,为优化实验方案,推进该技术在国内药物肠道转运机制研究领域中的应用提供理论指导。     

基于Ussing Chamber技术的红景天苷大鼠肠黏膜透过性研究

[目的]研究红景天苷在大鼠离体肠黏膜中的透过情况。[方法]采用Ussing Chamber技术,考察不同浓度红景天苷于大鼠肠黏膜透过情况,并考察维拉帕米(Ver)和十二烷基硫酸钠(SDS)对红景天苷大鼠肠黏膜透过的影响。[结果]不同浓度红景天苷在大鼠不同肠段的单位时间转运速率(Flux)随浓度升高而增大,不同肠段表观渗透系数(P_(app))无统计学差异(P0.05)。Ver加入一定量的SDS后,红景天苷在回肠和结肠的P_(app)显著增加(P0.01或P0.05),当SDS浓度为2 g/L时,回肠P_(app)增加为对照组的2.76倍。[结论]红景天苷在大鼠全肠段均有吸收,且吸收具有浓度依赖性,以被动吸收为主,Ver对红景天苷大鼠各肠吸收无影响,SDS促进了红景天苷回肠和结肠吸收。     

甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的 研究甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白（P-gp）功能和表达的影响,探讨甘草解毒的作用机制。方法 采用流式细胞仪检测经甘草黄酮类成分处理后Caco-2细胞对罗丹明123摄取量的影响,以评价P-gp的外排功能;采用Western blotting法检测甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-gp表达的影响。结果 与对照组相比,甘草总黄酮5、10、50、100 μg/mL作用Caco-2细胞1 h后,使细胞内罗丹明123的荧光强度分别减少61.1%、56.3%、49.2%、45.4%;甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、芹糖基甘草苷、芹糖基异甘草苷在相同质量浓度,使细胞内罗丹明123的荧光强度减少了19.3%～37.9%。与对照组相比,甘草总黄酮10～400 μg/mL给药后72 h,使Caco-2细胞膜上P-gp的表达显著增加（P＜0.01）;甘草苷、异甘草苷、甘草素、芹糖基甘草苷5～400 μmol/L,异甘草素、芹糖基异甘草苷10～400 μmol/L对此也有显著作用（P＜0.01）。结论 甘草黄酮类成分增强Caco-2细胞P-gp的功能,上调P-gp的表达,促进细胞内有毒物质的外排,减少有毒物质在肠道的吸收,这可能是甘草配伍其他中药的解毒机制之一。     

芍药甘草汤对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的:研究芍药甘草汤(SGT)对Caco-2细胞P-糖蛋白(P-gp)的功能和表达的影响。方法:采用Caco-2单层细胞模型,以P-gp底物3H-地高辛为探针,P-gp抑制剂维拉帕米(Ver)为阳性对照药,测定SGT对Caco-2细胞P-gp功能的影响;用免疫组化法检测SGT对Caco-2细胞膜上的P-gp表达的影响。结果:在Caco-2模型上,3H-地高辛从基底侧(BL)到肠腔侧(AP)与肠腔侧(AP)到基底侧(BL)的表观渗透系数(apparent permeabilities,Papp)比值Papp(BL→AP)/Papp(AP→BL)约为27倍,证明3H-地高辛在Caco-2模型上的吸收方式为主动吸收。阳性药Ver与3H-地高辛联合时,明显增高了3H-地高辛在AP→BL方向的Papp(BL→AP)达3.82倍,但对BL→AP方向的转运影响不明显,说明Ver可明显抑制P-gp活性。SGT在1/25 IC5,1/5IC5,IC5浓度范围对P-gp底物3H-地高辛从AP→BL方向的转运分别促进了159.83%,217.95%,160.26%。1/25 IC5,1/5 IC5浓度下对3H-地高辛在BL→AP方向的转运分别促进了59.16%,50.73%,而相对于IC5浓度下SGT对3H-地高辛在BL→AP方向的转运则无影响。免疫组化结果显示SGT对P-gp的表达有抑制作用。结论:SGT可抑制P-gp的功能和表达,从而促进P-gp底物的吸收。     

植物化合物对P-糖蛋白引起药物排泄的影响

为获得进一步阐明食品与药品相互作用的基础研究信息,本次探讨了含植物化合物的食品对决定药物体内动态的P-糖蛋白(P-gp)功能的影响。方法:①对P-gp高表达多剂耐受性人癌细胞KB-C2添加荧光基质柔红霉素或若丹明123,与各种植物化合物共存或非共存下培养2h,用荧光光度计检测细胞内掺入的基质量。②KB-C2仅与基质培养2h后,更换不含基质的培养液,在各种植物化合物存在或非存在下再培养30min,检测细胞内基质残留量。结果与讨论:①在咖啡豆所含的咖啡醇等共存时,KB-C2细胞内柔红霉素掺入量增加,其作用呈浓度依赖性。②在咖啡醇等共存时,若丹…     

甘草次酸18位差向异构体对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的 研究甘草次酸18位差向异构体即18α-甘草次酸、18β-甘草次酸对Caco-2细胞上P-糖蛋白功能和表达的影响。方法 建立Caco-2细胞模型,采用罗丹明-123摄取法评价P-糖蛋白的功能;使用荧光定量PCR检测MDR1 mRNA; Western blot分析Caco-2细胞膜上P-糖蛋白的表达。结果 中、高浓度(1, 10 μmol·L)的18α-甘草次酸和高浓度(10 μmol·L)的18β-甘草次酸使细胞内罗丹明-123摄取减少。高浓度(10 μmol·L)的18α-甘草次酸在转录水平上调MDR1 mRNA的表达;实验浓度的18β-甘草次酸未影响MDR1 mRNA的表达;高浓度（10 μmol·L）18α-甘草次酸对P-糖蛋白有诱导作用,实验浓度的18β-甘草次酸没有影响P-糖蛋白表达。结论 18α-甘草次酸对P-糖蛋白功能和表达的影响均表现为诱导作用,而18β-甘草次酸只对P-糖蛋白功能表现出一定的诱导作用。     

应用Ussing Chamber技术评价芹菜素与柚皮素经大鼠肠黏膜透过特征

 目的 研究芹菜素与柚皮素经大鼠空肠、回肠与结肠黏膜的区段透过特征。方法 采用体外Ussing Chamber方法,分别评价50 μmol·L-1芹菜素及柚皮素经空肠、回肠和结肠黏膜经时吸收方向（M-S）与分泌方向（S-M）的累计透过率和表观渗透系数（P_app）,芹菜素与柚皮素在接收池的样品浓度用HPLC测定。结果 芹菜素与柚皮素在结肠的透过性显著高于空肠（P<0.01）和回肠（P<0.05）。比较M-S方向和S-M方向的透过性发现,芹菜素空肠与回肠经两个方向的透过性无显著差异,但经结肠透过时,吸收方向的透过性显著高于分泌方向的透过性（P<0.01）;柚皮素在空肠、回肠及结肠黏膜经两个方向的透过性均无显著差异。结论 芹菜素与柚皮素在大鼠肠黏膜中的透过性存在区段性差异,结肠部位吸收最好。芹菜素与柚皮素除被动扩散外,可能受到肠黏膜转运体的调控。     

中药逆转P-糖蛋白介导的肿瘤多药耐药的研究进展

多药耐（MDR）是导致癌症化疗失败的主要因素。肿瘤产生MDR的机制很多,其中最为常见也研究得较为深入的一种机制是一种ATP依赖跨膜转运蛋白P-糖蛋白（P—gp）在肿瘤细胞中的过度表达。由于相当一部分化疗药物属于P-gp的转运底物,过度表达的P-gp使细胞内药物浓度显著低于有效毒性浓度,从而产生耐药性。P-gp调节剂可通过抑制P—gp的转运功能或者抑制蛋白的表达修复肿瘤细胞对药物的敏感性。本文就近年来在部分中药及中药单体成分逆转肿瘤P-gp—MDR作用方面的研究做一些总结。     

圣和散对胃癌SGC-7901／VCR耐药细胞P-糖蛋白表达的影响

胃癌多药耐药(multidrug resistance，MDR)是胃癌化疗失败的主要原因之一，P-糖蛋白(P-glucoprotein，P-gp)是与胃癌MDR相关的主要分子，其表达水平与细胞膜通透性、细脾内药物浓度以及细胞耐药程度密切相关。本实验主要观察中药圣和散逆转胃癌SGC7901／VCR耐药细胞MDR的作用。     

基于P-糖蛋白靶点对临床常见中药治疗风湿性关节炎用药的思考

风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一种常见的急性或慢性结缔组织炎症。临床常使用非甾体抗炎药、细胞毒素类免疫抑制剂或者糖皮质激素进行对症治疗。但至少有近5%的RA患者对常规治疗不敏感,惯称为难治愈性RA。已有研究表明,难治愈性RA与组织内P-糖蛋白过度表达有关。P-糖蛋白是由多重耐药基因-1编码的170kD跨膜转运蛋白。该蛋白功能是将药物小分子转运至细胞外,降低靶细胞内药物浓度。中医药治疗RA有着悠久的历史,文章以P-糖蛋白为靶点,对临床用于治疗RA常见中药进行整理。基于P-糖蛋白特殊的活性,对中药治疗RA的临床用药进行思考和展望。     

P-糖蛋白水平上药物之间相互作用的研究进展

本文从P-糖蛋白的角度探讨了中西药物之间的相互作用.P-糖蛋白作为一种广泛分布于体内组织的外排转运蛋白,对药物在人体内的吸收、分布、代谢、排泄过程产生影响.联合用药时,P-糖蛋白是许多药物之间相互作用的重要原因.某些药物可以通过诱导或抑制P-糖蛋白而对与之合用的另一种药物发挥作用,结果可能为提高疗效或降低毒性,如果盲目联合用药则可能会产生毒性或不良反应,因此合理利用P-糖蛋白介导的药物之间的相互作用,对指导临床合理用药具有深刻意义,以达到增效减毒的效果.     

甘草提取物及其主要成分对Caco-2细胞膜上P-gp功能和表达的影响

 目的 初步考察甘草提取物及其主要成分（甘草甜素、甘草次酸和甘草苷）对Caco-2细胞膜上P-糖蛋白（P-gp）功能和表达的影响,以备进一步探讨甘草新的解毒机制。方法 利用流式细胞术检测Caco-2细胞内罗丹明123（Rho-123）的荧光强度和细胞膜上P-gp的表达,以考察P-gp外排功能和表达水平的变化。结果 经过60 min的干预,甘草提取物(1, 10, 100 μg·mL-1)、甘草甜素(1, 10, 100 μg·mL-1)和甘草苷(1, 10, 100 μg·mL-1)Caco-2细胞内Rho-123的荧光强度较阴性对照组分别降低了34.66%、28.90%、24.56%、27.89%、26.29%、37.33%、19.51%、21.86%和19.03%（P＜0.05）。经过72 h的干预,甘草提取物中质量浓度(10 μg·mL-1)组,甘草甜素低、中、高质量浓度(1, 10, 100 μg·mL-1)组,甘草次酸中、高质量浓度(1, 10 μg·mL-1)组Caco-2细胞膜上P-gp表达的阳性率较阴性组分别增加了31.18%、61.67%、70.32%、77.43%、37.58%和49.14%（P＜0.05）。结论 甘草提取物、甘草甜素和甘草苷可能增强Caco-2细胞膜上P-gp的功能,而中质量浓度的甘草提取物,低、中、高质量浓度的甘草甜素和中、高质量浓度的甘草次酸则可能上调P-gp的表达。甘草甜素既能增强Caco-2细胞膜上P-gp的功能,又能上调其表达,可能是甘草影响P-gp的有效成分。     

冰片对P-糖蛋白的影响

目的：评价冰片对P－糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp)活性的作用。方法：制备含冰片的家兔血清，用MDCK（犬肾）和Hela(人子宫癌）细胞系作为评价载体，以维拉帕米作阳性对照组，用MTT法观察其对长春新碱所致细胞毒性的作用。结果：在MDCK和Hela两种细胞系上，冰片均能明显地增强长春新碱所致的细胞毒性，作用与维拉帕米相似。结论：冰片对P－gp的活性有明显地抑制作用。     

P-糖蛋白与冰片促血脑屏障生理性开放的关系探讨

血脑屏障（BBB）是由脑微血管、星形胶质细胞、外膜细胞、血管周围吞噬细胞和基底膜组成的一个复杂系统，是一个介于血液和脑脊液之间。有选择性通过能力的动态界面，对于保持脑内环境的相对稳定具有十分重要作用。有研究提示，冰片通过升高大鼠下丘脑5-羟色胺（5-HT）的含量。介导BBB开放，这可能是开窍药冰片开放BBB的作用机制。尽管冰片升高大鼠下丘脑5-HT的含量机制仍有待研究，但从冰片可能与P-糖蛋白（P-gp）之间的竞争性结合的角度去探讨开窍药的作用机制仍不失为一条有效的途径。     

益气活血解毒法对溃疡性结肠炎复发患者结肠组织P-糖蛋白的影响

[目的]探讨益气活血解毒法对溃疡性结肠炎(UC)复发患者结肠组织P-糖蛋白影响.[方法]90例UC复发患 者随机分为2组,中药治疗组45例,西药对照组45例.治疗3个月后对完全缓解及有效病例(其中治疗组39例,对照 组32例)进行为期6个月的随访.治疗组给予益气活血解毒立法的中药汤剂,对照组给予柳氮磺胺吡啶治疗.并与 20例作正常对照.[结果]治疗前UC组结肠组织P-糖蛋白水平明显高于正常健康人(p<0.01);复发组水平明显高于未 复发组(p<0.01);治疗组治疗后及随访时结肠组织P-糖蛋白水平明显低于对照组(P<0.01).[结论]以益气活血解毒立 法的中药溃结复发方,与西药柳氮磺胺吡啶比较,可有效降低结肠组织P-糖蛋白水平,减少耐药性,提高药物的治疗 效果从而降低复发率.