定心方通过上调CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达对PM2.5所致动脉粥样硬化的影响

目的:观察定心方(DXR)在小鼠吸入PM2.5所致动脉粥样硬化(AS)过程中对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs)表达调控的影响。方法:50只载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠喂食高脂饲料并吸入严重污染的自然空气,随机分为5组,DXR低、中、高剂量组分别灌胃DXR 9.29,18.59,37.18 g·kg~(-1)·d~(-1);辛伐他汀组灌胃辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1);模型组灌胃等剂量生理盐水;10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料吸入过滤空气设为正常组。16周后检测小鼠血清脂质、酶联免疫吸附测定测定(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素~(-1)0(IL~(-1)0)及转化生长因子-β(TGF-β)水平;流式细胞法检测脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量;苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉AS斑块形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉AS斑块Foxp3蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠主动脉AS斑块形成,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显升高,IL~(-1)0及TGF-β水平明显降低,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显减少,Foxp3蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,辛伐他汀组,DXR中、高剂量组小鼠AS斑块面积明显减小,血清脂质,IL-6及TNF-α水平明显降低,IL~(-1)0及TGF-β水平明显升高,CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs数量明显增加,Foxp3蛋白表达明显增加(P0.05)。结论:DXR可通过上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs表达发挥抗PM2.5所致AS功效。     

合欢皮总皂苷对H22荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响

目的:观察合欢皮总皂苷对H22荷瘤小鼠CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群、细胞因子白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,凋亡诱导因子(Fas),凋亡诱导因子配体(Fas L)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响,探讨其对细胞免疫功能的干预机制。方法:昆明种小鼠60只随机分为正常组、模型组、环磷酰胺组、合欢皮总皂苷高、中、低剂量组,建立小鼠H22荷瘤模型。给药组分别按环磷酰胺20 mg·kg-1·d-1,合欢皮总皂苷4,2,1 mg·kg-1·d-1ip,连续治疗11 d后,检测抑瘤率,血清IL-2,TNF-α水平,免疫组化染色检测肿瘤细胞Fas,Fas L和PCNA蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织形态。结果:与模型组比较,合欢皮总皂苷高、中、低剂量组小鼠移植瘤的平均质量均显著下降(P0.05,P0.01),合欢皮总皂苷中剂量组能明显提高CD4+T细胞,CD8+T细胞数量(P0.05,P0.01),对CD4+/CD8+无影响,合欢皮总皂苷中、高剂量组IL-2水平明显上升(P0.05),TNF-α水平无变化,合欢皮总皂苷各剂量组Fas L,PCNA蛋白表达显著降低(P0.01),中、高剂量组Fas表达水平显著升高(P0.01)。结论:合欢皮总皂苷能够调节细胞免疫功能,其机制可能与其上调CD4+,CD8+T细胞亚群,促进IL-2分泌,提高Fas蛋白表达并抑制Fas L,PCNA蛋白表达有关。     

贞芪扶正胶囊联合西药治疗气阴不足型尖锐湿疣疗效观察

目的观察贞芪扶正胶囊联合西药治疗气阴不足型尖锐湿疣患者的临床疗效。方法将80例气阴不足型尖锐湿疣患者随机分为治疗组与对照组各40例,2组均给予α-干扰素肌肉注射,5%5-氟尿嘧啶软膏和25%足叶草脂酊剂外涂,治疗组在此基础上给予贞芪扶正胶囊口服(4粒/次,2次/d),2组疗程均为8周。观察2组临床疗效及治疗前后免疫指标变化情况。结果治疗组治愈率、愈显率均明显高于对照组(P均<0.05),随访6个月复发率明显低于对照组(P<0.05);治疗后2组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均较治疗前明显增高(P均<0.05),CD8~+较治疗前明显降低(P均<0.05),且治疗组各指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05)。结论贞芪扶正胶囊联合西药治疗气阴不足型尖锐湿疣患者疗效好,有助于提高细胞免疫功能,降低复发率,值得推广应用。     

活血化瘀方对小鼠Hepa1-6肝癌转移和生长的作用及机制初探

目的:探讨活血化瘀方抑制小鼠Hepa1-6肝癌转移和生长的作用及其机制。方法:转染萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase gene)的C57BL/6小鼠肝癌Hepa1-6细胞,经筛选获得稳定表达GFP绿色荧光蛋白及荧光素酶基因的小鼠肝癌细胞株Hepa1-6 (luc2/GFP)。采用尾静脉注射及右侧腹部皮下注射的方法分别建立尾静脉肝癌转移模型及皮下肿瘤模型,并分别给予活血化瘀方52、104 g/kg组、索拉菲尼30 mg/kg组。造模后进行小动物成像荧光观测,16天后取皮下肿瘤组织,实时荧光定量PCR (q-PCR)法检测程序性死亡受体-1(PD-1)、白细胞介素-8 (IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;免疫组化(IHC)法检测CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、血小板-内皮细胞粘附分子标记的微血管密度(CD31-MVD)。结果:活血化瘀方能抑制小鼠Hepa1-6肝癌的转移和生长,与模型组比较,活血化瘀方52 g/kg、104 g/kg治疗组可使PD-1、IL-8、TNF-αmRNA的表达明显下调;同时上调CD4~+T蛋白表达、升高CD4~+T/CD8~+T比值,下调CD8~+T、CD31MVD蛋白的表达。结论:活血化瘀方可能是通过调控CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、PD-1、CD31、IL-8、TNF-α等多靶标来抑制小鼠Hepa1-6肝癌的转移和生长。     

中药对桥本甲状腺炎患者CD4+T细胞及血清IL-12,TNF-α表达的影响

目的:观察中药组方对桥本甲状腺炎甲状腺自身抗体,辅助性(CD4+)T细胞,血清白细胞介素-12(IL-12),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响以及甲状腺的病理变化,以探讨可能的作用机制。方法:70例桥本甲状腺炎随机分为治疗组和非治疗组各35例。治疗组用中药组方,每日1剂,12周为1个疗程,非治疗组给予优甲乐口服。游离三碘甲腺原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),促甲状腺激素(TSH)治疗前后各检测1次;甲状腺免疫标志物的测定:CD4+T细胞,血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb),过氧化物酶抗体(TPOAb),IL-12,TNF-α治疗前后各检测1次;甲状腺粗针穿刺病理检查治疗前后各检测1次。结果:两组患者治疗前后甲状腺功能比较无统计学意义,且治疗组患者治疗前后FT3,FT4,TSH无显著变化,说明中药对甲状腺激素水平无明显影响。两组患者治疗前TGAb,TPOAb,IL-12,TNF-α比较无统计学差异,治疗组治疗后CD4+TC,TGAb,TPOAb,IL-12,TNF-α水平较治疗前及非治疗组明显降低,显示本组药物能很好调节免疫,减轻甲状腺的体液免疫损伤,促进组织修复。结论:本组药物能很好调节免疫,减轻甲状腺的体液免疫损伤,促进组织修复,对桥本甲状腺炎的甲状腺组织具有保护和修复作用。     

基于P38MAPK通路的复方参鹿颗粒含药血清对TNF-α诱导的正常骨髓CD34~+细胞凋亡的影响

目的基于P38MAPK途径探讨复方参鹿颗粒含药血清对TNF-α诱导的正常骨髓CD34+细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠随机分为空白组和复方参鹿颗粒低、中、高剂量组,分别制备空白血清和不同浓度的含药血清。收集并分离8例正常的骨髓单个核细胞(BMMC),分别加入空白血清和10%不同浓度含药血清,与20 ng/ml人重组TNF-α共同培养。流式细胞术检测CD34~+细胞凋亡率,Western blot检测骨髓单个核细胞P38、p-P38、P53、p-P53、Bcl-xl、Bcl-2蛋白表达,荧光定量PCR检测P38、P53、Bcl-xl、Bcl-2mRNA表达。结果与空白组相比,复方参鹿颗粒中、高剂量组CD34~+细胞凋亡率以及p-P38、p-P53蛋白表达显著下降,Bcl-xl蛋白和mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论复方参鹿颗粒含药血清可有效抑制TNF-α诱导的正常骨髓CD34~+细胞凋亡,下调p-P38和p-P53蛋白表达,上调Bcl-xl表达。其机制可能与P38MAPK通路介导的凋亡途径有关。     

参芪扶正注射液联合手术后化疗治疗结直肠癌疗效观察

目的探讨参芪扶正注射液辅助化疗的疗效及机制。方法将40例住院结直肠癌患者随机分为两组,每组20例:对照组用FOLFOX方案化疗;试验组在对照组化疗基础上静脉滴注参芪扶正注射液;疗程均5天。检测治疗前后外周血中CD4+CD2+5调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素12(IL-12)含量变化。并根据WHO抗癌药物急性及亚急性毒性反应分度标准进行分级统计。结果对照组2例在观察期间脱落。结直肠癌患者CD4+CD2+5细胞含量较健康人明显升高(P0.05);化疗后CD4+CD2+5细胞含量两组均降低(P0.05);TNF-α及IL-12试验组化疗后升高(P0.05),对照组降低(P0.05);两组3项指标治疗后比较差异有统计学意义(P0.05)。试验组较对照组化疗毒副反应明显减轻(P0.05)。结论参芪扶正注射液辅助化疗,可调节机体免疫系统,提高化疗效果,还可减轻化疗药物的毒副反应。     

千金苇茎汤对香烟烟雾暴露模型大鼠肺组织Th17/Treg分化及其相关细胞因子表达的影响

目的:观察千金苇茎汤对香烟烟雾暴露模型大鼠肺组织辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)分化及其相关细胞因子表达的影响。方法:雄性大鼠60只,随机分为正常组,烟雾模型组,乙酰半胱氨酸组、千金苇茎汤高、中、低剂量组,共6组,每组10只。香烟烟雾造模30 d后,药物分别干预30 d,后处死各组大鼠并取组织;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt),叉头状/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织白细胞介素-17(IL~(-1)7),IL-6,IL~(-1)0,转化生长因子-β_1(TGF-β_1)含量,苏木素-伊红(HE)染色切片观察肺组织病理,流式细胞术检测Treg(Foxp3~+CD25~+)比例,Th17(CD4~+IL~(-1)7~+)比例,Treg/Th17。结果:与正常组比较,模型组ROR-γt mRNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,千金苇茎汤高、中、低剂量组干预后都能够降低其表达(P0.05,P0.01);与正常组比较,模型组Foxp3 mRNA表达明显降低(P0.05),与模型组比较,千金苇茎汤中低剂量组干预后表达明显升高(P0.05)。与正常组比较,模型组IL~(-1)7,IL-6含量明显升高,IL~(-1)0,TGF-β1含量明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,千金苇茎汤高、中、低剂量组干预后能够降低肺组织IL~(-1)7,IL-6含量,同时升高IL~(-1)0的含量(P0.05),与Real-time PCR检测的结果趋势一致。流式细胞术检测显示,千金苇茎汤中、低剂量组干预后Th17(CD4~+IL~(-1)7~+)比例降低,Treg/Th17增加(P0.05,P0.01)。结论:千金苇茎汤能调节Treg/Th17,使Th17/Treg达到平衡状态。     

贞芪扶正胶囊配合化疗治疗乳腺癌32例

目的观察贞芪扶正胶囊配合辅助化疗治疗乳腺癌的临床观察。方法随机将62例术后乳腺癌患者分成治疗组(32例)和对照组(30例)。对照组给予AC-T方案化疗;治疗组给予AC-T方案化疗同时配合服用贞芪扶正胶囊。2组均治疗两个疗程。比较两组在治疗前后白细胞数、血小板数,两组患者治疗后白细胞与血小板减少分级以及T细胞亚群变化。结果治疗后两组在白细胞数和血小板数均有下降,但治疗组下降程度明显小于对照组(P0.05)。治疗组发生III~IV级骨髓抑制的比例明显小于对照组(P0.05)。治疗组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与治疗前及对照组比较均有显著性差异(P0.05)。结论贞芪扶正胶囊配合乳腺癌辅助化疗能有效保护患者骨髓及提高患者免疫功能。     

加味独活寄生合剂治疗膝骨关节炎临床疗效及对关节液中IL-1,IL-6,TNF-α及NO的影响

目的:观察加味独活寄生合剂治疗膝骨性关节炎的临床疗效及对关节液中白细胞介素-1(interleukin-1,IL~(-1)),白细胞介素-6(interleukin-1,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及一氧化氮(NO)的影响。方法:将90例膝关节患者随机分为治疗组和对照组,各45例,治疗组予加味独活寄生合剂治疗,对照组予硫酸氨基葡萄糖胶囊治疗,8周后观察两组患者疗效,治疗前后均行关节穿刺取关节液,检测关节液中IL~(-1),IL-6,TNF-α及NO的含量,对两组患者进行分析比较。结果:两组患者治疗后视觉模拟评分(visual analogue scales,VAS)均明显降低(P0.05);治疗后两组患者VAS评分比较,治疗组低于对照组(P0.05);治疗组治疗后膝关节功能Western Ontario and Mc Master Univesrsities(WOMAC)评分优于对照组(P0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者IL~(-1),IL-6,TNF-α及NO的含量均明显降低(P0.05),两组患者组间比较无明显差异。结论:加味独活寄生合剂可减轻膝骨性关节炎患者疼痛,改善膝关节功能;加味独活寄生合剂能减少关节液中IL~(-1),IL-6,TNF-α及NO的含量,抑制炎症反应,从而改善临床症状,这可能是加味独活寄生合剂治疗膝骨关节炎的作用机制。     

参芦、根总皂甙对小鼠不同脏器组织ATP酶活性的影响

参芦和根中的总皂甙对正常小鼠心、肝、脑、肾和脾组织匀浆中的Mg²⁺-ATP酶均有抑制作用,对Na⁺-K⁺-ATP酶却有激活作用,尤以参芦总皂甙的作用更为显著。证明它们对不同组织的能量代谢均有一定的影响。     

竹叶和银杏叶总黄酮含量及其抗自由基活性的比较研究

目的 :研究竹叶和银杏叶黄酮含量和抗自由基活性的差异及季节性变化规律 ,以期为竹叶的开发提供依据。方法 :选取同一地块中生长的紫竹和银杏 ,逐月定时、定株、定量采集叶样 ,用硝酸铝 亚硝酸钠比色法测定总黄酮 (TF)含量 ,分别采用X XOD Luminol的O₂ · 产生体系和VC-Cu²⁺-H₂O₂-酵母多糖的·OH产生体系 ,用化学发光法测定提取物清除活性氧自由基的能力。结果 :竹叶的TF全年变化在 0.67%～ 1.71% (以叶干基计 ,下同 ) ,6月最低 ,7月最高 ,随后显著下降 ,11月至翌年 4月维持在较高的水平 (1.38%～1.56%) ;而银杏叶从 4月初抽芽至 11月下旬落叶 ,TF变化在 1.48%～2.49% ,随着芽苞向成叶的渐进 ,TF逐渐提高 ,在 6,7月达到最大值 ,随后逐渐回落 ,至 11月下旬临落叶前又出现 1个高峰。竹叶对O₂·和·OH的半抑制浓度 (IC₅₀)分别为 11.0 g·mL^-1和 5 .3mg·mL^-1,银杏叶为 19.0 g·mL^-1和 3.6mg·mL^-1。结论 :竹叶的总黄酮含量及其清除活性氧自由基的能力均与银杏叶具有可比性 ,这是一种优良的天然抗氧化剂和自由基清除剂的新资源。     

Inhibition of the gastric H+,K+ -ATPase by plectrinone A, a diterpenoid isolated from Plectranthus barbatus Andrews

This work assessed the mechanism underlying the antisecretory gastric acid effect of Plectranthus barbatus Andrews (Lamiaceae) and active constituents. Popularly known as "false-boldo", this plant is used in Brazilian folk medicine to treat gastrointestinal and hepatic ailments. The plant aqueous extract (AE) and isolated compounds were assayed in vivo in pylorus-ligated mice, and in vitro on acid secretion measured as [(14)C]-aminopyrine ([(14)C]-AP) accumulation in rabbit gastric glands and gastric H(+),K(+)-ATPase preparations. Injected into the duodenal lumen, the AE of the plant leaves (0.5 and 1.0 g/kg) decreased the volume (62 and 76%) and total acidity (23 and 50%) of gastric acid secretion in pylorus-ligated mice. Bioguided purification of the AE yielded an active fraction (IC(50)=24 microg/ml) that inhibited acid secretion in rabbit gastric glands with a potency 10 to 18 times greater than that of the originating extract, on both the basal and stimulated acid secretion by histamine (His) (1 microM) or bethanechol (100 microM). At the same concentrations the gastric H(+),K(+)-ATPase activity was also inhibited. The active constituent was chemically identified as the abietanoid dienedione plectrinone A which reduced the H(+),K(+)-ATPase activity with IC(50)=171 microM. The results indicate that inhibition of the gastric proton pump by this diterpenoid may account for the antisecretory acid effect and reputed anti ulcer activity of Plectranthus barbatus.     

抗心磷脂抗体导致妊娠丢失的免疫病理机制 及安子合剂的干预作用

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)导致妊娠丢失与CD4+ CD25+ FOXP3+调节性T( CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg)细胞的关系及安子合剂的免疫调节机制.方法:将BALB/c小鼠随机分组:空白组、模型组、安子合剂组(低、中、高剂量组)、阿司匹林组.于妊娠第1天,空白组和模型组以等量蒸馏水灌胃,安于合剂组(低、中、高剂量组分别以37.7,75.4,150.8 g·kg-1·d-1)药液ig,阿司匹林组以0.019 5 g·kg-1·d-1ig,连续给药14 d.于妊娠第8,12天通过给孕鼠腹腔注射抗心磷脂抗体-IgG(ACA-IgG),建立ACA阳性妊娠丢失动物模型.用流式细胞仪测定各组孕鼠外周血CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例;用ELISA法测定各组孕鼠外周血ACA的滴度;并观察各组孕鼠胚胎吸收及胎鼠发育情况.结果:模型组CD4+ CD25+ FOXP3+Treg细胞的比例较空白组显著下降(2.67±0.51)％,(9.849±1.774)％,P＜0.01;与模型组相比,安子合剂低、中剂量组均能显著升高CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例(9.47±1.26),(7.61±1.07)％,P＜0.01,显著降低ACA的滴度(P＜0.01),安子合剂低剂量组优于中剂量组.安子合剂低剂量组能显著降低胚胎吸收率,显著增加胎鼠和胎盘质量(P＜0.05).结论:ACA导致妊娠丢失的病理机制与免疫调节细胞-CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg细胞比例减少有关.安子合剂干预ACA导致妊娠丢失的免疫调节机制是通过增加CD4+ CD25+ FOXP3 +Treg细胞的比例来实现的,其作用的强弱与药物的剂量相关.     

甲基莲心碱对血管平滑肌α受体引起45Ca外溢与内流的影响

在血管平滑肌，甲基莲心碱能明显减少苯肾上腺素引起的⁴⁵Ca内流量，不影响高钾引起的⁴⁵Ca内流；而硝苯吡啶几乎完全阻断后一种的⁴⁵Ca内流。甲基莲心碱不抑制⁴⁵Ca外溢。     

染料木素抗大鼠心肌肥厚作用及其与ATPase活性的关系

目的:观察染料木素(Gen)对异丙肾上腺素(iso)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对心肌组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-Mg2+-ATPase活性及羟脯氨酸含量的影响。方法:0.2 g·L-1的iso 5 mL·kg-1·d-1,背部皮下注射,连续10 d,建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给予不同浓度的染料木素、二甲基亚砜或NS,连续14 d,末次给药后禁食12 h,称体重,麻醉,取心脏,称全心及左心室质量,计算全心质量指数及左心室质量指数,测定心肌组织Na+-K+-ATPase,Ca2+-Mg2+-ATPase活性及羟脯氨酸(Hyp)含量。结果:模型组全心质量指数及左心室质量指数分别为(3.30±0.24),(2.55±0.14)mg·kg-1,与正常对照组相比显著升高(P<0.001);心肌组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活力为(1.81±0.25),(1.00±0.22)U·mg-1,与正常对照组相比活性显著降低(P<0.01);Hyp含量为(0.80±0.05)mg·g-1,与正常对照组相比含量显著升高(P<0.001)。与模型组相比,染料木素高、低剂量组(0.3,0.1μmol.kg-1)全心质量指数分别为(2.83±0.22),(2.97±0.19)mg·kg-1;左心室质量指数分别为(2.32±0.16),(2.34±0.13)mg·kg-1均显著降低(P<0.01或P<0.05);高剂量组心肌组织Na+-K+-ATPase(2.58±0.40)U·mg-1及Ca2+-Mg2+-ATPase(1.35±0.22)U·mg-1活性升高(P<0.01或P<0.05),染料木素高、低剂量组心肌组织Hyp含量分别为(0.48±0.11),(0.57±0.14)mg·g-1显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论:染料木素可通过提高Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase的活性,降低Hyp含量,从而抑制心脏纤维化,起抗心肌肥厚作用。     

旋覆代赭汤对RE模型大鼠食管黏膜Na+-K+-ATP酶及 Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的: 观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性的影响,探讨RE食管黏膜细胞能量代谢障碍与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法: 将96只雄性Wistar大鼠随机分成6组,即假手术组、模型组、旋覆代赭汤组高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)及西药对照组(奥美拉唑10 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1莫沙必利),每组16只。采用"食管-十二指肠端侧吻合术"制备胃及十二指肠液混合RE模型。从术后第3天开始,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,药物治疗组分别给予旋覆代赭汤高、中、低剂量、西药(奥美拉唑10 mg·kg^-1+莫沙必利2 mg·kg^-1)灌胃,连续7天,记录大鼠体重变化及死亡情况,于第8天处死大鼠留取标本,观察食管下段黏膜大体及病理组织学变化;化学法检测食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性。结果: 与假手术组比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),食管黏膜肉眼及镜下病理改变明显,评分增高(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组及西药组比,旋覆代赭汤高、中剂量组大鼠死亡率明显降低(P<0.05):与模型组比,旋覆代赭汤高、中剂量组、西药组肉眼及病理评分显著降低(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性明显提高(P<0.05)。结论: 旋覆代赭汤能明显提高RE大鼠食管黏膜细胞膜Na⁺-K⁺-ATP 酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性, 从而保持食管黏膜细胞完整性,减轻黏膜损伤。     

Vasorelaxant effects of Cerebralcare Granule are mediated by NO/cGMP pathway,potassium channel opening and calcium channel blockade in isolated rat thoracic aorta

Ethnopharmacological relevance

Cerebralcare Granule (CG), one of the famous classical recipes in traditional Chinese medicine, is developed from the “Decoction of Four Drugs”. It has been used for treatment of cerebrovascular related diseases, such as hypertension. It is well known that vasodilatation plays a very important role in hypertensive. Despite the popular medicinal use of CG, little data was available to its activity and mechanism involved in vasodilatation. Therefore, we aimed to investigate the vasorelaxant effects of CG on isolated rat thoracic aorta so as to assess some of the possible mechanisms. The present study was performed to examine the vasodilative activity of CG and its mechanisms in isolated rat thoracic aorta.

Materials and methods

CG was studied on isolated rat thoracic aorta in vitro, including endothelium-intact and endothelium-denuded aortic rings. In present study, specific inhibitors including NO synthase inhibitor N^G-nitro-l-arginine methyl ester (l-NAME), cyclooxygenase (COX) inhibitor indomethacin (INDO), non-selective K⁺ channel inhibitor tetraethylammonium chloride (TEA), K_ir channel inhibitor BaCl₂, K_ATP channel inhibitor Glibenclamide (Gli) and cholinergic receptor antagonist atropine were used, they were added 20 min before NE contraction and then added CG-induced vasodilation.

Results

Removal of endothelium or pretreatment of aortic rings (intact endothelium) with l-NAME (0.1 mM) or INDO (0.01 mM) significantly blocked the CG induced relaxation. Pretreatment with the non-selective K⁺ channel inhibitor TEA (1 mM), or the K_ir channel inhibitor BaCl₂ (0.1 mM), neither of them had no influence on the CG-induced response (p>0.05). However, pretreatment with the K_ATP channel inhibitor Gli (0.01 mM) produced significant inhibition on the CG-induced response (p<0.01). Besides, CG also inhibited the contraction triggered by NE in endothelium-denuded rings in Ca²⁺-free medium. CG (0.4, 0.8 and 3.2 mg/mL) produced rightward parallel displacement of CaCl₂ curves and reduced the maximum contraction induced by 30 mM CaCl₂ to 31.1±9.3%, 18.8±6.9% and 9.4±4.5%, respectively. The relaxation, induced by CG on endothelium-intact rat aortic rings pre-contracted with NE, was significantly attenuated in the presence of atropine (EC₅₀=3.7 mg/mL, p<0.01).

Conclusions

Our results suggest that CG induces relaxation in rat aortic rings through an endothelium-dependent pathway mediated by NO/cGMP pathway and an endothelium-independent pathway involving blockade of Ca²⁺ channels, inhibition of Ca²⁺ mobilization from intracellular stores, opening of K_ATP channel. In addition, the muscarinic receptor stimulation is also one of the vasorelaxant mechanisms.     

温经化瘀止痛法治疗原发性痛经的临床疗效及其对T细胞亚群的调控机制

目的:观察温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的临床疗效,探讨温经化瘀止痛法治疗PD的免疫机制。方法:收集寒凝血瘀证PD患者108例,按随机数字表随机分为中药组、布洛芬组和安慰剂组,每组各36例。所有患者均于月经来潮前3 d开始给药,中药组给予中药和布洛芬缓释胶囊模拟剂治疗,布洛芬组给予布洛芬缓释胶囊和中药模拟剂治疗,安慰剂组给予中药模拟剂和布洛芬缓释胶囊模拟剂治疗,连续治疗6 d,共治疗3个月经周期,停药后随访3个月经周期。观察记录各月经期间的视觉模拟评分(visual analogue score,VAS),腹痛累计时间及中医症状,流式细胞术检测患者治疗前后外周血CD3+,CD4+,CD8+水平及CD4+/CD8+。结果:治疗3个月经周期后,中药组和布洛芬组在降低VAS和减少腹痛累计时间方面均优于安慰剂组(P0.01);停药后随访远期疗效,中药组显著优于布洛芬组(P0.01)。中药组降低中医症状积分总有效率为91.43%(32/35),布洛芬组总有效率为66.67%(22/33),安慰剂组总有效率为30.30%(10/33),中药组疗效优于布洛芬组(χ2=-2.971,P0.01),布洛芬组优于安慰剂组(χ2=-2.371,P0.05)。与本组治疗前比较,治疗后中药组CD3+,CD4+水平及CD4+/CD8+显著升高,CD8+水平显著降低(P0.01);与布洛芬组和安慰剂组治疗后比较,治疗后中药组CD4+水平及CD4+/CD8+升高(P0.05,P0.01),CD8+水平降低(P0.01)。结论:温经化瘀止痛法能够显著减少PD患者的VAS评分和腹痛累计时间,改善痛经症状,逆转T细胞亚群失调可能是其治疗寒凝血瘀证PD的作用机制之一。