抗角蛋白自身抗体对无血清培养黑素细胞及角质形成细胞增殖的影响

目的：建立一种无血清传代培养黑素细胞的方法,并观察抗角蛋白自身抗体（AKauto Ab）对无血清培养黑素细胞及角质形成细胞增殖的影响。方法：应用角质形成细胞无血清培养基（KC－SFM）添加牛垂体浸出液（BPE）和TPA传代培养黑素细胞,应用KC－SFM添加FGF和BPE传代培养角质形成细胞,培养均质3代时于培养基中加入不同浓度的AK auto Ab,用MTT法观察AK auto Ab对两种细胞增殖的影响。结果：应用无血清培养基成功地传代培养了黑素细胞,MTT法结果显示AK auto Ab各浓度组对培养黑素细胞的增殖无明显影响,但对角质形成细胞的增殖有显抑制作用并有浓度依赖性。结论：建立了一种无血清培养黑素细胞的方法,AKauto Ab对黑素细胞的增殖无抑制作用而对角质形成细胞有特异性抑制作用。     

同种异体抗角蛋白自身抗体对家兔接触性皮炎模型IL-6,IL-8的影响

目的　研究同种异体抗角蛋白自身抗体 (AKautoAbs)对家兔接触性皮炎模型血清IL 6 ,IL 8的影响 .方法　2 4只家兔随机分为AKautoAbs组和对照组 ,每组 12只 ;AKautoAbs组im药物 ,剂量为 5mg·kg-1,1次·2d-1,30d ;对照组动物以同样方法每次注射 2mL生理盐水 .ELISA检测血清IL 6 ,IL 8水平变化 .结果　AKautoAbs组动物血清IL 6 ,IL 8的水平下降 ;对照组动物血清IL 6 ,IL 8的水平升高 .结论　接触性皮炎可诱导IL 6 ,IL 8的产生 ;AKautoAbs则抑制IL 6 ,IL 8的产生     

人白细胞介素2基因转染角朊细胞稳定表达的检测

目的 观察人白细胞介素２（ＩＬ－２）基因皮肤角朊细胞中的稳定表达及分泌情况。方法 ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ介导法转染，以Ｇ４１８筛选出阳性克隆并做扩大培养用ＤＮＡ斑点杂交，ＲＮＡ斑点杂交，细胞铺片原位杂交，免疫组织化学，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交分析及噻唑蓝（ＭＴＴ）法检测外源基因在角朊细胞内的表达及分泌情况。结果 ＤＮＡ斑点杂交ＲＮＡ斑点杂交，原位杂交和免疫组织化学以均显著转染组有阳性信号，Ｗｅｓ     

抗角蛋白自身抗体对体外表皮形成的影响

目的 观察抗角蛋白自身抗体（anti-keratin auto antibodies,AK auto Ab)对体外表皮形成的影响,研究AK auto Ab在表皮自身稳定中的作用。方法 采用贴壁法体外培养皮肤,比较观察不同浓度AK auto Ab对表皮形成速率的影响,并采用Brd-U掺入法测定各组细胞增殖率。结果 在游走期,AK auto Ab可以促进表皮形成速率,并呈剂量效应关系;各处理组间角质形成细胞增殖率无差异。结论 AK auto Ab具有促进游走期表皮形成的作用,这可能与其促进角质形成细胞游走有关。     

重组人白细胞介素10单克隆抗体对角朊细胞增殖及产生细胞因子的影响

目的 研究重组人白细胞介素10单克隆抗体对无血清培养的角朊细胞增殖、产生细胞因子的影响。方法 用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定对细胞增殖的影响;用小鼠胸腺细胞增殖法检测IL-1;ELISA法检测IL-6、IL-8。结果 抗重组人白细胞介素10单克隆抗体促进角朊细胞增殖与IL-1、IL-6及IL-8的分泌,并呈剂量依赖关系。结论 重组人白细胞介素10单克隆抗体促进角朊细胞增殖与细胞因子分泌。     

抗角蛋白自身抗体对豚鼠银屑病样皮炎的影响

目的 观察豚鼠抗角蛋白自身抗体（anti-keratin au-toantibody,AK auto Ab）滴度的消长对豚鼠银屑病样皮炎转归的作用。方法 应用心得安乳剂涂抹豚鼠耳廓造成银屑病样皮炎，采用腹腔注射纯化的豚鼠AK auto Ab（高滴度组）、皮下植入自身皮片消耗AK auto Ab（低滴度组）以及不作处理（正常滴度组）作为对照，根据组织病理变化评价豚鼠血清AK auto Ab滴度消长对皮炎转归的影响。结果 AK atuo Ab高滴度组银屑病样皮炎的恢复速度明显于对照组，而低滴度组皮炎恢复最缓慢。结论 AK auto Ab具有促进豚鼠银屑病样皮炎恢复的作用。     

抗角蛋白自身抗体的免疫组织化学研究

作者对人体液 IgG抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)进行检测,结果显示:IgG AK auto Ab很难通过血脑屏障,极易穿透血管壁进入上皮组织。免疫电镜观察表明,AK auto Ab与角朊细胞的反应主要定位于张力细丝和桥粒,而与其它细胞器无关。家兔硫化钠皮炎皮损及血清内AK auto Ab的动态观察提示,皮损角朊细胞胞浆内AK auto Ab的沉积和血清AK auto Ab一时性降低,主要与角朊细胞的损伤有关。     

抗角蛋白自身抗体对银屑病裸鼠皮损移植模型的影响

目的：建立银屑病裸鼠皮损移植模型,观察抗角蛋白自身抗体（AK auto Ab)对银屑病动物模型的影响。方法：将人体银屑病皮损组织块移植于裸鼠背部,移植后一组裸鼠腹腔注射纯化的人体AK auto Ab,另一组裸鼠腹腔注射生理盐水作为对照,从组织病理变化评价银屑病裸鼠皮损移植模型的可行性以及AK auto Ab对移植的银屑病皮片组织学改变的影响。结果：对照组皮损植片相当一段时间内能稳定地维持银屑病的部分重要组织学改变,而AK auto Ab注射组则可使银屑病的组织学特征的维持时间明显缩短。结论：银屑病裸鼠皮损移植模型是银屑病短期内理想的动物模型,AK auto Ab具有促进银屑皮炎恢复的作用。     

天然抗角蛋白自身抗体对体外培养角质形成细胞细胞周期的影响

目的：研究天然抗角蛋白自身抗体对体外培养角质形成细胞细胞周期的影响。方法亲和层析法从混和人血清中提取纯化天然抗角蛋白自身抗体,然后通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化得到的抗体进行纯度分析,利用MTT比色法与流式细胞仪分析,观察纯化抗体对培养人角质形成细胞细细胞周期的影响。结果：纯化的抗角蛋白自身抗体纯度已达到的电泳级,MTT比色法的结果表明天然抗角蛋白身身抗体对培养的人角质形成细胞具有显著的剂量依赖性的抑制作用。相关系数为－0．797,流式细胞仪分析显示,浓度为0．01125g.L^-1的抗角蛋白自身抗体处理72h后,处于G2／M＋S期的角度质形成细胞细比例从56．2％下降至46．7％,而处于G1／G0期的细胞比例相应从43．8％升至53．3％,结论从正常人血清中提取的天然抗角蛋白身身抗体对体外培养的人角质形成细胞细的增殖具有抑制作用,使多数角质形成细胞细滞留于G1／G0期。     

家兔皮炎抗角蛋白自身抗体的动态观察

为进一步明确抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)的生理、病理意义,我们用免疫组织化学的方法,对家兔硫化钠皮炎的皮损和血清内AK auto Ab进行了同步动态观察。 材料和方法 取5只健康成年雄兔,用饱和硫化钠水溶液,使实验动物左背右1/2(大约相当于     

天然抗角蛋白自身抗体研究的回顾与展望

0　引言随着现代免疫学和分子生物学技术的迅速发展 ,在抗角蛋白自身抗体 ( anti-keratin au-toantibody,AK auto Ab)的研究方面已经取得了长足的进步 .对该自身抗体的生物学特性、生理和病理生理意义以及与多种临床疾病的关系等都有了较为深入的认识 .特别是近几年 ,天然免疫现象和天然自身抗体受到了生命科学和生物医学界的广泛关注 ,这一领域正面临着新的希望和挑战 .我们回顾 AK au-to Ab 30年的研究历程 ,探讨天然自身抗体的研究对免疫学和相关临床学科的重要影响 ,并对今后的研究方向和前景作一展望 .1　抗角蛋白自身抗体的发现开…     

抗角蛋白自身抗体亲和力成熟及其免疫学意义

目的　检测同种抗角蛋白自身抗体 (r AK auto Ab)反复注射家兔后 ,其血清 AK auto Ab与角蛋白亲和力的动态变化 .方法　采用亲和层析法纯化 r AK auto Ab,5 mg· kg- 1肌肉注射 ,隔日一次 ,连续 8wk,EL ISA法检测不同时间点家兔血清中 AK auto Ab与家兔角蛋白的反应强度 .结果　实验组家兔血清 A4 90 nm随时间推移而增加 ,对照组家兔血清A4 90 nm则基本保持不变 .结论　长期大量应用 r AK auto Ab的家兔血清中 ,r AK auto Ab与角蛋白的亲和力随时间推移而增加 .     

角朊细胞免疫生物学研究

观察了人角朊细胞株Ｃｏｌｏ－１６细胞的免疫生物学特点。通过流式细胞术和细胞因子 生物活性检测方法，研究了角朊细胞人白细胞抗原－ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）的表达和肿瘤坏死历子α（ＴＮＦ－α）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）的产生。     

天然抗角蛋白自身抗体IgG F(ab')2对培养角质形成细胞增殖的影响

1 材料和方法 1.1 材料 HD-97-1核酸蛋白检测仪;Wellscan MK2酶联检测仪;GL20A低温离心机;DYY-Ⅲ-7型转移电泳仪;Bio-Rad微型转移电泳槽;DU532紫外分正常人混合血清,正常年青人包皮,角朊细胞无血清培养基.     

不同年龄正常人IgM类抗角蛋白自身抗体自身反应特性的分析

目的：分析正常人血清IgM类抗角蛋白自身抗体（AKauto Abs）的自身反应特性及其与年龄的相关性。方法：应用间接ELISA法检测新生儿（脐带血）、幼儿、成年人及老年人血清IgM类AK auto Sbs的滴度，免疫印迹法检测抗体对自身角蛋白的反应特性，并对结果进行比较分析.结果：脐带血中存在IgM类AK auto Abs。但其滴度明显低于其他三个年龄组，而其他三组的抗体滴度无明显差异（P＞0．05）。新生儿组IgM类AKauto Abs 对角蛋白的反应模式在不同个体之间均匀一致，在其他三组不同个体之间有一定异质性，但不同年龄之间无相关性。结论：IgM类AKauto Abs天然存在于正常人体内，但出生时滴度较低,反应模式较为一致；幼年期抗体水平明显增加，反应模式趋向多元化；以后各年龄段基本保持稳定。     

抗角蛋白抗体在类风湿性关节炎中的诊断意义及与抗角蛋白自身抗体比较的实验

目的 探讨抗角蛋白抗体(AKA)对类风湿性关节炎(RA)诊断的特异性和敏感性，对比AKA与抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)两者的区别。方法 以SD大鼠的食管上皮与表皮为底物，应用间接免疫荧光(ⅡF)检测了146例RA患者及134例正常人血清的AKA与AK auto Ab、类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)的水平。结果 RA的血清可使食管上皮角质层出现板层状或片状荧光。AKA对RA诊断的特异性为90．3％，敏感性的59．59％。RF对RA诊断的特异性为71．65％，敏感性为64．39％，RF阴性的52例AKA阳性率达23．08％。AKA与RF同时阳性时，对RA诊断的特异性为94．78％，敏感性为66．44％。结论 AKA可以作为RA的诊断指标之一，联合检测AKA与RF可以提高诊断的特异性和敏感性。两组血清均使鼠表皮角质层呈线状荧光，提示AK auto Ab的天然存在。     

抗角蛋白自身抗体对角质形成细胞增殖影响的实验研究

目的 :研究抗角蛋白自身抗体治疗银屑病的作用机制。方法 :利用雌激素周期小鼠阴道上皮模拟银屑病角质形成细胞过度增殖 ,用天然缺乏颗粒层的鼠尾表皮模拟银屑病角质形成细胞分化障碍的特征。以抗角蛋白自身抗体腹腔注射作用于 BALB/ c小鼠 ,分别以生理盐水和丙种球蛋白作为对照 ,观察其对角质形成细胞增殖的调节作用。结果 :抗角蛋白自身抗体 ,有较好的降低嗜银蛋白含量和小鼠阴道上皮细胞有丝分裂 ,以及促使角质形成细胞分化的作用。结论 :抗角蛋白自身抗体治疗银屑病的作用机制与调节角质形成细胞增殖有关