STING/TBK1/NF-κB信号通路调节PD-1/PD-L1对肺癌细胞免疫逃逸的影响

目的 探讨干扰素基因刺激因子(STING)/TANK结合激酶1(TBK1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调节程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)对肺癌细胞免疫逃逸的影响。方法 分离培养小鼠脾脏淋巴细胞，以1∶1的比例与小鼠Lewis肺癌细胞共培养，随机分为对照组、diABZI(STING激活剂)组、BMS-1(PD-1/PD-L1信号抑制剂)组、diABZI+BMS-1组，以diABZI和BMS-1分组处理24 h,流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞中活化CD₈⁺T细胞比例；CCK-8实验检测脾脏淋巴细胞对Lewis细胞杀伤率；免疫印迹实验检测脾脏淋巴细胞和Lewis细胞PD-1、PD-L1和STING/TBK1/NF-κB通路蛋白表达。皮下注射Lewis细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型48只，随机分为对照组、diABZI组、BMS-1组、diABZI+BMS-1组，每组12只，以diABZI和BMS-1分组处理后，测量小鼠肿瘤体积；检测肿瘤组织中浸润的CD₈⁺T细胞数；免...     

DADS通过Chk1/Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路诱导白血病HL-60细胞G_2/M期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞及其分子机制。方法采用细胞计数、软琼脂克隆形成实验及流式细胞术观察DADS对HL-60细胞生长抑制与周期阻滞效应。Western blot检测DADS对HL-60细胞Chk1/2以及下游分子的影响。结果细胞计数显示,60、120μmol·L-1DADS处理后,其群体倍增时间从19.14 h增加到35.03、71.82 h(P<0.05)。软琼脂克隆形成实验表明,30、60、90、120μmol·L-1DADS对HL-60细胞克隆形成率的抑制率分别为35.06%、62.10%、93.79%、99.35%(P<0.05)。流式细胞术检测显示,60和120μmol·L-1DADS分别作用HL-60细胞24 h后,DADS可呈时间与浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。60μmol·L-1DADS处理HL-60细胞后,p-Chk1可呈时间依赖性上调(P<0.05),而Chk1与Chk2总蛋白和pChk2无改变(P>0.05)。并且,Cdc25C、CyclinB 1和CDK1分别呈时间依赖性下调(P<0.05),但14-3-3蛋白表达没有改变(P>0.05)。结论 DADS能够抑制HL-60细胞增殖,并通过Chk1/Cdc25C/CyclinB 1/CDK1通路阻滞HL-60细胞于G2/M期。     

肿瘤抑制基因PTEN/MMAC1/TEP1的研究现状及展望

PTEN基因是具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,在细胞的生长发育、凋亡、迁移及信号传导等方面起着重要的调控作用.PTEN在人类多种肿瘤中存在突变、缺失及甲基化,如前列腺癌、乳腺癌、胶质瘤等,并与肿瘤的发生、发展密切相关.因此,研究PTEN的信号传导机制及相关调节因子,将会对研究肿瘤的致癌机制、早期诊断、预后判断及基因治疗具有一定作用.     

PD-1/PD-L1抑制剂抗肿瘤临床研究进展

近年来,随着肿瘤免疫治疗研究的突破性进展,免疫检查点抑制剂,如程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)抑制剂已成为一种新的肿瘤临床治疗药物。目前已有多种PD-1/PD-L1抑制剂上市,并且获得了较为满意的临床效果。本文简述了PD-1/PD-L1抑制剂与传统药物的结构与生物学特点差异,介绍了PD-1/PD-L1抑制剂免疫疗法的临床应用,药物间相互作用等安全性数据,并对目前存在的超进展现象等用药挑战进行了展望。     

PD-1/PD-L1抑制剂介导的1型糖尿病研究进展

近年来,免疫检查点抑制剂已成为晚期癌症的重要治疗方法之一,随着免疫检查点抑制剂应用于临床,免疫相关不良反应也随之增多。其中,免疫相关的血糖异常越来越被关注,尤以1型糖尿病(T1DM)危害最大。本文主要综述程序性细胞死亡受体1/程序性细胞死亡-配体(Programmed cell death 1/Programmed cell death 1 ligand 1,PD-1/PD-L1)抑制剂治疗引起的1型糖尿病的临床特征、发病机制以及诊疗策略等,为肿瘤免疫的安全用药提供参考。     

PD-1/PD-L1抑制剂治疗血液恶性肿瘤综述

目的：程序性死亡受体-1（programmed death-1,PD-1）及其配体（programmed death-ligand 1,PD-L1）作为肿瘤免疫治疗的有效靶点之一,其抑制剂为血液恶性肿瘤的治愈带来了新的希望。本文旨在综述近年来PD-1/PD-L1抑制剂在血液恶性肿瘤,包括恶性淋巴瘤、白血病及多发性骨髓瘤（MM）方面的临床研究进展,并总结其对于血液恶性肿瘤的治疗效果。方法：在PubMed、Medline、The Cochrane Library、Embase、Elsevier、John Wiley等外文数据库及中国知网（CNKI）、万方、维普等中文数据库进行文献检索。结果：PD-1/PD-L1抑制剂多应用于恶性淋巴瘤的治疗,在各类白血病及MM的研究尚处于探索研究阶段。不同疾病获得的疗效存在差异,但整体较好,尤其是复发/难治经典霍奇金淋巴瘤（R/R cHL）。结论：PD-1/PD-L1抑制剂可显著提高缓解率,但仍有诸多争议有待进一步解决。     

PD-1/PD-L1抑制剂展现血癌治疗潜力

根据2014年第56届美国血液学会年会(ASH)上公布的数据,以默沙东Keytruda和百时美施贵宝Opdvio为代表的新一类抗癌免疫疗法PD-1/PD-L1抑制剂在缩小实体肿瘤方面已取得了巨大的成功。现在,这类药物在血液癌症领域也展现出了巨大潜     

ACE2通过下调AT1R和ERK1/2的磷酸化

目的探讨血管紧张素转换酶2(ACE2)对血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)和细胞外基质激酶(ERK)1/2磷酸化水平及细胞增殖的影响。方法荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达;将载有ACE2基因慢病毒表达载体(Lentiviral-ACE2)以感染复数为10(MOI=10)感染平滑肌细胞不同时间(24、48、72、96 h);采用CCK-8法检测平滑肌细胞增殖;Western blot检测ACE2、AT1R及ERK1/2磷酸化水平。结果目的蛋白GFP表达量明显增加,慢病毒ACE2的表达量成时间依赖性增加,并且在96 h时蛋白表达量较对照组和空载体组明显升高,(1.22±0.06 vs 0.53±0.03和0.53±0.09,P<0.05,n=4);AngⅡ(10-7 mol·L-1)可以促进平滑肌细胞的增殖,ACE2能够抑制AngⅡ诱导的平滑肌细胞增殖(0.53±0.10 vs 0.68±0.03,P<0.05,n=5);AngⅡ(10-7mol·L-1)作用平滑肌细胞12 h后AT1R明显上调,同时ACE2明显抑制AngⅡ诱导的AT1R的上调(0.34±0.01 vs 0.73±0.07,P<0.05,n=4);ACE2能够明显抑制AngⅡ诱导的ERK1/2的磷酸化水平(0.43±0.06 vs 0.71±0.08,P<0.05,n=4)。结论 ACE2可以通过下调AT1R和/及ERK1/2的磷酸化水平而抑制平滑肌增殖,提示ACE2的过表达具有血管保护作用。     

UFLC法测定复方丹参片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1

目的 探索建立超快速液相色谱（UFLC）法测定复方丹参片中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁。方法 采用SHIMADZU Shim-pack XR-ODS Ⅲ（2.0 mm×75 mm, 1.6 μm）色谱柱;以乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;检测波长为203 nm;进样体积为3 μL。结果 三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁分别在0.025 7～0.257 0、0.101 2～1.012 0、0.104 4～1.044 0 μg与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.7%、98.1%、98.8%。结论 本方法在15min内可以将三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁有效分离,节省了大量人力和流动相的消耗,为中药的质量控制技术提供参考方法。     

注射用丹参多酚酸对MCAO/R大鼠Nrf2/Keap1/HO-1信号通路的影响

目的 采用大鼠大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/R）模型考察注射用丹参多酚酸（SAFI）对脑缺血再灌注大鼠核因子E2相关因子2（Nrf2）/Kelch样ECH相关蛋白（Keap1）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路的影响。方法 线栓法构建大鼠MCAO/R模型,于术后24 h进行神经功能评分,将造模成功的大鼠随机分为模型组、丁苯酞（5 mL·kg^-1）组和SAFI低、中、高剂量（5.76、11.51、23.02 mg·kg^-1）组,尾iv给药,连续14 d。考察给药后各组大鼠神经功能缺损评分;ELISA法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、脑源性神经营养因子（BDNF）水平;TTC染色法检测脑梗死体积;HE染色观察脑组织病理变化;Western blotting法检测Nrf2、Keap1、HO-1蛋白表达。结果 与模型组比较,SAFI中、高剂量组和丁苯酞组大鼠的神经功能缺损评分显著降低（P＜0.05、0.01） ;SAFI各剂量组和丁苯酞组脑梗死体积显著减少（P＜0.01、0.001）,血清BDNF、SOD水平均显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）,MDA水平显著降低（P＜0.05、0.01）,脑组织病理变化明显减轻,水肿减轻; SAFI高、中剂量组及丁苯酞组Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）,SAFI低剂量组Keap1、HO-1蛋白表达显著升高（P＜0.01、0.001）。结论 SAFI可以减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,可能是通过促进Nrf2/Keap1/HO-1信号通路,抑制氧化损伤实现的。     

PD-1/PD-L1信号通路抗肿瘤抑制剂的研究进展

程序性细胞死亡受体1(programmed death 1,PD-1)及其配体(programmed death ligand 1,PD-L1)通路在许多实体瘤中过度激活,有助于肿瘤细胞免疫逃逸,所以阻断PD-1和PD-L1信号通路是恢复肿瘤特异性T细胞免疫能力从而治疗肿瘤的一个有效策略。目前,已有抗PD-1/PD-L1信号通路单克隆抗体药物上市,用于非小细胞肺癌、膀胱癌、三阴性乳腺癌及黑色素瘤等实体瘤的治疗。除了抗体药物外,靶向PD-1/PD-L1信号通路的肽类以及小分子抗癌药物也已成为研究热点。本文对近年来PD-1/PD-L1信号通路抑制剂在肿瘤治疗中的研究现状及进展进行总结。     

PD-1/PD-L1抑制剂在肝癌免疫治疗中的研究进展

原发性肝癌是目前我国第4位常见恶性肿瘤,其恶性程度极高,传统治疗方法对晚期肝癌的治疗效果欠佳。随着肿瘤免疫治疗机制的进一步阐明,许多免疫检查点抑制剂类新药被研发,并广泛地用于临床治疗中,成为继手术、放疗、化疗和中医药特色诊疗后治疗恶性肿瘤的新模式。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (CTLA-4)、程序性细胞死亡蛋白-1 (PD-1)和程序性细胞死亡配体1 (PD-L1)等免疫检查点是肿瘤免疫治疗的主要靶点。临床研究表明,PD-1/PD-L1抑制剂能使更多的肝癌患者获益,包括肝细胞肝癌(HCC)和胆管癌(ICC)2种主要的原发性肝癌。本文主要对以PD-1/PD-L1(程序性细胞死亡受体-1/程序性细胞死亡配体1)为靶点的肝癌免疫治疗中的研究进展进行综述。     

PD-1/PD-L1信号通路在黑色素瘤中的研究进展

细胞程序性死亡因子1(programmed death-1,PD-1)及其配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)是一对共刺激分子,激活细胞程序性死亡因子1及其配体1信号通路可抑制肿瘤特异性T细胞活性,有助于肿瘤细胞逃避免疫监视.而阻断该通路可以激活机体抗肿瘤免疫应答,抑制肿瘤细胞的生长...     

甜菜碱对糖尿病足大鼠创面愈合及AMPK/SIRT1/FoxO1通路的影响

目的 探讨甜菜碱对糖尿病足大鼠创面愈合及AMPK/SIRT1/FoxO1通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、二甲双胍（200 mg·kg^-1，ig给药）组和甜菜碱低、高剂量（50、100 mg ·kg^-1，ip给药）组，每组18只。除对照组外，其余组大鼠均构建糖尿病足模型。检测大鼠空腹血糖水平和创面愈合率；ELISA法检测大鼠血清炎性因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）水平；HE染色检测大鼠创面皮肤组织病理学改变；免疫组化染色检测大鼠创面皮肤组织中CD31蛋白阳性表达；试剂盒法检测大鼠创面皮肤组织中氧化应激指标超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量；Western blotting检测大鼠创面皮肤组织中AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/沉默信息调节因子相关酶1（SIRT1）/叉头框蛋白1（FoxO1）通路相关蛋白表达。结果 给药结束后，与对照组比较，模型组大鼠空腹血糖、血清IL-6、TNF-α、CRP水平以及创面皮肤组织中MDA含量和p-FoxO1/FoxO1值显著升高，创面愈合率和创面皮肤组织中CD31阳性表达率、SOD活性、p-AMPK/AMPK值和SIRT1蛋白表达水平显著降低（P<0.05），且创面皮肤组织病理学损伤严重；与模型组比较，甜菜碱低、高剂量组和二甲双胍组大鼠空腹血糖、血清IL-6、TNF-α、CRP水平以及创面皮肤组织中MDA含量和p-FoxO1/FoxO1值显著降低，创面愈合率和创面皮肤组织中CD31阳性表达率、SOD活性、p-AMPK/AMPK值和SIRT1蛋白表达水平显著升高（P<0.05），且创面皮肤组织病理学损伤均有不同程度改善，且甜菜碱高剂量组和二甲双胍组上述指标变化更为明显。结论 甜菜碱可激活AMPK/SIRT1/FoxO1通路，减轻糖尿病足大鼠氧化应激和炎症反应，促进血管生成，加速创面愈合。     

35例甲型H1N1流感患者药物利用分析

目的:调查分析35例临床确诊甲型H1N1流感患者治疗期间的药物利用情况。方法:采用HIS系统回顾性分析临床确诊的35例甲型H1N1流感患者的病案及用药记录,运用临床分型模型(普通型、重症型、危重型)分组,统一采用合理用药指标:限定成人日剂量、药物利用指数、用药例次数、医嘱数及人均药费、日均药费等。结果:35例患者共计应用17大类105种药物,使用例次最多的是止咳化痰药。DDDs排序最高的为抢救药、止咳化痰药和清热解毒药物。应用总天数最多的是止咳化痰药和清热解毒药物。结论:按WHO推荐的合理用药指标DUI=1标准,105种药物中DUI小于、等于和大于1的比例分别为31.4%、38.1%和30.5%。抗病毒药和止咳化痰药用量充分,激素类用量不大。     

食管癌组织KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达及其临床意义

目的 探讨食管癌组织中KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SABC法检测54例食管癌组织中KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达,并进行分析比较.结果 食管癌组织KAI1/CD82的阳性表达率为61.5%(32/52)、MRP1/CD9的阳性表达率为57.4%(31/54).两者的表达与淋巴结转移、肿瘤的分级、术后存活时间显著相关(P<0.05).结论 KAI1/CD82、MRP1/CD9可作为食管癌的预后指标.