聚合酶链反应对肺结核及结核性胸水诊断价值

对肺结核病人的痰液和结核性胸水进行PCR检测,并设对照组以观察PCR对结核的诊断及鉴别诊断价值。结果：肺结核组痰涂片阳性率为25％,PCR阳性率38．2％(P＜0．01),结核性脑水中涂片无1例查到结核菌,而NR阳性率为64．4％(P＜0．01),表明PCR技术对肺结核及结核性脑水的诊断敏感性高,特异性较好,可作为肺结核及结核性胸水诊断的有价值指标。     

肺结核5种体液聚合酶链反应检测分析

<正> 随着PCR检测技术的普及与提高,我院对1995年1月—1995年10月经胸片或痰菌阳性住院的200例患者,采用PCR检测其痰液、血液、尿液、胸     

聚合酶链反应对儿童结核性脑膜炎的检测及意义

聚合酶链反应对儿童结核性脑膜炎的检测及意义周红平饶兆英（江西省儿童医院中心实验室南昌３３０００６）随着全球结核病发病率的提高，儿童结核性脑膜炎的发生率也相应增多。典型的儿童结脑诊断并不困难，但对早期或不典型的儿童结脑在诊断上就有一定困难。传统的结核杆...     

聚合酶链反应检测儿童急性呼吸道流感嗜血杆菌感染的研究

目的：建立儿童急性呼吸道感染的PCR检测方法，并与常规方法进行比较。方城：选择编码外膜蛋白P6基因作为靶片段设计引物，分别用PCR方法及常规培养法检测78例急性呼吸道感染儿童。结果：建立的PCR检测法可以检测10—50个流感嗜血杆菌；78例急性呼吸道感染儿童中PCR方法检出42株(53．8％)，常规培养方法检出33株(42．3％)，培养法检测阳性者PCR方法均为阳性。PCR方法较培养法有显著性差异。结论：PCR方法检测呼吸道流感嗜血杆菌感染比常规方法更快速，更简便，更敏感。PCR方法检测流感嗜血杆菌有可能成为临床流感嗜血杆菌感染诊断的一种实用、理想的方法。     

聚合酶链反应对肺结核诊断的价值

对７８例肺结核和５６例其它肺部疾病的痰标本进行ＰＣＲ、培养检查和涂片镜检结核菌。结果表明，ＰＣＲ阳性率为６９．２％，培养阳性率３２．１％，涂片阳性率２３．１％。其它肺部疾病ＰＣＲ阳性率７．１％，涂片阳性１．８％，培养阳性率０。表明ＰＣＲ特异性好，敏感性高，且快速，是早期诊断和鉴别诊断的一种可靠方法。     

聚合酶链反应对肺结核的诊断价值

我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测临床诊断肺结核菌ＤＮＡ，同时检痰涂片及痰培养结核菌。结果ＰＣＲ的阳性率为７４．３０％，痰涂片阳性率为２．０８％，痰培养的阳性率为７．７０％。经统计学处理，前者均高于二者，Ｐ均＜０．００１。说明ＰＣＲ技术可快速高效检测肺结核病人结核菌的ＤＮＡ。     

聚合酶链反应在诊断肺结核中的应用

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７８例患者的痰、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和胸水标本进行结核菌检测；并同时进行涂片抗酸染色、皮肤结核菌素试验及血结核菌抗体检测。结果：ＰＣＲ阳性率为４６．１５％，与涂片镜检、结核菌素试验强阳性、血结核菌抗体阳性率（分别为３．８５％、１７．９５％、１１．５４％）相比均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。由此可见ＰＣＲ方法比传统方法具有更高的结核杆菌检出率。     

应用PCR快速诊断小儿结核性脑膜炎的研究

作者报道特异性寡核苷酸引物引导聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ。所用引物来自于编码结核杆菌的６５ＫＤａ蛋白质抗原基因，产生特异的３８３ｂｐ片段。对１０倍连续稀释的人型结核杆菌ＤＮＡ进行ＰＣＲ，可检测出１ｐｇ结核杆菌ＤＮＡ，相当于１０～１００个细菌。应用ＰＣＲ检测４２例结脑脑脊液，阳性率为５７．１４％，直接涂片镜检和细胞培养阳性率分别为７．１４％和１４．２８％；４６例非结脑脑脊液中，３种检测结果均阴性。研究结果表明，ＰＣＲ检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ有较高的敏感性和特异性，它快速、简便，有望成为一种临床常规检测结核杆菌方法。     

荧光定量聚合酶链反应诊断结核病临床应用研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术诊断结核病临床应用价值。方法应用FQ-PCR技术检测患者痰、外周血、体液（包括各种渗出液及脑脊液）中结核分枝杆菌DNA（TB-DNA），并与定性PCR、常规细菌学涂片法和培养法比较。结果112例结核病患者FQ-PCR、定性PCR、涂片法和培养法检测各类标本阳性率为59．82％，88．82％，25．89％，29．46％，非结核组43例FQ-PCR法阳性率是2．32％，PCR法是18．60％，FQ-PCR检测其标本TB-DNA的特异性为97．67％，敏感度为59．82％，阳性预测值为98．53％。结论FQ-PCR检测TB-DNA是一种快速简便、敏感性、特异性、可信性较高的方法，对诊断结核病具有临床意义，且适用于临床检验实验室，其含量变化对判断疗效有一定的提示作用。     

一例原发性肺结核发展为继发性肺结核的演变过程

目的 探讨原发性肺结核发展为继发性肺结核的演变过程。 方法 报道1例原发性肺结核在抗结核治疗过程中发展为血播性肺结核及继发性肺结核的诊疗过程。 结果 患者,男,29岁,因发热1月入院。既往曾患克隆恩病,给予英夫利昔单抗治疗。胸部CT提示纵隔淋巴结肿大,病理诊断原发综合症,给予抗结核治疗过程中发展为血播性肺结核,并进一步发展为继发性肺结核。 结论 英夫利昔单抗在结核病发生发展中具有重要作用。     

应用聚合酶链反应快速检测支气管肺泡灌洗液中的结核菌

目的：本研究评价聚合酶链反应（PCR）技术检测支气管肺泡准洗液中结核杆菌DNA的作用。方法：应用PCR技术对161例（肺结核81例，非肺结核80例作为对照）支气管肺泡灌洗液（BALF）进行结核菌DNA检测。结果：结核组BALF的阳性率：PCR为69．l％、徐片抗酸染色为86％、培养为98％，PCR的阳性率与涂片和培养比较，差异有显著性（P＜0．01）。非结核对照组BALF的阳性率为：PCR2.5％，涂片0％，培养0％。结论：PCR技术测定BALF中的结核菌是诊断肺结核的一种快速、敏感、特异的方法，尤其适用于无痰的患者。     

PCR检测食蟹猴疟原虫的实验研究

目的 建立一种特异、敏感、简捷的PCR检测食蟹猴疟原虫（P.C）的方法。方法 检测样品来自人工接种感染P.C的阳性猴血膜及滤纸血斑。根据P.C　SSUrRNA基因序列,设计P.C特异引物Pc1和Pc3,用PCR常规操作对P.C DNA模板扩增。同时用多对间日疟原虫（P.V）特异引物对照比较。结果 从 P.C血样中扩增出 425bp特定扩增带,而P.V红内期和子孢子、恶性疟原虫、伯氏疟原虫、人基因组DNA和健康猴血均未见扩增带;敏感度可检测 1.68 ×10-6的原虫感染水平。同时发现P.C对多对 P.V特异引物均出现阳性扩增带,以往一直未被注意。结论 该方法检测 P.C特异、敏感和简捷,提供了鉴别 P.V与 P.C的准确诊断。建议在 PCR的P.V引物设计和特异性的检测过程,把应用P.C　DNA检测列为常规对照,以提高检测质量。     

原位聚合酶链反应检测结核分枝杆菌L型的初步研究

目的：建立一种不需提取ＤＮＡ的检测分枝结核杆菌Ｌ型的分子生物学方法。方法：采用原位聚合酶链反应（原位ＰＣＲ）技术,扩增结核杆菌Ｌ型及其感染的人和小鼠血标本中的结核杆菌ＩＳ６１１０基因,再用免疫组化技术显色。结果：结核杆菌Ｌ型菌株中的ＤＮＡ被扩增,血标本中,可见到红细胞和淋巴细胞周围粘附大量结核杆菌ＤＮＡ阳性颗粒。结论;红细胞和淋巴细胞具有免疫粘附功能,原位ＰＣＲ快速、简便,可用于检测稳定和不稳定分     

聚合酶链反应快速检测加德纳菌的方法和应用

目的 建立聚合酶链反应快速检测加德纳菌方法,用于细菌性阴道病的诊断和治疗。方法 根据加德纳菌基因序列中IIS-23srRNA基因区设计并合成特异性引物,应用聚合酶链反应扩增阴道或宫颈分泌物中的加德纳菌,并与革兰染色和分离培养进行对照检测。结果 经对阴道加德纳菌和5种常见的阴道感染病原体检测,证实所用引物具有较高的特异性;敏感性实验结果10^2可扩增出明显的区带;在50例宫颈分泌物标本中,革兰染色阳性检出率为18%（9/50）、分离培养阳性检出率为16%（8/50）,聚合酶链反应阳性率为28%（14/50）。结论 采用聚合酶链反应检测阴道分泌物中的加德钠菌,用于细菌性阴道病的快速诊断,有可能成为细菌性阴道病实验室诊断的主要检测方法。     

聚合酶链反应检测外周血和腹水标本中结核菌的价值

目的 探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测外周血白细胞和腹水中结核分支杆菌的结核性腹膜炎诊断中的价值。方法 应用ＰＣＲ和抗菌染色镜检（镜检）对５８例结核性腹膜炎和３０例对照组外周血白细胞及腹水标本进行结核菌检测。结果 ５８例结核性腹膜炎外周血和腹水ＰＣＲ阳性率分别为７９．３％和６０．３％,外周血,腹水标本配对检测总阳性率为８８％,腹水镜检阳性率为１．７％,ＰＣＲ与镜检比较,Ｘ＾２检验,Ｐ〈０．００１     

多重PCR法检测结核分枝杆菌耐药基因研究

目的:建立多重PCR法快速检测结核分枝杆菌耐药基因。方法:采用多重聚合酶链反应(PCR)同时扩增46株结核分枝杆菌临床分离株、48株北京标准菌株、40例耐药及40例非耐药的结核分枝杆菌临床分离菌株的inhA、katG、rpoB、IS1081等基因并采用测序的方法进行验证。结果:所有耐药样本基因(包括利福平、异烟肼耐药基因)及野生型菌株均被成功扩增。结论:应用多重PCR技术可同时快速检测结核分枝杆菌耐药基因。     

沙门菌PCR检测技术应用进展

沙门菌是引起食物中毒的主要致病菌之一,其传统检测方法包括选择性培养、生化鉴定等步骤,耗时长、灵敏性差,很难满足快速检测要求。聚合酶链反应（PCR）技术是近年来广泛应用于食品中沙门菌快速检测的方法之一,其检测目的基因多种多样,主要包括属特异性引物基因、血清群特异性引物基因与血清型特异性引物基因。本文主要概述PCR技术应用于沙门菌检测的各种目的基因,并简要介绍常规PCR、多重PCR及实时定量PCR等技术的应用。