冠心病心脾阳虚证动物模型的建立及附子理中汤的反证效果

目的: 探索冠心病心脾阳虚证动物模型的建立方法并观察附子理中汤的对模型的反证效果。 方法: 100只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、附子理中汤低剂量、中剂量、高剂量组5组,每组20只。模型组采用肩胛骨间棕色脂肪组织（BAT）切除术,术后以高脂饲料喂养、隔日寒冷环境刺激连续21 d,从第22天开始脑垂体后叶素（10 U·kg^-1）皮下注射,每天1次,连续7 d。第29天开始,低剂量、中剂量、高剂量组在模型组基础上,以附子理中汤分别按10,20,40 g·kg^-1 ig每天1次,连续7 d。观察大鼠心功能、磷酸肌酸激酶、胆碱酯酶、甘油三酯、总胆固醇、体重和体温等的变化。 结果: 模型组大鼠有类似于冠心病血脂升高、心肌缺血损伤、心功能不全以及脾阳虚证形寒肢冷、纳少、消瘦、便溏及腹泻表现。与正常组和中剂量、高剂量组比较差异显著（P<0.05）或高度显著（P<0.01）。 结论: 通过复合方式建立病证结合的冠心病心脾阳虚证动物模型是可行的。附子理中汤高剂量能一定程度改善冠心病心脾阳虚证动物模型病理变化。     

苓桂气化方对射血分数保留性心力衰竭模型大鼠心脏功能及糖脂代谢的影响

[目的] 观察苓桂气化方（LGQH）对射血分数保留性心力衰竭（HFpEF）模型大鼠的心脏功能及血糖、血脂相关指标的影响。[方法] 采用高脂高糖饮食诱导加低剂量链脲佐菌素（STZ）建立复合HFpEF心力衰竭大鼠模型,随机分为HFpEF模型组、诺欣妥组、苓桂气化方低剂量、高剂量组,以及自发性高血压大鼠（SHR）正常对照组、Wistar kyoto（WKY）空白对照组,各给药组灌胃相应药物,HFpEF模型组及两个对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。超声心动图检测大鼠心脏超声功能指标包括舒张早期二尖瓣血流速度（E）、二尖瓣心房收缩期最大血流（A）等;酶联免疫吸附（ELISA）法测定大鼠空腹胰岛素（FINS）、C肽（C-P）、心钠素（ANP）、B型脑尿钠肽（BNP）等的含量;取大鼠心脏组织做大体病理和病理切片检测。[结果] 与HFpEF组比较,诺欣妥和苓桂气化方低、高剂量组均对E、E/A比值有一定的改善作用（P<0.05或P<0.01）,苓桂气化方组可使大鼠ANP、BNP含量不同程度的减低（P<0.05或P<0.01）,而诺欣妥组仅BNP含量较前降低（P<0.01）,诺欣妥和苓桂气化方低、高剂量组可不同程度降低FINS、C-P及LEP含量（P<0.05或P<0.01）,苓桂气化方低、高剂量组还可降低GSP及GLU水平（P<0.05或P<0.01）;苓桂气化方低、高剂量组大鼠血脂指标TC及LDL-CHO水平均较前降低（P<0.05或P<0.01）;诺欣妥和苓桂气化方低、高剂量组均对大鼠hs-CRP指标有明显的改善作用（P<0.01）。[结论] 苓桂气化方具有改善大鼠心脏舒张功能,抑制心房结构性重构,同时具有降低炎性因子、改善糖脂代谢及内皮功能的作用。     

附子理中汤对脾阳虚证大鼠免疫细胞因子的影响

目的: 观察附子理中汤对免疫细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨其对脾阳虚证免疫功能影响的可能机制。 方法: Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只。在模型组基础上,附子理中汤低、中、高剂量组按5,10,20 g·kg^-1 ig,每天1次,连续4周。检测胸腺指数、脾脏指数、IL-2,IL-6,IL-10,TNF-α含量。 结果: 与对照组比较,模型组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均降低(P<0.05或P<0.01),IL-10显著升高(P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤中、高剂量组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均升高(P<0.05或P<0.01),IL-10降低(P<0.05或P<0.01)。 结论: 附子理中汤对细胞免疫因子产生影响,通过细胞免疫因子之间的效应可能是其改善脾阳虚大鼠免疫功能的机制之一。     

胺甲氧斑蝥素对惊厥大鼠脑电和GABAC受体ρ2 mRNA表达的影响

 目的 研究胺甲氧斑蝥素（AMOC对电刺激大鼠坐骨神经和青霉素（PNC协同诱发痫性放电模型的对抗作用及对皮层脑电图（EcoG、诱发电位（CEP和γ-氨基丁酸（GABAC受体ρ2 mRNA表达的影响。方法 建立电刺激坐骨神经和PNC协同诱发大鼠惊厥模型,丙戊酸钠（VPA为阳性对照,以惊厥潜伏期和Racine痫性行为学分级作为评定药效指标,RM6240C型多道生物信号采集处理系统同步记录惊厥大鼠EcoG和CEP,观察AMOC的抗惊厥作用及对EcoG痫样波潜伏期、发放频率、最高振幅和CEP振幅的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术（RT-PCR检测海马区GABA_C受体ρ2 mRNA的表达变化。结果 AMOC和VPA均能明显延长大鼠惊厥潜伏期,减轻PNC诱发大鼠惊厥发作程度,明显延长痫性放电潜伏期,减少相同时间内痫样波发放频率,降低最高振幅和诱发电位振幅,与PNC模型组相比有显著性差异（P<0.01;PNC模型组GABA_C受体ρ2 mRNA表达量较正常组下降,有统计学意义（P<0.05;AMOC和VPA组较PNC模型组明显升高,差别有统计学意义（P<0.01。结论 AMOC和VPA均可对抗电刺激坐骨神经和PNC协同诱发大鼠惊厥发作,抑制痫性放电和诱发电位振幅,提高海马区GABA_C受体ρ2 mRNA基因表达量。     

当归芍药散含药血清调控UPP途径对Aβ1-40损伤PC12细胞的保护作用及机制

目的 探讨当归芍药散（DSS）含药血清对β淀粉样蛋白（Aβ）_1-40损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞的保护作用及对泛素-蛋白酶体途径（UPP）的调控作用机制。方法 采用Aβ_1-40干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、DSS含药血清高、中、低剂量组（10%、5%、2.5%）。细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞Aβ和磷酸化（p）-Tau蛋白含量,免疫荧光细胞化学（ICC）标记UPP重要靶点泛素（Ub）、泛素连接酶E3（E3）、26S蛋白酶体、泛素羧基端水解酶1（UCHL1）和UCHL3蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Ub、E3、26S、UCHL1、UCHL3 mRNA和蛋白的表达。结果 根据CCK-8实验结果,筛选5 μmol·L^-1、48 h为PC12细胞损伤最佳造模条件。与空白组比较,模型组细胞存活率降低（P<0.05）、凋亡率升高（P<0.05）,Aβ及p-Tau表达升高（P<0.05）,Ub蛋白及mRNA表达升高,26S、E3、UCHL1+3蛋白及mRNA表达降低（P<0.05）。与模型组比较,DSS中剂量组细胞存活率升高（P<0.05）;DSS各剂量组细胞凋亡率下降（P<0.05）;DSS各剂量组Aβ含量降低（P<0.05）,DSS高、中剂量组p-Tau 含量降低（P<0.05）;DSS各剂量组Ub mRNA表达降低（P<0.05）,DSS各剂量组26S mRNA表达升高（P<0.05）,DSS中剂量组UCHL1 mRNA表达升高（P<0.05）,DSS高、中剂量组E3和UCHL 3mRNA表达升高（P<0.05）;DSS各剂量组Ub蛋白表达降低,DSS高、中剂量组26S、E3、UCHL1+3蛋白表达升高,以DSS中剂量效果最佳。结论 DSS含药血清可提高细胞存活率、降低细胞凋亡率、清除Aβ和p-Tau蛋白沉积,对Aβ_1-40损伤PC12细胞有保护作用,其作用可能是通过调控UPP降低Ub表达及升高26S、E3、UCHL1及UCHL3表达来发挥。     

附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖和miR-155表达的影响

目的 观察附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖的影响,研究附子汤对miR-155表达的影响并进一步探讨其抗类风湿性关节炎的作用机制。方法 体外培养MH7A细胞,设空白组、附子汤高剂量组（25 g·L^-1）、低剂量组（12.5 g·L^-1）和硫酸羟氯喹阳性药组（0.006 25 g·L^-1）,采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）试剂盒法检测细胞增殖,流式细胞术检测MH7A细胞周期的改变;应用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法检测药物处理后miR-155及其下游基因含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶-1（SHIP-1）、蛋白激酶B3（Akt3）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR） mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、Akt3和mTOR的蛋白表达。结果 附子汤体外在质量浓度6.25 g·L^-1以上时,能明显抑制MH7A增殖,且呈明显的量-效关系和时-效关系。与空白组比较,附子汤高、低剂量组G₂/M期细胞比例均明显增加（P<0.05）,高剂量组G₀/G₁期细胞比例明显降低（P<0.05）,其细胞周期的阻滞作用呈明显的量效关系。与空白组比较,附子汤高、低剂量组miR-155的表达均明显下调（P<0.05）;附子汤高剂量组SHIP1 mRNA表达明显上调、Akt3 mRNA表达明显下调（P<0.05）,附子汤高、低剂量组mTOR mRNA表达均明显下调（P<0.05）。与空白组比较,附子汤高、低剂量组的PI3K、Akt3和mTOR的蛋白表达均明显下调（P<0.05）。结论 附子汤对MH7A细胞增殖具有显著的抑制作用,作用机制与下调miR-155的表达,从而促进SHIP-1的表达,抑制其下游PI3K/Akt3/mTOR信号通路的基因表达有关。     

健脾消癌方通过lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞株HCT116转移的机制

目的 观察健脾消癌方对Hox转录本反义基因间RNA（lncRNA HOTAIR）/ 酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号传导及转录激活因子3（STAT3）信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结肠癌转移的可能作用机制。方法 分析不同细胞株lncRNA HOTAIR的表达情况,采用10%,15%,20%健脾消癌方含药血清作用于HCT116细胞,transwell实验检测健脾消癌方对HCT116细胞的侵袭能力影响,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测lncRNA HOTAIR,JAK2,STAT3 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测JAK2,磷酸化STAT3（p-STAT3）,STAT3蛋白表达情况。结果 结肠癌细胞株HCT116中lncRNA HOTAIR的表达水平最高,采用此细胞作为观察对象。与空白组比较,健脾消癌方各组的侵袭细胞数均降低（P<0.05,P<0.01）;健脾消癌方中剂量组JAK2 mRNA相对表达水平降低（P<0.05）;健脾消癌方中、高剂量组的lncRNA HOTAIR,健脾消癌方高剂量组的JAK2 mRNA相对表达水平显著降低（P<0.01）。与空白组比较,健脾消癌方中剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均降低（P<0.05）;健脾消癌方中、高剂量组的JAK2蛋白,健脾消癌方高剂量组的p-STAT3蛋白相对表达水平均明显降低（P<0.01）。结论 健脾消癌方可有效抑制结肠癌细胞转移,其机制可能与抑制lncRNA HOTAIR/JAK2/STAT3信号通路的表达相关。     

3种冰片防治AMI模型大鼠的抗炎及调控HIF-1α/VEGF

目的 探讨艾片（左旋龙脑）、天然冰片（右旋龙脑）、冰片（合成龙脑）不同剂量对实验性急性心梗（AMI）模型大鼠心电生理及抗炎、调控缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子（VEGF）心血管保护的可能机制。方法 SD雄性成年大鼠，按体重随机分为假手术组、模型组、溶剂模型组、硝酸甘油组、天然冰片高、中、低剂量（0.6、0.3、0.15 g·kg^-1）组、艾片及合成冰片高、中、低剂量（0.2、0.1、0.05 g·kg^-1）组，每组10只。按10 mL·kg^-1灌胃，预给药3 d，末次给药30 min后，施冠状动脉左前降支（LAD）结扎造模，将模型成功大鼠连续治疗3 d。采用BL-420N生物系统分析造模前后及治疗3 d后心电图及心率变异性（HRV），实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测心肌组织中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6） mRNA表达量，蛋白免疫印迹法、免疫组织化学法检测血管内皮生长因子受体1（VEGFR1）、HIF-1α、CD34蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，模型组造模当天及干预3 d后心率、心电ST段、T波、QRS时限、QTC间期、Q波显著升高，HRV及T波明显改变（P<0.05，P<0.01）；与溶剂模型组比较，造模当天艾片中、低剂量组、天然冰片组心率，艾片组、天然冰片高、中剂量、冰片高剂量组ST波幅，艾片组、天然冰片中、低剂量、冰片高剂量组HRV参数，艾片高、中剂量、天然冰片低剂量、冰片组低频与高频范围内的功率谱比值（LF/HF），艾片、冰片高剂量、天然冰片中剂量组T波波幅，艾片中、低剂量、天然冰片高、中剂量组QTC间期，艾片与天然冰片各自高、低剂量、冰片组QRS时限，均明显减小或缩短（P<0.05，P<0.01）；治疗3 d后艾片组、天然冰片高、中剂量、冰片中剂量组心率，艾片组、天然冰片高、中剂量、冰片高剂量组的ST段波幅，艾片与天然冰片各自高剂量、冰片高、中剂量组的QTC间期与QRS时限及Q波波幅，艾片中剂量组QRS时限，天然冰片中剂量组QTC间期、冰片低剂量组Q波，皆显著减小或缩短（P<0.01）；艾片与天然冰片各自中、低剂量、冰片高、中剂量组的IL-1β、IL-6 mRNA表达量显著下调（P<0.01）；艾片、天然冰片各自高、中剂量、冰片高、低剂量组LF/HF明显减小（P<0.05，P<0.01）；艾片高剂量、天然冰片组、冰片高、低剂量组HRV及天然冰片高、中剂量、冰片高剂量组T波波幅显著增大；艾片中、低剂量、天然冰片低剂量、冰片高剂量组HIF-1α、VEGFR1、CD34蛋白，天然冰片中剂量组VEGFR1、CD34蛋白表达明显上调（P<0.05，P<0.01）。结论 3种冰片防治给药可不同程度改善AMI模型大鼠心率、心率变异性、心电图，可能会通过抗炎、促血管新生而发挥心肌保护作用。综合效应提示艾片较优，天然冰片略次、冰片次之。     

蒺藜对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响

目的： 研究蒺藜对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响。 方法： 以大强度耐力训练大鼠为模型,65只42 d龄雄性Wistar大鼠为对象,随机分为5组：静止对照组（C组）、运动对照组（T组）、运动+低剂量蒺藜组（TML组）、运动+中剂量蒺藜组（TMM组）,运动+高剂量蒺藜组（TMH组）每组12只（剔除不符合实验要求的大鼠）。每天ig给药1次,蒺藜组剂量分别为0.5,1,3 g·kg^-1,ig体积为5 mL·kg^-1,C组、M组ig等量生理盐水。49 d力竭游泳训练后,测定体重、力竭游泳时间及血睾酮等生化指标。 结果： 蒺藜各剂量组体重小于C组（P<0.05）,大于T组（P<0.05）;力竭游泳时间长于C组和T组（P<0.01）;血清睾酮低于C组（P<0.05）,高于T组 （P<0.01）;血清皮质酮水平各组间均无显著差异,各组间血清睾酮与皮质酮比值变化与睾酮变化较为一致;肝糖原（P<0.05）、肌糖原（P<0.01）高于C组和T组;促卵泡激素无明显影响;血尿素氮高于C组 （P<0.05）,低于T组（P<0.05）;血红蛋白低于C组（P<0.05）,高于T组 （P<0.05）。 结论： 蒺藜可以减轻大鼠血睾酮受高强度运动量的影响,并维持在正常生理水平;可以促进蛋白质合成,抑制氨基酸和蛋白质分解,提高运动训练大鼠血红蛋白含量和糖原的储备。     

龟甲胶对肾阴虚大鼠抗氧化活性和Bax、Bcl-2蛋白表达的影响＊

目的 探讨龟甲胶对肾阴虚大鼠抗氧化活性及Bax（Bcl-2同源二聚体X，Bcl2-Associated X）、Bcl-2（B淋巴细胞瘤-2，B-cell lymphoma-2）蛋白表达的作用机制。方法 60只SPF级雌性SD大鼠适应性喂养3天后，随机分为正常组，模型组、给药组（龟甲胶低剂量组、龟甲胶中剂量组、龟甲胶高剂量组）和阳性（六味地黄丸）组，给药21天。除正常组外，其余大鼠通过灌胃甲状腺素建立肾阴虚大鼠病理模型；于造模同时正常组及模型组每天灌胃等体积生理盐水。给药期间，观测大鼠脏器（肝脏、肾脏）指数、体质量、肛温、饮水量和进食量的变化；运用酶联免疫（ELISA）法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、雌二醇（E2）、睾酮（T）水平；免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白表达变化；RT-qPCR（荧光定量聚合酶链式反应，Real-time quantitative PCR）法检测Bax、Bcl-2蛋白mRNA相对表达量，并进行组间比较。结果 龟甲胶各给药组均能明显缓解大鼠的阴虚状态，龟甲胶中、高剂量组能显著增加肾阴虚大鼠体质量及肝脏指数（P < 0.05，P < 0.01），龟甲胶高剂量组能升高大鼠肾脏指数（P < 0.01）；龟甲胶各剂量组均能降低肾阴虚大鼠肛温（P < 0.05，P < 0.01）。龟甲胶中、高剂量组大鼠血清中SOD、GSH-Px、E2水平升高（P < 0.05，P < 0.01），MDA含量降低（P < 0.05）；龟甲胶高剂量组大鼠血清中T含量显著升高（P < 0.05，P < 0.01）。龟甲胶低、高剂量组大鼠肾组织中Bax表达水平降低（P < 0.05）；龟甲胶高剂量组大鼠肾组织中Bcl-2表达水平显著升高（P < 0.01）。结论 龟甲胶具有传统滋阴功效，能增强阴虚状态下机体抗氧化能力，提高SOD活力、降低MDA含量；同时下调Bax以及上调Bcl-2等衰老相关因子的蛋白表达，从而延缓机体的衰老。     

附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4的影响及其止泻机制

目的:观察附子理中汤对脾阳虚大鼠水通道蛋白4(AQP4)的影响,探讨附子理中汤止泻作用的机制.方法:Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只.在模型组基础上,低剂量组按10g·kg-1ig,中剂量组按20 g·kg-1 ig,高剂量组按40 g·kg-1 ig,每天1次,连续4周.取结肠标本,酶联免疫法(ELISA)法检测AQP4含量,RT-PCR法检测AQP4 mRNA表达.结果:和对照组比较,模型组的AQP4含量(13.25 ±4.22) ng·L-1.AQP4mRNA相对表达量(0.38±0.11)均降低(P＜0.01或P＜0.05).和模型组比较,附子理中汤中剂量组的AQP4含量(23.84±5.68) ng·L-1,AQP4 mRNA相对表达量(0.54±0.26)均升高(P＜0.05).和模型组比较,高剂量组的AQP4含量(28.98±6.12) ng·L-1,AQP4 mRNA相对表达量(0.62±0.32)均显著升高(P＜0.01).结论:附子理中汤能恢复脾阳虚大鼠AQP4含量和AQP4 mRNA正常表达,以高剂量的恢复作用较明显,附子理中汤可能通过上调AQP4表达,促进胃肠道黏膜对水液的重吸收而起到止泻的作用.     

脾阳虚证失眠大鼠模型的建立和附子理中汤的干预效应

目的:探讨附子理中汤对脾阳虚证失眠大鼠下丘脑增食素(orexin) mRNA表达及下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA axis)的影响及机制.方法:100只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、附子理中汤低剂量组,中剂量组和高剂量组5组,每组20只.模型组按400 mg· kg-1 ip对氯苯丙氨酸(PCPA)每天1次,连续2d,建立脾阳虚证失眠模型.低剂量组、中剂量组、高剂量组分别以附子理中汤10,20,40 g·kg-1 ig,每日1次,连续7d.疗程结束后对各组大鼠用ELISA法检测下丘脑5-羟色胺(5-HT)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,RT-PCR法检测下丘脑orexin mRNA表达.结果:与正常组相比,模型组orexin mRNA表达量显著升高(P＜0.01),5-HT含量显著降低(P＜0.01);CRH,ACTH含量显著升高(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组相比,附子理中汤高剂量组orexin mRNA表达量显著降低(P＜0.01),附子理中汤高、中剂量组5-HT含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05);高剂量组CRH,ACTH含量显著降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论:附子理中汤下调orexin mRNA表达,抑制HPA轴激活,降低应激反应性,可能是其治疗失眠的机制之一.     

附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4-ANP-pGC轴的影响

目的:从水通道蛋白4-心房利尿钠钛-非可溶性鸟苷酸环化酶(aquaporin4-atrial natriuretic peptide-particulate guanylate cyclase,AQP4-ANP-p GC)通路探讨附子理中汤温阳健脾祛湿的作用机制。方法:选清洁级Wistar大鼠120只,分为空白组、假手术组、模型组和附子理中汤高、中、低剂量组共6个组,每组20只。空白组常态饲养。假手术组与模型组采用"肩胛骨间棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激"方法造模(假手术组只找到BAT但不切除)。术后第1天始喂高脂饲料共30 d。在模型组基础上,高、中、低剂量各组分别予附子理中汤40,20,10 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,其他组给予等体积的生理盐水灌胃。于给药30 d后(其中模型组于造模成功后第1天)取材,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃窦与回肠组织病理形态学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测ANP含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测AQP4 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AQP4含量。结果:大鼠胃窦与回肠组织HE染色光镜下观察可见,附子理中汤各剂量组大鼠胃肠组织病理学改变均有不同程度的减轻,以高剂量组效果明显。与空白组和假手术组相比,模型组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量降低(P0.05,P0.01)。与模型组相比,中、高剂量组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量升高(P0.05,P0.01)。结论:附子理中汤可能通过影响AQP4-ANP-p GC通路中AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA表达以参与脾阳虚证大鼠水液代谢的调节。     

铁皮石斛对运动疲劳小鼠能量代谢和CNTFmRNA表达的影响

目的：通过建立T淋巴细胞（T细胞）免疫功能缺陷的小鼠动物模型,观察壮尔颗粒对小鼠体内细胞因子平衡状态的影响。方法：将48只小鼠随机分为空白组,模型组,玉屏风颗粒组,壮尔颗粒高、中、低剂量组,空白组和模型组ig给予生理盐水,其余各组分别ig给予按玉屏风颗粒溶液（3.38 g·kg^-1）,壮尔颗粒高、中、低剂量组（4.04,2.02,1.01 g·kg^-1）。给药10 d后,空白组经鼻滴入10 μL无菌生理盐水,其余各组经鼻滴入10 μL肺炎链球菌悬液（密度为1×10⁵CFU/mL）,制备小鼠T细胞免疫功能缺陷的动物模型。应用流式微球技术（CBA）分别测定小鼠血清和小鼠脾脏白介素（IL）-2等细胞因子的水平,免疫组织化学染色法检测小鼠脾脏中IL-2和IL-4的表达。结果：与正常组比较,模型组小鼠血清和脾脏中IL-2,肿瘤坏死因子（TNF）,干扰素-γ（IFN-γ）的水平均有显著性下降（P<0.05）,同时IL-4,IL-6,IL-10,IL-17A的水平有显著性升高（P<0.05）。与模型组比较,壮尔颗粒高、中剂量组可显著提高小鼠血清和脾脏中IL-2,TNF,IFN-γ水平（P<0.05）,同时IL-4,IL-6,IL-10,IL-17A的水平均有显著性下降（P<0.05）,并且小鼠脾脏IL-2表达上调和IL-4表达下调,有统计学意义（P<0.05）。结论：壮尔颗粒能够通过调节小鼠体内细胞因子的平衡来增强机体免疫功能。     

车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的肾保护作用及机制

目的:观察车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的药效学指标及对肾组织半胱氨酸蛋白酶-1(cysteine-aspartic acid protease-1,Caspase-1),Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)和凋亡相关点样蛋白(fapoptosis-associated specklike protein,ASC)表达的影响,探讨车前子水煎液对痛风性肾病大鼠的肾保护作用和初步机制。方法:60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,阳性药组(别嘌醇,50 mg·kg~(-1)),车前子水煎液高、中、低剂量组(1.62,0.81,0.27 g·kg~(-1)),除正常组外,其余各组采用腺嘌呤和酵母联用的方法制作痛风性肾病大鼠模型,给予车前子水煎液,观察肾脏特征;计算肾重指数;检测大鼠血清中尿酸(uric acid,UA),尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),肌酐(creatinine,SCr),丙氨酸氨基转移酶(cereal third transaminase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST),碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP);采用光镜观察肾脏病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western bolt)和免疫组化法(immunohistochemical methods)测定肾组织中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达量。结果:与模型组比较,别嘌醇组和车前子水煎液各剂量组的肾脏体积减小,别嘌醇组和车前子中剂量组肾重指数降低,车前子高剂量组肾重指数降低明显,别嘌醇组和车前子水煎液各剂量组血清UA,BUN,SCr,ALT,AST,ALP明显降低(P0.05,P0.01),肾组织病变程度均有一定减轻,其中车前子高、中剂量组最好,别嘌醇组和车前子水煎液高剂量组中NLRP3,ASC和Caspase-1蛋白的表达明显降低(P0.05,P0.01),车前子水煎液中剂量组中NLRP3蛋白的表达降低(P0.05)。结论:车前子对痛风性肾病大鼠具有较好肾保护作用,可能与其下调肾组织中NLRP3,ASC和Caspase-1蛋白表达,抑制下游炎性细胞因子释放有关。     

中医综合疗法治疗脾肾阳虚水停证肝硬化腹水60例临床观察

目的:观察加味附子理中汤内服、神阙穴贴敷和艾灸的综合疗法治疗肝硬化腹水(脾肾阳虚水停证)的临床疗效。方法:将118例患者随机按数字表法分为对照组58例和观察组60例。对照组卧床休息,减少钠盐摄入,限制患者液体输入量;纠正水、电解质紊乱和酸碱平衡;给予保肝、利尿等处理。观察组在对照组治疗的基础上给予加味附子理中汤内服、神阙穴贴敷和艾灸的中医综合疗法。两组疗程均为4周。进行治疗前后脾肾阳虚水停证评分,采用Child-Pugh分级评价肝功能,检测治疗前后丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移多酶(AST),总胆红素(TBIL)和血清白蛋白(ALB)水平;采用B超检查腹水程度,测量治疗前后体重、腹围等。结果:经Ridit分析,观察组综合疗效优于对照组(P0.05),观察组中医证候疗效优于对照组;治疗后观察组ALT,AST,TBIL水平低于对照组(P0.05,P0.01);治疗后ALB水平组间比较差异无统计学意义;治疗后观察组脾肾阳虚证和Child-Pugh评分均低于对照组(P0.01),体重轻于对照组(P0.05),腰围小于对照组(P0.05),24 h尿量多于对照组(P0.01)。结论:在西医常规治疗的基础上,中医综合疗法能改善肝硬化腹水(脾肾阳虚水停证)患者的肝功能,减轻临床症状、体征,促进腹水的消退,其综合疗效和中医证候疗效均优于单纯西医治疗。     

附子理中汤对腹泻型肠易激大鼠模型结肠组织中TLR4 mRNA表达水平的影响

目的:观察附子理中汤对腹泻型肠易激(D-IBS)大鼠模型结肠组织中toll样受体4(TLR4)表达水平的影响.方法:健康SPF级大鼠50只随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组、附子理中汤高、低剂量组,用束缚应激加大黄ig方法联合复制D-IBS大鼠模型,造模成功后附子理中汤高、低剂量组(30,15 g·kg-1)、匹维溴铵(30 mg·kg-1)ig给药,1次/d,连续14 d.采用荧光定量PCR方法观察该模型大鼠结肠黏膜TLR4 mRNA的表达情况.结果:模型组大鼠肠黏膜的TLR4的表达(1.229±0.172)高于正常对照组(1.109±0.062) (P ＜0.01).而附子理中汤的干预可使大鼠肠黏膜的TLR4的表达趋于正常,与正常组无明显差异.附子理中汤高(1.068±0.056),低(1.067±0.071)剂量组之间没有显著差异,匹维溴铵组(1.205±0.290)与正常组相比TLR4的表达增多(P＜0.01).结论:附子理中汤可能通过增强整体机体耐受性,降低TLR4的表达,减少免疫应答,来维持肠道的稳态.     

健脾活血方对胃癌前病变大鼠胃黏膜COX-2及MMP-2表达的影响

目的：研究健脾活血方对胃癌前病变（PLGC）大鼠胃黏膜组织中环氧合酶-2（COX-2）及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达的影响。方法：60只大鼠随机分为2组：正常组10只和造模组50只。正常组正常喂养,余下大鼠每天给予150 mg·L^-1的甲基硝基亚硝基胍（MNNG）溶液自由饮用,0.03% 雷尼替丁加入170 mg·L^-1的MNNG溶液中按10 mL·kg^-1每天灌胃1次,40%的乙醇按10 mL·kg^-1 每周灌胃2次,连续12周,其中第5周开始结合饥饱失常,建立胃癌前病变大鼠模型。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组（0.9%氯化钠溶液）、胃复春组（0.86 g·kg^-1）、健脾活血方高、中、低剂量组（32,16,8 g·kg^-1）,每组8只,每组每天给予不同药物灌胃一次,连续10周。实验第22周末处死大鼠,给予相应处理后,快速免疫组化检测COX-2及MMP-2表达情况。结果：与正常组相比,模型组COX-2,MMP-2表达均显著升高（P<0.01）;与模型组相比,健脾活血方高、中、低剂量组、胃复春组COX-2,MMP-2表达均显著降低（P<0.01或P<0.05）;与胃复春组相比,健脾活血方高剂量组COX-2,MMP-2表达均显著降低（P<0.05）,中、低剂量组COX-2,MMP-2表达与胃复春组相比无明显差异。结论：健脾活血方治疗胃癌前病变与降低胃黏膜中COX-2及MMP-2的表达相关。     

小半夏汤对豚鼠离体肠管运动的影响

目的: 观察小半夏汤对豚鼠离体肠管收缩的影响,初步探讨其止吐的作用机制。 方法: 利用离体浴槽,观察小半夏汤[(生药,下同) 0, 0.1, 0.25, 0.5, 1, 2.5, 5, 10, 20, 40 g·L^-1]对豚鼠离体肠管自主收缩平均张力、振幅和频率的影响;以呕吐相关受体激动剂乙酰胆碱(Ach)、组胺(His)、五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)为工具药,观察小半夏汤0, 2, 5, 10 g·L^-1对各工具药致豚鼠离体肠管收缩平均张力、振幅、频率和最大张力的影响。 结果: 小半夏汤能剂量依赖性地抑制豚鼠离体肠管自主收缩,降低其收缩平均张力、振幅和频率(与空白对照组相比,P<0.05或P<0.01);先加Ach,His,5-HT再加小半夏汤2,5,10 g·L^-1或小半夏汤2,5,10 g·L^-1预处理均能明显抑制3种工具药所致肠管收缩,减少肠管收缩平均张力、振幅、频率和最大张力(分别与给小半夏汤前和不给小半夏汤相比,P<0.05或P<0.01);小半夏汤能够增大DA致肠管收缩平均张力、振幅和频率(分别与给小半夏汤前和不给小半夏汤相比,P<0.05或P<0.01),但对肠管收缩最小张力无明显影响。 结论: 小半夏汤能够抑制豚鼠离体肠管自主收缩,其作用机制可能是通过阻断M受体、H₁受体、5-HT受体和D₂受体等呕吐相关受体而介导,或直接作用于肠平滑肌而起作用,其止呕机制有待进一步研究。