AG490对谷氨酸诱导PC12细胞磷酸化STAT3活性上调的抑制作用

目的研究AG-490拮抗谷氨酸对PC12细胞中P-STAT3活性的上调作用及其抗凋亡意义。方法谷氨酸诱导PC12细胞凋亡。Hochest荧光染色观察PC12细胞形态。流式细胞仪(FCM)分析评价凋亡百分率。Westernblot测定P-STAT3蛋白表达量,MTT检测PC12细胞存活率。结果谷氨酸诱导PC12细胞中STAT3蛋白表达上调(P=0.000),如予Jak/STAT3信号通路阻断剂AG-490预处理,则其表达被下调(P=0.002),细胞凋亡率减低(P=0.000),细胞存活率升高(P=0.000)。结论AG-490拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与STAT3活化有关。     

肿瘤相关巨噬细胞通过JAK2/STAT3途径调控肝癌细胞凋亡的机制研究

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)通过JAK2/STAT3途径对肝癌细胞凋亡的影响。方法培养人单核巨噬细胞(THP1),加入佛波酯(PMA)及白介素4(IL-4)诱导分化为TAMs,RT-PCR检测TAMs表面分子标记物CD206和CD163的表达;TAMs与肝癌细胞(Hep G2、SMMC7721)在Transwell小室内共培养48h,通过western blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase 3、抗凋亡蛋白Bcl-2、信号通路JAK2/STAT3以及p-STAT3的表达;加入JAK2/STAT3通路特异性阻断剂AG490进行阻断后,检测相关凋亡蛋白、抗凋亡蛋白表达情况以及JAK/STAT信号通路活化情况。结果人单核巨噬细胞(THP1)经PMA及IL-4分化诱导72h,RT-PCR检测其细胞表面CD206和CD163的表达显著增加(P0.05);肝癌细胞(Hep G2、SMMC7721)与TAMs共培养48h,Western Blot检测肿瘤细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Bax表达明显降低,抗凋亡蛋白Bcl-2以及信号通路JAK2、STAT3、p-STAT3表达显著升高;AG490阻断JAK2/STAT3通路后,加AG490组肿瘤细胞p-STAT3表达降低,凋亡相关蛋白Caspase3、Bax的表达明显升高,抗凋亡相关蛋白Bcl-2的表达显著降低;结论肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)通过激活JAK2/STAT3信号途径调控肝癌细胞的凋亡。     

高尔基体磷蛋白3在镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞炎性损伤中的作用

目的 探讨高尔基体磷蛋白3（golgiosomal phosphoprotein 3，GOLPH3）调控JAK2/STAT3信号通路在镍精炼烟尘致人支气管上皮细胞（Beas-2B）炎性损伤中的作用。方法 采用不同浓度镍精炼烟尘（0.00、12.50、25.00、50.00 μg/ml）处理Beas-2B细胞24 h，使用CCK8法检测细胞存活率；采用蛋白免疫印迹（Western blot，WB）法检测GOLPH3及JAK2/STAT3信号通路蛋白JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3和炎性效应蛋白NLRP3、白细胞介素-18（IL-18）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达水平。使用siRNA转染沉默GOLPH3，采用WB法检测GOLPH3、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平；使用JAK2/STAT3通路抑制剂AG490抑制该信号通路，采用WB法检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平。结果 随着镍精炼烟尘染毒浓度增加，Beas-2B细胞存活率显著降低（P<0.05）；GOLPH3、p-JAK2、p-STAT3、NLRP3、IL-18、TNF-α蛋白表达水平呈逐渐升高趋势（P<0.05）；与si-对照组相比，si-GOLPH3组Beas-2B细胞中GOLPH3、p-JAK2、p-STAT3和NLRP3、IL-18、TNF-α表达均降低（P<0.05）；与二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）组相比较，AG490组Beas-2B细胞中p-JAK2、p-STAT3和NLRP3、IL-18、TNF-α表达均降低（P<0.05）。结论 镍精炼烟尘可通过激活GOLPH3调控JAK2/STAT3信号通路，诱导Beas-2B细胞发生炎性损伤。     

ω-3多不饱和脂肪酸对人胃癌BGC-823细胞周期及凋亡的影响

目的 利用人胃癌BGC-823细胞体外培养实验，观察不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸（EPA、DHA）对肿瘤细胞周期及凋亡的影响。方法 采用MTT法、凋亡形态学检查和流式细胞检测肿瘤细胞周期及凋亡情况。结果 30和45μg／ml的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率（P〈0．001）；Hoechst33258染色和透射电镜可见细胞凋亡现象；流式细胞检测bcl-2基因蛋白表达明显下降（P〈0．05），G0／G1细胞明显增加，G2／M和S期细胞明显减少（P〈0．05）。结论 ω-3多不饱和脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡和阻滞细胞在G0／G1期，细胞增殖受到抑制。     

肝细胞癌中信号传导与转录活化因子-3表达与细胞凋亡的关系

目的 探讨信号传导与转录活化因子-3（STAT3）在肝细胞癌发生发展中的作用及其与细胞凋亡的关系。方法 应用免疫组织化学法检测52例原发性肝癌、17例癌旁组织和12例良性病变肝组织中STAT3与Bcl-xL的蛋白表达情况,同时采用原位末端标记法（TUNEL法）测定52例癌组织中细胞凋亡的表达并计算凋亡指数。结果 STAT3蛋白在肝癌组织、癌旁组织和良性病变肝组织中的阳性率分别为69．23％（36／52）、52．94％（9／17）和25．00％（3／12）;Bcl-xL蛋白在肝癌组织、癌旁组织和良性病变肝组织中的表达率分别为65．38％（34／52）、41．18％（7／17）和16．67％（2／12）。STAT3表达阳性的肝癌组织的平均凋亡指数明显低于阴性组（P〈0．05）。结论 STAT3高表达可能是肝癌发病机制中的早期事件,STAT3基因可能通过直接或间接促进Bcl-xL的表达,抑制细胞的凋亡,从而在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。     

雌激素对谷氨酸诱导大鼠脑皮质细胞凋亡的影响

目的：观察雌激素对谷氨酸诱导离体皮层神经元凋亡的作用,探讨雌激素的神经保护作用机制。方法：原代培养大鼠大脑皮质细胞,分为正常对照组、谷氨酸组和谷氨酸＋雌激素组,采用TUNEL和免疫细胞化学检测等方法,分析雌激素对谷氨酸诱导神经元凋亡的作用。结果：谷氨酸可明显诱导神经元凋亡,凋亡指数为34.6%;雌激素能明显拮抗谷氨酸的凋亡毒性作用,凋亡指数下降为18.4%（与谷氨酸组相比P〈0.05）;免疫组化结果显示,雌激素组bcl-2表达阳性细胞明显增加,bax蛋白表达受到抑制。结论：雌激素具有神经保护作用,作用机制可能通过影响凋亡相关基因的表达来实现。     

STAT5基因对人膀胱癌细胞顺铂化疗敏感性的影响及作用机制

目的研究STAT5基因高表达及沉默对人膀胱癌细胞系5637和T24顺铂化疗敏感性的影响及分子机制。方法冲击诱导方法构建顺铂耐药细胞株T24-cisplatin和5637-cisplatin,Western bolt法检测STAT5的表达;构建STAT5过表达载体,应用脂质体转染5637和5637-cisplatin细胞,用针对STAT5基因的特异性sh RNA转染T24和T24-cisplatin细胞,MTT法和流式细胞凋亡法检测转染前后膀胱癌细胞顺铂化疗的细胞生存率和凋亡率,及Western blot法检测细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3表达。结果顺铂耐药细胞株5637-cisplatin和T24-cisplatin STAT5表达明显高于顺铂敏感株5637和T24(P=0.004;P=0.001),而5637-cisplatin和T24-cisplatin细胞沉默STAT5其化疗敏感性显著升高(P=0.003,P=0.001)。5637细胞过表达STAT5其化疗敏感性显著下降(P=0.021),顺铂化疗的细胞凋亡率明显下降(P=0.002),Bax、Caspase-3表达水平显著降低(P=0.014;P=0.033),Bcl-2表达水平显著升高(P=0.001)。T24细胞STAT5被沉默后其化疗敏感性显著增强(P=0.011),顺铂化疗的细胞凋亡率明显上升(P=0.001),Bax、Caspase-3表达水平显著升高(P=0.001;P=0.007),Bcl-2表达水平显著降低(P=0.020)。结论STAT5表达情况与膀胱癌细胞顺铂化疗敏感性具有相关性,其可能分子机制为调控凋亡基因Bax、Bcl-2、Caspase-3介导细胞顺铂耐药。     

中性内肽酶高表达对β-淀粉样肽诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的 确定中性内肽酶（NEP）高表达对β-淀粉样肽（AB）诱导的PC12细胞凋亡保护作用的分子机制。方法 利用脂质体转染法建立可稳定表达NEP和失活NEP的PC12细胞系。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和免疫印迹法（Western blot法）检测基因在细胞中的表达。利用AB25-35诱导PC12细胞，CellTiter96AQueous单溶液检测系统（MTS）检测细胞存活率；分光光度法检测乳酸脱氢酶（LDH）含量、活性氧（ROS）生成量水平变化；化学发光法检测细胞三磷酸腺苷（ATP）生成量和Caspase-3表达量的变化。结果 在AB25-35诱导PC12细胞凋亡中，NEP高表达可明显提高细胞存活率，降低培养基中LDH含量和ROS生成量；提高细胞ATP释放量；抑制Caspase-3在细胞凋亡中的激活，与正常PC12细胞相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）。稳定表达失活NEP的PC12细胞则对细胞凋亡没有影响。结论 NEP通过降低氧化应激反应对细胞线粒体的损伤，抑制凋亡关键蛋白Caspase-3的激活，从而提高AB25-35诱导的神经细胞的存活率。     

血必净对百草枯诱导HK-2细胞凋亡的保护作用及机制研究

目的探讨血必净（xuebijing,XBJ）对百草枯（paraquat, PQ）诱导人近端肾小管上皮细胞系（human kidney cell line-2,HK-2）细胞凋亡的保护作用及机制。方法常规培养HK-2细胞。（1）PQ及XBJ干预后细胞生长抑制实验：PQ组分为0、200、400、800、1 600、3 200 μmol/L PQ组,干预24、48、72 h后检测细胞存活率;XBJ组分为0、5、10、20、40 mg/ml XBJ组,干预24、48、72 h后检测细胞存活率,以确定进行干预时合理的XBJ和PQ的浓度和作用时间。（2）XBJ拮抗PQ诱导HK-2细胞生长抑制实验：分为正常对照组、PQ组（800 μmol/L）、不同浓度XBJ＋PQ组（分别以5、10、20 mg/ml的XBJ预培养1 h后以800 μmol/L的PQ继续培养）,各组分别培养24、48、72 h后检测细胞存活率。（3）将HK-2细胞分为正常对照组、PQ组（800 μmol/L的PQ作用24 h）、PQ＋XBJ组（10 mg/ml的XBJ预处理1 h后以800 μmol/L的PQ作用24 h）、XBJ对照组（10 mg/ml的XBJ作用24 h）,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测各组细胞内Bcl-2和BAX的蛋白表达情况,caspase-3及caspase-9活力试剂盒检测细胞内caspase-3及caspase-9活力。结果（1）PQ能明显降低HK-2细胞的存活率,并且呈现出时间和浓度依赖性,其中800 μmol/L的PQ作用24 h后HK-2细胞的存活率约为55%;20 mg/ml以下的XBJ在72 h内对HK-2细胞的存活率无明显影响。（2）与PQ组比较,PQ＋XBJ组HK-2细胞的存活率明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）与正常对照组比较,PQ组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。与PQ组比较,PQ＋XBJ组细胞凋亡率明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。（4）与正常对照组比较,PQ组细胞内Bcl-2蛋白表达明显较低,BAX蛋白表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;与PQ组比较,PQ＋XBJ组细胞内Bcl-2蛋白表达明显升高,BAX蛋白表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。（5）与正常对照组比较,PQ组细胞内caspase-3及caspase-9活力明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;与PQ组比较,PQ＋XBJ组细胞内caspase-3及caspase-9活力明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论XBJ（10 mg/ml）对PQ（800 μmol/L）诱导的HK-2细胞损伤有明显的保护作用,其可以通过减轻PQ诱导HK-2细胞凋亡,来提高细胞的存活率。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

Choice of measures of vaccination and estimates of risk of pediatric pertussis

BackgroundVaccination uptake at the individual level can be assessed in a variety of ways, including traditional measures of being up-to-date (UTD), measures of UTD that consider dose timing, like age-appropriate vaccination, and risk reduction from individual doses. This analysis compared methods of operationalizing vaccination uptake and corresponding risk of pertussis infection.MethodsCity-wide case-control study of children in Philadelphia aged 3 months through 6 years, between 2001 and 2013. Multiple logistic regression was used to isolate the independent effects of each measure of vaccination uptake and the corresponding relative odds of pertussis.ResultsBeing UTD on vaccinations was associated with a 52% reduction in risk of pertussis (OR 0.48, 95% CI: 0.34, 0.69). Evaluation of delayed receipt of vaccine versus on-time UTD yielded similar results. There was a decrease in risk of pertussis for each additional dose received with the greatest reduction in pertussis infection observed from the first (OR 0.48, 95% CI: 0.28, 0.83) and second dose (OR 0.17, 95% CI: 0.08, 0.34). Additional doses conferred minimal additional protection in this age group.ConclusionExamining vaccination status by individual doses may offer improved predictive capacity for identifying children at risk for pertussis infection compared to the traditional UTD measure.     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。     

尘肺病患者145例死因调查

目的分析汉中市尘肺病的发生、发展和死亡原因，以提高尘肺病患者的生存质量。方法对145例尘肺病患者的死因进行回顾性分析，计算其平均发病年龄、死亡年龄及患尘肺病后的存活年限。结果矽肺的平均发病年龄和死亡年龄均早于煤工尘肺和石棉肺，尘肺病的主要死因为患肺部疾患，患尘肺病后的平均存活年限为12a。结论加强职业健康体检工作，对尘肺病人做到早发现早治疗和预防并发症的发生。     

Correlates of stages of change of smoking among inhabitants of deprived neighbourhoods

BACKGROUND: This study examines the prevalence and correlates of stages of change of smoking, in terms of psychosocial, structural and sociodemographic factors, among inhabitants of deprived neighbourhoods. METHODS: Cross-sectional data were obtained from a survey on health related behaviour. Subjects were 2009 current and former smokers, aged 20-46, living in deprived neighbourhoods in Rotterdam, the second largest city in the Netherlands. Three groups of smokers were formed according to the stages of change-definitions of the Transtheoretical Model: smokers not planning to quit (precontemplators), smokers planning to quit (contemplators/preparators) and former smokers (actors/maintainers). Smokers planning to quit and smokers not planning to quit were compared regarding psychosocial factors (attitude, social norm, self-efficacy), structural factors (neighbourhood problems, material deprivation, financial problems, employment status) and sociodemographic factors (age, gender, marital status, cultural background, educational level). Former smokers were compared with smokers planning to quit regarding structural and sociodemographic factors. Logistic regression was used to assess correlates of stages of change. RESULTS: Smokers planning to quit (prevalence = 19%) reported a more positive attitude, stronger social norms and higher self-efficacy expectations in quitting smoking than smokers not planning to quit (prevalence = 57%). Smokers planning to quit less often were Dutch-born, more often had attended higher vocational schooling or university and more often reported experiencing two or more neighbourhood problems compared to smokers not planning to quit. Former smokers (prevalence = 24%) were older, more often Dutch-born, married, employed and higher educated, compared to smokers planning to quit. Furthermore, former smokers less often reported material deprivation and financial problems than smokers planning to quit. CONCLUSION: Among people living in deprived neighbourhoods, different factors correlate with different stages of change of smoking. Implications for health promotion are discussed.     

西林瓶装注射用水的装量检查分析

为了检查西林瓶装注射用水的实际分装量是否符合2005年版《药典》三部要求,按照2005年版《药典》三部中“生物制品分装和冻干规程”,分装规格为0．8ml的西林瓶装注射用水10000瓶,随机在分装过程的前、中、后阶段共抽取100瓶,轧盖、目检。分别用1ml标定注射器及1ml普通无菌注射器抽取每瓶注射用水的实际体积,以t检验法对实际抽取量与标示量的差值进行统计学分析,结果显示其与2005年版《药典》三部要求分装附加量为0．1ml相比有显著性差异（P〈0．001）。     

对《医疗事故处理条例》的几点认识--学习《医疗事故处理条例》的一点体会

国务院颁布的《医疗事故处理条例》（以下简称《条例》）在吸收、总结原《医疗事故处理办法》（以下简称《办法》）实施十几年以来正反两方面经验教训的基础上，对《办法》作了许多重大的修改：《条例》扩大了医疗事故的主体与范围，提出了防范医疗事故的一些重要措施，授权医学会独立担纲医疗事故技术鉴定工作，赋予了患者更多的权利，规定医疗事故民事责任争议可以“私了”，制定了更为规范的医疗事故的赔偿制度等。《条例》作出的这些新规定必将使医疗事故得以更加科学、客观、公正、公平、合理的解决。认真学习、把握《条例》的这些新规定，很好地透视《条例》的立法宗旨与原则，必将极大地提高学习、宣传《条例》的主动性与积极性，更好地推进《条例》的贯彻执行工作。     

The analysis of case-control studies of the efficacy of screening for recurrence of cancer

Occasionally, the efficacy of screening for cancer recurrence has been evaluated by means of case-control studies. However, these studies generally have not been designed and analyzed in a manner that will yield an unbiased result. The commentary shows that by adhering to the principles developed for the analysis of studies of the efficacy of screening for the presence of a given cancer in persons with no history of this disease, a case-control study of screening for recurrence will improve its chances of obtaining valid findings.     

137例地中海贫血出生相关因素分析

目的:揭示地中海贫血患儿出生相关因素,提出干预措施,为进一步制定地贫预防控制总体规划提供决策参考。方法:对近3年137例地贫儿(45例重型β-地贫、29例中间型β-地贫、32例中间型α-地贫和31例巴氏胎儿水肿综合征)出生相关因素进行调查研究。结果:地贫儿出生相关社会心理因素顺位依次为:基因携带者不知情(70.07%)、经济困难(21.17%)、心理因素(5.11%)、其它(3.65%)。基因携带者对自身情况不知情是本组地贫儿主要出生相关因素,与其它出生相关因素有显著差异(P<0.05)。结论:基因携带者自身的认识与重视是预防控制工作的一个重要组成部分,地贫高发区人群携带者(轻型β-地贫、α-地贫特征和静止型携带者)的检出及系统管理是预防控制工作的关键环节,应进一步应用生物、社会及心理的医学模式搞好地贫预防控制工作。     

可乐对小鼠精子质量影响

目的 探讨可乐对雄性小鼠精子质量及数量的影响.方法 31只昆明种雄性小鼠按体重随机分为阴性对照组、低剂量组、高剂量组(分别以0.6ml生理盐水、0.3,0.6ml可乐灌胃),腹腔注射组(0.6ml可乐注射)和阳性对照组(0.6ml环磷酰胺腹腔注射)5组.灌胃及腹腔注射1次/d,连续7d,测定小鼠精子的运动参数,并观察其畸形发生率.结果 高剂量组肾脏系数与阴性对照、低剂量组比较差异均有统计学意义(P<0.05);腹腔注射组与阴性对照组比较小鼠附睾系数明显升高(P<0.05).腹腔注射组的精子平均移动角度与阴性对照组比较明显升高(P<0.05),低剂量组精子密度与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).高剂量组、阳性对照组与阴性对照组比较精子畸形率明显升高(P<0.05);低、高剂量组及腹腔注射组与阳性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);低、高剂量组与腹腔注射组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 可乐对小鼠精子活性和形态有一定的影响.