冰冻储存对HPLC法测定血清中苯妥英钠、卡马西平的影响

目的：本实验考察了不同时间冰冻储存(-20℃)。对血清中苯妥英钠、卡马西平HPLC色谱图和测定结果的影响。方法：记录经过不同时间冰冻储存的血清的HPLC色谱图、计算血清中苯妥英钠、卡马西平的浓度，考察每个血清5次测定结果之间有无显著性差异。结果：经过不同时间冰冻储存的血清，其HPLC色谱图基本上没有发生变化，血清中苯妥英钠、卡马西平浓度5次测定结果之间无显著性差异。结论：在冰冻条件下储存血清不影响对苯妥英钠、卡马西平的测定。     

高效液相色谱法测定血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥血药浓度

目的建立同时测定卡马西平、苯妥英钠和苯巴比妥的浓度的高效液相色谱法(HPLC)。方法血清乙醚提取浓集后进样,采用Beckman-ODS色谱柱(4.6mm×250mm),以乙腈水(45:55)为流动相,在波长220nm处测定。结果三种抗癫痫药物分离良好。卡马西平、苯妥英钠和苯巴比妥的线形范围为1.0～20、2.5～40、1.02～40μg/ml,三者平均回收率均大于95.32%,日内和日间精密度RSD均小于5%。结论本法快速、简便、准确,具有一定的实用意义。     

三种常用抗癫痫药物的胶束电动毛细管色谱分离

目的:建立适合卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠三种抗癫痫药物系统分离的胶束电动毛细管色谱(MECC)方法。方法:考察了运行缓冲液体系中各种参数,包括SDS浓度、电泳缓冲液浓度、pH值、分离电压对电泳分离效果的影响;MECC优化分离系统为:石英毛细管75μm×37cm,电泳缓冲液为15mmol/L磷酸缓冲液(pH=9.4)含十二烷基硫酸钠(SDS)25mmol/L。分离温度20℃,分离电压25KV,压力进样:10psi×5s,正极进样,负极柱上200nm检测。结果:三种常用抗癫痫药物卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠在5分钟之内获得了理想的分离。结论:胶束电动毛细管色谱法可以快速有效地分离和检测上述三种抗癫痫药物。     

抗癫痫药联用对肝药酶的诱导效应

目的通过对癫痫患者用药的实例分析,探讨有肝药酶诱导效应的常用抗癫痫药的合理应用问题。方法采用高效液相色谱法（HPLC法）监测苯妥英钠、卡马西平联合应用中的血药浓度动态变化。结果苯妥英钠、卡马西平联合应用时两者的血药浓度呈相反的改变,随着苯妥英钠血药浓度升高而使卡马西平的血药浓度降低。结论苯妥英钠、卡马西平酶诱导作用导致血药浓度波动,有必要监测用药后的血药动态变化,随时调整个体给药方案,提高合理用药水平。     

癫痫病人撤换苯妥英钠和苯巴比妥的临床研究

目的探讨在癫痫病人中用卡马西平、托吡酯替换苯妥英钠、苯巴比妥的临床效果。方法将62例原先使用苯妥英钠、苯巴比妥的癫痫病人,采用首选卡马西平或托吡酯进行渐进缓慢先添加新药、后撤退原用药的方法,对苯妥英钠、苯巴比妥进行替换。结果30例病人完全由卡马西平单药替换,11例病人完全由托吡酯单药替换。撤换时间为3～6个月的复发率为38％,而撤换时间为7～12个月的复发率为18％,两者差异有显著性（P〈0．05）。结论卡马西平、托吡酯均可推荐作为选择的药物对苯妥英钠、苯巴比妥进行替换。     

HPLC法测定血清中三种常见抗癫痫药的浓度

目的 用高效液相色谱法(HPLC法)同时测定血清中三种常见抗癫痫药(苯巴比妥钠、苯妥英钠和卡马西平)的浓度，为临床合理用药提供依据。方法 以甲醇-乙腈-KH2PO4为流动相，以shimpack C18柱为分析柱，以Alltech C18为保护柱，用HPLC法进行测定。结果 3种常用抗癫痫药分离良好，且浓度分别在0．8-200μg／ml(苯巴比妥钠)，0．4-100μg／ml(苯妥英钠)，0．2-50μg／ml(卡马西平)内与峰面积有良好的线性关系。平均回收率为97．02％～102．36％，日内和日问精密度均小于4．0％。结论 用HPLC法同时测定血清中苯巴比妥钠、苯妥英钠和卡马西平的浓度既简便又准确。具有一定的实用意义。     

HPLC法测定人CSF中3种抗癫痫药物

本文报道高效液相色谱法（HPLC）测定人脑脊液（CSF）中卡马西平（CBZ）、鲁米那（PB）、苯妥英钠（PHT）浓度以5 ，5-二乙基苯巴比妥酸为内标，标本经二氯甲烷一次提取，蒸干后用甲醇重溶进行色谱分析，以35/65比例的甲醇/去离子水为流动相。通过线性关系，重复性及相对回收率试验证明本方法简单、可靠、稳定、重复性好，完全适用于CSF中这3种药物浓度的常规测定。本文还对测定条件进行了探讨。     

高效液相色谱/质谱/质谱法测定血浆中3种常用药物的浓度

目的:建立测定血浆中卡马西平、苯妥英钠、茶碱浓度的高效液相色谱/质谱/质谱分析方法。方法:①液相色谱流动相为甲醇-0.01 mmol/L乙酸铵水溶液(60∶40),流速0.2 mL/min;色谱柱为SYMMETRY C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm),柱温30℃。②质谱电喷雾电离源,采用多反应监测方式进行检测,卡马西平质荷比237→194,苯妥英钠253→182,茶碱181→124。血浆样本经固相萃取小柱萃取处理后进样分析。结果:卡马西平在(1~20)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率100.9%~107.0%。日内误差(RSD)小于2.0%;苯妥英钠在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率96.5%~102.4%。RSD小于1.9%;茶碱在(2~40)μg/mL浓度范围内线性关系良好,萃取回收率95.8%~106.0%,RSD小于3.0%。结论:本方法具有特异性高,灵敏度好,测定快速等优点。     

E值法在卡马西平片溶出度过程分析中的误差探讨

目的 采用光纤传感溶出度过程分析技术(FODT)考察卡马西平片的溶出度并探讨采用E值法计算卡马西平片溶出度的误差来源.方法 利用FODT选用不同规格探头(代表不同的光程),配制不同浓度的卡马西平对照品溶液,分别于测定波长处测定吸光度,计算由FODT获得的不同浓度溶液的E值,并与紫外分光光度计测定的相应百分吸光系数(E1%1cm)比较,考察不同温度对卡马西平吸光度值的影响.结果 温度对卡马西平的吸光度值影响不大,FODT采用E值法计算的卡马西平片溶出率与对照品法和紫外分光光度计E1%1cm值法计算的卡马西平片的溶出率存在较大差异.FODT法测得的吸光度值随浓度增大而减小.结论 药典中取样分析需经稀释再测定的品种,当采用FODT测定时,不能简单套用给定的吸收系数;药典中取样分析不经稀释可直接测定的仍可继续沿用药典给定的吸收系数进行计算.     

不同剂量卡马西平与丙戊酸配伍对大鼠抗电刺激皮层惊厥阈值及癫痫患者血清药物浓度的影响

目的探讨卡马西平和丙戊酸配伍对大鼠电刺激皮层惊厥阈值的影响及部分临床患者的血清药物浓度间的相互关系。方法利用大鼠抗电刺激皮层惊厥阈值模型,按卡马西平加mg／kg＋丙戊酸镁90mg／kg,卡马西平20mg／kg＋丙戊酸镁68mg／kg,卡马西平10mg／kg＋丙戊酸镁45mg／kg的高中低剂量配伍的药物组及假阳性对照组给药10次后,观察大鼠惊厥阈值动态变化趋势和血药浓度,并对部分难治性癫痫患者的卡马西平和丙戊酸的血清药物浓度关系进行了临床观察。结果各组大鼠末次给药前30min,高剂量组惊厥阈值高于中低剂量,各时间点不同剂量联合用药组惊厥阈值比较无明显差异。动物给药后的血药浓度显示,给药剂量越高,其峰浓度越高,但低剂量组的血药浓度仍在有效浓度范围内;三种不同剂量组的抗癫痫作用均在给药后30min开始起效,4h达高峰,维持抗惊厥作用12h,且其抗惊厥作用逐渐达峰,又逐渐下降,期间波动不大。临床观察组中原用卡马西平治疗者在添加小剂量丙戊酸镁,原用丙戊酸镁治疗者在添加小剂量卡马西平后,添加药物对患者的血药浓度影响不大。结论不同剂量卡马西平和丙戊酸镁配伍在大鼠电刺激皮层惊厥阈值测定模型的抗惊厥作用无明显差异,其血药浓度随剂量的升高而升高。不同剂量的卡马西平和丙戊酸镁配伍对患者血清药物浓度的影响不大。     

冰片对卡马西平在小鼠体内分布的影响

目的：观察冰片对卡马西平（CBZ）及10，11-环氧化卡马西平（ECBZ）在小鼠体内分布的影响。方法：CBZ和冰片灌胃给药，高效液相色谱法检测小鼠血浆和脑、心、肾、肝、脾、肺、脂肪、骨骼肌等组织中CBZ及ECBZ的浓度，并计算有关的药动学参数。结果：合用冰片使CBZ在脑、肺、肝、脾等组织前60min内的含量明显增高，在血浆、脑、骨骼肌、脾、脂肪组织的相对摄取率（Re）和峰浓度比（Ce）均大于1。ECBZ在血浆、心、脑、肝、肾、脾、肌肉、脂肪组织前60min内的含量也明显增高，在脑、骨骼肌、脾、脂肪组织的Re和Ce均大于1。结论：冰片可提高CBZ和ECBZ在小鼠各组织中分布的靶向性。     

胶束电动毛细管色谱法和荧光偏振免疫法测定癫痫患者血浆中苯妥英浓度的比较

目的:比较治疗药物监测中胶束电动毛细管色谱法(MECC)和荧光偏正免疫法(FPIA)测定血浆中苯妥英的浓度。方法:收集该院31例服用苯妥英的癫痫患者稳态浓度的血浆样品,分别以MECC和FPIA进行测定,用回归法考察两种方法测定结果的相关性。结果:两种方法无显著差异,具有良好的相关性(P>0.05)。回归分析的线性方程YFPIA=1.044×XMECC,相关性分析r=0.967。结论:MECC法可在无TDx仪的情况下替代FPIA,而且成本较低,快速简便。适用于苯妥英单用,以及苯妥英与常用抗癫痫药物(卡马西平、扑米酮、丙戊酸、苯巴比妥、氯硝西泮)合用的临床监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中苯妥英钠和苯巴比妥的浓度

目的：建立测定人血浆中苯妥英钠和苯巴比妥质量浓度的高效液相色谱方法。方法：血清经旋涡振摇和高速离心等处理后,取20μl进样分析,以ZORBAXSB-C18（4.6nm×250nm,5μl）为分离柱,磷酸二氢钾缓冲液（pH=3.5）-甲醇（40∶60）（V/V）为流动相,检测波长为210nm,流速为1ml/min,柱温为25℃。结果：苯妥英钠、苯巴比妥的血浆质量浓度分别在2.62～23.58μg/ml、6.24～56.12μg/ml检测范围内呈良好线性关系（r=0.9991、r=0.9992）;平均回收率分别为98.7%、98.6%;日内、日间差均小于4.0%,稳定性良好。结论：本方法准确可靠,简便快速,适用于人血浆中苯妥英钠和苯巴比妥质量浓度的测定及其药动学研究。     

苯妥因钠、丙戊酸钠、卡马西平对癫痫患者智力的影响

抗癫痫药物造成认知功能的损害及损害程度迄今仍无明确结论。为此，我们对46例全面性强直一阵挛发作的癫痫患儿进行了服药前后的智力测验，并以16例健康同龄人对照，以检测苯妥因钠、丙戊酸钠、卡马西平对智力的影响。结果表明：服药3－4个月后，在血药浓度水平于治疗范围内的情况下，苯妥因钠组病人的操作智商，知觉组织智高较对照组低（P＜0．05），而丙戊酸钠组及卡马西平组相互比较并与对照组比较则元显著差异。提示苯妥因销影响患儿的记忆、注意、抽象思维能力、空间知觉能力及学习能力，而丙戊酸钠及卡马西平对智力则无明显影响。     

酶联免疫吸附试验测定血清苯妥英钠浓度

建立酶联免疫吸附实验测定苯妥英钠血药浓度的方法。方法采用碳二亚胺法将化学修饰后的苯妥英钠与人血清白蛋白结合,再与被氧化物酶结合,作为酶标抗原,自制免抗苯妥钠多克隆抗体。结果抗苯妥英钠ＩｇＧ稀释倍数１：２００、酶标记抗原１：１００时,标准曲线最理想;该方法的测定灵敏度为２．８７μｇ／ｍｌ,线性范围２．９－３０μｇ／ｍｌ,批内变异系数３．３％－１０．２％,批间变异系数５．１％－１３．２％,回收率９０％     

Antiepileptic drug-induced multidrug resistance P-glycoprotein overexpression in astrocytes cultured from rat brains

Background Intractable epilepsy may be due to multidrug resistance induced by conventional antiepileptic drugs. The phenomenon is sometimes associated with an overexpression of multidrug resistance gene 1 ( MDR1 ). The purpose of this study was to determine if the overexpression of MDR1 could be induced in astrocytes from rat brains in vitro using antiepileptic drugs.Methods Astrocyte cell cultures from postnatal Wistar rats (within 24 hours of birth ) were established. Different concentrations of the antiepileptic drugs phenytoin, phenobarbital,carbamazepine, and valproic acid were added to the cultures for 10, 20, or 30 days. The expression of P-glycoprotein (Pgp), the protein product of MDR1, was investigated with immunocytochemistry.Results Less than 5% of normal, untreated astrocytes had detectable Pgp staining at any time point. Phenytoin, phenobarbital, carbamazepine, and valproic acid induced the overexpression of Pgpin astrocytes in a dose- and time-dependent manner. Significantly higher levels of Pgp staining were detected at therapeutic concentrations of certain antiepileptic drugs (20 μg/ml phenobarbital, 40μg/mlphenobarbital, and 20μg/ml phenytoin) on day 30. Upregulation of Pgp was detected when using higher concentrations of phenytoin, phenobarbital, and valproic acid on day 20 and when using higher concentrations of any of the four antiepileptic drugs on day 30.Conclusions Treatment with antiepileptic drugs may contribute to the overexpression in astrocytes of MDR1 and its protein product, Pgp. The mechanism leading to MDR must be considered in patients under qoinq lonq-term treatment with antiepileptic drugs.     

反相高效液相色谱法测定血清中卡马西平浓度

目的:建立一种快速、方便、准确的方法测定卡马西平血药浓度。方法:用RP-HPLC法测定卡马西平血药浓度。结果:线性范围1.0—20μg/mL,最低检测浓度0.02μg/mL,回归方程C=0.0422R─0.2565,r=0.9998,回收率为101.6%,日内、日间精密度分别为3.5%—4.2%和4.2%—5.0%。结论:本法准确、快速,回收率高,适合临床上血药浓度检测。     

Serum protein binding of antiepileptic drugs in Sri Lankans

The percentage protein binding of antiepileptic drugs was investigated in epileptic patients (n = 90) undergoing treatment with phenobarbitone, phenytoin and carbamazepine either as a single drug therapy or in different combinations. When administered individually, the percentage (mean +/- SEM) protein binding of phenobarbitone, phenytoin and carbamazepine were 50.84 +/- 7.03, 87.23 +/- 2.98 and 76.80 +/- 6.30 respectively. Combination of phenobarbitone and phenytoin resulted in percentage (mean +/- SEM) protein binding of 51.94 +/- 6.09 for phenobarbitone and 83.54 +/- 7.01 for phenytoin, while the combination of phenobarbitone and carbamazepine resulted in percentage (mean +/- SEM) protein binding of 49.60 +/- 2.59 for phenobarbitone and 79.10 +/- 3.31 for carbamazepine. When phenytoin was given with carbamazepine percentage (mean +/- SEM) protein binding was 87.22 +/- 4.48 for phenytoin and 72.50 +/- 5.92 for carbamazepine.     

1999～2001年全国治疗药物监测室间质评结果

目的:通过开展室间质量评价活动提高临床实验室的检验结果质量。方法:每年向参加治疗药物监测(TDM)室间质量评价活动的单位发放质控品10个批号,测定项目包括茶碱、地高辛、苯妥英、苯巴比妥、卡马西平和环孢菌素A,实验室用常规方法测定并回报测定结果,经计算机软件对全部结果进行统计分析。结果:2001年参加TDM室间质评的实验室数为48家,测定结果的平均及格率分别为茶碱94.2％、地高辛82.6％、苯妥英83.8％、苯巴比妥88.4％、卡马西平94.2和环孢菌素A92.4％。1999～2001年全国TDM室间质评的年平均及格率分别为78.7％、84.7％和89.3％。不同测定方法的精密度分别为茶碱4.4％～14.2％、地高辛11.5％～21.9％、苯妥英8.5％～29.5％、苯巴比妥8.2％～13.9％、卡马西平10.8％～12.6％和环孢菌素A15.5％～16.6％。结论:多数参加TDM室间质评实验室的测定结果有较好的一致性,及格率逐年上升,但参加TDM室间质评的实验室数占开展TDM的实验室总数的比例较低,在不同的测定方法间还存在较大的差异。     

对HPLC法测定茶碱血药浓度的改进

目的 :使用与日常工作中测定一些常用抗癫痫药物 (如 :苯妥英钠、卡马西平、苯巴比妥 )相同的流动相 (甲醇—水 1∶1) [1\〗,建立用HPLC法测定茶碱血药浓度的方法 ,希望在日常治疗药物监测工作中能起到降低成本、提高效率的作用。方法 :用二氯甲烷萃取血清中的茶碱 ,浓集后进样测定 ,以内标法定量。在室温条件下 ,使用ELITEC18色谱柱 (5 μm) ,以甲醇—水 (1∶1)为流动相 (流速 1.0mL/min) ,以咖啡因 (0 .1g/L)为内标 ,检测波长2 75nm。结果 :本方法线性范围 0 .5mg/L～ 2 0 .0mg/L ,相关系数 0 .9992 ,检测限 0 .2mg/L ,回收率 96 %～ 10 5 %。结论 :方法灵敏、简便、准确 ,适用于对茶碱进行治疗药物监测的需要 ,在和一些常用抗癫痫药物先后测定时可以有效地降低成本、提高效率