丹参酮ⅡA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠血液SOD、NO及Hyp含量的影响

目的：观察丹参酮ⅡA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠血液超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、羟脯氨酸（Hyp）含量的影响。方法：健康成年SD雄性大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组（10mg·kg^-1）、丹参酮1组（5mg·kg^-1）、丹参酮2组（20mg·kg^-1）各8只,除假手术组外,其他组均采用胸主动脉部分缩窄术复制大鼠心肌肥厚模型。测量各组大鼠全心重量指数（HW／BW）、左心室重量指数（LVW／BW,即LVI）;检测血清SOD活力、NO及Hyp含量。结果：模型组大鼠的HW／BW、LVI、Hyp含量明显高于假手术组,而SOD活力、NO含量明显低于假手术组（均P〈0．05）。与模型组比较．丹参酮2组和缬沙坦组HW／BW、LVI及Hyp含量显著降低,SOD活力、NO含量显著升高;丹参酮1组与模型组各指标间差异无显著性意义。结论：丹参酮ⅡA对大鼠心肌肥厚有一定的保护作用,其机制可能与增加NO生成、抑制胶原合成、调节心脏局部氧自由基代谢等方面的作用有关,但〈5mg·kg^-1的丹参酮ⅡA对心肌作用不明显。     

丹参酮ⅡA阻断信号转导通路抑制心肌肥厚

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠盐（STS）对血管紧张肽Ⅱ（AngⅡ）诱导心肌肥厚的抑制作用，探讨该作用的信号转导机制。方法以原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞为模型，用AngⅡ刺激细胞肥大，STS及氯沙坦进行干预，采用：①以^3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率，作为心肌肥大反应指标；②WesternBlot检测总ERK和磷酸化细胞外信号调节激酶（P—ERK）水平变化反映ERK活性状态；③免疫荧光显示P—ERK的细胞定位和活性变化。结果STS能明显抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚（P＜0．01），使心肌细胞P—ERK数量和活性均减少（P＜0．05），其抑制作用与血管紧张肽Ⅱ受体阻滞药氯沙坦相似（P＞0．05）。结论STS能抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚，其机制与阻断了ERK信号转导通路有关。     

丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄大鼠肥厚心肌血管紧张肽受体及细胞内游离钙离子浓度的影响

目的 通过研究丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄的高血压大鼠肥厚心肌血管紧张肽Ⅱ受体(ATR)基因表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]I)的影响,探讨丹参酮ⅡA逆转高血压左心室肥厚的分子生物学机制.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,术后4周将手术大鼠随机分为假手术组(A组)、手术组(B组)、丹参酮低剂量组(C组,10 mg·kg-1·d-1腹腔注射)、丹参酮高剂量组(D组,20 mg·kg-1·d-1腹腔注射)及缬沙坦组(E组,10 mg·kg-1·d-1灌胃).用药8周后检测各组尾动脉压,取左心室组织检测左心室质量指数(LVMI)、病理切片HE染色测量心肌纤维直径(MFD);采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分别检测AT1受体mRNA和蛋白的表达水平.利用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2 浓度的变化.结果 ①C、D组血压[(188±11、187±14)mm Hg]显著高于A组、E组[vs(117±8、136±15)mm Hg,P<0.01],C、D组与B组[(186±13)mm Hg]之间差异无统计学意义(P>0.05).②C、D组和E组LVMI、MFD均高于A组(P<0.05),显著低于B组(P<0.01).③B组的AT1R mRNA和蛋白的表达显著高于其他各组(P<0.01);C、D组间无差异(P>0.05),但均高于E组(P<0.05);C、D、E组的AT1R基因表达均未降至A组水平(P<0.05).④B组细胞内[Ca2 ]I明显高于其他各组(P<0.01);D组与A组之间差异无统计学意义(P>0.05);E组和C组仍高于A、D组(P<0.05).结论 丹参酮ⅡA可通过下调心肌细胞AT1基因表达、阻止心肌细胞的钙离子内流发挥逆转心肌肥厚的作用,该作用是非血压依从性的.     

丹参酮ⅡA预防自发性高血压大鼠左室肥厚的机制

目的观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用，并研究其对心肌bcl-2蛋白表达的影响。方法18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成3组：对照组、丹参组和高血压组，每组6只。测量大鼠尾动脉收缩压（SBP）及左心室重量指数（LVMI）。应用HE染色、VG染色、免疫组织化学的方法，结合计算机图像分析技术，检测心肌细胞的直径和面积、心肌组织胶原体积比例（CVF）、血管周围胶原面积和管腔面积比例（PVCA）。用Western blot法检测心肌细胞bcl-2蛋白的表达。结果与对照组相比，高血压组大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径和面积、CVF、PVCA显著增加，bcl-2蛋白的表达降低（P〈0．05），丹参酮ⅡA治疗可抑制左心室肥厚（LVH）的发展和上调bcl-2蛋白的表达，但收缩压无明显改变。结论长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成，其机制可能与丹参酮ⅡA上调心肌细胞凋亡蛋白bcl-2的表达有关。     

丹参酮ⅡA对肥厚心肌信号转导系统蛋白激酶B通路的影响

目的：探讨丹参酮ⅡA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠的细胞信号转导系统中蛋白激酶B（Akt）的影响。方法：健康雄性成年大鼠48只，采用胸主动脉部分缩窄术复制心肌肥厚模型大鼠40只，随机分为模型组（M组），缬沙坦组（X组）各8只，丹参酮组（D组）24只，另8只设为假手术组（S组）。术后2周，X组大鼠给予缬沙坦10mg／kg灌胃；D组大鼠按丹参酮5、10和20mg／kg剂量各8只腹腔注射；S及M组大鼠给予同等容量无菌注射用水腹腔注射。各组治疗均每日1次。8周后检测各组大鼠左室心肌质量指数（LVMI），左心室后壁（LVPw）及室间隔（IVS）厚度，比较心肌纤维横径（MFD），心肌组织中p—Akt，p-Gsk3β信号转导蛋白的量。结果：与S组比较，M组、X组和D组的大鼠左室心肌质量指数，左心室及室间隔厚度及心肌纤维横径均增加，p—Akt及PGsk3β升高（均P〈0．05），与M组比较，X组和D组各项检测指标均下降；X组与D组间比较差异无显著性意义；D组中各剂量丹参酮治疗的大鼠间比较差异无显著性意义。结论：丹参酮ⅡA可以通过作用于蛋白激酶B（Akt）信号通路，防止心肌肥厚。     

丹参酮ⅡA对心肌肥厚的作用及其机制研究

目的　在原代培养的新生大鼠心肌细胞上 ,观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA ,TSN)对血管紧张素Ⅱ (AngiotensinⅡ ,AngⅡ )诱导的心肌细胞肥大的影响。方法　采用相差显微镜测量细胞大小 ,3 H -亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标 ;用逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)检测心肌细胞原癌基因c -fosmRNA的表达。结果　TSN能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞增大 ,蛋白质合成速率的显著增加 (P <0 0 5 )及心肌细胞原癌基因c -fosmRNA表达的增强 (P <0 0 5 ) ,其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦 (Valsartan ,Val)相似。结论　TSN可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大 ,这与其抑制了原癌基因c -fos的表达有关。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的影响及机制

目的观察丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚的作用,并探讨其作用机制.方法18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成3组一组于8周处死,另两组分别经腹腔注射丹参酮IIA和蒸馏水(1 g·kg-1·d-1),共10周.测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LVMI).应用HE染色、VG染色、免疫组织化学的方法,结合计算机图像分析技术,检测心肌细胞的直径和面积、心肌组织胶原体积比例(CVF)、血管周围胶原面积和管腔面积比例(PVCA)以及蛋白激酶C(PKC)的表达.结果与8周龄的自发性高血压大鼠相比,18周龄大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径、面积、CVF、PVCA显著增加,PKC表达上调,丹参酮IIA治疗可抑制LVH的发展和心肌组织PKC的表达,但收缩压无明显改变.结论长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成,其机制可能与丹参酮ⅡA降低了心脏PKG的表达有关.     

丹参酮ⅡA对高血压肥厚心肌细胞游离钙离子及一氧化氮合酶基因表达的影响

目的 通过研究丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄的高血压大鼠肥厚心肌血管紧张肽Ⅱ受体(ATR)基因表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)的影响,探讨丹参酮ⅡA逆转高血压左心室肥厚的分子生物学机制.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,术后4周将手术大鼠随机分为假手术组(A组)、手术组(B组)、丹参酮低剂量组(C组,10 mg·kg-1·d-1腹腔注射)、丹参酮高剂量组(D组,20 mg·kg-1·d-1腹腔注射)及缬沙坦组(E组,10mg·kg-1·d-1灌胃).用药8周后检测各组尾动脉压,取左心室组织检测左心室质量指数(LCMI)、病理切片HE染色测量心肌纤维直径(MFD);采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)分别检测AT1受体mRNA和蛋白的表达水平.利用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2 浓度的变化.结果 ①c、D组的血压[(188±11、187±14)mm Hg]显著高于A、E组[Vs(117±8、136±15)EtlIn Hg,P＜0.01],C、D组与B组[(186±13)mm Hg]之间差异无统计学意义(P＞0.05).②C、D组和E组的LVMI、MFD均高于A组(P＜0.05),显著低于B组(P＜0.01).③B组的ATlR mRNA和蛋白的表达显著高于其他各组(P＜0.01);C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于E组(P＜0.05);C、D、E组的AT1R基因表达均未降至A组水平(P＜0.05).④B组细胞内[ca2 ]i明显高于其他各组(P＜0.01);D组与A组之间差异无统计学意义(P＞0.05);E组和C组仍高于A、D组(P＜0.05).结论 丹参酮ⅡA可通过下调心肌细胞AT1基因表达、阻止心肌细胞的钙离子内流发挥逆转心肌肥厚的作用,该作用是非血压依从性的.     

丹参酮Ⅱ A对肥厚心肌细胞内C-jun氨基末端激酶活性的影响

目的:在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的肥大心肌细胞C-jun氨基末端激酶(C-junN-terminalkinases,JNKs)表达的影响。方法:采用相差显微镜测量心肌细胞直径大小,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标,用细胞免疫荧光标记和蛋白质印迹法(westernblot)检测心肌细胞核内磷酸化JNKs(JNK-P)的表达代表JNKs活性。结果:AngⅡ诱导心肌细胞肥大,其导致的心肌细胞直径、蛋白合成速率、细胞内JNK-P蛋白含量均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),丹参酮ⅡA对此有一定的抑制作用(P<0.05),其效果与AngⅡ受体阻滞剂氯沙坦相似。结论:丹参酮ⅡA对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大有一定的抑制作用。其作用机制可能与丹参酮能抑制AngⅡ1型受体激活,阻止Ca2 内流,阻断丝裂原活化的蛋白激酶通路,抑制JNKs的磷酸化和向核内移位有关。     

丹参酮ⅡA对压力负荷增加大鼠心肌转化生长因子-β_1表达影响

目的探讨丹参酮ⅡA对大鼠心肌纤维化的保护作用。方法 SD大鼠60只采用腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加心肌纤维化模型,术后存活中的24只大鼠随机分为3组,假手术组、模型组、丹参酮ⅡA组（20mg/（kg.d）,每组各8只。术后4周造模成功并开始给药,疗程为4周,8周后检测心肌质量指数、心肌组织病理学、心肌羟脯氨酸及心肌组织转化生长因子-β1蛋白水平。结果模型组大鼠心肌质量指数、心肌羟脯氨酸及心肌组织中转化生长因子-β1蛋白水平明显高于假手术组与丹参酮ⅡA组（P〈0.01）。结论丹参酮ⅡA可抑制心肌肥厚,减轻心肌纤维化,可能与下调心肌组织转化生长因子-β1表达有关。     

中药川芎嗪对慢性压力超负荷大鼠心肌纤维化的干预作用

目的为验证中药川芎嗪对心肌肥大心功能不全时改善心肌生物力学方面的功能。观察中药川芎嗪对压力超负荷大鼠心肌纤维化动态改变的影响。方法采用缩窄腹主动脉造成大鼠压力负荷模型。将63只大鼠SPSS软件采用随机分为3组:假手术组(shamoperatedgroups,SOG)、手术组(operatedgroups,OG)和手术+川芎嗪干预组(OG+川芎嗪)。每组分为术后1,2,4,7,14,21,30d7个时间点。采用组织病理学和计算机图像分析技术对在各时间点大鼠心肌纤维化进行形态学和形态计量法上的比较。结果(1)OG组光镜下显示出反应性纤维化和修复性纤维化阶段,OG+川芎嗪组心肌纤维化程度明显比OG组减轻,未见修复性纤维化出现。(2)OG组心肌血管周围纤维化(perivascularcollagenarea,PVCA)在术后1d(2.09±0.45)就已显著高于SOG组(0.83±0.06),以后平稳上升,而与此同时OG+川芎嗪组PVCA(1.16±0.06)显著低于OG组;OG组心肌胶原容积分数(collagenvol-umefraction,CVF)在术后2d(3.08±0.56)已显著高于SOG组(2.78±0.64),从术后21d始呈现迅速上升的趋势,而OG+川芎嗪组CVF从术后21d(4.69±0.85)开始显著低于OG组(7.56±0.88),P均<0.05。结论川芎嗪可减缓压力超负荷大鼠心肌胶原的沉积,具有心脏保护作用。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠心肌醛固酮合成相关基因表达的影响

目的　探讨丹参酮ⅡA对心肌醛固酮合成相关基因表达的作用。方法　雄性自发性高血压大鼠 (SHR) 2 0只 ,分为两组 :高血压组、丹参酮ⅡA组 ,分别腹腔注射生理盐水、丹参酮ⅡA12周。通过逆转录 聚合酶链反应 ,以GAPDH为内参照 ,测定两组心肌CYP11B1、CYP11B2的mRNA表达量。结果　丹参酮ⅡA组CYP11B1及CYP11B2的mRNA表达水平明显低于高血压组 (0 92 4± 0 12 1vs 1 343± 0 132 ,P <0 0 5 ;1 0 17± 0 119vs 1 6 75± 0 12 6 ,P <0 0 1) ,GAPDH的mRNA水平在两组间无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　丹参酮ⅡA治疗可抑制心脏醛固酮合成相关基因CYP11B1及CYP11B2的mRNA表达     

丹参酮ⅡA对星巴謦心肌细胞内C-jun氨基末端激酶活性的影响

目的：在原代培养的新生大鼠心肌细胞上，观察丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）诱导的肥大心肌细胞C-jun氨基末端激酶（C-jun N-terminal kinases，JNKs）表达的影响。方法：采用相差显微镜测量心肌细胞直径大小，^3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标，用细胞免疫荧光标记和蛋白质印迹法（western blot）检测心肌细胞核内磷酸化JNKs（JNK-P）的表达代表JNKs活性。结果：AngⅡ诱导心肌细胞肥大，其导致的心肌细胞直径、蛋白合成速率、细胞内JNK-P蛋白含量均明显高于对照组（P〈0.05或P〈0．01），丹参酮ⅡA对此有一定的抑制作用（P〈0．05），其效果与AngⅡ受体阻滞剂氯沙坦相似。结论：丹参酮ⅡA对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大有一定的抑制作用。其作用机制可能与丹参酮能抑制AngⅡ1型受体激活．阻止Ca^2＋内流。阻断丝裂原活化的蛋白激酶通路。抑制JNKs的磷酸化和向核内移位有关。     

黄芪多糖对压力超负荷诱导的大鼠心肌肥大的影响

目的:探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)对压力超负荷所致大鼠心肌肥大的抑制作用。方法:SD大鼠随机分为5组:假手术手组、模型组、APS低剂量组(AP1)、APS高剂量组(AP2)和卡托普利组。给药8周后,分别进行心脏超声和HE染色检测心脏肥大指数及形态学改变。结果:超声检测发现,与假手术组相比,模型组左右心室质量比明显增加,舒张期左心室容量、左心室射血分数和左心室短轴缩短速率均明显降低;AP2组与模型组相比,以上指标均有显著性改善,而AP1组和模型组比较无明显差异。HE染色显示,模型组肌细胞排列疏松、肥大,AP1组和AP2组细胞排列整齐,有少量肥大细胞夹杂。结论:高剂量APS对压力超负荷大鼠的心肌肥大有明显保护作用。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大反应中磷酸化MAPK的作用

目的 主要从丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活及失活的角度研究丹参酮ⅡA磺酸钠（STS）对血管紧张肽Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌肥大反应中的作用。方法 培养新生大鼠心肌细胞，考马斯亮蓝法测定心肌细胞蛋白含量、[^3H]-亮氨酸掺入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标；用Western blot测定磷酸化MAPK蛋白（p44MAPK、p42MAPK）表达。结果 ①AngⅡ（1μmol／L）处理24h，心肌细胞[^3H]-亮氨酸掺入率、蛋白含量明显增加，STS能明显抑制AngⅡ介导心肌细胞[^3H]-亮氨酸掺入率、蛋白含量的增加。②用AngⅡ（1μmol／L）处理心肌细胞5min，磷酸化MAPK蛋白（p44MAPK、p42MAPK）表达即开始增加，10min左右时最明显。以AngⅡ（1μmol／L）处理心肌细胞10min，磷酸化MAPK蛋白（p44MAPK、p42MAPK）表达为标准，预先以STS（2、10、50μmol／L）处理心肌细胞30min。发现STS可明显抑制Angi诱导的心肌细胞磷酸化MAPK蛋白表达。③预先以不同浓度STS处理心肌细胞30min，发现STS对AngⅡ诱导的心肌细胞磷酸化MAPK蛋白表达的抑制作用存在剂量依赖性。结论 STS可以抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚，其机制与抑制磷酸化MAPK表达有关。     

丹参酮ⅡA预防血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌肥大的机制

目的：观察丹参酮ⅡA磺酸钠盐（sodium tanshinone ⅡA sulfonate，STS）对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的影响，以探讨STS在钙调神经磷酸酶（calcineurin，CaN）依赖的信号通路心肌肥大中的作用。方法：以培养的原代心肌细胞为模型，用AngⅡ刺激细胞外Ca^2＋内流，丹参酮ⅡA及钙离子拮抗剂雏拉帕米（Ver）进行干预，检测心肌细胞[Ca^2＋]i及CaN活性；[^3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标。用Western blot法检测心肌细胞CaN蛋白的表迭。结果：AngⅡ刺激组[Ca^2＋]i水平、CaN蛋白的表达及蛋白核酸合成速率明显增高，与对照组相比差异有显著性（P〈0．01），而STS能有效地降低由AngⅡ刺激引起的[Ca^2＋]i增高（P〈0．01vs AngⅡ组），明显抑制AngⅡ诱导的蛋白质合成速率的增加（P〈0．01 vs AngⅡ组）。AngⅡ刺激组CaN活性及其蛋白表达明显高于对照组，差异有显著性（P〈0．05，P〈0．01）。STS及Ver抑制AngⅡ介导的心肌细胞CaN活性及其蛋白表达的增高。结论：CaN通路在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用；STS具有Ca^2＋阻滞剂的特点，能有效地降低由AngⅡ刺激引起的[Ca^2＋]i增高，导致CaN活性及其蛋白表达降低，阻滞心肌肥大的发生和发展。     

压力超负荷致小鼠心肌肥厚中miR378对热休克转录因子1的调节作用

目的:探讨miR-378在压力超负荷致小鼠心肌肥厚中对热休克转录因子1(HSF1)的调节作用及机制。方法:采用C57B/L6雄性小鼠经主动脉缩窄构建心肌的压力超负荷(TAC)模型,2周后对小鼠进行心脏超声和血流动力学测定,并观察miR-378和HSF1的表达变化。体外培养心肌细胞,机械牵张刺激24 h后观察miR-378和HSF1的表达变化;对心肌细胞分别转染miR-378模拟物和抑制物,48 h后观察心肌细胞内源性HSF1的表达变化;通过荧光素酶基因报告系统,检测miR-378是否靶向结合其预测靶点HSF1的3′UTR区域。结果:建模TAC小鼠2周后,心脏表现为代偿性心肌肥厚,HSF1表达升高而miR-378表达下降。心肌细胞机械牵张后HSF1表达升高而miR-378表达下降;心肌细胞过表达miR-378后,HSF1表达显著下降,而当抑制内源miR-378时,HSF1表达显著升高;荧光素酶报告系统证实miR-378能够靶向结合HSF1的3′UTR序列。结论:在心肌肥厚代偿期,miR-378可能通过靶向结合HSF1的3′UTR序列调节心肌内源性HSF1的表达。     

压力超负荷后大鼠心肌核仁组成区嗜银蛋白动态变化及 …

目的 探讨用核仁组成区嗜银蛋白染色反映压力超负荷后早期心肌肥大的可能性。方法 作心肌ＡｇＮＯＲｓ染色并作图像分析进行相对定量,分析其与心肌肥大进程的关系。结果 随着大鼠血压的升高,左室重量指数于手术５ｄ开始显著增大,并持续升高。超微结构显示术后１ｄ心肌细胞肌浆网逐渐扩张,术后５ｄ尤以核周和肌膜下明显。     

丹参酮ⅡA对主动脉内皮细胞功能损伤的保护机制

目的通过观察猪主动脉内皮细胞在血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)作用后,丹参酮ⅡA对血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白、mRNA表达和细胞内游离钙离子([Ca2 ]i)浓度的变化,探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞的保护作用。方法采用硝酸还原法、免疫组织化学法、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和激光共聚焦扫描显像系统,分别检测NO水平、eNOS蛋白和mRNA表达,以及细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)水平的变化。结果①随着AngⅡ浓度的增加、作用时间的延长,内皮细胞NO的产生及eNOS的基因表达呈顺序下降(P<0.01),表现出剂量、时间依赖性的负性作用。②丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对内皮细胞分泌NO及eNOS表达的负性作用(P<0.01),但尚不能恢复到空白对照组水平(P<0.05)。在丹参酮ⅡA作用1、6h,A组的抑制效应明显强于B组(P<0.05);随着作用时间延长至24h,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。③AngⅡ可引起主动脉内皮细胞[Ca2 ]i显著升高(P<0.01),丹参酮ⅡA可部分抑制AngⅡ诱导的内皮细胞[Ca2 ]i升高(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA通过增加血管内皮细胞eNOS基因表达及细胞分泌NO水平和降低内皮细胞[Ca2 ]i水平来发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

丹参酮ⅡA抑制新生大鼠心肌细胞肥大的作用机制

目的本研究在原代培养的新生大鼠心肌细胞的基础上,观察丹参酮ⅡA磺酸钠盐(STS)对血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的影响,以探讨STS在钙调神经磷酸酶(CaN)依赖的信号通路心肌肥大中的作用。方法以培养的原代心肌细胞为模型,用AngⅡ刺激细胞外Ca2 内流,丹参酮ⅡA及钙离子拮抗剂维拉帕米(Ver)进行干预,检测心肌细胞[Ca2 ]i及CaN活性;[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标。用Western blot法检测心肌细胞CaN蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌细胞原癌基因c-fos mRNA的表达。结果AngⅡ组[Ca2 ]i水平、CaN蛋白的表达及蛋白核酸合成速率明显增高,与对照组相比差异显著(P<0.01),而STS能有效地降低由AngⅡ剌激引起的[Ca2 ]i增高(P<0.01),明显抑制AngⅡ诱导的蛋白质合成速率的增加(P<0.01)。AngⅡ组CaN活性、蛋白表达以及c-fos mRNA的表达与对照组相比差异有显著性(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。STS及维拉帕米抑制AngⅡ介导的心肌细胞CaN活性、蛋白表达以及c-fos mRNA表达的增高。结论CaN通路在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用;STS具有Ca2 阻滞剂的特点,能有效降低由AngⅡ剌激引起的[Ca2 ]i增高,降低CaN活性及其蛋白表达,从而降低c-fos mRNA的表达,抑制心肌肥大的发生和发展。