芪冬活血饮对急性肺损伤大鼠caveolin-1和细胞因子的影响

摘 要 目的 观察芪冬活血饮对脂多糖所致大鼠急性肺损伤（ALI）小窝蛋白-1及细胞因子的影响。方法 将50只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、芪冬活血高、中、低组,每组10只。通过气道内滴注脂多糖建立大鼠急性肺损伤模型。芪冬活血高、中、低剂量组造模前24、12h及造模后12h分别以16、8、4mL/kg芪冬活血饮灌胃,空白组及模型组以8mL/kg生理盐水灌胃。各组大鼠均在造模后24h处死,收集标本。检测肺泡灌洗液细胞因子变化;常规HE染色,光镜下观察肺组织病理变化;免疫组化法检测肺组织Cav-1表达;RT-PCR检测Cav-1mRNA表达。结果 1.芪冬活血饮可以减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏,肺水肿及炎性细胞浸润。2.空白组TNF-?、IL-1β、IL-10含量最低,与其余各组比较差异均有统计学意义（P均＜0.01）。模型组TNF-?、IL-1β含量均高于中、高剂量组[（52.59±12.78）比（39.87± 8.14）和（27.78±10.99）pg/mL,（42.39±11.15）比（33.83±8.38）和（24.90±7.06）pg/mL,P＜0.05或P＜0.01],IL-10含量低于中、高剂量组[(15.63±2.13）比（20.98±2.17）和（22.33±2.31）pg/mL,P＜0.05或P＜0.01]。中、高剂量组比较TNF-?、IL-1β 差异P均<0.05。3.Cav-1免疫组化积分及mRNA表达量均为空白对照组最低,模型组最高。除模型组与低剂量组免疫组化积分（8.58±1.39比7.33±1.16）比较差异无统计学意义,空白组、模型组与各中药比较P均＜0.01;Cav-1免疫组化积分及mRNA相对表达高剂量组低于低剂量组 [（5.91±1.11比7.33±1.16）和（35.27±3.31比62.34±5.66）,P＜0.01]。结论 芪冬活血饮对LPS诱导的大鼠ALI有保护作用,其机制可能与抑制Caveolin-1表达,降低促炎细胞因子TNF-?、IL-1β水平,升高抗炎细胞因子IL-10水平,纠正炎症失衡有关。     

芪冬活血饮对脂多糖诱导急性肺损伤大鼠血气分析的影响

[目的]探讨及分析芪冬活血饮对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)大鼠血气分析的影响。[方法]SD大鼠60只,随机分为6组,即生理盐水组(Normal Saline Group,NS组)、模型组(Model group,M组)、地塞米松组(DXM组)、芪冬活血饮组、大黄组、芪冬活血饮加大黄组,除生理盐水组采用气道内滴入生理盐水外,其余各组大鼠均气道内滴入脂多糖制备ALI模型,并分别应用相应药物进行干预。所有大鼠均在造模后24h处死采集动脉血,检测pH值、二氧化碳分压(PaCO2)及血氧分压(PaO2),并且HE染色观察肺组织损伤程度。[结果]芪冬活血饮可以减轻肺水肿及中性粒细胞浸润,改善酸中毒、降低PaCO2,差异有统计学意义(P<0.05);提高PaO2,但无明显差异,芪冬活血饮同大黄合用,脏腑同治,虽可以进一步提高PaO2、降低PaCO2及改善酸中毒,但同芪冬活血饮组比较,两者之间差异没有统计学意义(P>0.05)。[结论]芪冬活血饮可以减轻ALI大鼠酸中毒,降低PaCO2及提高PaO2,改善肺组织病理学改变,但同大黄合用,在改善大鼠氧合功能方面协同作用不明显。     

芪冬活血饮通过干扰素调节因子5抑制肺组织M1巨噬细胞募集治疗急性肺损伤的作用机制研究

目的 探讨芪冬活血饮通过干扰素调节因子5(IRF5)抑制肺组织M1巨噬细胞募集治疗急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法 24只C57BL/6小鼠随机分成四组,即空白组、模型组、芪冬活血饮低剂量(1 g/mL)和高剂量(2 g/mL)组,每组6只。采用脂多糖(LPS)制备ALI模型,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学改变;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)]水平;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测肺组织细胞凋亡情况;采用流式细胞术检测肺组织M1型巨噬细胞水平,采用蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3剪切体(cleaved caspase3)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、BCL2相关X蛋白(Bax)表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肺组织IRF5 mRNA表达;采用免疫荧光法检测IRF5蛋白在肺组织中的原位表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠肺组织肺泡结构破坏,肺间质水肿增厚,炎性细胞浸润,红细胞渗出,肺组织细胞凋亡显著增...     

芪冬活血饮对急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞iRhom2/TACE信号通路的影响

[目的]探索芪冬活血饮对肠缺血/再灌注诱导的急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞未活化的菱形蛋白2(inactive rhomboid protein 2,iRhom2)/肿瘤坏死因子-α转化酶(tumor necrosis factor-αconvertase,TACE)信号通路的影响.[方法]通过肠缺血/再灌注方法构建急性肺...     

芪冬活血饮加减治疗肺间质纤维化的临证经验

[目的]总结第二批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师王会仍教授治疗肺间质纤维化（pulmonary interstitial fibrosis,PIF）的学术思想和临床经验,力求继承发扬。[方法]通过跟师侍诊,整理典型医案,梳理王会仍教授对PIF病因病机的认识,阐述其临证心法,总结经验方芪冬活血饮的组成、方义及效用,并举验案以证明之。[结果] PIF的病因病机有气阴两虚、热毒熏蒸、痰瘀互阻。王会仍教授治疗PIF,主抓“虚、热、瘀”的病理基础,临证遵循清热解毒、袪瘀通腑、益气养阴为主的治疗原则,强调气阴同治、肺肠同治、气血同治,常用自拟“芪冬活血饮”加减治疗。文中所举闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎验案为气阴不足、痰瘀交阻之肺痿,以芪冬活血饮加减,益气养阴化瘀、化痰通络平喘,疗效显著。[结论]王会仍教授运用芪冬活血饮治疗PIF,以达益气养阴、清肺化痰、祛瘀通腑之效,其学术思想和临证经验值得学习传承。     

L精氨酸对大鼠急性肺损务和内皮素水平的影响

观察Ｌ－精氨酸对大鼠急性肺损伤和内皮素水平的影响，将３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为正常组，损伤组１Ｌ－精氨酸组，各组在乌拉坦麻醉下用微量注射器从股静脉给药物观察１２０ｍｉｎ时的动脉血氧分压，肺组织中的内皮素变化和肺水含量变化。     

壮通饮对大鼠心肌缺血血瘀证内皮素1表达的影响

目的 观察壮通饮对心肌缺血血瘀证大鼠血清及心肌组织内皮素1（endothelin-1,ET-1）表达的影响,探讨壮通饮对冠心病心肌缺血的保护作用机制。方法 采用左冠状动脉结扎法制作大鼠心肌缺血血瘀证模型,并随机分为空白、假手术组、模型组、壮通饮低（6.8g/kg）、中（13.6g/kg）、高（27.2g/kg）剂量组、阳性对照组7个组,灌胃给药治疗4周后,分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）和WB（Western blotting）法检测大鼠血清及心肌组织ET-1的表达。结果 血清ELISA结果显示,与空白组、假手术组相比,模型组ET-1的表达明显升高（P<0.05）,药物干预后,各组均可使ET-1降低,但中剂量组降低ET-1效果最明显（P<0.05）。WB检测结果显示,模型组ET-1的平均灰度值明显高于空白组、假手术组,药物干预后,各组均可使ET-1平均灰度值降低,但中剂量组降低效果最明显。结论 壮通饮能减少心肌缺血血瘀证大鼠ET-1的表达,缓解血管收缩,对大鼠心肌缺血有一定的保护作用。     

乌司它丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1的影响

目的:探讨乌司他丁对油酸致急性肺损伤大鼠肺组织血红素氧化酶-1表达的影响.方法 30只成年SD大鼠,随机分为3组(n＝10).正常组(A组)经大鼠尾静脉注射0.2mL/kg生理盐水;急性肺损伤组(B组)、乌司他丁组(C组)经大鼠尾静脉注射油酸0.2mL/kg制成急性肺损伤模型,随后立即给予A组、B组腹腔注射生理盐水10mL/kg,C组100ku/kg的乌司他丁腹腔注射.测取动物4h时间点呼吸频率和左心室动脉血氧分压,并于4h后取右下肺组织行HE染色和HO-1免疫组织化学检查,观察光镜下病理改变以及血红素氧化酶-1的表达.结果: 乌司他丁能显著改善油酸所致急性肺损伤所致的呼吸窘迫;肺组织血红素氧化酶-1在对照组仅有少量表达,急性肺损伤组表达增多,乌司他丁干预组表达明显增强.结论:乌司他丁可通过增加肺组织中血红素氧化酶-1的表达而发挥保护作用.     

咯利普兰对肺纤维化大鼠内皮素-1水平的影响

目的:观察喀利普兰对肺纤维化大鼠内皮素-1(ET-1)含量的影响。方法:48只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和喀利普兰组,对照组腹腔注射体积分数为5%乙醇的生理盐水,后2组制备模型前一天腹腔分别注射体积分数为5%乙醇的生理盐水(0.5mL)和喀利普兰溶液(0.25mg·kg-1·d-1);分别于第7、28天收集标本,测定肺匀浆ET-1和羟脯氨酸(HYP)含量。结果:造模后第7、28天,3组大鼠肺匀浆中ET-1含量差异均有统计学意义(F=9.749,8.771,P<0.05)。模型组肺匀浆ET-1含量[(98.82±15.25)mg/g,72.88±22.59)mg/g]均高于对照组[(65.72±17.67)mg/g,(36.00±15.49)mg/g,P<0.05)];而喀利普兰组[(78.03±12.02)mg/g,(49.05±14.38)mg/g]低于模型组(P<0.05)。第28天,喀利普兰组肺HYP含量[(1.316±0.225)mg/g]低于模型组[(2.399±0.152)mg/g)](P<0.05)。结论:喀利普兰对平阳霉素诱发的肺纤维化有阻断作用,可能是通过拮抗ET-1而实现。     

三七总甙对糖尿病皮肤溃疡大鼠内皮素-1水平的影响

目的观察三七总甙(PNS)对糖尿病皮肤溃疡(DSU)大鼠血管内皮功能的影响。方法成年雄性Wist-ar大鼠50只随机分为对照组、DSU模型组和PNS高、中、低剂量组,每组10只。采用放射免疫法检测大鼠血清内皮素(ET-1)水平,采用反转录-聚合酶链反应技术和Western blotting技术检测大鼠溃疡处组织中ET-1的表达。结果DSU模型组和PNS高、中、低剂量组大鼠血清ET-1水平显著高于对照组(P<0.05),PNS高、中、低剂量组大鼠血清ET-1水平及溃疡组织中ET-1 mRNA和蛋白表达显著低于DSU模型组(P<0.05),PNS高剂量组大鼠血清ET-1水平及溃疡组织中ET-1 mRNA和蛋白表达明显低于PNS中、低剂量组(P<0.05),PNS中剂量组大鼠血清ET-1水平及溃疡组织中ET-1 mRNA和蛋白表达明显低于PNS低剂量组(P<0.05)。结论 PNS可降低DSU大鼠ET-1的表达。     

前列腺素E1治疗犬油酸型急性肺损伤的实验观察

目的 观察前列腺素El联合呼气末正压(PEEP)对犬油酸型急性肺损伤(ALI)的治疗作用。方法 15只成年健康家犬随机分成3组，静脉注射油酸复制性肺损伤模型后分别给予PGEl雾化吸入或静脉滴注或雾化吸入生理盐水，同时联合PEEP治疗。结果PGEl治疗组犬动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)均明显改善，肺循环阻力(FVR)和平均肺动脉压(MRAP)均显著降低；且雾化吸入组动物体循环平稳，静脉治疗组体循环指标变化显著。结论 雾化吸入PGE1可选择性扩张肺血管．降低油酸型ALI犬MPAP和PVR．迅速提高PaO2／FiO2．且不影响体循环．     

宣肺通腑方对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织TLR4蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨宣肺通腑方对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织TLR4蛋白及其mRNA表达的影响。方法:将32只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、宣肺通腑方组,每组8只。尾静脉注射LPS 6 mg/kg制备大鼠ALI模型。宣肺通腑方组在造模前3 d,按7.56 g/kg予宣肺通腑方水煎液灌胃,1次/d;地塞米松组在造模前1 h按5 mg/kg腹腔注射地塞米松。造模后6 h麻醉取样,分别采用免疫组化法和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测TLR4蛋白及其mRNA的表达,并于光镜下观察大鼠肺组织病理变化。结果:与模型组相比,宣肺通腑方组TLR4蛋白及其mRNA的表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。病理学显示,模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死,宣肺通腑方组大鼠肺组织病理改变明显轻于模型对照组,肺细支气管偶见炎症改变,水肿较轻,炎性细胞渗出较少。与地塞米松组比较,两药物干预组无显著性差异。结论:宣肺通腑方能减轻内毒素所致ALI大鼠肺组织损伤,对肺损伤有保护作用,其机制可能与其能降低内毒素致ALI大鼠TLR4蛋白及其mRNA的表达有关。     

甘氨酸减轻油酸诱导的大鼠肺损伤

目的 探讨甘氨酸对油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、ALI组、甘氨酸预处理组(0．8g／kg)。测定成模后6h肺系数、肺匀浆中谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)水平,观察肺组织学病变,ELISA法检测各组肺泡巨噬细胞培养上清液IL-10和TNFa浓度。结果与Au组相比,甘氨酸不能提高ALI组各时相降低的肺GSH水平,但可降低肺系数和肺MPO活性,明显改善肺病变,提高IL-10而降低TNFa水平,提高生存率。结论 甘氨酸虽然不能提高肺GSH水平,但对油酸诱导的急性肺损伤有一定的防治作用,可能与抑制白细胞浸润激活有关。     

宣白承气汤对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA表达的影响

目的：探讨宣白承气汤对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织髓样分化蛋白-2（myeloid differentiation protein-2,MD-2）mRNA、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）蛋白及其mRNA表达的影响。方法：将32只雄性Wistar大鼠随机分为：正常对照组、模型对照组、地塞米松组、宣白承气汤组,每组8只。尾静脉注射LPS 6 mg/kg制备大鼠ALI模型。宣白承气汤组在造模前灌胃3 d,按7.56g生药/kg宣白承气汤水煎液灌胃,1次/d;地塞米松组在造模前1 h按5 mg/kg腹腔注射地塞米松,造模6 h后麻醉取材。采用免疫组化ABC法和实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA的表达,并于光镜下观察大鼠肺组织病理变化。结果：与正常对照组相比,模型组MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA的表达均明显上调（P〈0.01）;与模型组相比,地塞米松组和宣白承气汤组MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA表达明显降低（P〈0.01）;地塞米松组和宣白承气汤组相比无显著差异（P〉0.05）。病理学观察,与正常组相比,模型对照组大鼠肺组织出现大片出血及坏死,宣白承气汤组和地塞米松组大鼠肺组织病理改变明显轻于模型对照组,肺细支气管偶见炎症改变,水肿较轻,炎性细胞渗出较少。结论：宣白承气汤能减轻内毒素致ALI大鼠肺组织损伤,对肺损伤有保护作用,其机制可能与其能降低内毒素致ALI大鼠MD-2mRNA、MyD88蛋白及其mRNA的表达有关。     

硫酸镁对油酸致家兔急性肺损伤的防治作用

目的　利用油酸 (OA )复制家兔急性肺损伤模型 ,观察硫酸镁的防治作用并探讨其机制。　方法　 2 4只兔随机分为 3组 (各 8只 ) : .对照组 ; .油酸损伤组 ,按 0 .12 ml/ kg静推 OA,损伤前 6 0 min静推生理盐水 ; .硫酸镁防治组 ,损伤前 6 0 min按 2 m g· kg- 1 · min- 1 推注 Mg SO4直至实验结束。于损伤前 6 0 m in,损伤后 6 0 ,12 0 ,180 min抽颈总动脉血查氧分压、L PO、SOD活力 ,实验末取肺标本观察病理改变 ,计算肺系数。　结果　 (1)油酸损伤组和硫酸镁防治组在 OA损伤后 Pa O2 呈进行性下降 ,与损伤前比较差别有显著意义 (P<0 .0 1) ;但防治组Pa O2 下降的幅度比损伤组小 ,在伤后 6 0 ,12 0和 180 min Pa O2 测定损伤组比对照组下降了 30 .7% ,35 .5 %和40 .6 % ,而防治组为 13.6 % ,16 .6 %和 19.6 % ,两组差别有显著意义 (P<0 .0 1)。 (2 )损伤组 L PO含量与对照组比各时点分别增加了 6 4.7% ,80 .5 %和 95 .5 % ,差别显著 (P<0 .0 1) ;防治组增加不如损伤组明显。 (3)损伤组 SOD与对照组相比 ,各时点分别下降 32 .6 % ,40 .2 %和 49.2 % (P<0 .0 1) ;防治组下降不如损伤组明显。 (4 )损伤组和对照组肺系数分别比对照组高出 12 3.8%和 40 .4% (P<0 .0 1) ,但防治组不如损伤组明显 ;观察肺大体     

机械通气对急性肺损伤兔肺水肿影响的实验研究

目的研究不同潮气量联合不同水平呼气末正压(PEEP)机械通气对急性肺损伤(ALI)兔肺水肿的影响。方法用数字表法将36只新西兰兔随机分为正常对照(NC)组、ALI组、常规潮气量(15mL/kg)低PEEP(5cmH2O)(CVLP)组、常规潮气量高PEEP(10cmH2O)(CVHP)组、小潮气量(8mL/kg)低PEEP(LVLP)组和小潮气量高PEEP组(LVHP组)。以内毒素静脉注射建立ALI动物模型,经机械通气的4组动物分别给予不同潮气量联合不同水平PEEP机械通气4h。实验结束后取肺组织测定湿质量/干质量比值评价肺水肿严重程度。结果NC组、ALI组、CVLP组、CVHP组、LVLP组和LVHP组的肺湿质量/干质量比值分别为4.81±0.19、5.84±0.20、5.47±0.28、5.25±0.12、5.24±0.12和5.12±0.10,NC组低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05);ALI组高于各机械通气组,差异有统计学意义(P<0.05);LVHP组低于CVLP组,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论机械通气能够减轻ALI肺水肿,小潮气量联合高PEEP机械通气减轻ALI肺水肿的作用更加显著。     

油酸肺损伤所致RDS对肾功能的影响

目的：探讨油酸肺损伤所致ＲＤＳ时动脉血氧分压（ＰａＯ２）和中分子物质（ＭＭＳ）的改变对肾脏的影响。方法：用油酸（ＯＡ）０．１ｍｌ／ｋｇ体重静脉缓慢注入复制家兔ＲＤＳ模型，检测平均动脉血压（ＭＡＢＰ）、血气、肾功能和肾组织电镜以及血浆和肾组织ＭＭＳ的变化。结果：随着ＰａＯ２进行性下降，ＢＵＮ和ＰＣｒ明显增高，同时血浆和肾组织中的ＭＭＳ也相应明显增高，而且ＢＵＮ和ＰＣｒ与肾组织ＭＭＳ呈正相关关系。此外，ＭＡＢＰ亦进行性下降并与ＰａＯ２下降呈正相关关系。电镜下肾组织在ＲＤＳ早期和晚期有不同的改变。结论：油酸所致单纯ＲＤＳ过程可伴发急性肾功能障碍，此变化与ＰａＯ２下降、ＭＡＢＰ降低和ＭＭＳ增高有关