石蒜碱诱导肺癌A549细胞凋亡作用研究

为探讨石蒜碱诱导肺癌A549细胞的凋亡作用及其机制。该研究以肺癌A549细胞为实验对象,通过不同浓度的石蒜碱(0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 μmol·L^-1) 处理A549细胞,MTT观察细胞增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双标法检测细胞的凋亡率;酶标仪检测凋亡因子Bcl-2,Bax,p53的活性;流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位变化;Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2,Bax,p53和Survivin的表达。研究结果表明:石蒜碱可显著抑制A549细胞增殖(P<0.05)、诱导A549细胞凋亡(P<0.05)。同时增强Bax和p53的活性,降低Bcl-2活性和线粒体膜电位,显著改变Bcl-2,Bax,p53和Survivin的基因表达(P<0.05)。综上表明石蒜碱可诱导A549细胞凋亡,具有治疗肺癌的应用前景,其机制可能与其调节Bcl-2信号通路中相关因子活性有关。     

直立白薇苷C诱导肺癌A549细胞凋亡的作用机制

目的研究白薇诱导肺癌A549细胞凋亡的活性成分及其作用机制。方法以肺癌A549细胞为实验对象,通过硅胶柱层析等方法确定其活性成分,并利用比色法研究活性成分对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和Caspase-9的活性以及凋亡相关基因肿瘤坏死因子(TNF-α)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(BCL2)、Caspase-3和生存素(Survivin)的影响。结果分离获得1种能诱导肺癌A549细胞凋亡的活性成分,经鉴定为直立白薇苷C。它可显著抑制A549细胞增殖、诱导A549细胞凋亡。同时增强Caspase-3和Caspase-9的活性,上调TNF-α基因表达,下调BCL2、Caspase-3和Survivin等基因表达。结论直立白薇苷C可诱导A549细胞凋亡,其机制可能与其调节Caspase家族因子活性有关。     

桔梗皂苷D诱导人肺癌细胞A549的凋亡及机制

目的:研究桔梗皂苷D(platycodin,PD)抑制人肺癌A549细胞株增殖和诱导凋亡的分子机制.方法:体外培养人肺癌细胞株A549,PD作用终浓度分别为5～ 20μmol·L-1.MTF法测定PD对细胞的增殖抑制作用,显微镜观察细胞的形态学变化,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率,JC-1检测线粒体膜电位的变化,Western blot方法检测PD对Caspase-3,Caspase-9,PARP的剪切片段和Bax,Bcl-2,Bak,Bcl-xl蛋白表达的影响.结果:PD抑制A549细胞的增殖,并随药物浓度的增加和作用时间的延长,作用更显著;与对照组相比,不同浓度的PD作用24 h后,细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低,且差异显著.蛋白电泳检测结果显示蛋白Caspase-3,Caspase-9均出现剪切片断,并随着时间的增加断裂更明显.PD处理A549细胞后,Bax和Bak蛋白表达升高,Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达下降.结论:PD具有明显的细胞毒作用,能诱导A549细胞凋亡,通过对Bax,Bak和Bcl-2,Bcl-xl表达的调控,导致线粒体膜电位的下降,进而激活Caspase最终导致肺癌细胞死亡.     

桔梗皂苷-D诱导肺腺癌A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞

目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(A549)和A549顺铂耐药细胞(A549/DDP)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡作用;Hoechst-33258荧光染色观察细胞核形态的变化;Western-blot蛋白印迹法分析凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:MTT检测结果显示,PD对A549和A549/DDP细胞的增殖抑制呈浓度和时间依赖性。Hoechst 33258荧光染色发现,随着PD浓度增加,两种细胞核形态都有明显的改变。进一步流式细胞术结果表明,PD诱导A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞。Westernblot检测结果表明,PD通过上调Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3和PARP的表达,下调Bcl-2和Caspase-3的表达诱导A549和A549/DDP细胞凋亡。此外,PD通过下调Cyclin-D1、Cyclin-D3、CDK4、CDK6、E2F1和p-Rb及上调P18的蛋白水平诱导A549细胞周期G0/G1阻滞。同时,PD通过下调Cyclin-B1、p-Cdc2、E2F1和p-Rb及上调P27的蛋白表达诱导A549/DDP细胞周期G2/M阻滞。结论:PD通过线粒体途径诱导A549和A549/DDP细胞凋亡诱导,并且引发A549细胞G0/G1周期阻滞和A549/DDP细胞G2/M阻滞周期阻滞。     

猫爪草总皂苷体外抗人非小细胞肺癌A549细胞活性研究

目的：观察猫爪草总皂苷体外对人非小细胞肺癌A549细胞活性的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法：采用系统溶剂法提取猫爪草总皂苷,3H-TdR掺入法和集落形成实验观察猫爪草总皂苷对A549细胞增殖的影响;流式细胞仪检测其对A549细胞凋亡和周期的影响。结果：猫爪草总皂苷对A549细胞增殖和集落形成均有较好的抑制作用,呈现较好的量效关系,可促进A549细胞的早期凋亡,细胞周期出现G0/G1期的阻滞。结论：猫爪草总皂苷能较好的抑制A549细胞增殖,其机制可能与诱导凋亡、G0/G1期阻滞有关。     

水飞蓟宾体外诱导人肺癌A549细胞凋亡作用研究

目的:研究水飞蓟宾对人肺癌A549细胞凋亡的影响。方法:采用MTT法测定水飞蓟宾在不同浓度下对A549细胞的抑制率;分别采用q TR-PCR及Western blot检测细胞中Capase-3、Caspase-9及Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:10、20、40、80、160μg/ml水飞蓟宾对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,最高抑制率为46.61±3.70。qRTPCR及Western blot结果显示,与对照组相比,当水飞蓟宾浓度为40~160μg/ml剂量范围时,显著上调Capase-3、Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平,下调Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测发现,40~160μg/ml剂量范围的水飞蓟宾显著增加了A549细胞的凋亡率。结论:水飞蓟宾能够抑制人肺癌A549细胞株的体外增殖并促进细胞凋亡,其机制可能是通过上调Capase-3、Caspase-9的表达,下调Bcl-2的表达实现的。     

rsTRAIL诱导人肺癌细胞系A549的细胞凋亡表达谱变化研究

 目的研究一定量的重组可溶性TRAIL作用于人肺癌系A549细胞培养物后,细胞凋亡基因表达谱变化。方法用50μg·L^-1的rsTRAIL处理人肺癌系A549细胞培养物,以未经药物处理的A549细胞培养物为对照,应用基因表达谱芯片技术进行细胞凋亡相关基因mRNA表达差异分析。结果经TRAIL处理后,所检测的96个细胞凋亡相关基因中,21个基因表达上调,17个基因表达水平下调。结论经TRAIL处理后,通过细胞凋亡相关的功能基因组群基因表达的正负调控,对人肺癌系A549细胞凋亡信号传导途径进行调控。药物处理不影响p53基因的表达变化。     

加味二陈汤诱导肺癌A549移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究加味二陈汤对肺腺癌A549移植瘤生长抑制作用并初步探讨其对内质网应激反应的作用机制。方法：18只BALB/C裸鼠接种A549肺癌细胞后，随机分为对照组、加味二陈汤高剂量组（简称中药高剂量组）、加味二陈汤低剂量组（简称中药低剂量组），每组6只，分别灌胃给予生理盐水，26、13g/（kg·d）加味二陈汤水煎液，连续给药21 d。观测并分析各组肿瘤体积、瘤体生长曲线、瘤重、抑瘤率、凋亡率，并分析ATF4、CHOP蛋白表达水平。结果：与对照组比较，中药低剂量组和高剂量组裸鼠在肿瘤生长减慢、肿瘤体积缩小、瘤重降低，差异有统计学意义（P <0.05）；中药低剂量组和高剂量组抑瘤率分别为21.4%、37%，与对照组比较均有统计学意义（P <0.05）；对照组、中药低剂量组、中药高剂量组瘤体凋亡率分别为0.23%、0.29%、0.35%，中药高剂量组与对照组差异具有统计学意义（P <0.05）；中药高剂量组和低剂量组ATF4、CHOP蛋白表达水平均较对照组上调，差异均具有统计学意义（P <0.05）。结论：加味二陈汤能诱导肺腺癌A549细胞凋亡，其机制与调控内质网蛋白ATF4、CHOP的表达水平有关。     

山茱萸提取物对人肺癌A549细胞凋亡作用的实验研究

目的：探讨山茱萸水、醇提取物对人肺癌A549细胞的体外增殖的影响。方法：采用M1Tr法检测山茱萸水、醇提取物对A549细胞增殖的抑制作用,观察细胞形态变化。结果：同浓度的山茱萸水提取物对A549细胞抑制作用较醇提取物强,形态学观察到细胞凋亡。结论：山茱萸水、醇提取物均可抑制A549的细胞增殖,且能诱导细胞凋亡。     

番酯素诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究

目的研究番酯素抑制人肺腺癌细胞A549增殖和诱导凋亡的作用及其机制。方法①MTT法观察番酯素对人肺腺癌A549细胞株、人肺腺癌NCI-H460细胞株体外增殖的影响;②流式细胞仪检测番酯素对细胞凋亡的影响。结果番酯素在体外对人肺腺癌细胞A549有一定的抑制作用,且这种抑制作用具有量-效关系,剂量越大,抑制作用越强;细胞经过番酯素处理72 h后,与对照组比较,番酯素各剂量线细胞均出现不同程度的凋亡,且总凋亡随着剂量的增加而增加。结论番酯素具有抑制人肺腺癌细胞A549增殖的作用,可以诱导其凋亡。     

南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究

目的 探讨南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞的凋亡作用及其分子机制。     

番荔枝内酯对肺腺癌A549细胞周期及凋亡的影响

目的：探讨番荔枝内酯 Bullatacin 诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用 MTT 法检测不同浓度（6.25、12.5、25、50、100μg/mL）Bullatacin对A549细胞的抑制增殖作用,依照MTT结果取浓度25μg/mL Bullatacin作用于A549细胞0、12、24、48 h,流式细胞仪分析其对A549细胞增殖周期的影响,观察其对细胞凋亡的干预作用。Western Blot 检测不同实验组 ERK、JNK、p38磷酸化与总蛋白的表达。结果不同浓度Bullatacin作用于A549细胞后,呈明显的剂量依赖性;25μg/mL Bullatacin能将A549细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡;与空白组比较,P-ERK、P-JNK、P-p38的蛋白表达均明显增强。结论 Bullatacin明显抑制A549细胞增殖,并诱导其凋亡,其机理与Bullatacin通过磷酸化各蛋白激酶而激活MAPK通路有关。     

二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的作用研究

目的：研究二冬汤含药血清对肺癌细胞A549的抑制作用、最佳给药方案及诱导细胞凋亡。方法：采用MTT法,观察不同给药天数、不同剂量、不同采血时间、不同培养时间的二冬汤血清对肺癌细胞A549的抑制效应,及应用FITC／PI流式细胞术检测最佳给药方案含药血清对A549细胞的凋亡率。结果：二冬汤含药血清对人肺癌细胞A549具有抑制作用,中剂量组[7．99g／（kg·d）]给药5天、10天,末次给药2h的含药血清与细胞培养48h后的抑制作用最明显,抑制率分别为42．27％和39．67％,与空白血清组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）;但从给药天数以及与肺癌细胞培养时间上来看,与空白血清组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）;FITC／PI双染法显示二冬汤含药血清对A549的凋亡总计为（28．45±0．68）％,与空白血清组（6．75±0．46）％比较,差异有非常显著性意义护〈0．01）。结论：二冬汤最佳给药方案为给药5天,末次给药2h后取血,此时制备的含药血清能诱导细胞发生凋亡。     

塔斯品碱诱导肺癌细胞A549凋亡的实验研究

目的:探讨塔斯品碱对肺癌细胞A549增殖、凋亡以及细胞周期的影响。方法:进行人肺腺癌细胞株A549细胞培养,不同浓度塔斯品碱干预,采用MTT法、流式细胞术、透射电镜等技术,研究不同浓度塔斯品碱对其增生、凋亡以及细胞周期的影响。结果:塔斯品碱可抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,且呈时间剂量依赖性;FCM检测发现塔斯品碱阻滞细胞周期于S期;电镜下可见塔斯品碱能够诱导细胞出现核固缩、细胞核内染色质凝聚和凋亡小体等凋亡现象。结论:塔斯品碱有抗肿瘤和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

枸杞多糖对人肺癌A549细胞凋亡及Survivin表达的影响

目的 探讨枸杞多糖(LBP)诱导人肺癌A549细胞的凋亡的作用及其作用机制.方法 在体外培养的肺癌A549细胞株中加入不同浓度的LBP,应用流式细胞仪FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT - PCR及Western blot法分析加药前后凋亡抑制基因Survivin mRNA和蛋白表达情况.结果 流式细胞仪FITC/PI双染法检测结果显示LBP可诱导人肺癌A549细胞凋亡,并且随着LBP浓度增加,凋亡率逐渐增加;LBP可使Survivin mRNA和蛋白的表达明显降低,并成一定的量效关系.结论 LBP可显著诱导人肺癌A549细胞凋亡,其作用机制可能与LBP抑制A549细胞凋亡抑制基因Survivin表达有关.     

姜黄素与博来霉素联用对A549细胞增殖抑制及细胞周期和凋亡的影响

目的:研究姜黄素和博来霉素联合应用对人肺泡Ⅱ型样细胞A549细胞增殖和细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素抗博来霉素诱导的肺纤维化机制。方法:采用MTT法观察姜黄素和博来霉素对A549细胞的增殖抑制作用,并用流式检测细胞周期分布,凋亡试剂盒检测细胞凋亡。结果:姜黄素及博来霉素能抑制A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。姜黄素(Cur)浓度为60μmol/L与博来霉素(BLM)2、4、6、8μg/mL联合24h的抑制率显著高于单用博来霉素组;姜黄素可引起体外培养的A549细胞G0/G1期阻滞;而且对G0/G1期阻滞随作用时间延长而增强。单用博来霉素刺激细胞,培养24h和48h,对细胞周期各个时期的影响没有统计学意义;姜黄素联合博来霉素诱导A549细胞凋亡,细胞核变的不规则皱缩,可见凋亡小体。结论:姜黄素联合博来霉素在体外对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有显著阻滞作用,并可改变细胞凋亡;姜黄素和博来霉素联合应用可能通过改变肺泡上皮细胞细胞周期分布,并通过影响肺泡细胞凋亡从而起到抑制博来霉素治疗过程中肺纤维化的发生发展。     

红景天苷对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响简

 目的 观察红景天苷(salidroside)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响, 探讨其抗肿瘤的可能机制。方法 以体外培养的人肝癌HepG2细胞作为研究对象, 倒置显微镜观察红景天苷对肝癌细胞形态的影响;采用MTS法检测红景天苷对细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-8的表达。结果 红景天苷能显著抑制肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡, 下调细胞Bcl-2 表达, 上调Bax、caspase-3及caspase-8的蛋白表达量。结论 红景天苷在体外对人肝癌HepG2细胞具有显著的抑制增殖和促进凋亡作用, 其机制可能与其调节凋亡基因Bcl-2、Bax、caspase-3与caspase-8的蛋白表达有关。     

不同药物对人肺巨细胞癌PGCL3细胞表面表达的血小板免疫相关抗原的影响

利用辅有Ｍａｔｒｉｇｅｌ的Ｂｏｙｄｅｎ小室观察抗ＣＤ９、抗ＣＤ４２ａ、抗ＣＤ６３、抗ＴＳＰ抗体对ＰＧ－ＣＬ３细胞侵袭作用的影响;采用流式细胞术观察２．５、１０、２０ｍｇ／Ｌ的川芎嗪、丹参酮ⅡＡ和５０、５００、１０００Ｕ／Ｌ的水蛭素和凝血酶对ＰＧＣＬ３细胞膜表面ＣＤ９、ＣＤ４２ａ、ＣＤ６３、ＴＳＰ表达的影响,观察川芎嗪、丹参酮ⅡＡ、水蛭素和凝血酶对人肺巨细胞癌ＰＧＣＬ３细胞表面血小板免疫相关抗原ＣＤ     

雷公藤内酯醇抑制卵巢癌细胞增殖并诱导凋亡作用初探

目的:初步探讨雷公藤内酯醇诱导人卵巢癌细胞株Caov-3细胞的凋亡作用及其分子机制。方法:采用MTT法检测雷公藤内酯醇对人卵巢癌细胞株Caov-3的生长抑制作用;用透射电镜观察细胞超微结构的变化;以AnnexinⅤ-FITC标记法定量检测细胞凋亡;以蛋白印迹分析雷公藤内酯醇对Caspase 3蛋白表达的影响。结果:雷公藤内酯醇能够抑制Caov-3细胞的增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性;雷公藤内酯醇处理Caov-3细胞后,光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞;AnnexinⅤ-FITC标记法的定量检测进一步证实了雷公藤内酯醇诱导细胞凋亡的作用;蛋白印迹检测表明雷公藤内酯醇可使Caspase 3表达变化。结论:雷公藤内酯醇对人Caov-3细胞系具有较强的直接抑制作用,可以诱导癌细胞凋亡,可能与其调节癌细胞Caspase-3蛋白活化有密切的关系。     

雷公藤内酯醇抑制卵巢癌细胞增殖并诱导凋亡作用初探

目的：初步探讨雷公藤内酯醇诱导人卵巢癌细胞株Caov-3细胞的凋亡作用及其分子机制。方法：采用MTT法检测雷公藤内酯醇对人卵巢癌细胞株Caov-3的生长抑制作用；用透射电镜观察细胞超微结构的变化；以AnnexinV—FITC标记法定量检测细胞凋亡；以蛋白印迹分析雷公藤内酯醇对Caspase3蛋白表达的影响。结果：雷公藤内酯醇能够抑制Caov-3细胞的增殖，且抑制率具有浓度和时间依赖性；雷公藤内酯醇处理Caov-3细胞后，光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞；Annexin V—FITC标记法的定量检测进一步证实了雷公藤内酯醇诱导细胞调亡的作用；蛋白印迹检测表明雷公藤内酯醇可使Caspase3表达变化。结论：雷公藤内酯醇对人Caov-3细胞系具有较强的直接抑制作用，可以诱导癌细胞凋亡，可能与其调节癌细胞Caspase-3蛋白活化有密切的关系。