垂盆草总黄酮影响肝星状细胞凋亡的作用机制研究

目的:研究垂盆草总黄酮(SSTF)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)凋亡的影响及其作用机制。方法:将不同质量浓度的SSTF与HSC-T6细胞共培养不同时间后,MTT法检测SSTF对HSC-T6细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪Annexin-V/PI双染方法检测SSTF对HSC-T6细胞凋亡的影响;应用Western blotting和Real-time PCR方法观察药物对凋亡相关细胞因子Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白及mRNA表达的影响。结果:SSTF能显著抑制HSC-T6细胞增殖、诱导细胞凋亡,且呈剂量和时间依赖;Western blotting结果显示,SSTF通过抑制Bcl-2,促进Bax和Caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡;进一步采用Real-time PCR研究发现,Bcl-2能够从mRNA水平抑制Bcl-2、促进Bax和Caspase-3表达。结论:SSTF具有促进HSC-T6凋亡的作用,这种作用的发挥主要是通过抑制Bcl-2、促进Bax和Caspase-3蛋白和mRNA的表达实现的。     

藤茶总黄酮对小鼠肝纤维化的改善作用

【目的】 探讨藤茶总黄酮（TF）对小鼠肝纤维化的改善作用及机制。【方法】 从45只小鼠中随机抽取8只设为正常组,其 余 37 只构建肝纤维化模型。将成功造模的 24 只小鼠随机分为肝纤维化组、TF 组、TF＋激活剂组,每组 8 只。TF 组给予300 mg/kg TF灌胃;TF＋激活剂组给予300 mg/kg TF、5 mg/kg尼日菌素钠盐灌胃;正常组、肝纤维化组给予等体积生理盐水灌胃。1次/d,连续干预10周。给药结束后,生化检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平,酶联免疫吸附分析（ELISA）检测肝组织白细胞介素18（IL-18）、白细胞介素1β（IL-1β）含量,免疫组织化学染色法检测肝组织α-平滑肌蛋白（α-SAM）表达,马松（Masson）染色法观察肝组织纤维化程度,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测肝组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1蛋白表达。【结果】 与正常组比较,肝纤维化组血清ALT、AST水平,肝组织IL-18、IL-1β含量,α-SAM阳性染色面积百分比,肝组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白相对表达量升高（P＜ 0.05）,Masson染色结果显示,肝纤维化组可观察到大量增生性胶原纤维,肝小叶结构被严重破坏;与肝纤维化组比较,TF组、TF＋激活剂组血清ALT、AST水平,肝组织IL-18、IL-1β含量,α-SAM阳性染色面积百分比,肝组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白相对表达量降低（P＜0.05）,Masson染色结果显示,TF组、TF+激活剂组肝脏胶原纤维沉积、纤维性增生及假小叶形成有所减少,纤维间隔缩小,而TF组效果优于TF＋激活剂组。【结论】 TF可改善肝纤维化小鼠肝功能,减轻炎症反应及肝纤维化程度,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体通路有关。     

黄芩茎叶总黄酮对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的 :研究黄芩茎叶总黄酮 (SSTF)对四氯化碳诱导的实验性大鼠肝纤维化的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :6 0只大鼠随机分为 5组 ,正常组、模型组、SSTF(17 5mg/kg、35mg/kg、70mg/kg) 3个剂量保护组 ,采用四氯化碳 (CCL4)皮下注射 8周制备大鼠慢性肝纤维化模型 ,用SSTF灌胃给药 ,每天 1次 ,连续 8周 ,8周末处死全部大鼠。常规生化方法检测肝功能和肝组织Hyp含量 ,免疫组化检测肝组织转化生长因子 - β1(TGF - β1)和α -平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)表达。H E染色和Van -Gieson染色观察肝组织病理形态学改变。结果 :SSTF保护组肝纤维化程度显著低于模型组 ,血清ALT活性和肝组织HYP含量明显减少 (P <0 0 5 ) ;CCL4诱导肝纤维化肝组织中TGF - β1、α-SMA表达增加 ,给予SSTF保护后可明显抑制肝组织中TGF - β1、α -SMA蛋白的表达。结论 :SSTF能有效减轻大鼠肝脏损伤和肝纤维化的形成 ,其机理可能是通过抑制TGF - β1在肝内的表达和星形细胞的活化 ,从而抑制了细胞外基质在肝脏的分泌和沉积 ,达到抗肝纤维化作用。     

藤茶总黄酮对实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1表达的影响

目的：探讨藤茶总黄酮（Tengcha flavonoids,TCF）对实验性肝纤维化大鼠的防治作用及机制。方法：52只雄性sD大鼠被随机分为正常对照组、模型组、TCF组及复方鳖甲软肝片组,采用四氯化碳（CCL4）皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型。造模的同时,各组分别灌胃给予TCF、复方鳖甲软肝片及生理盐水治疗。于第12周末检测大鼠血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）及转化生长因子β1（TGF-β1）的水平,检测肝组织TGF—β1阳性面积的表达水平。结果：与模型组比较,TCF组血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平显著下降（P〈0．05）,肝组织内TGF-β1阳性面积的表达明显下降（P〈0．05）。结论：TCF对实验性肝纤维化大鼠有较好的防治作用,其作用机制可能与降低血清及肝组织内TGF—β1有关。     

垂盆草总黄酮对APAP诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的 研究垂盆草总黄酮对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)所致小鼠肝损伤的保护作用及其可能的作用机制.方法 将48只ICR雄性小鼠随机分为6组(n= 8),正常对照组,模型组,阳性药物组(联苯双酯,300 mg/kg),垂盆草总黄酮低(150 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高剂量组(600 ...     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝组织MMP-2表达的影响

目的:观察基质金属酶-2(MM P-2)在实验性肝纤维化大鼠组织中的表达,探讨荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)抗肝纤维化的作用机制.方法:大鼠随机分为正常组,模型组,TFL高,低剂量组及秋水仙碱阳性对照组.模型组,TFL治疗组及秋水仙碱阳性对照组以二甲基亚硝胺腹腔注射4周制作大鼠肝纤维化模型:造模同时TFL高、低剂量组及秋水仙碱分别以TFL( 200,100 mg-kg-1·d-1),秋水仙碱(colchicine,col)灌胃给药,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,6周后处死大鼠,抽取下腔静脉血检测谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(ALT),取肝脏同一部位行HE,Masson染色观察大鼠肝纤维化程度,采用免疫组化检测各组肝组织MMP-2的表达.结果:TFL高、低剂量组和正常组血清AST,ALT均明显低于模型组,具有显著性差异(P＜0.05).与模型组比较TFL治疗组可明显抑制MMP-2的表达(P＜0.05),改善大鼠肝纤维化程度(P＜0.05).结论:荔枝核总黄酮可减轻肝损伤及改善实验性大鼠肝纤维化程度,抑制MMP-2的表达可能是其抗肝纤维化作用的机制之一.     

复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的：探讨中药复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用。方法：采用猪血清致大鼠肝纤维化模型，观察复肝宁对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响。结果：复肝宁明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况，同时明显降低血清转氨酶活性，升高血清白蛋白，降低白球蛋白比例；电镜观察表明复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线拉体等细胞器的损伤有保护作用。结论：复肝宁能明显减轻猪血清所致的肝细胞损伤，保护肝细胞，改善肝功能。     

睡莲花总黄酮对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的防治作用

目的研究睡莲花总黄酮(NCTF)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的防治作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、NCTF低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和秋水仙碱(0.2 mg/kg)组。除对照组大鼠sc花生油外,其余各组分别于大鼠背部sc 50%CCl4花生油溶液(0.1 mL/100 g),2次/周,连续12周。除对照组和模型组ig 0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液外,其余各组于造模第2天按设定剂量ig药物(1.0 mL/100 g),1次/d,连续12周。实验结束后,收集大鼠血样、肝脏及脾脏组织,测定大鼠肝脾指数;通过HE染色和Masson染色观察肝组织病理变化;通过免疫组化法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;通过全自动生化仪检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)水平;通过生化法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)水平;通过放射免疫分析法检测血清透明质酸(HA)水平;采用酶联免疫吸附法...     

牛磺酸对实验性肝纤维化大鼠保护作用的研究

[目的]研究牛磺酸(Tau)对实验性肝纤维大鼠肝组织的保护作用。[方法]将120只实验用大鼠随机分为正常对照组、模型组、牛磺酸低(150 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高(600 mg/kg)剂量组和复方鳖甲软肝片540 mg/kg组,每组20只;采用CCl4复合法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型,灌胃给药治疗4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶门冬氨酸(ALT)、氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)含量,测定血清中肝纤四项(CⅣ、PCⅢ、LN、HA)含量,HE染色法观察肝脏组织形态结构变化并对肝组织细胞坏死和组织增生进行分级;通过天狼星染色观察肝脏组织纤维化状况;测定抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;测定血清中炎症细胞因子IL-10、TNF-α含量。[结果]与模型组相比,牛磺酸中、高剂量组大鼠血清中ALT、AST、TBIL含量和CⅣ、PCⅢ、HA含量均显著降低(P0.05,P0.01),高剂量组LN含量显著降低(P0.05);牛磺酸各剂量组大鼠肝组织纤维化病变呈不同程度改善,以高剂量组效果最为显著;牛磺酸中、高剂量组大鼠肝脏组织SOD、GSH-Px活性显著升高且MDA含量显著降低(P0.05,P0.01),血清中IL-10、TNF-α含量显著降低。[结论]牛磺酸对实验性肝纤维化大鼠具有保护作用,其机制可能与牛磺酸能够有效保肝降酶、抑制氧化应激反应和炎症反应、改善肝功能有关。     

复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的:探讨中药复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用。方法:采用猪血清致大鼠肝纤维化模型,观察复肝宁对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响。结果:复肝宁明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况,同时明显降低血清转氨酶活性,升高血清白蛋白,降低白球蛋白比例;电镜观察表明复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用。结论:复肝宁能明显减轻猪血清所致的肝细胞损伤,保护肝细胞,改善肝功能。     

天胡荽有效部位HS抗大鼠免疫型肝纤维化的实验研究

目的：研究天胡荽有效部位HS抗肝纤维化的作用。方法：复制猪血清所致的大鼠肝纤维化模型,设立空白对照组,模型对照组,γ干扰素组,HS高剂量组（1.5g/kg）与低剂量组（0.5g/kg）,观察HS对丙氨酸氨基转移酶（ALT）,门冬氨酸氨基转移酶（AST）,白蛋白（Alb）,总蛋白,羟脯氨酸（Hyp）的含量以及对肝脏病理形态学的影响。结果：HS显著降低大鼠血清中的ALT,AST水平以及肝组织中的Hyp水平;组织病理学结果显示：HS高,低剂量组大鼠肝组织纤维化程度都有一定改善。结论：HS具有良好的抗免疫型肝纤维化作用。     

肝乐颗粒对肝纤维化大鼠细胞因子的影响

目的：探讨肝乐颗粒对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠细胞因子的影响。方法：除正常组外,其余各组采用四氯化碳诱导肝纤维化模型,每周2次,连续12周。于造模第7周起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,疗程6周。实验结束后,测定血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1、IL-6、IL-10含量及肝组织中转化生长因子（TGF）-β1、结缔组织生长因子（CTGF）的表达。结果：肝乐颗粒各剂量组能明显降低肝纤维化大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-6含量,促进IL-10的生成;抑制TGF-β1和CTGF在肝组织中的表达。结论：肝乐颗粒通过调节肝纤维化大鼠细胞因子而发挥抗肝纤维化作用。     

RP-HPLC法测定垂盆草胶囊中槲皮素的含量

目的：建立一种测定垂盆草胶囊中槲皮素的方法。方法：采用RP-HPLC法，色谱柱为ODS柱，流动相：0．1％三氟乙酸溶液：甲醇（58：42），检测波长：371nm，柱温：30℃。结果：建立的色谱方法能使槲皮素在5．05～60．60μg/mL范围内，线性关系良好（r=0．9999），平均回收率100．6％，重现性实验RSD=1.07％（n=6）。结论：本法简便准确可用垂盆草胶囊的含量测定。     

康氏抗纤颗粒抗肝纤维化的实验研究

目的：初步探讨康氏抗纤颗粒抗肝纤维化的作用机制。方法：用复合四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型，分为正常对照组、模型对照组、康氏抗纤颗粒大剂量组、等效剂量组和干扰素组。观察肝功能、血清透明质酸、肝组织羟脯氨酸、肝脏病理组织学改变及用免疫组织化学法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果：康氏抗纤颗粒可以显著改善肝功能，降低血清透明质酸和肝组织羟脯氨酸水平，减少肝纤维化面积，减少α-SMA的表达。结论：康氏抗纤颗粒具有良好的抗肝纤维化作用，其机制可能与保护肝细胞调节胶原代谢减少活化的肝星状细胞有关。     

佛甲草对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的：观察佛甲草对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法：分别采用四氯化碳（CCl4）、α-萘异硫氰酸酯（ANIT）一次性灌胃中毒致小鼠急性肝损伤及黄疸模型，测定血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBiL）含量及血清、肝组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）水平和观察肝组织病理变化，分析佛甲草对上述指标的影响。结果：佛甲草能明显降低CCl4中毒性小鼠血清ALT、血清及肝组织中MDA含量（P〈0.01），使SOD，NO水平显著增高（P〈0．01，P〈0．001）；能明显降低ANIT中毒性小鼠血清TBil含量（P〈0．001）；肝脏病理组织学检查表明佛甲草能明显减轻肝细胞的变性和坏死。结论：佛甲草对CCl4和ANIT所致的急性肝损伤有保护作用，其机理可能与抗脂质过氧化及改善肝脏微循环，恢复肝脏功能的作用有关。     

实验性肝纤维化造模方法研究

目的:研究实验性肝纤维化造模方法。方法:将大鼠分为3个造模组和1个正常组,造模组分别用3种纤维化造模方法造成不同类型的肝纤维化,对比各组大鼠死亡数、体重、肝脏重量及肝纤维化程度。结果:猪血清组无死亡,但形成肝纤维化较缓慢。四氯化碳组与酒精组随着造模时间的延长死亡率逐渐上升(P0.05),但形成肝纤维化较明显。结论:用猪血清造模比较稳定、损伤性较小,但形成肝纤维化较慢,是长期造模的较好方法、四氯化碳与酒精造模肝纤维化形成较快、但损伤较大,是短期造模的较好选择。     

中药强肝溶纤汤对肝纤维化预防及治疗作用的实验研究

目的:研究中药强肝溶纤汤预防及治疗肝纤维化的作用。方法:采用四氯化碳法造大鼠肝纤维化的模型,观察中药强肝溶纤汤预防组和治疗组对肝纤维化大鼠血清的GOT、GPT、GGP、TP、ALB、A/G、ALP、LDH及对大鼠肝、脾指数和肝脏病理学变化的影响。结果:中药强肝溶纤汤预防组血清GPT、GGP、LDH水平与模型组比有显著性降低(P<0.05),中药强肝溶纤汤预防组A/G与模型组比有显著性升高(P<0.01),中药强肝溶纤汤预防组肝指数与模型组比有显著性升高(P<0.05),中药强肝溶纤汤预防组脾指数与模型组比有显著降低(P<0.05),对肝细胞脂肪变、肝细胞坏死、肝纤维组织增生有明显的预防作用(P<0.01);中药强肝溶纤汤治疗组血清GOT、BUN与模型组相比有明显降低(P<0.05);中药强肝溶纤汤治疗组脾指数与模型组比有显著降低(P<0.05),对肝细胞脂肪变、肝细胞坏死、肝纤维组织增生有明显的治疗作用。结论:中药强肝溶纤汤对四氯化碳所致大鼠肝纤维化具有预防及治疗作用。     

红景天苷体外抗肝纤维化的实验研究

目的：观察红景天苷对大鼠肝星状细胞增殖及细胞外基质分泌的影响。方法：用不同浓度的红蒂天苷处理大鼠肝星状细胞；以MTT比色法测定细胞的增殖；放射免疫法测定透明质酸和层粘连蛋白；酶联免疫吸附法(ELISA)测定Ⅰ型胶原的水平。结果：红景天苷可剂量依赖性地抑制HSC增殖，不同程度抑制Ⅰ型胶原、透明质酸和层粘连蛋白分泌。结论：红景天苷在体外有显著的抗肝纤维化作用。     

冷饭团在实验性肝纤维化中抗氧化作用的实验研究

目的:探讨冷饭团抗肝纤维化的作用机理.方法:采用CCl4和高脂低蛋白等复合因素诱导大鼠实验性肝纤维化,以联苯双酯为对照,观察冷饭团对大鼠肝功能、肝组织羟脯氨酸(Hyp),组织病理学改变与血清及肝组织中SOD、肝组织中MDA含量的影响.结果:冷饭团能升高实验大鼠血及肝组织中SOD含量,降低实验大鼠肝组织中MDA含量,并与剂量有关.结论:冷饭团降酶,保护肝细胞和抗肝纤维化的作用与其抗氧化作用有关.     

三棱、莪术抗大鼠免疫性肝纤维化研究

目的:研究三棱、莪术抗肝纤维化的作用。方法:以腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型,以ALT,GGT,TP,Alb,A/G比值,ⅣC,LN,HA及肝脏组织病理变化为指标,观察三棱、莪术对大鼠免疫性肝纤维化的影响。结果:三棱、莪术能提高肝纤维化大鼠TP,Alb含量及A/G比值,降低ALT,GGT,ⅣC,LN,HA的作用,并能改善肝脏组织病理学变化。结论:三棱、莪术有保护肝细胞、减轻肝细胞变性坏死,恢复肝细胞结构和功能;减少纤维组织增生、阻止纤维化发展,促进纤维组织降解的作用。